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呼吸道感染儿童鼻咽拭中流感嗜血杆菌的分离培养及药敏
目的了解流感嗜血杆菌(Hi)目前对几种常用抗生素的耐药性、β-内酰胺酶的产生率以及b型株阳性率.方法收集呼吸道感染患儿的鼻咽拭子标本共446份,应用Hi选择性巧克力培养基进行分离培养;以KB法和Etest法测定Hi对9种抗生素的耐药率;以Nitrocefin纸片测定β-内酰胺酶的产生率;以玻片凝集法分离出b型株.结果 446份标本分离出100株Hi,分离率22.4%(100/446),其中b型流感嗜血杆菌(Hib)22株,占22%(22/100).100株Hi产β-内酰胺酶10株,产酶率10%(10/100).Hib中产酶7株,产酶率31.8%(7/22).第二、第三代头孢类抗生素、阿莫西林/克拉维酸、阿奇霉素的耐药率为0%,氯霉素、氨苄西林的耐药率分别为8.2%和10%;四环素、复方新诺明的耐药率分别达到27.8%和54.6%.结论选择性巧克力培养基可提高Hi的分离率,Hib的产酶率显著高于非Hib,Hi对氨苄西林和氯霉素的耐药在增加.
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2002至2008年临床分离志贺菌的血清分型及耐药性监测
志贺菌是一类传染性较强的革兰阴性肠道致病菌,其感染所致的细菌性痢疾主要在夏、秋季节发病.2002年2月至2008年12月从上海市大华医院肠道门诊、儿科门诊和急诊科的急性腹泻患者中分离志贺菌597株,进行血清学分型,并对部分菌株进行药物敏感试验,以了解近7年来梅陇地区志贺菌的血清型变化和耐药情况的变迁,为临床用药提供参考.
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崇明地区小儿呼吸道感染流感嗜血杆菌的分型及耐药性分析
流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)是引起儿童急性呼吸道感染的常见病原菌[1],国内报道Hi对其常规用药氨苄西林耐药率升高及对新型抗菌药出现不同程度的低耐药情况,因此对我院和崇明县妇幼保健院2003年1月～2005年6月儿科门诊及住院部诊断为呼吸道感染儿童培养分离的嗜血杆菌行血清分型、生物学分型及耐药性监测,为崇明地区治疗由Hi引起的小儿呼吸道感染提供实验依据.
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儿童肺炎链球菌血清型分布及其对抗菌药物的耐药性
目的 了解上海交通大学附属儿童医院临床分离的肺炎链球菌血清型分布和对抗菌药物的耐药状况,为控制耐药菌株的播散和疫苗免疫预防的可行性提供参考依据.方法 2007年10月-2008年5月该院就诊患儿咽喉部分泌物中分离的肺炎链球菌株.采用荚膜肿胀试验进行血清型分析,E试验法检测菌株对8种抗菌药物的敏感性.结果 临床共分离到338株肺炎链球菌,主要血清型依次为19F 138株(41.0 %)、19A 67株(19.8%)、14型30株(8.9 %)、23F 14株(4.1 %)、6B 13株(3.8%)、6A 12株(3.6%)和15B 10株(3.0%).在青霉素不敏感菌株(PNSP)和红霉素耐药株(ERSP)中多价疫苗(PCV7)的覆盖率分别为41.9%(26/62)和59.6%(198/332),PCV13的覆盖率分别为72.6%(45/62)和84.9%(282/332).青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSP)的血清型主要集中在19F、19A和未能分型株.除未能分型株之外,血清型的分布在2岁以下婴幼儿和2～5岁儿童之间没有显著差异.338株肺炎链球菌中,青霉素敏感株(PSSP)占81.7%(267/338),青霉素中介株(PISP)占10.9%(37/338),青霉素耐药株(PRSP)占7.4%(25/338).19F和19A型的PNSP(PISP+PRSP)对阿莫西林-克拉维酸、头孢曲松的耐药率显著高于PSSP(P<0.01).未能分型株的PNSP对阿莫西林-克拉维酸、头孢曲松以及头孢呋辛的耐药率显著高于PSSP(P<0.01).结论 该院临床分离的肺炎链球菌常见血清型为19F、19A、14、23F、6B和6A,PCV13能覆盖多数PNSP和ERSP,应用该疫苗应能有效地预防儿童肺炎链球菌的感染和控制耐药菌株传播.
