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阴茎梅毒-硬性下疳2例
例1男性,24岁.阴茎皮肤结节1月余.1个月前发现阴茎皮肤长出-结节,起初发红,后逐渐增大.查体:阴茎背侧皮肤有一结节,大小为0.6cm×0.3cm,微隆起,边界清楚,质地较硬.患者有不洁性交史3年,梅毒血清学反应(+).于局麻下行结节切除术.
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结核分枝杆菌蛋白Rv1813c原核表达、纯化及免疫活性研究
目的 克隆、表达、纯化结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白Rv1813c,分析其免疫活性. 方法 应用生物信息学方法分析Rv1813c蛋白序列,根据H37Rv基因组序列合成引物,PCR扩增Rv1813c基因,克隆至pGEM-T载体;挑取阳性克隆测序,将正确编码基因克隆到pET30a载体上,在大肠埃希菌BL21菌株中以IPTG诱导表达重组蛋白.以金属螯合层析分离纯化重组蛋白,采用ELISA法分析其免疫反应性. 结果 Rv1813c蛋白第34位氨基酸残基之前含有跨膜区及信号肽部分,可能是一个胞外蛋白.对重组质粒pET30a-Rv1813c测序,与设计的序列相同.重组蛋白在大肠埃希菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式表达,IPTG诱导3h-4h重组蛋白在大肠埃希菌中的表达量较高,表达量约占细菌总蛋白的40%以上.纯化的重组Rv1813c蛋白纯度>95%.ELISA分析重组Rv1813c蛋白与结核患者血清有较强的反应性,A450值为0.50±0.34,显著高于健康组A450值0.23±0.18及非结核呼吸疾病组A450值0.30±0.27(P<0.05). 结论 成功构建的结核分枝杆菌重组质粒能高效表达Rv1813c蛋白,该蛋白具有良好的免疫反应性,为结核病的免疫机制研究奠定了基础.
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不同血清稀释度对动物莱姆病酶联免疫吸附试验检测结果分析
在当前尚无动物莱姆病诊断试剂和操作技术规程情况下,在引用人莱姆病诊断试剂及方法时,考虑人和动物抗体活性、血清学反应差异等因素,不能完全按人莱姆病检测标准.为选择动物佳血清稀释度,故进行了本项试验.1 材料和方法被检血清(牛、羊)共1 083份,分别采集于陈巴虎旗、鄂温克族自治旗、海拉尔市及我市所属各镇;莱姆病酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂盒、莱姆病抗原包被载玻片和兔抗羊、兔抗马荧光抗体,均由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所提供;每份血清样品均以100、200、400倍稀释后分别进行ELISA测试.ELISA、间接免疫荧光法(IFAT)按中国疾病预防控制中心传染病预防控制所暂定的操作规程实施.
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美国西尼罗病毒感染的实验室诊断进展
西尼罗病毒(West Nile virus)病是一种烈性人畜共患疾病.该病病原与日本脑炎病毒(Japanese B encephalitis virus )、摩莱河谷脑炎病毒(Murray valley encephalitis virus)、圣路易斯脑炎病毒(St. Louis encephalitis virus)同属黄病毒(Flavivirus)属的日本脑炎病毒血清群,它们在血清学反应上有交叉.近年来西尼罗病毒感染在欧洲、中东、西亚和俄罗斯等地区和国家频频发生.令人瞩目的是1999年在美国纽约首次发生,尔后几乎扩散至全美各州,成为近年来影响美国大的传染病,截止2003年10月22日全美已有7386人感染发病,有155人死亡[1].本文简介美国西尼罗病毒感染实验室诊断的进展.
