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金丝桃清除活性氧作用研究
目的:对金丝桃不同部位提取物的清除活性氧活性进行了实验研究.方法:用化学发光法研究了金丝桃提取物对O2-·、H2O2的清除作用;用分光光度法研究了提取物对·OH的清除作用以及对H2O2引起红细胞损伤和由Fe2+-VitC引起线粒体膨胀的保护作用.结果:金丝桃提取物能有效地清除O2-/·、H2O2和·OH,对H2O2引起的红细胞损伤有一定的保护作用,同时能抑制由Fe2+-VitC引起的线粒体膨胀.结论:金丝桃提取物有良好的清除活性氧活性.
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化学发光免疫技术检测鳞状细胞癌抗原的性能验证
目的:验证和评价雅培i2000SR全自动化学发光仪定量检测鳞状细胞癌抗原(SCC Ag)的分析性能.方法:对雅培i2000定量检测SCC Ag的精密度、线性进行验证.用i2000和酶联免疫吸附技术(ELISA)方法检测相同标本SCC Ag,对检测结果进行比较分析.结果:精密度均符合雅培性能标准；SCC Ag检测呈一次线性(r=0.999,P＜0.05),线性范围为:0.24-61.9 ng/mL；两种方法检测相同标本,i2000的阳性率为60％,ELISA的阳性率为35％.以i2000为标准,ELISA的相对敏感度为54.2％、相对特异性为93.8％,两种方法的总符合率为70％.结论:雅培i2000检测SCC Ag的主要分析性能验证结果与厂商声明的基本一致,与旧方法ELISA的总符合率良好,符合质量目标要求,可应用于临床标本检测.
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化学发光在疾病检测中的应用
化学发光是指化学反应中弱键分解时释放的化学能产生了激发态的中间物,后者衰变成基态时就能发射出光.目前化学发光反应已成为临床疾病检测的核心技术之一.
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127例乙肝表面抗体ELISA检测与化学发光法的比较
目的 探讨浓度处于5～100mIU/ml的乙肝表面抗体(HBsAb)ELISA定性检测与化学发光法的符合情况.方法 采用10种国产主流HBsAb ELISA试剂对127例经用化学发光法检测已知HBsAb浓度的标本进行检测,分析ELISA检测OD值与抗体浓度的相关性,并以试剂盒临界值为准分别比较不同OD值段ELISA结果 与化学发光法结果 的符合率.结果 10种同产HBsAb ELISA试剂盒OD值与化学发光定值均呈正相关(P<0.01);ELISA法检测结果 与化学发光的阴阳符合率比较显示,5～10mIU/ml样本符合率较低,只有37.5%,在大于100mIU/ml时可达99.4%,在10～30mIU/ml,30～100mIU/ml分别为75.3%和90.7%;OD值存0～0.05,0.05～0.105、0.105～0.21、0.21～0.3、0.3～0.5、大于0.5分别为73.4%、65.3%、60.5%、72.0%、86.5%、92.2%.结果 显示阴阳结果 符合率在较高在大于0.5时高,在介于0.105～0.21的符合率低;处于试剂盒临界值±20%处的标本的符合率普遍偏低,低只有42%,高亦不超过80%.结论 虽然10种国产ELISA试剂之间的检测结果 没有统计学差异,但是对于浓度介于5～10mIU/ml标本符合率低.而且在接近试剂盒临界值时与化学发光结果 符合率则很低,但是随着OD值的增高符合率也逐渐升高.考虑到乙肝表面抗体的特殊临床意义,如何选取一个更为科学客观的结果 判断临界值值得进一步探讨.
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电化学发光与放射免疫检测甲胎蛋白的比较
本实验室多年来一直采用放射免疫法检测血清甲胎蛋白(A即).近年来,电化学发光免疫法以其敏感、快速、稳定等优点,在固相标记免疫测定技术方面居领先地位[1].
