首页 > 文献资料
-
荧光定量两探针法检测HCV RNA的研究
目的 建立荧光定量两探针检测HCV RNA方法.方法 对105例抗HCV抗体阳性和220例阴性样本,用荧光定量两探针法和2种商品荧光定量试剂进行检测,并对检测结果进行比较.结果 荧光定量两探针法阳性率分别为89.5%(94/105)和2.3%(5/220).两种商品荧光定量试剂阳性率分别为71.4%(75/105)和0.45%(1/220);69.5%(73/105)和1.8%(4/220).结论 荧光定量两探针法检测HCV RNA有较高的敏感性和特异性.
关键词: 丙型肝炎病毒(HCV)RNA 探针 荧光定量 -
荧光定量RT-PCR检测白血病多耐药基因及其临床意义
多药耐药(multidrug resistance,MDR)导致的化疗失败是肿瘤治疗中亟待解决的问题.鉴于临床MDR的出现常与多药耐药基因(mdr1)过度表达有关,我们在Light-CyclePCR仪上对mdr1 定量的技术方法和临床应用进行了探讨.
关键词: 多药耐药基因 荧光定量 逆转录-聚合酶链反应 -
荧光定量PCR分析法在结核病诊断中的应用
为了探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测结核分枝杆菌的临床应用,本文采用FQ-PCR技术检测145例标本,并与培养法、抗酸染色法和PCR-电泳法进行比较.结果:在115例来自结核病人的高度怀疑有结核分枝杆菌的标本中,FQ-PCR法检出阳性为53例,其检出率高于PCR-电泳法检出率(48/115)、培养法检出率(43/115)和抗酸染色法检出率(31/115),30例非结核病的病人标本,四种方法均未检出结核分枝杆菌.FQ-PCR法的阳性检出低值为103拷贝/ml,PCR-电泳法为104拷贝/ml.结果表明,FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测结核分枝杆菌方法.
-
全脑缺血-再灌注鼠STAT3基因的表达
目的 研究鼠海马组织中信号转导与转录激活子-3(STAT3)mRNA在短暂性全脑缺血-再灌注过程中的表达变化.方法 将健康雄性SD大鼠25只,随机均分为全脑缺血-再灌注4、24、48、72 h组和假手术组.以"双侧颈总动脉阻断加全身低血压法"建立大鼠短暂性全脑缺血模型,采用实时荧光定量PCR技术观察大鼠缺血性脑损伤海马组织中STAT3 mRNA的变化.结果 短暂性全脑缺血后海马组织STAT3 mRNA的表达增强,再灌注24 h达高峰.结论 短暂性全脑缺血-再灌注后STAT3 mRNA的活化及超量表达可能介导了缺血神经细胞信号传导过程,并参与了脑神经细胞损伤的病理生理过程.
关键词: 脑缺血-再灌注 信号转导与转录激活子-3 逆转录聚合酶链反应 荧光定量 -
肾小球白介素-10基因表达的检测及其在狼疮性肾炎分子诊断中的应用
目的:探讨狼疮性肾炎(LN)患者肾活检组织切片中肾小球IL-10 mRNA表达与临床病理的联系,及其在LN分子诊断中的意义.方法:对20例病理证实的Ⅳ型LN患者,运用激光微分离系统分离其肾活检组织切片中的肾小球,提取总RNA,用荧光定量PCR检测IL-10 mRNA的表达.结果:12例患者的肾小球中检测到IL-10mRNA表达.肾小球IL-10 CT比值与尿IL-10水平、血IgG水平和肾小球CD68平均计数呈显著正相关,与血C3水平呈显著负相关.结论:应用激光微分离技术精确获取肾小球检测基因表达,发现肾小球IL-10 mRNA表达与Ⅳ型LN患者的免疫损伤表现及肾小球病理改变特点显著关联.肾小球原位IL-10 mRNA表达的检测为判断LN患者病情,指导治疗提供了新的组织学分子标志.
-
荧光定量聚合酶链反应检测早期梅毒患者梅毒螺旋体
笔者应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测3例早期梅毒患者梅毒螺旋体及其血液中梅毒螺旋体特异基因片段,现报告如下.
-
基因芯片技术检测生殖器疱疹病原体
近年来,基因芯片技术在感染性疾病诊断中的临床应用已经起步[1,2].我们旨在建立检测性传播感染常见病原体的基因芯片技术,并将其应用于生殖器疱疹患者的临床检测;同时,将该方法与目前临床常用的荧光定量PCR(FQ-PCR)技术作比较,初步评价其临床应用价值.
