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睡眠剥夺诱导小鼠气虚证模型的方法研究
目的:通过比较睡眠剥夺、力竭游泳、睡眠剥夺结合力竭游泳3种造模方法,研究小鼠气虚模型的建立与评价方法.方法:将小鼠分为正常对照组、睡眠剥夺组、力竭游泳组、睡眠剥夺+力竭游泳(简称“复合组”),每组12只,睡眠剥夺组采用多平台水环境法进行睡眠剥夺,每天10 h;力竭游泳组采用负重10％进行力竭游泳,每天一次;复合组两种方法联合使用,连续28天.试验结束后,观察小鼠行为与体重,抓力仪测量小鼠抓力,利用小动物无创监护仪检测脉搏信号(心率、呼吸频率、呼吸幅度、脉搏幅度),采用数码照相机采集舌面图像,利用细胞流式仪检测脾脏T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)与B细胞(CD19+).结果:与正常对照组比较,3组模型小鼠活动能力均降低,呈现疲劳特性,体重、抓力显著降低(P＜0.05-0.01);小鼠舌面均见不同程度的变白,仅复合组具有显著性差异(P＜0.05);睡眠剥夺组与复合组小鼠心率、呼吸频率、脉搏幅度与呼吸幅度均显著降低(P＜0.05-0.01);3组的CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群显著增加(P＜0.01),睡眠剥夺组的CD19+B细胞显著减少(P＜0.01).结论:三种方法均可以成功制备气虚小鼠模型,以睡眠剥夺造模优.
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电针对睾酮低下老年大鼠睾丸间质细胞慢性炎性反应的影响
目的:探讨电针对睾酮低下老年大鼠睾丸间质细胞(L ey dig细胞)慢性炎性反应的影响及其抗雄性生殖衰老的可能机制.方法:SD老年大鼠随机分为电针组、药物组、老年对照组,每组8只,SD青年大鼠8只作为青年对照组.电针组取"肾俞""关元"穴予电针治疗,持续15min,每日1次,治疗5d休息2d,连续8周.药物组予腹部皮下注射丙酸睾酮注射液(7 mg·kg-1·3 d-1),连续8周.老年对照组和青年对照组给予腹部皮下注射0.9％ 氯化钠溶液,注射剂量及疗程同药物组.治疗前后观察大鼠力竭游泳时间,采用ELISA法检测大鼠血清睾酮(T T)和游离睾酮(FT)水平,免疫组化法检测Leydig细胞环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达水平,Western blot法检测大鼠睾丸核因子-κB p 65(NF-κB p 65)、COX-2、白介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平.结果:与青年对照组比较,老年对照组力竭游泳时间及血清TT、FT水平降低(P<0.01);治疗后,电针组与药物组力竭游泳时间及血清TT、FT水平高于老年对照组(P<0.01).与青年对照组比较,老年对照组睾丸NF-κB p 65、COX-2及其下游炎性因子IL-1β、TNF-α表达明显上调(P<0.01);与老年对照组比较,电针组可显著下调睾丸NF-κB p 65、COX-2、IL-1β及TNF-α蛋白的表达水平(P<0.01).结论:电针能改善睾酮低下老年大鼠血清TT及FT含量,并能降低老年大鼠睾丸组织的炎性反应,这可能是改善雄性生殖衰老的机制之一.
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多因素复合建立多发性脑梗死气虚血瘀证大鼠模型的探讨
目的:通过多因素复合建立多发性脑梗死气虚血瘀证大鼠模型,研究多发性脑梗死气虚血瘀证大鼠模型的建立方法.方法:将大鼠随机分为假手术组、多发性脑梗死模型组(脑梗组)和3个病证结合模型组——力竭游泳复合多发性脑梗死组(游泳+脑梗组),睡眠剥夺复合多发性脑梗死组(睡夺+脑梗组),力竭游泳加睡眠剥夺复合多发性脑梗死组(游泳+睡夺+脑梗组).3个病证结合模型组大鼠先分别采用相应因素(力竭游泳和睡眠剥夺)造模10 d,然后行多发性脑梗死手术,术后继续采用相应因素造模10 d;脑梗组大鼠只进行多发性脑梗死手术;术后第11天观察各组大鼠一般状态,采集中医证候指标(体重、抓力、脉搏、舌象等)和西医生化指标(血液流变学、凝血4项等).结果:与假手术组比较,睡夺+脑梗组大鼠活动量减少、体重减轻、抓力下降,脉搏幅度减弱,舌面R,G,B值降低,全血黏度增加凝血酶原时间(PT)或活化部分凝血酶原时间(APTT)缩短(P ＜0.05,P＜0.01),且较其他组指标变化明显.结论:通过中医证候指标和西医生化指标综合分析,睡眠剥夺复合多发性脑梗死的方法优于其他3个造模方法,更适合建立多发性脑梗死气虚血瘀证大鼠模型.