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CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测方法的建立
目的:建立CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法,进行方法学评价.方法:纯化卵巢癌患者腹水得到CA125抗原,制备生物素化CA125抗体,酶标板包被生物素化BSA,建立BA-ELISA反应系统.观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定性等指标.测定卵巢癌患者以及卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,与化学发光免疫检测结果对比.结果:BA-ELISA方法灵敏度为3.18 U/L,与CEA、PSA等交叉反应率低;高低浓度样品平均回收率分别为107.11%、99.96%,批内和批间变异分别为7.97%、8.04%,稳定性好.本研究与化学发光免疫检测检出结果差异无统计学意义,检测卵巢癌患者血清CA125水平,回归方程为y＝-6.830 + 1.014x,r＝0.993.检测卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,回归方程为y＝1.936 + 0.937x,r＝0.986.结论:BA-ELISA检测方法的建立在诊断卵巢癌等方面灵敏度高、特异性强,操作简便,无需昂贵仪器,适合广泛应用.
关键词： CA-125抗原 生物素-亲和素酶联免疫法 卵巢癌 化学发光 -
化学发光法与酶联免疫吸附测定法在乙肝两对半检测中的应用研究
目的:分析探讨化学发光法与酶联免疫吸附测定法在乙肝两对半检测中的应用价值.方法:对2014年7月至2017年9月在我院接收的460例乙肝患者作为研究对象,所有患者均采用化学发光法和酶连免疫吸附法检测乙肝表面抗原、表面抗体、e抗体、e抗原、核心抗体;对两种方法测的准确度、特异性和敏感性.结果:化学发光法对乙肝表面抗原、e抗原和核心抗体的检出率高于酶连免疫吸附法,具有统计学意义(P<0.05);化学发光法检测的低浓度为0.035IU/mI,而酶联免疫吸附试验发检测的低浓度为0.15IU/mI(P<0.05);化学发光法检查出67例低水平(0.06U/mI-3 IU/mI)乙肝表面抗原,而酶联免疫吸附法检查出41例(P<0.05);酶联免疫吸附法的批次内、批次间精密度分别为3.5％ ～5.5％、6％～10％,显著高于化学发光免疫法的<3.2％ 和<5.5％(P<0.05);结论:在乙肝两对半检测中化学发光法的灵敏度好、精确度高、特异性好,检出乙肝表面抗原低水平的结果较好,值得在临床上进行推广.
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氧基黄酮的体外免疫药理作用
目的:对新发现的一种黄芩类黄酮,3',5,6',7-四羟基-2' 一种新的黄芩类黄酮3',5,6',7-四羟基-2',8-二甲,8-二甲氧基黄酮(TDF)的免疫药理作用进行研究.方法:检测TDF对人多形核细胞(PMN)、单个核细胞(MNC)化学发光反应、化学趋向性和PHA诱导淋巴细胞增殖的影响.结果:TDF本身不能激活PMN和MNC的氧呼吸爆发,TDF对PMN和MNC无毒性作用;当TDF与PMN或MNC预先孵育后,明显的抑制fMLP或OZ激活PMN以及fMLP激活MNC的氧呼吸爆发,抑制的强度与孵育的剂量成正比关系;对PMN的抑制能力大于MNC.TDF本身对 PMN和MNC没有明显的化学趋化作用,但经与TDF预先与细胞孵育后的PMN或MNC对ZAS的化学趋向性明显增强,对fMLP的化学趋向性作用不明显;TDF浓度在(1.25×10-4～5×10 -4)mol/L时,显著地抑制PHA诱导的淋巴细胞增殖,抑制率达31%～100%.结论:TDF对人的免疫细胞有重要的作用.
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血液中长春新碱的快速检测
目的 建立一种快速、准确测定血液中长春新碱含量的测定方法.方法 在酸性条件下长春新碱与高锰酸钾产生化学发光的行为,对影响化学发光强度的因素进行了实验和探讨,罗丹明6G能显著增强体系的发光强度.结果 线性范围为1.21 × 10-7mol·L-1～1.21×10-5mol·L-1; RSD为1.28%(n=12);检测限为4.8×10-mol·L-1.该体系已经应用于血样中长春新碱含量的测定,结果令人满意.此外,在酸性高锰酸钾-长春新碱化学发光体系光谱学研究的基础上,探讨了该体系的化学发光反应机理.结论 该方法处理简单,操作简便,便于快速、准确的检测.
