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全自动酶放大化学发光免疫分析法与RIA法定量AFP的对比
近年来非放射标记免疫分析技术已逐渐推广应用.本文选用美国德普公司IMMULITE Ⅰ型酶放大化学发光分析法(以下简称发光法)与RIA进行了对比分析,并对患者血清样品若干批次的AFP进行了检测,结果报道如下.
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不同血清稀释度对动物莱姆病酶联免疫吸附试验检测结果分析
在当前尚无动物莱姆病诊断试剂和操作技术规程情况下,在引用人莱姆病诊断试剂及方法时,考虑人和动物抗体活性、血清学反应差异等因素,不能完全按人莱姆病检测标准.为选择动物佳血清稀释度,故进行了本项试验.1 材料和方法被检血清(牛、羊)共1 083份,分别采集于陈巴虎旗、鄂温克族自治旗、海拉尔市及我市所属各镇;莱姆病酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂盒、莱姆病抗原包被载玻片和兔抗羊、兔抗马荧光抗体,均由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所提供;每份血清样品均以100、200、400倍稀释后分别进行ELISA测试.ELISA、间接免疫荧光法(IFAT)按中国疾病预防控制中心传染病预防控制所暂定的操作规程实施.
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酶联免疫吸附法同时检测血清中的HIV和HCV抗体
用酶联免疫吸附试验检测病毒抗体,多为对单一抗体的检测,我们将人类免疫缺陷病毒(HIV-1/2)和丙型肝炎病毒(HCV)抗原包被于同一载体,同时检测这两种病毒的抗体,取得了与单测法基本一致的效果.HIV-1/2抗原和HCV抗原为加拿大Yes生物技术研究有限公司产品;HIV酶联免疫检测试剂盒批号960515,HCV酶联免疫诊断试剂盒批号960723,均为厦门新创科技有限公司产品.HIV和HCV抗体阴、阳性国家参照品由卫生部药品生物制品检定所制备,批号分别为9601、9604.1 120份血清样品取自山东医科大学附属医院、济南市传染病医院和济南市中心血站.加拿大Yes生物技术有限公司提供HIV抗体阳性血清5份.
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HCV单片段抗原EIA与重组免疫印迹分析对丙型肝炎病毒抗体检测比较的研究
利用基因重组技术分别克隆表达了丙型肝炎病毒(HCV)蛋白相对应的抗原(HCV-C、NS3、NS4、NS5),组建了单片段抗原EIA检测试剂.与进口重组免疫印迹分析试剂(Orhto HCV RIBA3.0)分别检测了国家第3代抗-HCV参比血清盘和临床血清样品,并对检测结果进行了初步比较.
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实验室感染SARS病例的血清学验证
本实验室作为安徽省选定的平行实验室于2004年4月20日接受了安徽省疾病预防控制中心送检的2份血清样品.同日我们对这2份样品进行了抗SARS-CoV的抗体检测,简要报告如下.
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抗-HIV快速检测试剂质量考查
目前国内检测艾滋病病毒(HIV)抗体(抗-HIV)常用的试剂有酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂和快速法(RT)试剂.RT试剂使用的大优点是操作简便,可单份检测,报告结果快(可在滴加血清样品后3～30分钟观察到结果).2003年8～12月,本所受中国疾病预防控制中心(CDC)艾滋病(AIDS)参比实验室委托,对国内销售的Abbott公司的快速试剂进行质量考查,现将结果报告如下.
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补阳还五汤进入兔血清中化学成分的研究
为研究补阳还五汤进入兔血清中的化学成分.作者按临床常用量的10倍剂量,连续给药3 d,后1次给药后2 h从颈总动脉插管取血,血液离心得血清样品.甲醇超声提取兔血清冷干粉样品,利用RP-18柱色谱法分离含药血清的甲醇提取液;利用HPLC-DAD法分析给药血清样品分离流份与空白血清样品化学成分的HPLC图,确定含药血清特有的色谱峰;利用HPLC/MS,UV等方法鉴定给药血清特有色谱峰的化学结构.结果表明,确定含药血清特有色谱峰32个,已鉴定了其中3个色谱峰的化学结构.
