首页 > 文献资料
-
层粘连蛋白受体在滋养层细胞肿瘤和正常绒毛血管内皮的定位意义
在滋养层细胞转化为滋养层肿瘤和良性肿瘤转化为恶性肿瘤的过程中,新生血管内皮细胞的变化是研究肿瘤发生的重要方面.出于这些考虑,我们对正常人胚胎不同发育时期、不明原因流产、增殖型和侵蚀型葡萄胎内皮细胞,用免疫组织化学方法观察层粘连蛋白受体(LNR)在血管内皮细胞的定位,比较不同定位与滋养上皮增殖、生长、分化、凋亡、迁移和浸润的关系.
-
胃腺癌组织层粘连蛋白受体表达的意义
目的:探讨LN-R在判断胃腺癌浸润转移及预后中的作用.方法:应用免疫组织化学S-P法检测76例胃腺癌组织和10例正常胃组织中LN-R的表达水平,比较LN-R的不同表达率与生存率的关系.结果:LN-R在胃腺癌组织中阳性表达率为51.3%,较正常组织(10.0%)显著增高(P＜0.05),与分化程度、Borrmann分型、浸润深度、肿块大小、淋巴结转移程度比较关系显著(χ2=10.606、9.979、6.838、7.611、12.509,P＜0.05),LN-R阳性表达者的生存时间较阴性者短(χ2=9.980,P＜0.05).结论:LN-R是判断胃腺癌浸润转移及预后的重要指标.
-
37LRP基因表达载体构建及蛋白表达的研究
目的 研究克隆宫颈癌HeLa细胞层粘连蛋白受体前体(37-kDa laminin receptor precursor,37LRP)并构建表达载体及成功表达该受体蛋白.方法 采用RT-PCR从宫颈癌HeLa细胞总RNA中扩增人37LRP受体的cDNA序列,克隆到pGEM-T Easy载体上.经过序列测定后插入到表达载体pET22b(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.结果 构建的表达载体经限制性内切酶分析和DNA测序并与GenBank比对,证明所构建的重组质粒含有37 LRP插入片段,经诱导后表达37 LRP蛋白.结论 成功构建了重组人37LRP表达载体,并获取重组人37 LRP蛋白,为临床肿瘤的研究奠定了基础.
-
层粘连蛋白及其受体在卵巢癌组织中的表达及其临床意义
肿瘤转移扩散是卵巢癌患者死亡常见的原因.层粘连蛋白(LN)作为细胞外基质和基底膜的重要组织成分,与肿瘤细胞表面的层粘连蛋白受体(LNR)结合,在肿瘤浸润、转移中发挥重要作用[1].本研究采用免疫组织化学(组化)EnVision二步法检测了正常卵巢、良性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中LN及其相对分子质量为67 000的受体(67LNR)的表达,探讨其与卵巢癌病理分化程度、临床分期、腹水形成和转移的关系.
-
层粘连蛋白受体Ⅰ与hPeriod1相互作用的研究
目的 寻找与节律蛋白hPeriod1(hPer1)相互作用的蛋白,并对筛选出的层粘连蛋白受体Ⅰ(Lamr1)在节律系统中的功能作初步研究. 方法 分别构建pGAD rec/脑cDNA文库和pGBKT7/hPer1bHLH-PAS重组诱饵蛋白质粒,酵母双杂交筛选下丘脑里与hPer1相互作用的蛋白.利用RT-PCR技术检测新蛋白在脑、肺、心、肝、肾组织中的表达及在SH-SY5Y细胞中的节律性质.通过RNA干扰技术研究新蛋白与hPer1的关系. 结果 通过酵母双杂交筛选,证明Lamr1能与hPer1蛋白发生相互作用.该蛋白在脑、肺、心、肝、肾组织广泛表达,灰度比较显示经马血清诱导后的SH-SY5Y细胞的hPer1表达呈现近日节律,而Lamr1表达无节律变化.RNA干扰显示hPer1表达下调不影响Lamr1的表达. 结论 Lamr1能与hPer1蛋白发生相互作用,但其表达在RNA水平无节律变化.Lamr1参与细胞的黏附、转移和侵袭.其前体蛋白作为核蛋白参与细胞蛋白的合成.Lamr1可能参与hPer1相关的生物节律系统的信号传出.
-
人胎盘绒毛层粘连蛋白及其受体的定位与定量研究
目的:研究层粘连蛋白(laminin, LN)及其受体(laminin receptor,LN-R)在早、中、晚期人胎盘绒毛的定位及其相对含量变化.方法:取早期、中期和晚期胎盘绒毛,常规制作石蜡组织切片,采用免疫组织化学ABC法和图像分析技术进行LN及LN-R定位和定量测定.结果:LN阳性反应主要位于绒毛上皮基膜和绒毛血管内皮基膜;LN-R的阳性反应位于绒毛上皮合体滋养层表面及合体滋养层和细胞滋养层的细胞质内,细胞核呈阴性.LN及LN-R的含量以早期胎盘绒毛中高,中期及晚期含量明显降低.结论:人胎盘绒毛含有LN及LN-R,随着胎盘周龄的增加,二者的含量均降低.
