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丹酚酸B-TAT脂质体对HSF细胞增殖、侵袭和细胞周期的影响
制备载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),研究其对人皮肤成纤维细胞(HSF)生长增殖、迁移、侵袭和细胞周期的影响,初步评价其用于防治增生性瘢痕的效果.以体外培养的HSF细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐MTT法检测SAB-TAT-LIP对细胞生长增殖的抑制作用;采用Transwell小室法和划痕法检测SAB-TAT-LIP对细胞侵袭和迁移能力的影响;采用流式细胞术检测细胞周期变化.空白脂质体对HSF细胞基本无毒副作用,不同浓度的SAB-TAT-LIP干预HSF细胞不同时间后,均具有一定的增殖抑制作用,且呈现剂量和时间依赖性,同时细胞迁移和侵袭能力明显降低;SAB-TAT-LIP干预HSF细胞48 h后,可使细胞周期阻滞于G0/G1期,与空白对照组相比,P＜0.01.SAB-TAT-LIP对HSF细胞的增殖、侵袭和迁移有显著的抑制作用,对细胞周期G0/G1期有阻滞作用.
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二甲双胍抑制UVA诱导的人皮肤成纤维细胞的光老化效应
目的 研究二甲双胍(MF)对长波紫外线(UVA)诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)光老化效应的抑制作用及相关机制.方法 体外培养人皮肤成纤维细胞,分为对照组(control)、UVA组、UVA+MF组.以CCK-8法检测细胞增殖;对各组细胞进行细胞衰老β-半乳糖苷酶染色;以荧光探针DCF-DA染色流式细胞仪检测细胞内ROS水平;real-time PCR检测衰老相关基因MMP1、MMP3的mRNA相对表达量;Western blot检测蛋白MMP1、MMP3、SOD1和SOD2的表达.结果 0.01 mmol/L二甲双胍对HSF增殖无显著影响,0.1和1 mmol/L二甲双胍则显著抑制HSF的细胞增殖(P<0.05).与对照组相比,UVA组β-半乳糖苷酶染色阳性率显著增高(P<0.01);ROS水平显著升高(P<0.05);MMP1和MMP3 mRNA相对表达量显著增加(P<0.01);MMP1和MMP3蛋白表达量显著增多(P<0.01);SOD1、SOD2蛋白表达显著减少(P<0.01).与UVA组相比,UVA+MF组β-半乳糖苷酶染色阳性率显著降低(P<0.05);ROS水平显著下降(P<0.05);MMP1和MMP3的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);蛋白MMP1和MMP3表达量显著降低(P<0.05);蛋白SOD1表达显著增加(P<0.01);SOD2表达量增加.结论 二甲双胍可通过抑制细胞内ROS水平和相关基质金属蛋白酶的表达,提高细胞抗氧化能力,从而抑制UVA诱导的皮肤成纤维细胞的光老化效应.
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细胞因子在登革病毒感染人皮肤成纤维细胞中的作用
目的探讨登革病毒(dengue virus, DV)对人皮肤成纤维细胞(HSF)的感染性和细胞因子在DV感染HSF中的作用. 方法采用微量病毒空斑法检测登革Ⅱ型病毒(dengue type-2 virus, DV2)感染HSF后病毒繁殖动态变化,间接免疫荧光法检测HSF内DV抗原.透射电镜观察病毒感染细胞的超微结构改变.用不同浓度的IL-6、TNF-α、GM-CSF分别作用于DV2感染HSF的不同环节(病毒吸附时和病毒吸附后),于感染后48*!h收集感染上清,测病毒滴度;用DV2感染HSF后,于不同时间收集感染上清,用ELISA法定量测定IL-6、TNF-α的含量. 结果病毒感染后24*!h即可在培养上清中测出病毒,病毒滴度在48*!h达到高峰,以后逐渐下降.用间接免疫荧光法证明感染的HSF胞浆及胞膜上携带DV抗原.在光镜和电镜下,感染细胞均未见明显的形态和结构改变.在病毒吸附时10*!ng/ml浓度的IL-6能显著提高病毒产量;在病毒吸附时和吸附后100*!ng/ml浓度的TNF-α能抑制病毒的产量.GM-CSF对DV感染HSF无明显影响.DV感染能促进HSF分泌IL-6;对TNF-α的分泌无明显影响. 结论 HSF是DV的允许性细胞.HSF可能是蚊叮咬后在原位组织中首先支持DV感染的细胞之一;细胞因子在DV感染HSF的致病和免疫过程中起重要作用.