-
婴幼儿人巨细胞病毒感染154例PCR与ELISA检测比较
目的:探讨采用不同的定量方法及不同的标本检测婴幼儿人巨细胞病毒(HCMV)感染阳性率.方法:采用荧光定量PCR法和ELISA定量法分别对154例疑感染HCMV住院患儿进行HCMV DNA和HCMV IgM抗体的定量检测,其中对73例患儿的血及尿标本同时进行HCMV DNA的检测.结果:血和尿HCMV DNA同时检测,尿检出率明显高于血;血和尿HCMV DNA检出率明显高于血清HCMV IgM;两种方法的联合检测进一步提高阳性率.结论:两种方法同时检测可提高HCMV的检出率;尿标本HCMV DNA的检出率明显高于血标本,采用尿标本更方便,且阳性率高.
关键词: 巨细胞病毒 荧光定量 聚合酶链反应 人巨细胞病毒IgM抗体 儿童 -
荧光定量PCR及斑点杂交检测HBV DNA与血清HBV标志物的关系
目的比较荧光定量PCR和斑点杂交检测血清HBV DNA与血清HBV标志物(HBVM)的相互关系.方法采用荧光定量PCR(FQ-PCR)、斑点杂交和酶联免疫吸附法(ELISA)同时检测213份肝炎患者血清,并对结果进行分析比较.结果 213份肝炎患者血清中FQ-PCR及斑点杂交法检测HBV DNA阳性数分别为125例、80例,阳性检出率分别为58.7%和37.6%,2种方法阳性检出率有显著性差异(P<0.05).除HBsAg、HBeAg阳性组和HBsAb阳性组FQ-PCR和斑点杂交HBV DNA阳性检出率相同外,其余各组FQ-PCR HBV DNA检出率明显高于斑点杂交(P<0.05),HBeAg阳性2组的2种方法HBV DNA检出率明显高于HBeAg阴性各组(P<0.05).随着FQ-PCR检测HBV DNA拷贝数的增加,斑点杂交法阳性检出率也明显增加.结论 FQ-PCR和斑点杂交法检测HBV DNA均可直接反映乙肝患者HBV感染、复制及病程变化,而FQ-PCR能真实地反映病毒的负荷量,对乙肝临床诊断及抗病毒治疗疗效观察较斑点杂交与HBVM更具有指导意义.
-
荧光定量PCR在丙型肝炎病毒感染检测中的应用
目的观察荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)在丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染检测中的临床应用情况.方法用FQ-PCR检测315份怀疑HCV感染的临床血清标本,并同时采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗HCV,用生化仪测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,了解样本中HCV-RNA含量与抗HCV及ALT的相关性.结果 315份标本中有225份HCV-RNA含量高于80拷贝@ml-1,250份抗HCV阳性,145例ALT异常,HCV-RNA含量与抗HCV阳性率间有显著的相关性(r=0.682,P=0.002);HCV-RNA含量与ALT异常率间也有显著的相关性(r=0.923,P=0.032).结论 FQ-PCR技术检测HCV-RNA特异性强,灵敏度高,具有良好的临床应用价值.
-
荧光定量PCR检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的临床意义
目的:检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的含量,了解其与免疫学指标的关系.方法:采用荧光定量PCR技术和ELISA法,分别检测287例乙型肝炎患者血清中HBV DNA含量和免疫学指标.结果:287例乙型肝炎患者血清中检出HBV DNA 199例,阳性率为69.34%(199/287);144例HBsAg、HBeAg、抗HBc三项阳性的血清,其血清中HBV DNA也全部阳性;而HBsAg、抗HBe、抗HBc三项阳性和HBsAg、抗HBc二项阳性的标本,HBV DNA的检出率分别38.9%(42/108)和37.1%(13/35).结论:乙型肝炎患者血清中HBVDNA的拷贝数与HBeAg密切相关,但系统转换不能说明HBV停止复制,而只是复制水平的降低而已.
-
3种荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA结果比较
乙型病毒性肝炎(乙肝)是一种严重影响我国人民健康的传染病,检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA含量是反映HBV复制的程度,考核抗病毒药物治疗效果的重要依据.
-
慢性乙肝HBV DNA定量与e系统及ALT检测结果
乙型肝炎病毒(HBV)感染的诊断及疗效主要依据血清学标志物和HBV-DNA等的检测,其中HBV-DNA是HBV感染、复制和传染性强弱的直接指标[1].我们用荧光定量PCR法检测213例慢性乙肝患者血清HBV-DNA含量,同时用ELISA法检测HBV标志物及ALT水平,分析HBV-DNA含量与HBV血清学标志物及肝功能的关系.