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不同血清型肺炎链球菌对非β内酰胺类抗生素的耐药性
目的 了解不同血清型的肺炎链球菌对非β内酰胺类抗菌药物的耐药特点.方法 以2000-2002年于北京、上海和广州3所儿童医院门诊分离的625株肺炎链球菌为研究对象,应用简易棋盘式肺炎链球菌分型系统分析血清型;采用E试验(青霉素和红霉素)和K-B纸片扩散法(复方磺胺甲噁唑、四环素和氯霉素)检测菌株对抗菌药的敏感性.结果 常见的血清型/群为19群、23群、6群和14型.常见血清型菌株对红霉素、四环素、复方磺胺甲噁唑不敏感率均明显高于其他少见血清型和不能分型组.青霉素不敏感菌(PNSP)对红霉素和复方磺胺甲噁唑的不敏感率明显高于青霉素敏感菌(PSSP);不能分型的PNSP对红霉素和复方磺胺甲噁唑的不敏感率也明显高于PSSP;19群的PNSP红霉素和四环素不敏感率明显高于PSSP,氯霉素耐药率明显低于PSSP;23、6、14和其他少见血清型/群菌株PNSP和PSSP之间,各抗菌药物不敏感率差异并无统计学意义.结论 常见的19、23、6和14型/群肺炎链球菌对红霉素、复方磺胺甲噁唑和四环素耐药率高于其他少见血清型和不能分型菌株,PNSP与PSSP对部分非β内酰胺类抗生素不敏感率的差异可能与血清型分布有关.
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儿童鼻咽部肺炎链球菌携带株研究
目的 了解武汉地区健康儿童肺炎链球菌带菌状况、耐药性、耐药基因及血清型流行情况.方法 收集武汉地区2所幼儿园469名健康儿童的鼻咽拭子标本,分离鉴定肺炎链球菌,琼脂稀释法测定其对12种抗菌药物的MIC;PCR检测红霉素耐药基因ermB和mefA;"荚膜肿胀"试验进行血清学分型.结果 469份鼻咽拭子标本共分离出116株肺炎链球菌,分离率为24.7%.存活的114株中,肺炎链球菌对青霉素的敏感率为51.8%(59/114),对红霉素的敏感率为13.2%(15/114).99株红霉素耐药肺炎链球菌中,ermB基因总检出率为98.0%(97/99),其中30株(31.6%)同时具有ermB和mefA基因,2株红霉素低耐株仅检出mefA基因.血清分型涉及16个血清型、群,主要分布在19、23、6和14血清群.结论 武汉地区肺炎链球菌耐药性高,多为多重耐药菌株,红霉素耐药基因主要为ermB,19、23、6血清群多重耐药株分布广泛.
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浙江省赛罗群钩端螺旋体病的监测
目的 研究赛罗群钩体病流行规律.方法 用显微镜凝集试验法检测患者、水鸭和蛙血清抗体;同时分离培养病原体.用夹夜法捕鼠,采集鼠肾、猪肾、牛中段尿、蛙肾、水鸭肾和蚂蟥血分离培养病原体.结果 浙江省20世纪60至80年代钩体病不断出现大规模暴发流行,90年代后疫情平稳下降.到2004年为止,全省共发生钩体病138 526例,死亡933例,年平均发病率为5.86/10万,病死率为0.67%.1997至2004年全省共发生钩体病956例,平均发病率为0.27/10万,死亡14例,平均病死率为1.46%.衢州、丽水和台州市的发病数占全省发病总数的93.20%.病例主要分布在7～10月份,占94.87%.患者血清抗体阳性率为61.72%,菌群主要为黄疸出血群、七日热群和赛罗群.患者血培养阳性率为1.0%.鼠密度为4.54%,以黑线姬鼠为优势种,占52.04%.鼠带菌率为3.82%,黑线姬鼠带菌率为6.05%.蛙肾阳性率为0.41%.水鸭血清抗体阳性率为34%,菌株主要为秋季群和赛罗群;蛙血抗体阳性率为8.7%,菌株为秋季群.结论 浙江省存在赛罗群钩体感染,钩体病进入低发期,需要科学监测.
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急性腹泻患儿空肠弯曲菌血清学和生物学分型
1984年12月～1985年11月,我们用加拿大Lior近年提出的血清学和生物学分型技术,系统观察了我院急性腹泻患儿空肠弯曲菌血清和生物型别分布情况.139株血清学分型的菌株中,115株能为我们使用的抗血清分型,其余24株分别出现了不凝集,与二种以上单价抗血清和仅同多价抗血清凝集.Lior血清型4和1可能是上海地区主要流行株.血清型别的分布似乎和季节无关.139株中的111株同时进行了生物学分型,结果提示:本地区引起小儿急性腹泻的空肠弯曲菌主要为弯曲菌空肠亚种生物Ⅰ、Ⅱ工亚型和结肠亚种生物Ⅰ、Ⅱ亚型,并以前者多见.本工作中未发现快速硫化氢反应阳性菌株和近被认识的耐嗪啶酸嗜热弯曲菌--弯曲菌Laridis.我们还对二种分型方法进行了比较和评价.