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枸杞多糖对紫外线致人皮肤成纤维细胞脂质损伤的防御作用
目的 探讨枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)对紫外线(Ultraviolet.,Uv)照射的人皮肤成纤维细胞(Human Skin Fibroblasts,HSF)脂质损伤的防御作用及其机制.方法 采用不同浓度LBP处理体外培养HSF细胞,用噻唑蓝(Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT)法筛选出适宜药物浓度,行长波紫外线(Ultraviolet A,UVA)、中波紫外线(Ultraviolet B,UVB)照射建立HSF细胞急性光损伤模型,设空白组、LBP组、UVA组、UVA+ LBP组、UVB组、UVB+ LBP组;尼罗红荧光染色检测过氧化脂质含量;酶生化法测定胞质超氧化物歧化酶(Superox-ide Dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活性及乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)漏出量.结果 LBP浓度在300 μg/ml以下时,HSF细胞的增殖活性不受影响(P＞0.05),当浓度＞300 μg/ml时,LBP抑制细胞增殖能力(P＜0.05);与空白组比较,UVA和UVB照射组氧化脂质含量、LDH漏出量明显升高,胞内SOD、GSH-Px活性显著降低,差异均有统计学意义(均P ＜0.05);相比UV组,光照前加入LBP(UVA+ LBP组、UVB+ LBP组)可明显提高细胞SOD、GSH-Px活性,降低ROS水平、过氧化脂质含量及LDH漏出率(均P＜0.05).结论 枸杞多糖可有效拮抗UV诱导的HSF细胞脂质损伤,作用机制可能与其增强SOD、GSH-Px等抗氧化酶的活性,降低LDH漏出量,保护细胞膜免受损伤有关.
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雌激素对人皮肤成纤维细胞增殖与迁移的影响
目的 探讨雌激素(17β-estrogen,17β-E2)对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSFB)增殖与迁移的影响.方法 分离培养HSFB,传至第4代；(1)四甲基偶氮噻唑蓝比色法(MTT)检测不同浓度17β-E2和17β-E2+雌激素β受体(estrogen β receptor,ER-β)拮抗剂ICI-182780干预24、48、72、96h后HSFB增殖活力；(2)流式细胞仪检测17β-E2和ICI-182780对HSFB周期分布的影响；(3)建立细胞划痕(Scratch-Wound)模型,24、48、72 h后观察HSFB在不同浓度17β-E2和17β-E2+ ICI-182780干预下的迁移情况.结果 (1)MTT显示,48、72、96 h时,10-8、10-9、10-10、10-11、10-12mol/L浓度范围内,均以10-10 mol/L 17β-E2促增殖效应强；并且10-10mol/L 17β-E2组(A组)细胞增殖效应强于ICI-182780+ 10-10 mol/L 17β-E2组(B组)与空白组(C组,P＜0.01)；(2)A组处于S期的细胞比例多于B、C组(P＜0.01),处于G0/G1期的细胞比例则少于B、C组(P＜0.01)；(3)48 h时,10-6、10-7、10-8、10-9、10-10 mol/L浓度范围内,10-8 mol/L 17β-E2促细胞迁移效应强(P＜0.01);24、48、72 h时,10-8 mol/L 17β-E2组(D组)细胞迁移距离均大于10-8 mol/L 17β-E2+ ICI-182780组(E组)及空白组(F组)(P＜0.01).结论 10-10 mol/L浓度雌激素促HSFB增殖效应强；10-8 mol/L浓度促HSFB迁移效应强；ICI-182780有效减弱上述2种效应.