-
PTEN基因编码蛋白及上皮钙粘蛋白和层粘连蛋白受体与胃癌浸润转移的关系
胃癌的浸润和转移是影响胃癌患者长期生存的主要原因.肿瘤浸润转移是一个多步骤、连续的主动过程,受多种癌基因和抑癌基因的调控[1].为此,作者对参与浸润转移的重要细胞黏附因子-上皮钙黏蛋白(E-CD)、层粘连蛋白受体(67KD-LR) 及抑癌基因PTEN编码蛋白在胃癌组织中的表达进行观察和比较,分析并探讨其在胃癌浸润转移中的作用机制及与胃癌病理生物学行为和预后的关系.
-
层粘连蛋白及其受体与卵巢肿瘤关系的研究
层粘连蛋白(LN)是细胞外基质—基底膜中的主要非胶原性糖蛋白，通过与肿瘤细胞表面的LN受体结合，在肿瘤浸润转移的多个步骤中发挥重要作用。就LN及其受体在卵巢肿瘤方面的研究进展进行综述。
-
恶性纤维组织细胞瘤LN-R与Cath-D的表达及临床意义
目的:研究层粘连蛋白受体(laminin receptor,LN-R)和组织蛋白酶D(Cathepsin D,Cath-D)在恶性纤维组织细胞瘤(malignant fibrous histiocytoma,MFH)组织中的表达情况,探讨它们之间的关系及临床意义.方法:65例MFH组织标本来自1999年4月至2001年12月哈尔滨医科大学附属肿瘤医院骨科手术患者,其中男40例,女25例;年龄23～78岁(平均年龄54岁).应用免疫组化方法检测65例MFH组织与10例正常纤维组织中LN-R和Cath-D的蛋白表达情况,分析LN-R与Cath-D在MFH中的表达与MFH临床病理学特征之间的关系,以及二者表达的相关性.结果:光学显微镜下LN-R阳性反应物着色部位主要定位于细胞膜和细胞浆,Cath-D阳性反应物主要定位于细胞浆;65例MFH组织中LN-R和Cath-D蛋白表达阳性率分别为66.2%和75.4%;LN-R和Cath-D在Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率低于Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率,二者统计学差异有显著性(P＜0.05);LN-R和Cath-D的阳性表达率在高分化明显低于中分化和低分化,表明随着肿瘤病理分化程度的降低,LN-R和Cath-D的阳性表达率也有升高的趋势;10例正常纤维组织中两蛋白均不表达;LN-R和Cath-D的表达与MFH患者的性别、年龄和组织学类型无关;所有病例经过半年至7年随访,平均随访时间为5年,LN-R与Cath-D在术后生存期小于5年的患者中的阳性表达率明显高于生存期大于5年的患者,二者统计学差异有显著性(P＜0.005);LN-R和Cath-D表达呈显著正相关(P＜0.01).结论:LN-R和Cath-D在MFH发生、发展中起重要作用,是判断MFH侵袭力和恶性进展、转移和预后的重要指标.
-
肿瘤侵袭、转移的亚临床研究
肿瘤是机体在各种致癌因素作用下,局部组织的细胞在基因水平上失去了对其生长的正常调控,导致克隆性异常增生而形成的新生物.这种新生物常形成局部肿块,因而得名.肿瘤(neoplasms)是一种常见病、多发病,其中恶性肿瘤是目前危害人类健康严重的一类疾病.侵袭和转移是恶性肿瘤特有的两种性质,也是影响预后的重要因素,因此探索肿瘤的侵袭转移机制,寻找有价值的可以预测转移及指导临床治疗的生物学指标,就成了肿瘤研究的热点.
-
层粘连蛋白受体基因表达谱分析
目的 探讨层粘连蛋白受体(67LR1)基因相关的一组基因表达变化,为反式二羟环氧苯并芘致癌机制的研究提供依据.方法 构建67LR1转基因表达载体,转染人支气管上皮细胞(16HBE),获得转基因67LR1的瞬时表达的细胞株.用半定量RT-PCR方法分析转基因表达产物,应用含8 064个基因点的微芯公司基因表达谱芯片CSCGE-80与双荧光标记样品与芯片杂交和扫描、图像数据分析等一系列处理进行表达谱分析.结果 成功构建出瞬时表达67LR1的细胞株.基因表达谱分析,2组相比发生了显著性表达变化的基因有295个,其中表现为上调的基因有145个,下调表达的基因有150个.在发生了显著性表达改变的基因中,比较有明显功能分类特征的包括与信号转导相关的基因,与肿瘤相关的基因,与免疫反应相关的基因以及与蛋白质合成系统相关的基因等.结论 67LR1基因功能涉及到信号转导、肿瘤相关基因等方面,相关基因的表达变化具有复杂性.