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HIV分型的分子流行病学和临床意义
HIV在病毒分类中属逆转录病毒科慢病毒属中的人类免疫缺陷病毒组.由于以下4个方面的原因其基因有很高的变异特征,①高错误率的逆转录酶,其复制时,不能及时切除错误引入的核苷酸,约每个复制循环中就会发生一个错误使病毒复制时发生随机变异;②病毒快速的复制,估计每天一个HIV感染者要产生并清除100亿个病毒颗粒;③宿主的免疫选择作用,在宿主免疫压力的作用下,使能激发宿主细胞或体液免疫的基因组的变异高于其他部位,如gp120 V3环高变区;④不同病毒株DNA之间的基因重组.迄今为止,全球流行的HIV根据血清学反应和病毒核酸序列测定可分为二型,HIV-1型和HIV-2型.
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先天性梅毒赫氏反应1例
患儿 男性,生后2 d,住院号为79379,胎龄为37+2周,出生体重为3 080 g,身长为48 cm,头围为34 cm.2007年11月21日17∶24顺产, 10 min Apgar评分为10分,羊水Ⅲ°,胎盘、脐带无异常.其母于2007年11月21日11∶20入院待产,梅毒血清学反应(RPR.TPPA)试验,11月21日的检查结果为1∶128;11∶27梅毒螺旋抗体(TPHA)检查结果超过1∶80(呈阳性);考虑妊娠期合并梅毒,仅于产前肌内注射普鲁卡因青霉素80万u 1次.
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205例HIV/AIDS患者流行病学调查及梅毒检测初析
为了解艾滋病病毒(HIV)感染者及艾滋病(AIDS)患者中混合感染梅毒的情况,近年来医院对HIV/AIDS患者进行流行病学调查和梅毒血清学反应(STS)检测,其结果如下.
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人感染猪链球菌病
1 病原学猪链球菌广泛存在于猪的呼吸道及腭扁桃体中,是一种革兰阳性球菌,根据血清学反应,分为20个血清群、35个血清型.该菌对外界抵抗力不强,56℃即可杀灭.
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利福平引起新月体肾炎急性肾功能衰竭1例
患者,男,60岁。因咳嗽、咳痰一年多,乏力,纳差,恶心,下肢浮肿伴少尿半月于1999年12月收入我院。患者一年前因咳嗽、咳痰、痰中带血诊断为“肺结核”而自行不正规间断服用利福平近一年,总剂量60 g。入院前半月患者就出现少尿和全身浮肿的症状。本次发病期间无发热、皮疹,患者无肝炎病史和毒物接触史。入院体格检查:体温36.6℃,脉搏115次.min-1,呼吸21次.min-1,血压20/12 kPa。重度贫血貌,全身浅表淋巴节未触及。患者双侧胸部不对称,右上胸廓塌陷,右上肺语音增强,叩诊呈浊音,闻及大小水泡音,左肺无明显变化。心界不大,律齐。腹平软,肝脾肋下未触及,移动性浊音阳性,双下肢凹性水肿明显。化验检查:血红蛋白55 g.L-1,血红细胞2×1012.L-1,血白细胞7.1×109.L-1,血小板20×109.L-1,血沉101 mm.h-1;尿蛋白(+++),24 h尿蛋白定量4.1 g.L-1,尿红细胞记数满视野,均一型占90%,尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)100 U。血清肌酐908 μmol.L-1,尿素33 mmol.L-1,尿酸597 μmol.L-1,Cystatin C 8 mg.L-1,血清总蛋白55 g.L-1,白蛋白23 g.L-1;抗核抗体阴性,澳抗及丙肝抗体阴性,抗中性粒细胞胞浆抗体阴性,补体C3 602 mg.L-1,免疫血清学反应显示利福平抗体阳性。痰涂片5次未见抗酸杆菌。胸部X线片显示右肺有广泛纤维化改变,胸膜粘连、增厚。肾B超显示双肾大小未见改变,回声明显增强。彩色多普勒超声显示,双肾血流量明显减少。入院后肾穿刺病理诊断结果:全片中9个肾小球有5个纤维细胞性新月体肾小球,占55%,间质明显增宽,间质中可见有单核细胞侵润,肾小管有嗜酸性细胞浸润,小血管无明显改变;免疫荧光发现lgM(+),C3(++)。临床诊断:①右上肺结核;②利福平相关性急进性肾炎综合征。患者入院后停用利福平,经血浆置换、血透治疗后病情好转,在未用激素和免疫抑制剂之前患者脱离透析。在其后的治疗中患者肾功能得到部分缓解。