关键词： 人皮肤成纤维细胞 雌激素 细胞增殖 细胞迁移 ICI-182780 -
枸杞多糖对紫外线致人皮肤成纤维细胞DNA链断裂损伤的影响
目的 探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对紫外线(UV)照射致体外培养人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF)DNA链断裂损伤的影响.方法 实验随机分为6组:空白组、LBP组、UVA组、UVB组、UVA+LBP组、UVB+ LBP组.构建UVA和UVB致HSF细胞光损伤模型;MTT法检测细胞增殖活性;分光光度计检测IBP对UV吸收情况;用DCFH-DA法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;彗星实验观察彗星电泳图及DNA迁移效应.结果 当浓度≤300 μg/ml时,LBP对HSF增殖活性无明显影响(P＞0.05),当浓度＞300 μg/ml时,LBP抑制细胞增殖活性(P＜0.05);相比空白组,UVA组及UVB组增殖活性明显下降(P＜0.05),而光照前予以LBP干预组增殖活性显著升高(P＜0.05);LBP在280～400 nm UV范围内吸光度(A值)均较小;UVA+ IBP组及UVB+LBP组ROS明显低于单纯照射组(P＜0.05);与空白组比较,仅照射组DNA荧光强度、迁移距离均增加(P＜0.05),而LBP干预组各项指标均明显降低(P＜0.05).结论 LBP不具有遮光剂的作用,可有效抑制UV照射致HSF增殖活性下降,防护DNA链断裂损伤,其机制可能与其清除ROS有关.
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五倍子提取物对细胞辐射佳防护剂量筛选
目的 研究中药五倍子提取物细胞辐射防护作用做初步研究并且筛选佳防护剂量.方法 用不同剂量(2Gy、4Gy、8Gy、16Gy、32Gy)X射线一次性照射人皮肤成纤维细胞(HSF)确定辐射损伤模型,以MTT法对不同剂量(5μg/ml,25 μg/ml,50μg/ml,100 μg/ml,200 μg/ml)的五倍子提取物抗辐射的佳剂量进行筛选.结果 以16Gy一次性X射线照射辐射损伤模型,模型组与不同药物干预组在各时段(2 h,24h,48 h,72 h)差异均有统计学意义(P＜0.01),其中200 μg/ml五倍子取物在各时间段辐射防护作用优于其它组(P＜0.01).结论 X射线辐射对HSF具有损伤作用,不同剂量五倍子提取物对辐射后的HSF均有保护作用,其中200 μg//ml五倍子提取物抗辐射活性强.
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茶多酚提取物EGCG对人皮肤成纤维细胞自然老化及慢性光损伤的影响
目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG)对正常生理代谢状态下人皮肤成纤维细胞(hu-man skin fibroblast,HSF)自然老化以及经长、中波紫外线(UVA及UVB)多次辐射后HSF光损伤的影响.方法 分离新生儿包皮获得原代HSF,将其分为正常生理代谢传代实验组(A组)和多次UV照射实验组(B组).预实验选定EGCG有效作用质量浓度25 mg·L-1.A组细胞包括加入EGCG干预组和空白对照组,共孵育80 d.B组HSF细胞分组包括:空白对照组、EGCG干预组、多次UVA组、多次UVA+EGCG组、多次UVB组及多次UVB+EGCG组,其中UVA和UVB均采用文献提示日常生理剂量,每天照射,持续照射2周.采用组织化学染色法检测细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶的表达量,观察细胞自然老化及照光后的老化情况;采用流式细胞仪测定细胞周期及细胞凋亡率.结果 A组中,EGCG组的β-半乳糖苷酶阳性细胞数较正常对照组下降了47.60%(P<0.05).B组中正常细胞组及EGCG组均只见少量的β-半乳糖苷酶阳性细胞.其余几组阳性细胞比率为:多次UVB组<多次UVA组
关键词： 没食子儿荼素没食子酸酯 UV辐射 细胞老化 细胞凋亡 人皮肤成纤维细胞 -
葡萄糖转运蛋白1基因多态性对成纤维细胞糖代谢的影响
高血糖和遗传体质因素是糖尿病肾病（DN）的主要发病因素。研究表明，葡萄糖转运蛋白1基因（glucose transporter 1,GLUT1）XbaI（-）等位基因与2型DN的发生相关［1］。GLUT1是肾小球系膜细胞的主要葡萄糖转运蛋白［2］，负责细胞的基础代谢,其表达与活性可能在DN细胞糖代谢异常中起了重要作用［3］。为了进一步揭示GLUT1基因多态性与其功能之间的联系，我们对GLUT1不同基因型DN和正常人皮肤成纤维细胞葡萄糖摄入率和动力学,GLUT1的表达及细胞表型进行了研究。 一、对象 分别对54名汉族健康成人,14例2型DN患者(尿白蛋白≥200 μg/min，并经肾活检确诊)进行GLUT1基因分析。将不同人群分为至少携带1条及不携带XbaI(-)等位基因的2组,并根据年龄和性别进行配对。
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长波紫外线对人皮肤成纤维细胞DNA的损伤
紫外线在电磁波谱中属于非电离辐射,波长100～400nm,通常把波长320～400nm的紫外线称为长波紫外线(UVA).UVA的能量很弱,DNA对UVA的吸收作用极低,因此UVA对DNA的损伤往往被忽视.我们用单细胞凝胶电泳检测UVA对原代培养人皮肤成纤维细胞DNA的损伤.