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逆灸命门穴对正常大鼠力竭游泳时间及HPA轴的影响
目的:观察逆灸命门穴对大鼠力竭游泳时间及游泳力竭后下丘脑—垂体—肾上腺(HPA)轴的影响.方法:将大鼠按游泳能力随机分为空白对照组、逆灸命门组、力竭对照组、逆灸命门+力竭组,分别干预20d后进行力竭游泳,观察力竭时间的差别,并采用生化法检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)、肾上腺皮质醇(CORT)的含量.结果:逆灸命门+力竭组力竭游泳时间较力竭对照组明显延长(P＜0.05).各组内HPA轴的3种激素表现同步:与空白对照组相比,逆灸命门 组大鼠的下丘脑CRH、垂体ACTH、肾上腺CORT含量无明显变化；力竭对照组大鼠的下丘脑CRH、垂体ACTH、肾上腺CORT含量极显著升高(P＜0.01)；与力竭对照组比较,逆灸命门+力竭组大鼠的下丘脑CRH、垂体ACTH、肾上腺CORT含量明显降低(P＜0.01).结论:运动力竭后HPA轴出现过度应激,逆灸命门穴可缓和其应激程度,这可能是逆灸命门穴能提高大鼠的运动耐力,延长其游泳力竭时间的部分机制.
关键词： 逆灸 力竭游泳 下丘脑—垂体—肾上腺轴 -
逆灸命门穴对力竭大鼠糖原、ghrelin水平的影响
目的:观察逆灸命门穴对力竭游泳大鼠肝糖原、肌糖原及血清ghrelin含量的影响.方法:将大鼠按游泳能力随机分为空白对照组、逆灸命门组、力竭对照组、逆灸命门+力竭组,分别干预20d,第21天进行1次力竭游泳后取材,采用酶联免疫法测定血清ghrelin的含量,采用生化法检测肝脏、比目鱼肌糖原的含量.结果:与空白对照组相比,逆灸命门组大鼠肌糖原、肝糖原和血清ghrelin含量均无明显变化,力竭对照组大鼠肌糖原和肝糖原含量均出现明显下降(P＜0.05,P＜0.01),血清ghrelin的含量显著升高(P＜0.01);与力竭对照组比较,逆灸命门穴+力竭组大鼠肌糖原和肝糖原的含量有所升高(P＜0.05),血清中ghrelin的含量显著降低(P＜0.01).结论:逆灸命门穴提高机体运动耐力的机制可能与调用机体不同部位的糖原有关,脑肠肽ghrelin参与糖原调用,推测ghrelin可能是机体力竭状态下能量调控的关键因子.
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补充复力康合剂对训练大鼠运动能力及血清T、C、GH水平的影响
目的:观察补充复力康合剂对训练大鼠运动能力的作用,探讨雌性成年大鼠GH/C比值与雄性成年大鼠T/C比值与运动能力的关系.方法:成年SD大鼠,雄性30只,雌性31只,随机分为雄性安静对照组、雄性运动对照组、雄性运动服药组、雌性安静对照组、雌性运动对照组和雌性运动服药组6组.运动对照组和运动服药组每天负?%力竭游泳,每周游泳6天,观察游泳时间.运动服药组每天灌喂复力康合剂(10.8g生药/kg体重)1次,安静对照组和运动对照组则按同等比例灌喂蒸馏水1次.共4周.取材当日完成运动负荷后取血清,测定睾酮(T)、生长激素(GH)和皮质醇(C).结果:长期游泳训练导致雄性大鼠血清T水平明显降低,而雌性大鼠则主要表现为GH的降低,服用复力康合剂后能提高雄性大鼠血清T水平和雌性大鼠GH的水平.运动服药组力竭游泳时间较运动对照组明显延长.以上结果提示补充复力康合剂对机体运动能力有良性作用.