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炭血清玻片凝集试验诊断军团病杆菌的实验研究
本文报道用炭血清玻片凝集试验诊断LDB,实验证明该法是一种简便、快速、特异的诊断方法.利用本法能检查标本中全菌抗原和可溶性抗原,并可对LDB作玻片凝集试验进行血清分型和纯菌的初步鉴定.实验指出制备理想的LDB炭血清,必须免疫质量好,效价高的血清,可提高试验的敏感性,才能获得满意的结果.
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小儿急性呼吸道感染流感嗜血杆菌耐药性研究
为了解上海地区小儿急性呼吸道感染(ARTIs)时流感嗜血杆菌 (Hi)的分离率、产酶率以及 b型 Hi(Hib)感染的情况,并了解 Hi对 8种常用抗菌药物的耐药性,收集 812例呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物进行 Hi分离培养,以 Nitrocefin纸片法测定β -内酰胺酶的产生率,以玻片凝集法分离出 b型株,用 Kirbry-Bauer(KB)法和 E-test法测定 Hi对 8种抗菌药物的耐药率.结果显示, Hi分离率 24.7% ,其中 Hib占 19%;平均β -内酰胺酶产生率 9%,其中 Hib产酶率 36.8%,明显高于非 Hib产酶率 2.5% (P<0.01). Hi对第 2、第 3代头孢类抗生素、阿莫西林 /克拉维酸均十分敏感,对氯霉素、氨苄西林的耐药率分别为 11.5%和 9.5%,而对四环素、复方新诺明 (SMZco)的耐药率分别达到 16.1%和 45.6%.提示 Hi是小儿 ARTIs的重要病原菌之一, Hi对氨苄西林、氯霉素、四环素和 SMZco的耐药在增加,产β -内酰胺酶是 Hi耐药的重要机制,而 Hib的产酶率显著高于非 Hib株.
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171株儿童侵袭性肺炎链球菌血清分型和多位点序列分型研究
目的 了解侵袭性肺炎链球菌在中国儿童中的多位点序列分型(MLST)状况.方法 对2006 -2008年中国11家儿童医院分离的171株侵袭性肺炎链球菌,采用简易棋盘式肺炎链球菌分型试剂盒进行血清型分型,用聚合酶链反应(PCR)扩增7个看家基因并测序,根据7个基因型的组合确定序列分型(ST).结果 171株侵袭性肺炎链球菌常见的血清型为19F(19.9%),14(19.3%),19A(18.1%),6B(9.4%)和23F(6.4%),其中有5株(2.0%)用丹麦抗血清无法确定血清型.共检出65种ST,12个克隆群,有1株因未扩增出aroe位点的等位基因无法分型.其中ST320常见,占17.5%,其次为ST271(13.5%)、ST876(10.5%).常见的ST同源复合群是CC320(33.9%)和CC876(13.3%).发现20种新的ST型,已被MLST数据库录入,并有3个新的等位基因序列.结论 分离自中国儿童的侵袭性肺炎链球菌主要为ST320、ST271和ST876等3种,流行的克隆群为CC271、CC876.
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新生隐球菌的磷脂酶活力检测
目的:评价不同孵育条件、来源和血清型的新生隐球菌分泌磷脂酶的活力情况.方法:分别在30℃和37℃下用蛋黄平板法培养不同来源的40株新生隐球菌菌株,测量其产生沉淀圈的大小,计算PZ值来比较其磷脂酶活力的不同.结果:40株菌中有39株能在其菌落周围产生明显沉淀圈,PZ值在30℃和37℃培养条件下分别为(0.529±0.121)和(0.523±0.143),两者差异无统计学意义(P＞0.05);在37℃培养条件下,血清A 、B、AD和D型菌株的PZ值分别为(0.541±0.116)、(0.518±0.036)和(0.472±0.051),3组间差异均无统计学意义(P＞0.05);临床株和环境株PZ值分别为(0.501±0.049)和(0.565±0.131),差异有显著性意义(P＜0.05).结论:温度对新生隐球菌磷脂酶活力没有影响;不同来源的新生隐球菌菌株的磷脂酶活力差异较大,其中临床分离株比环境分离株磷脂酶活力强;而不同血清型菌株的磷脂酶活力无差别.