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不同浓度葛根素溶液对人皮肤成纤维细胞生物学效应的影响
[目的]观察不同浓度的葛根素溶液对人皮肤成纤维细胞(HDF)生物学效应的影响.[方法]体外培养人皮肤成纤维细胞,选用葛根素溶液100、200、300、400、500μg/mL五个不同的药物浓度,观测葛根素溶液在5个药物浓度下对HDF的生物学效应的影响.[结果]与对照组相比较,药物浓度为100、200、300、400μg/mL的葛根素溶液,对体外培养的HDF的生物学效应无影响(P>0.05);药物浓度为500μg/mL的葛根素溶液,对体外培养的HDF的增殖有抑制作用(P<0.05),且对HDF的细胞膜有一定的损伤作用(P<0.05).[结论]药物浓度500μg/mL的葛根素溶液对体外培养的HDF有抑制增殖和细胞膜损伤的作用,此药物浓度可作为干预HDF的作用剂量,对瘢痕组织的治疗将起到一定作用.
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穿膜肽TAT修饰载丹酚酸B脂质体的制备及其抑制人皮肤成纤维细胞增殖与迁移初步研究
目的 制备具有防治增生性瘢痕(HS)作用的载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),建立其质量评价方法,并初步考察其对体外人皮肤成纤维(HSF)细胞增殖和迁移的影响.方法 采用pH梯度逆向蒸发法制备脂质体,超滤法测其包封率,以包封率为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优化脂质体的处方工艺;考察其形态、粒径、Zeta电位、体外释放、体外透皮吸收和稳定性等理化性质;在此基础上采用MTT法考察其对HSF细胞增殖的作用,采用划痕法和Transwell小室法考察其对HSF细胞迁移和侵袭的作用.结果 SAB-TAT-LIP的药物包封率为(86.70±0.85)％,平均粒径为(219.90±5.09) nm,Zeta电位(-9.25±0.92) mV,体外24 h累积释放率为62.49％,无突释效应,体外32 h皮肤累积透过率为17.21％,透过速率为(28.33±4.9)μg/(cm2·h),真皮层滞留量为(44.39±6.87) μg/cm2,4℃放置10 d稳定性良好.SAB-TAT-LIP能够显著地抑制HSF细胞的增殖、迁移和侵袭,与对照组相比,差异显著(P＜0.01).结论 优化得到的SAB-TAT-LIP包封率较高、粒径较小,体外释放和透皮行为均满足局部透皮给药制剂的体外释放和透皮规律,对体外HSF细胞的增殖、迁移和侵袭具有抑制作用.
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内毒素对人皮肤成纤维细胞的影响及在增生性瘢痕形成中的意义探讨
增生性瘢痕是烧伤患者创面愈合后所面临的主要问题之一,其临床特点为难耐的瘙痒及外观和功能毁损,给患者造成极大的痛苦.对增生性瘢痕诱因、发病机制和防治的研究,已成为创面修复领域的前沿课题.
