首页 > 文献资料
-
白杨素平衡溶解度、油水分配系数及解离常数的测定
目的:测定白杨素在不同介质中的平衡溶解度以及其在水和不同pH溶液中的油水分配系数(lgp)和解离常数(pKa).方法:采用高效液相色谱法测定白杨素在不同介质中的平衡溶解度;采用摇瓶法测定白杨素在水和不同pH溶液中的lgP;采用紫外分光光度法测定白杨素的pKa.结果:37℃时,白杨素在水中的平衡溶解度为38.43 μg· L-1,1gP为4.37;白杨素在pH为1.2～9的溶液中,平衡溶解度和lgP无明显变化,当pH达到10和11时,平衡溶解度和1gP变化明显;实验测得,白杨素在常用油相中的平衡溶解度均小于0.5 g·L-1,而在非醇类的表面活性剂Transcutol HP中溶解度大为6.63 g·L-1;白杨素的2个解离常数pKa1、pKa2分别为6.52、7.92.结论:白杨素具有极差的水溶性,为弱酸性药物,其解离过程分为两步进行.
-
UPLC-MS/MS法分析洋槐蜜及其蜜源花中的黄酮类成分
目的:考察采用蜜源花作为“对照药材”寻找蜂蜜中特征成分的分析方法的可行性.方法:洋槐蜜和洋槐花酸水提取液经D-101型大孔吸附树脂提取纯化后采用UPLC-MS/MS分析.色谱柱采用InertsilODS-3柱(2.1 mm×75 mm,2μm),甲醇-0.02％甲酸为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL· min-1,柱温40℃,进样量2 μL;以儿茶素、表儿茶素、芦丁、芸香柚皮苷、桑黄素、杨梅素、山柰酚、生松素等16种黄酮类对照品作为对照,采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)进行分析.结果:洋槐蜜与洋槐花中同时存在柚皮素、槲皮素、染料木素、木犀草素、山柰酚、芹菜素和汉黄芩素,且它们的含量在总共有组分含量中的占比呈一定比例,分别为5.75∶23.21∶5.00∶30.37∶32.47∶2.94∶0.25和2.45∶23.05∶0.88∶5.41∶66.04∶2.13∶0.03.洋槐蜜和洋槐花中的黄酮类组分及含量存在一定程度的相关性:洋槐花中含量高的化合物,洋槐蜜中也相对较高;相反则相对较低.后,发现洋槐蜜中的潜在标志物染料木素.结论:采用蜜源花作为“对照”寻找蜂蜜中特征成分的分析方法具有可行性.
-
UPLC-MS/MS法分析10种不同蜜源蜂蜜中的黄酮类组分
目的:建立超高效液相色谱质谱分析方法,比较不同蜜源蜂蜜中黄酮类组分的区别.方法:不同蜜源蜂蜜经D101型大孔吸附树脂提取纯化后采用UPLC-MS/MS进行分析.色谱柱采用Inertsil ODS-3柱(2.1 mm×75 mm,2μm),以甲醇-0.02％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,柱温40℃;以儿茶素、表儿茶素、芦丁、芸香柚皮苷、桑黄素、杨梅素、山柰酚、生松素等16个黄酮类对照品作为对照,采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)进行分析.结果:儿茶素、表儿茶素、芸香柚皮苷、芦丁、桑黄素、杨梅素、柚皮素、槲皮素、染料木素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、生松素、汉黄芩素、白杨素和高良姜素的质量浓度分别在0.835～83.5 μg·mL-1(r=0.998 5)、0.562～22.48 μg·mL-1(r=0.999 0)、0.095 2～4.76μg· mL-1(r=0.995 5)、0.052 2～1.307 μg· mL-1(r=0.998 0)、1.608～40.2 μg·mL-1(r=0.997 0)、0.45～9.0μg· mL-1(r=0.998 5)、0.006 9～0.69 μg· mL-1(r=0.999 5)、0.022 5～4.498 μg· mL-1(r=0.999 5)、0.0406～4.055 μg·mL-1(r=0.999 5)、0.073 3～3.665 μg·mL-1(r=0.999 5)、3.26～32.6μg·mL-1(r=0.996 5)、0.0214～1.072 μg· mL-1(r=0.999 0)、0.047 2～1.18 μg· mL-1(r=0.998 5)、0.001 4～0.353 μg· mL-1(r=0.999 5)、0.058～2.925μg·mL-1(r=0.999 5)、0.222 4～11.12 μg·mL-1(r=0.997 5)范围内与峰面积呈良好的线性关系,提取回收率分别为2.7％、3.8％、0.26％、0.00％、70.6％、59.3％、83.0％、87.8％、83.4％、81.1％、93.3％、89.9％、86.1％、95.9％、89.8和93.3％,基质效应(n=5)在94.29％～115.72％之间,18h内基本稳定,其中杨梅素6h内稳定(RSD=2.3％).不同蜜源蜂蜜之间黄酮类组分及其含量有一定程度的差异.如洋槐蜜中槲皮素、白杨素、生松素和山柰酚为主,木犀草素、染料木素、汉黄芩素等为辅;柑橘蜜中以槲皮素、山柰酚、高良姜素和汉黄芩素为主,木犀草素和芹菜素为辅;油菜蜜中以山柰酚和槲皮素为主,白杨素、生松素、柚皮素、染料木素、木犀草素和汉黄芩素等为辅等.某些化合物有可能成为蜂蜜中的潜在标志组分,如洋槐蜜中的染料木素及柑橘蜜中的汉黄芩素,与其他蜜源蜂蜜中的组分含量相比,具有含量占比高或蜂蜜和蜜源花中均有等特点.结论:该方法选择性强,灵敏度高,所得结果准确可靠,同时有助于单花蜜蜜源来源的鉴定.