-
层粘连蛋白受体基因表达与子宫内膜癌的关系
目的探讨67ku层粘连蛋白受体(67LR)基因表达与子宫内膜癌的关系.方法应用免疫组化SABC法检测1990～2001年收治的44例子宫内膜癌、15例子宫内膜增殖症、47例正常子宫内膜组织中67LR的表达;采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法定量检测2000～2001年收治的24例子宫内膜癌、16例子宫内膜增殖症、29例正常子宫内膜新鲜组织67LR mRNA水平.结果67LR在子宫内膜癌、子宫内膜增殖症的表达较正常子宫内膜均明显增高(P＜0.001),但前两组的表达差异无显著性(P＞0.05).高、中分化子宫内膜腺癌67LR表达较低分化者为高(P＜0.05);但高、中、低分化组病例67LRmRNA水平差异无显著性(P＞0.05).67LRmRNA水平与免疫组化蛋白表达无明显相关(P＞0.05).结论67LR蛋白过度表达可能与子宫内膜癌的发生、发展有关.67LR mRNA水平与蛋白表达水平无相关.
关键词： 层粘连蛋白受体 子宫内膜癌 荧光定量逆转录聚合酶链反应 免疫组织化学 -
层粘连蛋白及其受体在卵巢上皮性肿瘤中表达的研究
目的:研究卵巢上皮性肿瘤组织中层粘连蛋白及其受体的表达及临床意义,初步探讨肿瘤浸润和转移的机制.方法:采用免疫组织化学方法检测47例恶性、12例良性和12例交界性卵巢上皮性肿瘤中层粘连蛋白及其受体的表达情况,并分析与临床的关系.结果:层粘连蛋白分布于瘤巢的基底膜,在癌组织中基底膜存在不同程度的缺损,表现为层粘连蛋白表达不连续或缺失.其受体分布于细胞膜上,在癌组织中表达于大部分或全部的细胞膜;二者的表达在良性与恶性肿瘤间有显著性差异,在交界性肿瘤中表达不规律.在恶性肿瘤中二者的表达与组织学分级、临床分期、淋巴结转移有关.组织学分级高,临床出现浸润及有淋巴结转移的肿瘤,比组织学分级低,临床无浸润无淋巴结转移的肿瘤,层粘连蛋白表达明显减少甚至缺失,层粘连蛋白受体的表达明显增多.二者均与组织学分型无关系.结论:层粘连蛋白及其受体作为细胞粘附相关因子和受体与恶性肿瘤的浸润和转移有关,癌巢周围层粘连蛋白的缺失可作为肿瘤浸润的指标,其受体增多标志肿瘤细胞具有浸润和转移的潜能.
-
层粘连蛋白特异性受体--整合素α6亚单位胞外区单克隆抗体的制备及鉴定
目的:制备针对整合素α6胞外区的单克隆抗体并鉴定其生物学特异性.方法:利用整合素α6 cDNA构建可表达整合素α6胞外区的原核表达载体,在大肠杆菌中表达GST--整合素α6胞外区融合蛋白.融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫Balb/C小鼠,取其脾细胞,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养.单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛后,分析其亚类及进行免疫细胞化学鉴定.结果:经ELISA双筛,获得了一株能稳定分泌针对整合素α6胞外区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类为IgG1.免疫细胞化学显示此单抗在人肝癌细胞系BEL-7402呈强阳性反应.结论:通过原核表达产物制备并纯化了针对整合素α6胞外区的单克隆抗体,对分离纯化α6亚单位、研究其生物学作用及鉴定正常和疾病状态下是否表达整合素α6及其水平具有重要意义.
-
垂体腺瘤中基质金属蛋白酶-2、层粘连蛋白受体基因蛋白的表达与侵袭性的关系
目的 探讨基质属蛋白酶-2(MMP-2)、层粘连蛋白受体(LN-R)的表达与侵袭性垂体腺瘤的关系.方法 用免疫组化的方法对60例垂体瘤患者组织标本中这三个指标的表达进行检测.免疫组化结果用半定量的方法进行分析.结果 60例垂体瘤患者中,32例女性,28例男性.其中,30例为侵袭性垂体腺瘤,30例为非侵袭性垂体腺瘤.免疫组化显示侵袭性垂体腺瘤的MMP-2、LN-R的表达明显高于非侵袭性垂体腺瘤(P＜0.01).结论 MMP-2、LN-R的高表达与垂体腺瘤的侵袭性密切相关.MMP-2、LN-R可以作为判定垂体腺瘤侵袭性的有效指标.