关键词： 复力康合剂 力竭游泳 生长激素/皮质醇比值 睾酮/皮质醇比值 -
力竭游泳对大鼠红细胞膜组分的影响
雄性SD大鼠随机分为两组:安静对照组和力竭游泳组.测定了各组红细胞膜唾液酸、巯基(-SH)、丙二醛(MDA)、胆固醇和磷脂含量.结果表明:同对照组比较,力竭游泳组大鼠红细胞膜唾液酸、磷脂含量及-SH数目显著降低,MDA含量显著升高,胆固醇含量无明显变化,但胆固醇/磷脂比值显著升高.提示力竭游泳可改变红细胞膜组分,损害红细胞变形能力和正常生理机能.
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力竭游泳对大鼠海马突触体内游离钙浓度的影响
目的:探讨力竭游泳对大鼠海马突触体内游离钙浓度的影响.方法:Fura-2荧光法测游离钙浓度.结果:力竭游泳大鼠海马突触体内游离钙浓度显著升高(P < 0.05).结论:力竭游泳可致海马内钙稳态失衡.
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连翘叶苷类成分对力竭游泳小鼠心肌和骨骼肌超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量及超微结构的影响
目的:探讨连翘叶苷类成分(glycosides in forsythia suspensa leaves,FSG)对力竭游泳小鼠心肌和骨骼肌的保护作用.方法:健康雄性ICR小鼠随机等分为安静对照组、运动对照组、运动+FSG大剂量组和运动+FSG小剂量组,每组12只.给药组小鼠以相应剂量FSG灌胃20天,在后一次给药后22h,运动组小鼠进行一次力竭游泳,并记录力竭时间.用分光光度法测定力竭运动后各组小鼠心肌和骨骼肌MDA含量和T-SOD、CuZn-SOD活性.用免疫组化法(SABC法)测定小鼠心肌和骨骼肌细胞CuZn-SOD蛋白表达.电子显微镜观察各组小鼠心肌和骨骼肌细胞超微结构.结果:FSG组的MDA含量均低于运动对照组,T-SOD和CuZn-SOD活性均高于运动对照组,CuZn-SOD表达也呈现同一趋势.电镜下可见运动对照组小鼠心肌和骨骼肌细胞、线粒体肿胀,空泡样变,闰盘严重损伤,肌原纤维排列杂乱,细胞核核质溶解和肌浆网扩张.而FSG大剂量组的损伤程度明显减轻,与安静对照组接近.结果表明:FSG对力竭游泳小鼠心肌和骨骼肌有一定保护作用.
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训练大鼠力竭游泳后海马NO含量及NOS活性变化
一氧化氮(NO)是一种活性极强的小分子物质,由一氧化氮合成酶(NOS)催化L-精氨酸合成.适度的NO发挥信号传递作用,过量的NO对组织细胞有损害作用.有报道,力竭游泳大鼠脑组织NOS活性显著增高[1].海马是脑组织中应激损伤的主要靶区.本实验主要观察了训练大鼠一次性力竭游泳后海马NO含量和NOS活性的变化.
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不同剂量水杨酸钠对小鼠力竭游泳运动能力的影响
近年来,抗疲劳研究备受关注[1-3].水杨酸钠作为非甾体抗炎药物的典型代表,对关节和软组织疾病有较好疗效.
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力竭游泳运动对雌性大鼠生殖系统及血清激素水平的影响
目的:观察3周力竭游泳运动对雌性大鼠生殖系统及血清性激素的影响.方法:实验组大鼠每天进行1次力竭游泳,持续3周后检测相关指标.结果:与对照组相比,实验组大鼠血清雌二醇(E2)和睾酮(T)水平显著下降,羟脯氨酸(HP)水平显著增高;子宫系数、卵巢系数显著下降;阴道pH值增高,脱落角化细胞大量减少;阴道组织超微结构电镜观察见桥粒增多、细胞间通道消失、微绒毛减少、胞质内脂褐素及脂滴较多、细胞器减少;卵巢外观形态观察可见卵泡凸起数目少,偶见黄体,卵巢萎缩.结果显示,3周力竭游泳使雌性大鼠血清雌激素和睾酮水平下降、羟脯氨酸水平升高、阴道pH值增高、阴道脱落角化细胞大量减少.