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麦冬多糖对中波紫外线损伤人皮肤成纤维细胞的保护作用
背景:随着环境日益恶化,大气臭氧层破坏严重,辐照到地球表面的中波紫外线也日渐增加,防治中波紫外线引起的皮肤光老化意义重大.目的:观察麦冬多糖对中波紫外线诱导的人皮肤成纤维细胞光老化损伤的保护作用,探讨其作用机制.方法:实验将人皮肤成纤维细胞分为5组,对照组不光照,无药培养液培养;其余4组均给予200 mJ/cm2的中波紫外线照射建立细胞光老化模型,模型组光照后给予无药培养液培养;各麦冬多糖给药组光照后分别给予10 mg/L、100 mg/L、1 g/L的麦冬多糖培养液培养.培养48 h后CCK-8检测细胞生存率;试剂盒法测定细胞内超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量;利用荧光定量PCR法测定光老化人皮肤成纤维细胞中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3、c-Jun基因表达量.结果与结论:①200 mJ/cm2的中波紫外线可以降低人皮肤成纤维细胞生存率,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性降低,丙二醛含量升高,基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3、c-Jun基因表达量增加,与对照组相比差异均有显著性意义(P<0.05);②给予10 mg/L、100 mg/L、1 g/L的麦冬多糖均能提高中波紫外线损伤的人皮肤成纤维细胞生存率,升高细胞内超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性,降低丙二醛含量,降低受损细胞内基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3、c-Jun基因表达量;③综上,麦冬多糖能减轻中波紫外线对人皮肤成纤维细胞的损伤,其机制可能是通过缓解中波紫外线诱导的氧化应激,抑制相应信号转导通路,降低光老化细胞内c-Jun表达,进而抑制基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3表达,减少皮肤胶原蛋白损伤.
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光老化作用对体外人皮肤成纤维细胞的影响
目的 建立体外分离培养人皮肤成纤维细胞的光老化模型,观察研究中波紫外线对人皮肤成性纤维细胞的影响.方法 使用组织块法分离培养原代人皮肤成纤维细胞,并用免疫荧光特异性标记物鉴定证实,选择不同剂量的紫外线照射人皮肤成纤维细胞后,倒置显微镜观察细胞形态学的改变;β-半乳糖苷酶(β-gal)细胞衰老试剂盒染色;MTT检测不同剂量的紫外线照射对成纤维细胞增殖能力影响;western blot检测衰老标志物P16蛋白的表达.结果 组织块法成功分离获得人皮肤成纤维细胞,用20～60mJ/cm2 UVB单次照射后,可以成功诱导人皮肤成纤维细胞出现衰老形态学的改变,其增殖能力降至正常对照组的一半左右,β-gal染色阳性率约90%,衰老相关蛋白P16表达随时相明显升高.结论 20～60mJ/cm2中波紫外线照射人皮肤成纤维细胞可诱导人皮肤成纤维细胞衰老,为今后皮肤光老化的体外研究提供了参考.
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逆转录病毒介导系统感染原代培养人皮肤成纤维细胞
目的 利用包装生产逆转录病毒感染原代培养人皮肤成纤维细胞,为细胞重编程提供技术保证.方法 利用组织块贴壁法体外原代培养人皮肤成纤维细胞.包装生产携带绿色荧光蛋白GFP基因的逆转录病毒上清液.收集逆转录病毒上清液感染原代培养人皮肤成纤维细胞,利用荧光显微镜观察逆转录病毒感染成纤维细胞.结果 体外成功原代培养出人皮肤成纤维细胞.293T细胞包装生产携带GFP基因的逆转录病毒上清液.包装生产后逆转录病毒成功地感染原代培养人皮肤成纤维细胞.结论 逆转录病毒介导系统是人皮肤成纤维细胞重编程的有效基因转移载体.