-
LN-R mRNA及其蛋白在恶性纤维组织细胞瘤中的表达
目的 探讨层粘连蛋白受体(laminin receptor,LN-R)mRNA及其蛋白在恶性纤维组织细胞瘤(malignant fibrous histiocytoma,MFH)组织中的表达及意义.方法 采用原位杂交和免疫组化法检测LN-R mRNA及其蛋白在65例MFH组织的表达,并与10正常纤维组织对照.结果 LN-RmRNA及其蛋白阳性表达率分别为60%和66.2%.LN-RmRNA及其蛋白阳性表达率与MFH的分级、临床分期及预后密切相关(P＜0.05);与性别、年龄、组织学类型无关(P＞0.05).LN-R mRNA及其蛋白阳性表达具有明显的相关性(P＜0.01).结论 LN-R与MFH的发生有关,能较好反映MFH的恶性生物学行为,作为判断其预后的参考指标.
-
层粘连蛋白受体与肿瘤的侵袭和转移
层粘连蛋白(laminin,LN)是细胞外基质(extra-cellular matrix,ECM)的重要组成成分,它与肿瘤细胞表达的层粘连蛋白受体(laminin receptor,LN-R)结合产生多种生物学行为,LN-R与大多数肿瘤的转移和预后具有密切的关系,因而受到越来越多的关注.
-
层粘连蛋白受体、尿激酶型纤溶酶原激活物在乳腺浸润性导管癌中的表达及其相关性
目的:探讨乳腺浸润性导管癌组织中层粘连蛋白受体(LN-R)和尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)蛋白的表达及其相关性.方法:应用免疫组织化学法检测60例乳腺浸润性导管癌组织及30例癌旁组织中LN-R、uPA蛋白的表达情况.结果:乳腺浸润性导管癌组织中LN-R和uPA蛋白的阳性表达率分别为68.3%和61.7%,与癌旁组相比较差异有统计学意义(P<0.01);LN-R与uPA蛋白的表达显著正相关(r=0.348,P<0.01).结论:乳腺癌的发生、浸润和转移可能和LN-R和uPA蛋白表达上调密切相关,LN-R表达的上调可能通过激活细胞内某些重要的信号转导通路,影响u-PA的表达,促进细胞外基质的降解,从而促进乳腺癌细胞的侵袭和转移.
关键词： 乳腺癌 层粘连蛋白受体 尿激酶型纤溶酶原激活物 侵袭性 淋巴结转移 -
EGCG对舌鳞癌细胞CAL-27的EGFR、67LR及VEGF表达的影响
目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对舌鳞癌细胞CAL-27的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、相对分子质量为67 000的层粘连蛋白受体(67 000 dalton laminin receptor,67 LR)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor receptor,VEGF)表达的影响,从而揭示EGCG抑致舌鳞癌细胞增殖的可能机制.方法:不同浓度EGCG处理CAL-27细胞24h后,MTT法检测细胞增殖活性;Real Time PCR法和Western Blot法分别检测CAL-27细胞EGFR、67LR、VEGF的mRNA及蛋白表达情况；Western Blot 法检测磷酸化EGFR(p-EGFR)的蛋白表达水平.结果:EGCG浓度依赖性抑制CAL-27细胞的增殖,且抑制其EGFR、67LR、VEGF的mRNA和蛋白、p-EGFR的蛋白表达.结论:EGCG能影响EGFR 、67LR及VEGF的转录和翻译水平以及p-EGFR蛋白表达,这可能是EGCG抑制舌鳞癌细胞CAL-27增殖的重要机制.
-
67LR的结构和功能及其与表没食子儿茶素没食子酸酯的相互作用
相对分子质量为67 000的层粘连蛋白受体(67LR)是一种细胞外基质的非整合素型表面受体,在肿瘤细胞中表达明显高于正常细胞.它是由一种小分子多肽——相对分子质量为37 000的层粘连蛋白受体前体(37LRP)通过脂肪酸乙酰化转变而来.67LR广泛参与肿瘤细胞的生长、转移、侵袭和凋亡过程,不仅是层粘连蛋白的受体,还可作为其他多种病毒和朊蛋白的受体.67LR是表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)主要的膜表面受体,EGCG通过与67LR相互作用调控Toll样受体、MAPK和NF-κB等信号转导通路,对肿瘤的生长、转移抑制以及促凋亡有显著作用.文章综述了近年来关于67LR及其与EGCG相互作用机制的研究进展.
关键词： 67LR 层粘连蛋白受体 表没食子儿茶素没食子酸酯 信号通路