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营口地区麻疹局部暴发病例血清学分析
2005年3月份,营口地区相继发生麻疹暴发病例,仅到5月份就采集和送检184份临床血清样品.我中心麻疹实验室应用ELISA法对血清样品进行麻疹IgM抗体检测,同时进行风疹IgM抗体检测的鉴别实验.结果分析如下.
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ELISA法对乙型肝炎病毒感染五项血清学指标的检测结果与分析
目前,病毒性肝炎发病率国内外均有增长趋势,乙型肝炎发病率尤其引起人们的关注.随着检测手段的不断更新,ELISA(酶联免疫吸附试验)已大大提高了乙型肝炎病毒(HBV)的阳性检出率.为了探讨HBsAg与其它指标的关系,我们检测分析了412例五项血清学指标中分别不同呈阳性者的血清样品,结果如下.
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ECL和RIA测定血清FT3,FT4方法学质控及临床应用价值比较
放射免疫分析技术(RIA)自1959年美国的Berson和Yalow开创以来,以其灵敏度高、特异性强及标本用量少等优点,为临床诊断和医学生物学研究提供了很多有利条件.近年来,随着免疫学分析技术的迅速发展,特别是为了满足临床及早诊断的需求,各种简便快速的检测法如酶免疫分析、化学发光免疫分析、时间分辨荧光免疫分析等应运而生,并显示了其良好的应用前景.FT3、FT4由于不受体内TBG浓度变化的影响,是判断甲状腺功能状态的重要指标[1].电化学发光免疫分析(ECL)和放射免疫分析(RIA)均为体外超微量分析法,一种新方法运用于临床前,对其进行方法学质量控制及临床应用效果比较是非常必要的.本文同时用ECL和RIA两种检测法对51例正常人和194例患者血清样品FT3、FT4含量进行了测定,并对两种方法的方法学及临床诊断价值进行了比较和评价.
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癫患儿血清中丙戊酸的稳定性
丙戊酸钠(sodium valproate, SVPA)为临床常用广谱抗癫药物,因其丙戊酸(valproate acid, VPA)治疗血药浓度范围窄(50～100 μg/ml),需进行常规的治疗血药浓度监测(TDM)[1～3].我院自1995年至今共有500多人次的VPA血药浓度监测,均为当天取样当天测定.在常规TDM中,患者的血清样品未能即时测定而需储存.VPA血清样品要求放在低温冰箱-20 ℃条件下,可存放2 wk保持稳定[3,4].但由于低温冰箱价格贵,且样品解冻至室温所需时间长.本实验探讨癫患儿单用SVPA治疗时,其血清样品在冷处(2～10 ℃)密闭储存7 d的稳定性.
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血清与肝素抗凝血浆电解质、血糖测定结果比较
电解质与血糖(Glu)的测定常采用血清样品,分离血清至少需20～30分钟,若采用肝素抗凝血浆,可立即离心测定,快速报告结果.作者对肝素抗凝血浆与电解质、血糖测定结果作比较,并提出处理方法.
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汕头地区几种人群血清弓形虫抗体检测结果分析
弓形虫(Toxoplasma gondii)属机会致病原虫[1]，但人的感染并非罕见，尤其是免疫功能低下或免疫缺陷者易引起感染、发病甚至造成严重的后果，因此越来越引起国内外医学界的重视。汕头地区自90年代开始采用间接血凝试验对儿童、孕妇及肿瘤患者等进行血清弓形虫抗体的调查研究[2～4]我们于1993～1995年对与弓形虫关系密切的重点人群如流产、恶性肿瘤术后化疗或放疗病人、眼部疾患和精神分裂症患者等血清共1077份用间接血凝试验和酶联免疫吸附试验两种方法对每一份血清样品进行弓形虫抗体的互补检测，以期提高诊断的准确性，并进一步阐明受检人群与弓形虫感染之间的关系，结果报告于下。
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甲氨蝶呤血清样品的稳定性观察
大剂量甲氨蝶呤结合四氢叶酸钙解救目前已成为治疗儿童急性淋巴细胞白血病重要方案之一.应用该药时,常发生严重的毒副作用,以胃肠道反应多见,其余依次为发热、骨髓抑制、肝功能损害等[1].