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080树突状细胞为基础的疫苗治疗宫颈癌:一项15例患者个体化治疗的临床实验结果
人类乳头瘤病毒(HPV)16,18是宫颈癌中常见的基因型.HPV16,18的癌基因E6,E7的表达产物是宫颈癌肿瘤细胞的永恒表型.由于宫颈癌肿瘤细胞有强阳性病毒抗原表达,故认为宫颈癌适合进行免疫治疗.研究中15例Ⅳ期宫颈癌患者经PCR-ELASA分析,12例检测出HPV16,3例检测出HPV18.将自体单核细胞衍生而来的树突状细胞(DC)体外加载重组HPV16E7或HPV18E7癌蛋白制成疫苗,对患者按个体化方案进行至少1次免疫接种.治疗前后监测接种的安全性、毒副作用、患者的临床反应、血清学反应(包括血清SCC、CEA水平)及免疫反应(ELISA分析检测抗HPV16,18的E6,E7抗原的抗体水平变化及抗原特异性T分析Th1增殖反应和CTL反应).
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晚期梅毒患者治疗后血清学反应分析
目的:探讨晚期梅毒患者治疗后的血清学反应。方法选择2012年1月—2015年2月在我院治疗的梅毒患者为研究对象,123例为有症状的神经梅毒,9例患者为无症状神经梅毒,21例为隐性梅毒。分析患者治疗后血清及脑脊液 RPR 滴度变化,比较滴度升高患者与未升高患者一般资料的差异。结果所有患者在治疗1个月时复查 RPR 滴度,48例患者滴度升高,占31.4%;15例患者滴度升高4倍及以上,余升高2倍。48例滴度升高的患者,隐性梅毒患者4例,无症状神经梅毒1例升高,有症状神经梅毒43例,有症状神经梅毒治疗1个月后滴度升高比例高。123例有症状神经梅毒患者复查脑脊液 RPR,7例患者脑脊液 RPR 滴度升高,占5.7%。男性,年龄36岁~45岁的患者,治疗后 RPR 滴度升高的发生率更高(P<0.05或<0.01)。结论晚期梅毒患者经正规驱梅治疗后1个月,有部分患者 RPR 滴度反而上升,临床上应予以重视,必要时进行重复驱梅治疗,以提高远期疗效。
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064一种对乙型肝炎病毒快速基因分型的聚合酶链反应
根据基因组的差别,目前可以将全世界范围内的乙型肝炎病毒(HBV)分成A~F 6个基因型.鉴于HBV的基因型有典型的地域分布特点及不同基因型HBV可能在血清学反应、致病性、治疗反应等方面存在差异,进行HBV的基因分型对于弄清病毒传播和疾病发生具有重要意义.目前用于HBV基因分型的方法主要有种系发生分析和限制性片段长度多态性分析,但是这些方法存在不适合大规模基因分型工作和敏感性、特异性不足等方面的缺点.本文介绍了一种使用类型特异的引物进行聚合酶链反应(PCR)的简单、快速、特异的HBV基因分型方法.
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卡尔·兰斯坦纳和他的学术思想--纪念AB0血型发现100周年
虽然ABO血型的发现者、奥地利免疫学家卡尔·兰斯坦纳(Karl Landsteiner,1868~1943)已被人们以"血型之父"的誉称在历史上定位,但是他所开拓的研究领域和他的学术思想,远远超越血型的范畴[1,2].终其一生总共发表345篇学术论文,出版<血清学反应特异性>专著[3],获得1930年诺贝尔医学奖.