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淮北市149株志贺菌茵群分布及药物敏感试验
志贺菌是人类细菌性痢疾的病原菌之一,也是导致急性腹泻的重要原因之一,研究志贺菌群的分布趋势及耐药性,对探索其流行规律,控制发病率,改进防治对策具有重要的意义.
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烧伤患者铜绿假单胞菌的血清分型及耐药分析
铜绿假单胞菌(PA)是烧伤感染中的常见菌,对PA进行血清分型及耐药分析,可了解PA的流行情况及各医院的用药情况.1材料与方法1.1菌株来源我院烧伤病房患者的血、创面等标本经培养鉴定为PA,共67株.1.2血清分型分型血清购自成都生物制品所,按说明操作.1.3药敏试验采用纸片扩散法,按美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)1999年文件判定结果,每周用ATCC27853标准菌株做质控.2结果2.1分型结果67株PA能明确分型的有64株,分型率为95.5%,共分5个血清型,其中6型27株(37.5%),4型10株(15.6%),1型2株(3.1%),3型1株(1.6%),3株未能明确分型.
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徐州市255例病毒性肝炎血清学分型诊断质量调查
目的 通过对急性病毒性肝炎病例进行血清学分型,了解报告诊断肝炎型别与实验室诊断的符合情况. 方法 随机选取2011年传染病疫情信息系统中的病毒性肝炎255例,用酶联免疫吸附实验检测抗HAV-IgM、HBsAg、抗HBc-IgM、抗HCV、抗HEV-IgM. 结果 255例中经实验室检测核实诊断196例,符合率为76.86％；甲肝符合率为4.76％；乙肝符合率96.73％；丙肝符合率37.84％；戊肝符合率81.08％；未分型肝炎符合率42.86％. 结论 各级医疗机构对乙肝和戊肝的诊断准确率较高,其他型别的肝炎诊断准确率相对较低.徐州地区多数医疗机构仅仅开展乙肝的实验室检测,绝大多数一级医疗机构对于其它型别的病毒性肝炎,尤其是甲型肝炎的诊断存在着一定的随意性.可以通过增加投入、加强培训等多种措施提高实验室诊断水平.
关键词： 肝炎 病毒性 人/诊断 血清分型 酶联免疫吸附测定/诊断应用 -
浙江5个地区2010～2012年沙门菌流行特征及分子分型研究
目的 了解浙江部分地区沙门菌感染的流行病学特点,为防治提供科学依据.方法 收集浙江省杭州、宁波、嘉兴、衢州、绍兴5个地区2010 ～2012年临床分离的沙门菌94株,对其进行血清分型、K-B纸片法药物敏感性试验.用二重PCR法检测毒力岛基因invA和毒力质粒基因spvB,并进行多位点序列分型；用多位点序列分型软件Dna SP version 5.0对7个管家基因进行核苷酸多态性分析.结果 94株沙门菌共测出18种血清型,其中肠炎沙门菌29株(30.9％),鼠伤寒沙门菌27株(28.7％),甲型副伤寒沙门菌10株(10.6％),纽波特沙门菌和伊鲁慕沙门菌各5株(5.3％),猪霍乱沙门菌4株(4.3％),伤寒沙门菌和婴儿沙门菌各2株(2.1％),其余10种血清型均各分离到1株.94株沙门菌耐药率高的为氨苄西林47株(50.0％),耐药率低的为头孢吡肟1株(1.1％)；非耐药菌株占所有菌株的46.8％(44/94).毒力岛基因invA和毒力质粒基因spvB阳性率分别为97.9％(92/94)和45.7％(43/94).94株沙门菌经MLST分析分为24种ST型,以ST11型菌株多,占29.8％(28/94)；上报网站http://mlst.ucc.ie/mlst/新ST型5型,分别为ST1746、ST1747、ST1748、ST1749和ST1750.结论 浙江5个地区临床分离的沙门菌以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主,质粒毒力基因spvB在这两种主要血清型中有较多的分布.94株沙门菌的耐药情况尚好,非耐药株数量接近半数.血清分型与多位点序列分型存在一定的联系.