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反复力竭游泳对大鼠痛阈的影响
目的:观察大鼠运动疲劳前后痛阈的变化,探讨疲劳与痛阈的关系.方法:建立一周力竭游泳疲劳模型,观察疲劳前后大鼠的机械性缩爪阈值(PWMT)和热缩爪潜伏期(PWTL),以反映运动疲劳后大鼠痛阈的变化.结果:大鼠在维持一周的运动疲劳状态下PWTL明显延长(P<0.01),即热痛阚值升高;PWMT显著升高(P<0.01),即机械性痛阈升高.结论:强迫游泳所致的运动疲劳可引起机体痛阈升高,对痛觉反应迟钝,可能是机体保护性抑制和应激的结果.
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气虚血瘀大鼠模型糖、脂代谢及氧化应激反应研究
目的 从糖、脂代谢及心、脑组织氧化应激损伤等角度,探讨气虚血瘀大鼠模型靶器官损伤及其机理.方法 采用力竭游泳法制作气虚血瘀大鼠模型,分别造模1、2、4周,然后检测模型大鼠血糖、血脂及心、脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平.结果 模型组大鼠力竭造模后1、2、4周血糖均升高,血浆总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)水平在4周时下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)未见明显异常变化;模型组大鼠心肌组织MDA含量升高,心肌组织SOD及脑组织MDA、SOD未见有显著性意义的变化.结论 糖、脂等能量代谢紊乱是气虚血瘀证重要生物学基础,其靶器官的损害可能与氧化应激损伤密切相关.
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小鼠游泳耐力实验系统的建立与红景天抗疲劳作用的验证
目的 建立小鼠游泳耐力实验系统,挖掘评价小鼠游泳耐力的新指标,并用此系统验证红景天对小鼠耐力的影响.方法 将计算机视频采集技术和图像分析技术应用于小鼠游泳耐力实验中,实时获取小鼠游泳信息,提取包括力竭时间、首次下沉时间、下沉总时间、首次连续下沉时间在内的多个耐力评价指标,客观精确地在线分析小鼠耐力数据;利用正常小鼠、红景天给药小鼠对系统的稳定性、可靠性进行实验研究.结果 计算机记录数据与人工记录数据具有高度相关性,r ＞0.95,系统稳定可靠.首次连续下沉时间与力竭时间的相关性系数r=0.974,其他新指标与力竭时间的相关性系数r＜0.9.红景天给药组较空白组,首次下沉时间和首次连续下沉时间显著性增加.结论 该系统用于评价小鼠游泳耐力的指标客观、精确、灵敏,实现了视频采集、信息整合、数据分析、统计输出一体化,寻找到了与力竭时间高度相关的新指标-首次连续下沉时间.全套系统自动化、智能化程度高,为抗疲劳药物的筛选提供了一套可靠的实验系统.
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力竭游泳对红细胞膜MDA含量、Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性的影响
运动性贫血在运动训练中经常发生,不仅常发于耐力性运动员中,而且在技巧、速度性等项目中也较为常见,它严重影响运动员的机能水平和运动成绩.本实验通过对力竭运动大鼠红细胞膜MDA含量、Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性的研究,旨在探讨运动性贫血的发生机理,为预防和治疗运动性贫血提供一定的理论依据.
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黄芪多糖对小鼠红细胞数及血红蛋白的影响
目的 探究黄芪多糖对小鼠红细胞数及血红蛋白的影响.方法 取40只SPF级昆明小鼠随机分为4组,为高浓度组、中浓度组、低浓度组和蒸馏水组,通过直接喂食高浓度0.2g/kg、中浓度0.05g/kg、低浓度0.0125g/kg的黄芪多糖和蒸馏水5ml/kg,制备抗疲劳小鼠模型和对照组,喂养4周后,游泳力竭实验,进行小鼠负重游泳,检测小鼠血液中红细胞数和血红蛋白含量.结果 低、高剂量组小鼠游泳力竭时间明显比对照组延长;中、高剂量组小鼠血红蛋白含量较对照组升高.结论 一定浓度的黄芪多糖可以推迟小鼠疲劳出现的时间,可能与其增加血红蛋白含量有关.