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189HIV感染者对隐孢子虫的血清学反应可作为流行病学研究的一个指标
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我校教工鼻咽癌筛查分析
EB病毒(EBV)是一种疱疹病毒,能诱发人鼻咽黏膜上皮细胞癌变,与鼻咽癌关系十分密切.研究证实,鼻咽癌患者血清中EB病毒壳抗体(VCA-IgA)阳性率可达90%以上,而且滴度也比较高[1],为此应用EBV血清学反应进行筛检,有利于鼻咽癌的早期发现.我校教工健康体检中,一直开展此筛检项目,现将2000年结果分析如下.
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179例梅毒临床分期与非特异性抗体比较观察
在梅毒的诊断中血清学反应具有特殊的重要性[1].通过179例梅毒确诊病例与非特异性血清抗体滴度之间进行比较与分析,现报道如下.材料与方法1 病例来源本组为1996~1998年本站门诊部病例.其中男84例,女95例. 年龄在18~65岁之间,21~30岁占总数的59.78%(107/179).2 诊断标准根据国家技术监督局、卫生部发布的<梅毒诊断标准及处理原则>及卫生部编印的<性病防治手册>为依据.
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微波ELISA诊断日本血吸虫病实验条件的初步研究
微波辐射能使溶液中的极性分子(如抗原、抗体等)发生高频振荡而快速运动,从而加速抗原抗体的结合反应,大大缩短其反应时间,并减少非特异性结合[1].目前,微波已经广泛应用于免疫组化、血清学反应和病理技术中.笔者将微波就用于诊断日本血吸虫病的间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)中,发现明显缩短了ELISA反应时间,并获得良好效果(另文).本文就微波ELISA诊断血吸虫病的实验条件进步初步研究.现报告如下.
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输血相容性检测室内质控品自制及应用探讨
目的 利用输血科现有血液样本资源自制室内质控品,监测输血相容性检测结果的准确度,完善输血相容性检测的室内质量控制体系.方法 选取A、B、O、AB型血液样本各10份,同型混合后离心,分离血浆备用;压积红细胞用生理盐水洗涤后与CPDA保养液等量混合备用;选取ABO同型Rh (D)阴性血液样本1~2份,经确认后,与CPDA保养液等量混合备用;IgG抗-D血清采用商品化试剂.各型血液的红细胞和血浆按照标准操作规程进行血清学验证试验,符合血清学反应格局,且质控红细胞与标准血清凝集强度达4+、质控血浆与相应红细胞凝集强度为2+,方作为室内质控品使用.结果 通过本实验室的长期实践和完善,证实该法自制可满足输血相容性检测对室内质控品的要求,所制备质控品能满足4~6周使用.结论 输血相容性检测实验室可充分利用血液样本的资源优势,通过科学严谨的设计方法制备合格的室内质控品,且制备原料来源稳定、经济可行,适宜各实验室选择开展.
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病原微生物检测技术进展
病原微生物种类繁多,变异迅速,快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着.目前,应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应等,该文对这些检测技术进展做一综述.
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细粒棘球蚴Eg95重组蛋白表达及其血清学反应的研究
目的 诱导表达和纯化细粒棘球蚴Eg95抗原重组蛋白,对其与CE病人血清学反应情况进行研究.方法 IPTG诱导pET28a-Eg95原核表达质粒,表达和纯化Eg95重组蛋白,SDS-PAGE 电泳对其进行初步鉴定,Western blot法检测其与中间宿主CE病人血清学反应情况.结果 pET28a-Eg95重组蛋白得到成功表达,SDS-PAGE 电泳显示相对分子量约为15kDa.Western blot 结果 表明,pET28a-Eg95重组蛋白能被CE病人血清识别,11例CE病人血清中8例呈阳性反应.结论 细粒棘球蚴Eg95抗原存在于中间宿主CE病人体内,Eg95蛋白作为保护性抗原可能成为CE病人术后辅助性治疗的手段之一.