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鲁米诺化学发光体系在药物分析中的应用
化学发光分析是根据化学反应产生的光辐射(化学发光)确定物质含量的一种痕量分析方法。化学发光分析具有灵敏度高(检出限常达10~(-12)～10~(-18) mol)、线性范围宽(3～6个数量级)、分析速度快以及仪器设备相对简单、便宜等优点，使得这种方法已经成为现代痕量分析中一个十分活跃的研究和应用领域。由于化学发光分析的这些优点恰好满足药物分析对分析方法提出的要求，使得它在药物分析领域得到了较为广泛的应用。鲁米诺(5-氨基-邻苯二甲酰肼)是使用早、应用广泛……
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HBsAg灰区在Maglumi4000化学发光分析仪上的建立
目前检测乙肝的方法主要有ELISA、胶体金和化学发光，化学发光与前两种方法相比具有灵敏度高、样本不需要稀释、能定量等优点，对于位于窗口期和隐性感染的人群能够更好的检出，因而定量检测对于临床输血、流行病学研究、动态观察和治疗具有非常重要的意义。但是化学发光灵敏度的增高，检测下线的降低[1]，使一些弱阳性标本在定性的判读上出现一些问题，而弱阳性结果给临床的分析和解释工作带来了不便。确定实验室所使用化学发光仪器的灰区，并对灰区结果进行正确解读，成为必需。
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人体位改变对肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)影响的初步探讨
目的探讨不同体位对肿瘤标志物AFP、CEA的影响.方法 90名志愿者采取同体配对设计,分别抽坐、卧两种姿势同一部位的血液样本,在ACS:180PLUS全自动化学发光免疫分析仪上配对分析AFP和CEA两项指标.结果坐位和卧位检测出来的结果差异有非常显著意义(P＜0.001),坐位＞卧位,AFP升12.7%,CEA升高14.7%.体位改变与年龄无关,与性别有关系.结论体位改变可引起肿瘤标志物AFP、CEA两项指标的显著生理变异,致使正常边缘数值出现异常结果.提示在分析实验数据时不要忽视体位因素,以免引起误导.
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用化学发光免疫法检测患者血清中前列腺特异性抗体PSA的临床意义
PSA由前列腺上皮细胞分泌,前列腺细胞也会产生,分子量在30-34DK,是一种具有蛋白酶活性的单链糖蛋白,基因定位在19号染色体.因为只有前列腺组织能够合成这种蛋白,故有较高的器官特异性,大量存在于前列腺上皮组织和精液中.前列腺腺泡内容物(富含PSA)与淋巴系统之间存在由内皮层、基底细胞层和基底膜构成的屏障相隔.
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酶放大化学发光测定血清CA-125的临床应用
糖类抗原CA-125早应用于上皮性卵巢癌的血清肿瘤标记物[1].本文以酶放大化学发光是在化学发光的基本上,加入碱性磷酸酶,延长发光信号时间的自动化学发光免疫分析法,测定血清CA-125, 探讨其在肿瘤中的诊断价值.
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化学发光微粒子免疫分析法检测性激素6项的性能验证
目的 验证和评价ARCHITECT i2000SR分析仪应用化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)检测雌二醇(E2)、孕酮(Prog)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、泌乳素(PRL)和睾酮(Tes)的方法学性能.方法 参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)的相关文件,对性激素6项的精密度、正确度、线性范围、参考区间和检测低限进行验证,其结果与厂家声称的性能指标或公认的质量目标进行比较.结果 性激素6项的批内不精密度≤2.62%,总不精密度≤3.17%;正确度在±9.41%以内;线性范围内斜率(a)在1.00±0.05以内,相关系数(r2)>0.995;参考区间符合率≥90%;检测低限均小于等于厂家声称的指标,以上性能指标均符合厂家或质量目标的要求.结论 ARCHITECT i2000SR全自动化学发光免疫分析仪检测性激素6项的方法学性能满意,结果可靠,能满足临床需要.