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血清双向电泳研究中的失误分析及解决
双向凝胶电泳是蛋白质组学的一种基本技术,它以固相pH梯度等电聚焦进行第一向电泳,再用SDS-PAGE(sodiumdodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis)进行第二向电泳[1-2].由于其稳定性高、重复性好等特点,故它在血清样品研究中有独特的优点.但该方法操作步骤多,包括样品的处理、等电聚焦、胶条的平衡及转移、SDS-PAGE电泳及凝胶的染色等,同时每个步骤的操作要求较高.
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血清葡萄糖测定时间对结果影响的探讨
随着自动化生化分析仪的普及,有的实验室为求方便,采用血清样品一次完成,包括血清葡萄糖测定在内的成套生化检查.由于成批测定时,标本多,标本采取时间和测定时间具有一定距离,以致造成葡萄糖体外消耗,引起测定结果偏低.现就这一问题作一探讨.
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三级HIV病毒抗体检测实验室检测结果分析
沈阳地区HIV病毒抗体检测筛查中心实验室承担地区各医疗机构HIV病毒抗体筛查实验室筛查阳性血清("初筛")样品的复判和上送省疾控中心HIV确认实验室进行确认("终判").为了解各级实验室的检测结果,并对其进行客观的分析判断,于2003年和2004年两年对本市各HIV抗体筛查实验室所送156份初筛检测阳性血清样品,用抗HIV双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)和明胶颗粒凝集试验方法(PA)进行检测("复判"),并将53份复判阳性样品上送省CDC进行确认试验,对三级实验室终检测结果进行分析,报告如下:
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狂犬病毒抗体检测方法的探讨
目前狂犬病毒抗体检测方法有荧光法和ELISA法.本文作者按照"狂犬抗体目测试剂盒使用说明书.用ELISA法进行检验,多次发现用洁净自来水冲洗板孔,其检验结果不稳定,波动较大,会出现假阴性.本文使用离子交换蒸馏水冲洗法,获得稳定结果.此外,按本文拟定的经验公式来进行样品稀释液、洗液的配制,具有可操作性,简单易行,解决了条板96孔分次检测而容易造成的稀释液,洗液和包被孔的浪费问题.直接取待测血清样品于盛有按本文方法配制的稀释液的包被孔中的方法(本文简称DDM法),保证了检测结果的准确性,同时也减少了器具的使用,还减少了血清样品对实验室环境的污染.经实验,结果稳定、效果良好,操作简便.
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生物化学实验教学用血清标本替代物的制备
糖、脂肪、蛋白质(酶)三大物质代谢的规律是生物化学理论和实践教学的重点.在某些病变时,葡萄糖、甘油三酯、丙氨酸氨基转移酶等各种物质的含量变化常常能在血清中反映出来,医学生必须熟练掌握这些项目的生化检测方法.而在这些实验教学中必须采集大量的血清标本供学生检测使用.以往我校实验教学所用血清标本主要是到医院收集临床生化检验残剩血清样品.但随着科学技术的不断进步,各医院生化检验普遍采用半自动或全自动生化分析仪,取血量甚少,给生物化学实验教学所需血清标本的收集带来了困难,且病人阳性血清存在易传染等问题[1].为此,我们尝试使用一种外观、性状与人血清标本相似的血清标本替代物用于生物化学实验教学,取得较为满意的教学效果,现报告如下.
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抗凝剂的选择对血葡萄糖测定的影响
糖尿病是一种复杂的代谢性疾病,严重危害人们的健康,并呈逐年上升趋势,因此血液中葡萄糖的准确测定至关重要.目前,许多基层医院为求方便,采用血清样品一次完成包括葡萄糖在内的全套生化检测,而《全国临床检验操作规程》指明采用草酸钾-氟化钠作抗凝剂测定血浆葡萄糖含量,为此将探讨不同温度条件下血清和血浆葡萄糖测定是否一致性.