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体外原代培养脐带基质间充质细胞和人皮肤成纤维细胞
目的 探讨体外原代培养脐带基质间充质细胞(UMC)和人皮肤成纤维细胞(HSF)的方法.方法 用Ⅳ型胶原蛋白酶、Ⅰ型脱氧核糖核酸酶和0.25％胰蛋白酶消化法原代分离培养UMC细胞,用组织块贴壁法原代分离培养HSF细胞,镜下观察细胞的培养过程和生长状态.结果 脐带组织分离培养第3天,有少量UMC贴壁生长,细胞膜周围有折光性,形态类似于成纤维细胞；皮肤组织块贴壁培养第7天,有HSF爬出,呈长梭形、不规则三角形.随着细胞培养时间延长,UMC和HSF数量逐渐增多细胞生长状态良好.结论 应用酶消化法和组织块贴壁法可成功分离培养出UMC和HSF.
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浅谈黄芪甲苷对人皮肤成纤维细胞增生和凋亡的影响
探讨分析黄芪甲苷对人皮肤成纤维细胞增生和凋亡的影响。方法：选取近年来我院皮肤科收治的2例中年男性患者及1例老年男性患者作为研究对象，采集其中1例中年男性的面部皱纹皮肤、另外1例中年男性的面部无皱纹皮肤及老年男性的面部皮肤作为样本，分别采用不同浓度的黄芪甲苷溶液对其进行体外培养，检测对比24h后、72h后及120h后皮肤成纤维细胞的增生率和凋亡率，并将对比的结果及3例患者的临床资料进行回顾性的分析。结果：当黄芪甲苷的浓度较低时（5～20μg/ml），具有促进人皮肤成纤维细胞增生的作用，尤其当浓度为10μg/ml时的效果为明显，明显优于DMSO组（72h后及120h后），差异显著（P＜0.05），具有统计学意义。当黄芪甲苷的浓度为10μg/ml时，皱纹组样本细胞的凋亡率由70.2%下降至24.7%（培养120h后），下降幅度明显，差异显著（P＜0.05），具有统计学意义；非皱纹组样本细胞的凋亡率由71.0%下降至29.7%（培养120h后），下降幅度明显，差异显著（P＜0.05），具有统计学意义；而老年组样本细胞的凋亡率则无明显下降，差异不显著（P＞0.05），不具有统计学意义。结论：较低浓度的黄芪甲苷不仅能改善人皮肤成纤维细胞的活性，促进其增生，还能有效地抑制细胞的凋亡。
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胶原蛋白对人皮肤成纤维细胞生长状态的影响
目的:通过细胞实验,从细胞机理上探索胶原蛋白对人皮肤成纤维细胞生长状态的影响,挖掘其潜在功效.方法:用一定浓度胶原蛋白的细胞培养液培养人皮肤成纤维细胞,观察不同来源胶原蛋白对细胞生长曲线的影响,考察样品对体外人皮肤成纤维细胞生长是否有促进作用.羟脯氨酸是人皮肤细胞保水重要成分因子,测定各样品培养细胞后的培养液的羟脯氨酸的含量,以观察其对细胞保水能力的影响.测定各样品培养细胞后的培养液的SOD、MDA的含量,观察其对细胞抗氧化能力的影响.结果:鱼皮胶原蛋白对人成纤维细胞有促进生长的作用,明显增加羟脯氨酸的含量,能够显著降低细胞培养液中MDA的含量.结论:经过细胞实验,鱼皮胶原蛋白能够较好的改善人皮肤成纤维细胞的生长状态.
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以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞
目的:比较人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblasts,HDFs)与小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblasts,MEFs)的增殖能力及研究人皮肤成纤维细胞作为饲养层支持人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)未分化生长的能力.方法:利用组织贴壁法从人皮肤中分离出HDFs,通过细胞形态的观察和生长曲线的绘制比较HDFs与MEFs的体外增殖能力.将HDFs作为饲养层细胞与hESCs共培养,传代12代后,检测hESCs碱性磷酸酶(AKP)、表面特异性标志及胚胎干细胞特异性转录因子.结果:HDFs可连续传代培养15代以上,10代以下的HDFs增殖迅速,而MEFs自第4代起,增殖能力就明显下降;hESCs在HDFs饲养层上可传代培养12代以上,克隆边界清晰,细胞排列紧密,碱性磷酸酶、表面标志物检测均呈阳性,表达了hESCs特异性转录因子.结论:HDFs比MEFs具有更强的增殖能力;HDFs可作为培养hESCs的饲养层细胞.