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46株肺炎链球菌的血清型别和毒力因子基因的保守性分析
目的 研究临床分离的肺炎链球菌菌株的血清型和重要毒力因子碱基序列的保守情况,为临床肺炎链球菌疫苗的使用和蛋白质疫苗的研发提供参考依据.方法 收集2010 ～2013年重庆医科大学附属儿童医院11岁以下儿童中分离的46株肺炎链球菌,用多重PCR进行血清型分型.同时PCR扩增肺炎链球菌的11个毒力基因ply、lytA、nanA 、phtD、clpP、cps2A、bacteriocin、psaA、piaA、pcsB和stkP,测序后分析碱基序列的突变情况.结果 46株肺炎链球菌共检出13种血清型,其中19A(19.57％)为常见的血清型,其次为23F和19F(各占15.22％).临床菌株毒力基因ply、lytA、nanA、phtD、clpP、cps2A、bacteri-ocin 、psaA 、piaA、pcsB和stkP的碱基序列保守性分别为97.82％、96.31％、82.96％、87.50％、98.48％、83.68％、66.27％、99.46％、98.63％、88.72％和96.67％.结论 在重庆地区儿童感染的肺炎链球菌中,血清型19A分布比例高,本地区儿童接种肺炎链球菌疫苗时应首选含有19A血清型荚膜多糖抗原的PCV13疫苗.毒力因子ply、stkP、piaA、lytA、clpP和psaA基因在临床菌株中保守性较高,具有作为肺炎链球菌疫苗候选蛋白质的潜力.
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解脲脲原体血清型1和3感染BALB/c雌性小鼠生殖道的致病性比较
目的 探讨相同浓度解脲脲原体血清型1(Uu1)和3(Uu3)及混合感染(Uu1和Uu3)在BALB/c雌性小鼠模型生殖道的致病性.方法 156只雌激素预处理过的BALB/c小鼠随机分为4组,Uu1组、Uu3组、Uu1+Uu3组每组48只,无菌培养液对照组12只,分别阴道接种相同浓度(106拷贝/g)Uu.接种后第1、3、7、14、21、35天随机处死每实验组各8只及对照组2只小鼠.取宫颈、子宫内膜及输卵管行HE染色,光镜观察;取接种后第14天宫颈管黏膜扫描电镜观察.数据采用卡方检验进行统计学分析.结果 接种相同浓度不同血清型Uu后3～35d,Uu1组、Uu3组、Uu1+Uu3组的总致病率分别为35.0％(14/40)、47.5％ (19/40)、62.5％(25/40),3组致病率差异有统计学意义(P＜0.05).对照组无致病.结论 BALB/c小鼠生殖道接种相同浓度的Uu1、Uu3、Uu1+Uu3后,Uu1+Uu3组致病性强,Uu1组弱.
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体检和性罪错人群宫颈中解脲脲原体的检测
目的了解解脲脲原体(Uu)在体检人群和性罪错人群的宫颈检出情况及生物分群分型.方法用支原体液体选择培养基筛查妇科体检人群和性罪错人群,对阳性标本再用PCB法进行生物分群分型.结果性罪错人群共筛查了卖淫妇女98例,体检人群共筛查了体检妇女164例.性罪错组中Uu液体培养阳性89例(90.8%),其中生物1群64例(71.9%),1+2群7例(7.9%),2群18例(20.2%):71例生物1群阳性的标本中,以血清1、3、6、14型两个或两个以上的同时感染为混合感染,以血清1、3、6、14型的单独感染为单纯感染.性罪错组中混合感染17例(23.9%),单纯感染54例(76.1%);54例单纯感染中血清1型17例(31.5%),3型22例(40.7%),6型15例(27.8%).体检人群组中Uu液体培养阳性104例(63.4%),其中生物1群97例(93.3%),2群7例(6.7%);97例生物1群阳性的标本中,混合感染11例(11.3%),单纯感染86例(88.7%),86例单纯感染中血清1型22例(25.6%),3型37例(43.0%),6型27例(31.4%).结论Uu在性罪错人群中的检出率高于体检人群(P＜0.01),在Uu培养阳性的标本中,生物2群的检出率性罪错人群高于体检人群(P＜0.01),在Uu生物1群阳性的标本中,混合感染的检出率性罪错人群高于体检人群(P＜0.05),而生物1群中各血清型的单纯感染两组间没有统计学差异.
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807株流感嗜血杆菌的血清分型及耐药性的研究
目的 了解南京地区儿童感染流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza, Hi)的血清型及抗生素的耐药性.方法 采集南京儿童医院2004年6月至2007年6月20 985份不同种类标本,分离鉴定Hi 807例,玻片凝集法进行血清分型,纸片扩散法(K-B法)进行抗茵药物敏感实验,E-test法测低抑菌浓度(MIC).结果 807株流感嗜血杆菌,血清分型,不定型(NTHi)47.71%,可分型中f型多,占可分型36.02%,b型少,仅占可分型1.66%.K-B法检测抗生素的耐药率,氨苄西林耐药率49.07%.结论 南京地区儿童感染Hi,可分型株中主要血清型以f、a型占多数.氨苄西林的耐药率逐年上升.