-
3种荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA结果比较
准确定量检测血清中HBV-DNA能反映HBV在肝脏复制的程度,对乙肝治疗监测具有极其重要的意义,同时也是考核抗病毒药物治疗效果的重要依据.PCR法检测HBV-DNA成为常用的检测手段,由于PCR法比较精细,可受一系列的技术及人为因素的影响,因此检测结果易产生误差,甚至造成假阴性.为此,对96份HBV-DNA检测阴性标本,用多种不同厂家生产的PCR试剂进行复核,探讨其假阴性结果的真实性,现将结果报道如下.
-
TaqMan荧光定量RT-PCR法快速检测肠道病毒EV71
手足口病(Hand foot mouth disease HFMD)是婴幼儿常见的传染病,由人肠道病毒属的柯萨奇病毒(Coxsackie virus) A组16、4、5、7、9、10 型, B组2、5型;埃可病毒(ECHO viruses)和肠道病毒71型(EV 71)感染引起,其中以EV 71及Cox Al6型为常见.
-
5%咪喹莫特乳膏对尖锐湿疣临床治愈后原皮损区HPV DNA含量的影响
尖锐湿疣(CA)临床常用的物理治疗包括激光、冷冻等可以达到临床治愈,但不能解决HPV亚临床感染和潜伏感染病灶的存在,使得CA病程较长、病情顽固易复发[1,2].作者采用先激光治疗CA感染病灶,并5%咪喹莫特乳膏外用治疗8周,荧光定量PCR检测患者的HPV清除情况,以期能减少CA临床复发.
-
大肠癌不同发展阶段相关基因甲基化定量分析的临床意义
目的:通过进行大肠癌患者相关基因甲基化定量分析,探讨相关基因甲基化水平与大肠癌发生、发展的关系。方法采用实时荧光定量PCR技术检测大肠癌组、癌前病变组(结肠腺瘤)及正常对照组的APC、p16及大肠癌特异性基因Vimentin基因甲基化水平。结果大肠癌组中APC、p16及Vimentin基因甲基化阳性率比较癌前病变(结肠腺瘤)和正常肠黏膜组显著升高,其差异有统计学意义(P<0.05);大肠癌组中肿瘤组织的APC、p16及Vimentin基因甲基化阳性率比癌旁及正常黏膜组织显著升高,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论 APC、p16及Vimentin基因甲基化参与了大肠癌的发生发展,且利用实时荧光定量PCR对相关基因甲基化进行定量分析可能预测大肠癌早期发生。
-
异位妊娠与生殖道沙眼衣原体感染的关系分析
近年来,异位妊娠的发生率呈上升趋势,输卵管妊娠占异位妊娠的95%左右,在异位妊娠的病因中,输卵管炎症是主要病因[1].而国内外越来越多的研究表明,生殖道沙眼衣原体(CT)感染可能与输卵管妊娠的发生有关.本文采用荧光定量PCR技术,检测宫颈分泌物中与输卵管黏膜组织中的CT DNA,对两组的检测结果进行统计学比较,以期分析异位妊娠与生殖道沙眼原体感染的关系.
-
荧光定量PCR检测上皮性恶性肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA
[目的]探讨荧光定量PCR技术检测外周血CK19、CK20mRNA对上皮性恶性肿瘤微转移的临床意义.[方法]采用荧光定量PCR技术检测41例上皮性恶性肿瘤患者术前外周血CK19、CK20mRNA的表达情况.[结果]41例肿瘤患者中CK19mRNA阳性率26.82%,CK20mRNA阳性率21.95%,两者均阳性5例(12.19%).CK19、CK20mRNA阳性率与患者的性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤细胞分化程度无关(P>0.05),而与肿瘤分期相关,其差异有显著性.[结论]CK19、CK20mRNA可作为一个检测上皮性恶性肿瘤患者外周血微转移标志物,两者联合检测可提高外周血癌细胞的检出率.
-
白血病不同病期细胞端粒酶mRNA表达水平分析
近年来研究发现端粒酶活性增高与肿瘤细胞增殖加快、分化受抑有关,可使肿瘤细胞逃脱死亡成为永生细胞[1].白血病是血液系统恶性疾病,表现为细胞周期失控性增殖,其改变与端粒及端粒酶的异常关系密切.因而,检测白血病端粒酶活性,有助于白血病的病情分析和治疗.常用端粒酶活性分析方法是端粒重复扩增法(Telomeric Repeat Amplification Protocol,TRAP)[2],通过电泳条带放射自显影定性测定.用定量方法研究其活性鲜见报道,本文应用荧光定量PCR技术检测33例白血病患者白血病细胞端粒酶mRNA水平,旨在探讨端粒酶mRNA与白血病演变和预后关系.