-
高效液相色谱法测定山核桃叶中5个黄酮苷元含量
目的:采用反相高效液相色谱法同时测定山核桃叶中汉黄芩素、白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮、松属素的含量.方法:采用戴安Ultimate 3000系统,使用戴安Acclaim 120 C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.1％乙酸水溶液(70∶30)为流动相,流速1.0 mL· min-1,柱温为30℃,检测器为戴安Ultimate 3000 DAD,以对应化合物大吸收波长(汉黄芩素272nm、白杨素262 nm、小豆蔻明342 nm、球松素查尔酮342 nm、松属素284 nm)为检测波长,同时对山核桃叶中5个黄酮苷元进行含量测定.结果:在上述条件下,汉黄芩素、白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮、松属素浓度分别在1.27 ～25.3、2.56 ～51.2、1.29 ～25.6、5.01 ～100.2和5.06～101.2 μg·mL-1范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为98.83％、99.27％、101.1％、98.70％和99.54％;测得山核桃叶中上述的5个化合物平均含量(n=3)分别为0.0183％、0.1142％、0.0618％、0.7934％和0.3368％.结论:本法同时测定山核桃叶中汉黄芩素、白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮、松属素5个黄酮苷元,为评价和监控山核桃叶质量及其深入研究与开发奠定了良好基础.
-
HPLC法测定黄连、黄芩药对提取物中11个成分的含量
目的:建立高效液相色谱法测定黄连、黄芩药对提取物中11个成分(药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A)的含量.方法:采用Phenomoil 5μ C18 BDS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(37:63,内含磷酸二氢钾0.3400 g,十二烷基硫酸钠0.1700 g,磷酸调pH约为4),流速1.0 mL·min-1,检测波长349 nm,柱温30℃,对药对中黄连进行测定;采用Agilent ZORBAX SB-C1s(250 mm ×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.3％磷酸三乙胺(B)水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长为275 nm,柱温30℃,对药对中黄芩进行测定.结果:药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A进样量分别在0.015～0.15 μg(r =0.9997)、0.033～0.33 μg(r =0.9993)、0.17～1.7 μg(r=0.9991)、0.079 ～0.79μμg(r =0.9991)、0.31 ～3.1 μg(r=0.9991)、0.42～4.2 μg(r =0.9992)、0.078 ～ 0.78 μg(r =0.9995)、0.053 ～0.53 μg(r =0.9993)、0.016～0.16μg(r =0.9993)、1.2×10-3 ～0.012 μg(r =0.9991)、0.010～0.10g(r =0.9994)范围内呈良好线性关系;平均回收率(n=5)分别为100.1％、97.7％、97.6％、102.2％、99.4％、99.3％、99.9％、99.8％、101.1％、101.1％、100.3％,RSD分别为2.1％、1.1％、1.2％、0.9％、1.2％、1.8％、1.8％、2.2％、2.0％、1.9％、2.3％.结论:该方法为黄芩、黄连药对提取物的质量综合评价提供了科学依据.
-
白杨素增强顺铂抗肿瘤作用的研究
目的:探讨白杨素增强顺铂抗肿瘤作用的佳条件并筛选敏感细胞.方法:设立阴性对照组、空白调零组及40 μmol/L白杨素、5.0 μg/mL顺,铂、40 μmol/L白杨素+5.0 μg/mL顺铂3个处理组,选取人结直肠癌细胞(HCT-116)、人鼻咽癌细胞(CNEl)、人肝癌细胞(HepG2)、人胃癌细胞(BGC-823)分别作用24h.采用四甲基噻唑蓝(MTr)法测定肿瘤细胞的增殖抑制率,采用Hoechst33342荧光染色法测定诱导肿瘤细胞的凋亡率,通过抑制率和凋亡率筛选出敏感细胞.采用L9(33)正交设计方法,设立3个白杨素水平(10、20、40 μmol/L),3个顺铂水平(1.3、2.5、5.0 μg/mL),以及3种作用时间(12、24、36 h)处理敏感细胞,确定白杨素增强顺铂抗肿瘤作用的佳作用条件.结果:与白杨素或顺铂单独处理组相比,MTI试验结果表明,白杨素联合顺铂作用组对上述4种肿瘤细胞增殖的抑制率均明显增加,差异均具有统计学意义(P均＜0.01);Hoechst 33342染色实验发现,白杨素联合顺铂作用组诱导各肿瘤细胞的凋亡率亦均明显增加(P均＜0.01).白杨素联合顺铂作用组对人胃癌细胞BGC-823的增殖抑制率为(78.0±2.0)％、诱导细胞的凋亡率为(72.3±6.5)％.在4种细胞中,人胃癌细胞株BGC-823对白杨素联合顺铂抗肿瘤作用敏感.正交实验的体外模型结果表明,佳作用条件为白杨素40μ.mol/L联合顺铂5.0μg/mL,作用时间24h.结论:白杨素能增强顺铂抑制人肿瘤细胞增殖和诱导人肿瘤细胞凋亡的作用.人胃癌细胞BGC-823是白杨素和顺铂联合作用的敏感细胞株.