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核酸检测技术在献血者血液筛查中的应用
目的：探讨核酸检测技术应用于献血者血液筛查的必要性和可行性。方法对2011年7月1日至2014年12月31日经ELISA检测均合格的献血者标本170316份，再采用核酸检测技术联合检测乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒核酸，对筛查呈反应性的部分标本再送卫计委临床检验中心进行确证。结果共筛查出160份核酸反应性标本，总反应性率为0．09％，其中罗氏核酸检测系统反应性率为0．10％，达安核酸检测系统反应性率为0．08％，两者差异无统计学意义（ P＞0．05）。在27份送检标本中，有14份被确证为HBV DNA阳性，无HCV RNA和 HIV RNA的检出，确证阳性率为51．85％。有2份送检标本，采用化学发光法检测 HBsAg ，结果呈反应性。结论 ELISA方法筛查献血者标本存在漏检现象，核酸检测方法可作为ELISA的有效补充，能提高临床用血的安全性；化学发光法检测灵敏度优于ELSA。
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不同发光检测系统总前列腺抗原测定结果的对比研究
目的 探讨不同检测系统测定总前列腺抗原(TPSA)结果 的可比性.方法 取百乐、德普不同水平的质控物以及38份不同浓度的患者新鲜血清,在4个不同的化学发光免疫检测系统上进行TPSA检测,并对结果 进行统计分析.结果 经配伍组设计资料的方差分析,不同厂家、不同水平的质控物和不同浓度的患者新鲜血清TPSA测定结果 在各检测系统的组间差异均有统计学意义(P<0.01);各检测系统TPSA测定结果 的信度系数a接近1;各检测系统间的相关系数均大于0.980.以雅培AXSYM系统作为目标检测系统,对其他检测系统作临床可接受性能评价,罗氏2010、贝克曼Access、德普Immulite-1000检测系统临床均可接受.结论 4个检测系统测定TPSA结果 的精密度符合临床要求,临床可接受性能评价具有可比性.
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69例少精、无精症患者血清性激素水平分析
目的探讨少精、无精症患者血清性激素检测的临床应用价值.方法采用化学发光免疫分析法(CLIA)测定21例无精症、48例少精症(其中13例为重度少精症)患者与25例精液正常健康体检男性的血清性激素水平.结果无精症组及重度少精症组卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)均显著高于正常精液组(P＜0.01),且FSH升高幅度均大于LH.少精症组FSH、LH虽较正常精液组高,但无显著性意义(P＞0.05).与正常精液组比较,无精症组、少精症组、重度少精症组垂体催乳素(PRL)均呈显著性升高(P＜0.01),睾酮(T)均呈显著性降低(P＜0.01),而雌二醇(E2)、孕酮(P)均无显著性变化(P＞0.05).无精症组FSH、LH、PRL升高者分别占66.7%、61.9%和28.6%,T降低者为42.9%;重度少精症组FSH、LH、PRL升高者分别为53.8%、38.5%和30.8%,T降低者为38.5%.FSH、LH、T均呈降低者,无精症组14.3%,重度少精症组7.7%;FSH、LH升高而T在正常参考范围者,无精症组38.1%,重度少精症组23.1%;FSH、LH升高而T降低者,无精症组23.8%,重度少精症组15.4%;FSH、LH、T均在正常参考范围者,无精症组19.0%,重度少精症组23.1%.结论血清性激素水平检测应用于少精症(特别是重度少精症)、无精症患者的病因分析、制定治疗措施和预后判断具有重要的临床意义.
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磁分离-酶标记-化学发光法测定促甲状腺素的应用
目的评估促甲状腺素(TSH)在甲状腺机能亢进症(甲亢)中的诊断地位.方法采用高灵敏度的化学发光免疫夹心法检测TSH,比较TSH在诊断甲亢时的ROC曲线下面积.结果化学发光免疫分析(CLIA)的灵敏度为0.01mIU/L,批内、批间精密度CV值分别为2.39%和4.09%,与质控靶值回归方程y=0.928 4 x-0.055 1(r2:0.998 4)、与游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和游离甲状腺素(FT4)相比,TSH具有大的ROC曲线下面积及小的交叉重叠范围.在甲状腺机能减退症(甲减)的诊断中,TSH与FT4具有相同的诊断效率(P>0.05),而在甲亢的诊断中,TSH比FT3、FT4更有效(P<0.05).结论由于高灵敏度与高精密度方法学的应用,可检测到低浓度的TSH值,使TSH不但应用于甲减的诊断,而且也能应用于甲亢,甚至亚临床型及潜在型甲亢或甲减的诊断.
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快速制作LIAISON 化学发光孕酮测定标准曲线的方法
目的：通过每日定标快速手工制作标准曲线的方法，使孕酮测定结果的准确性得到保证。方法根据LIAISON化学发光计算原理和孕酮的标准曲线，借用Excel软件的对数回归方程快速计算孕酮实际的标准曲线，对该试验进行校准。结果通过该方法计算得出的浓度值符合临床诊断。结论该方法简便、快速、准确，得到临床科室的认可，值得在基层医院推广应用。