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饮食限制对小鼠学习记忆及抗氧化能力影响
目的 探讨不同饮食限制(dietary restriction,DR)水平对小鼠学习记忆、抗氧化能力影响.方法 120只ICR小鼠随机分为自由饮食(对照)组,20%,40%,60%DR组,连续25 d,进行力竭游泳及耐缺氧实验;39 d后,进行Y迷宫、水迷宫、脏器系数、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量的测定.结果 Y迷宫结果表明,40%DR组记忆成绩(14.40±2.68)次,与自由饮食组比较差异有统计学意义(P<0.05);水迷宫结果表明,40%DR组潜伏期(20.36±9.12)s,访问次数(1.5±0.5)次,游动距离(0.49±0.32)m.;60%DR组脑系数为(1.51±0.19)%,明显高于自由饮食组(1.12±0.09)%(P<0.01);各饮食限制组小鼠脾脏、甲状腺系数及肾脏丙二醛(MDA)含量均有所下降;小鼠耐力及耐缺氧能力与限制水平成正比,雌鼠耐缺氧能力强于雄鼠.结论 适当饮食限制可以提高机体对新环境适应能力,提高体内抗氧化系统活性.
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构建复合因素致慢性疲劳大鼠模型及血生化动态变化
背景:以往构建慢性疲劳动物模型多采用悬吊、束缚、游泳、跑台等复合性物理因素.目的:以睡眠剥夺与负重力竭游泳复合为慢性疲劳因素,构建慢性疲劳人鼠模型并观察其血液生化指标的变化.设计、时间及地点:2007-03/06在南方医科大学中医症候实验室完成的随机对照动物观察.材料:SPF级健康雄性SD大鼠40只,取8只进行预实验确定观察时间点为造模第1,4,13天,剩余32只随机分为正常对照组8只、模型组24只.方法:模型组大鼠建立慢性疲劳模型,即放入水深1.5 cm的盒子中剥夺睡眠20h,按其体质量5%负重后再于水深50cm的玻璃缸内进行力竭游泳训练,以沉入水中10 s无法浮出水面判定达到力竭状态.正常对照组不给予任何刺激,自然饲养.主要观察指标:造模第1,4,13天各取8只模型鼠麻醉后腹主动脉采血,离心取上清检测血液生化指标的变化.结果:与正常对照组比较,造模第1天仅尿素氮水平升高,尚未引起血液生化指标的明显改变,大鼠处于急性应激状态;造模第2～4天进入适应阶段,门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、尿素氮等肝.肾功能指标发生异常(P<0.01),大鼠尚可承受该运动强度:造模第5-13天,肝肾功能、C-反应蛋白、血糖、血脂及血清离子等常规血液生化指标几乎均发生异常(P<0.01),大鼠机体受到严重损伤.结论:随造模时间的延长,慢性疲劳大鼠血液生化指标呈逐渐恶化状态,机体损伤趋势加重.
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疲劳型亚健康大鼠模型的构建
背景:有研究用复合因素构建了亚健康及慢性疲劳大鼠模型,但疲劳型亚健康大鼠模型的构建较罕见.目的:采用力竭游泳复合睡眠剥夺构建疲劳型亚健康大鼠模型,探讨佳的疲劳型亚健康大鼠模型制备方法.方法:将大鼠负重5%力竭游泳并睡眠剥夺20 h 建立疲劳型亚健康模型,记录力竭游泳时间,各组实验结束禁食1 d,行血液生化检查.结果与结论:建模后4,5 d 大鼠末次力竭游泳时间显著减少(P < 0.05).建模后5 d,大鼠血α-羟丁酸脱氢酶、尿素氮、血肌酸激酶升高(P < 0.05)、总胆固醇降低,门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、血清肌酐、三酰甘油水平均降低(P < 0.05).结果证实,负重5%的力竭游泳复合20 h 睡眠剥夺持续4 d 即可成功制备疲劳型亚健康大鼠模型.
