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生长激素定量标记免疫分析试剂盒行业标准的验证
目的：制订生长激素(GH)定量标记免疫分析试剂盒行业标准，并采用该标准适用的化学发光标记、时间分辨荧光标记方法进行验证。方法：选择GH磁微粒化学发光法、电化学发光法、化学发光法和时间分辨荧光分析法试剂盒，按照拟定的行业标准规定，对空白限、线性、准确度、精密度、特异性和稳定性项目进行验证。结果：除部分试剂盒的准确度结果不能满足预期要求的±10%外，其余验证结果均能满足拟定行业标准中的要求。结论：根据验证情况，将准确度要求调整至±15%，其余项目要求不变，终确定GH定量标记免疫分析试剂盒行业标准。该标准的制定，有助于统一GH定量标记免疫分析试剂盒的质量标准，为该类产品的研制、检验及上市后的监督管理提供依据。
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化学发光免疫分析技术及其进展
化学发光免疫分析技术是将化学发光与免疫分析方法相结合,综合了化学发光的高灵敏度和免疫分析的高选择性,被广泛应用到医学诊断、药物分析、卫生检疫、生命科学和环境监测上.简要综述了化学发光免疫分析研究的历史背景、基本原理、常见发光体系及其特点.
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超微量蛋白分析仪在微量树突细胞中ERK蛋白及其磷酸化修饰检测中的应用研究
目的：建立利用超微量蛋白分析仪检测微量细胞样品中低丰度细胞外调节蛋白激酶(ERK)及其磷酸化修饰的应用方法，为在科研工作中应用该仪器提供实验依据。方法：采用配制样品溶液，上样、分离、固定、免疫杂交和软件定量等实验步骤，进行化学发光检测，对不同数目树突状细胞中ERK蛋白及其磷酸化修饰的定性及定量结果进行分析。结果：超微量蛋白分析仪能够检测到低至2000个细胞中的目的蛋白并获得定量数据，该仪器还能够有效分辨出20000个细胞中ERK蛋白不同形式的磷酸化修饰。结论：超微量蛋白分析仪有效完成了对低丰度细胞外调节蛋白以及蛋白质翻译后修饰检测。
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TPPA,化学发光,RPR检测梅毒的应用体会
梅毒是由梅毒螺旋体(TP)所引起的一种性传播疾病,本病几乎侵害全身各个器官,主要通过血液传播和性接触传播[1].近年来,梅毒发病率明显出现逐年上升的趋势.梅毒螺旋体培养艰难,梅毒的诊断主要根据临床表现、镜检病原体和血清学抗梅毒螺旋体抗体检测.本文用化学发光,TPPA,RPR3种梅毒常用检测方法对检测出的120例阳性血清标本进行分析,探求RPR手工稀释倍数的简易实验操作.
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进口食品中BHA与BHT的流动注射化学发光法测定
BHA与BHT与铬(Ⅵ)发生氧化还原反应,产生的铬(Ⅲ)可催化Luminol(鲁米诺)-H2O2化学发光体系,籍此,结合流动注射技术,建立了一种高灵敏度的快速测定BHA与BHT的新方法.方法的线性范围为2.0×10-9～4.0×10-5g/mL和2.8×10-9～1.0×10-5g/mL,检出限为6.0×10-10g/mL和8.0×10-10g/mL,相对标准差为1.2%和1.4%(1.0×10-7g/mLBHA和BHT,n=11).该方法应用于进口食品中痕量BHA和BHT的测定,结果满意.
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流动注射化学发光法在进出口化矿金产品检验中的展望
本文介绍了FI-CL法的基本原理及其测定痕量无机元素的应用.评述了FI-CL仪器的研制、新分析方法的建立、与其他技术联用等方面的新进展情况.展望了FI-CL法测定痕量无机元素的发展方向和研究热点以及在进出口化矿金产品检验中的应用前景.
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血痕预试验检测的应用现状与研究进展
血迹是凶杀、伤害等案件中常见和重要的一种物证.血痕预试验是利用化学检测的方法从现场大量可疑的斑迹中初步筛选出可能是血的痕迹物证.本文对常用血痕预试验试剂的应用现状及其灵敏度、特异性、稳定性等进行分析比较,同时对预试验检测中存在的问题及今后的发展趋势进行综述,旨在为更好地研究、利用血痕预试验试剂提供参考.
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流动注射—化学方光法检测人体血清内枸橼酸芬太尼
目的 建立灵敏测定生物样品中皮克级枸橼酸芬太尼的方法.方法 使用流动注射-化学发光法、鲁米诺-溶解氧体系检测芬太尼,蠕动泵流速2.0mL/min,鲁米诺与NaOH混合后被六通阀定量注入系统直至形成稳定基线,同时将样品推进送入混合管.碱性混合液被送入化学发光流通池产生化学发光,光电倍增管和光度计即检测到发光信号强度.结果 在1.0～ 700pg/mL线性范围内,化学发光强度与芬太尼浓度呈线性关系,且发光强度随浓度增大呈增敏趋势,检出限低至0.3pg/mL.相对标准偏差在3.0％以内.分析过程可在30s内完成,采样频率120次/h.回收率98.9％～103.1％.结论 该方法已经成功应用于检测人体血清中的枸橼酸芬太尼.
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开发高灵敏度血痕发光试剂用于法医现场检测
目的 开发高灵敏度血痕发光试剂用于法医现场检测.方法 本项目通过借鉴ECL发光的原理,通过化学电子链的乒乓共轭激活原理,使用均匀设计实验方法优化条件,合成多个新化合物,开发出新型高灵敏度血痕发光试剂.结果 本项目开发的高灵敏度血痕发光试剂灵敏度高,发光时间长,在血液稀释1000倍的情况下,使用ChemiScope3300化学发光成像系统读取荧光值,经过灰度转化高值达到56,发光时间达到10分钟.结论 本项目成功开发了高灵敏度血痕发光试剂,可以应用于法医现场检测.
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红景天醇提物对乙醇诱导QZG细胞氧化损伤的保护作用
目的:研究乙醇对氧化应激损伤的作用特点和红景天醇提物的抗氧化作用.方法:采用DPPH自由基生成体系、体外鲁米诺化学发光反应(OH和O<,2><'+>)体系观察红景天醇提物对DPPH自由基、OH和O<,2><'+>化学发光强度的抑制作用以及剂量-效应关系.采用乙醇诱导人正常肝细胞系QZG细胞的氧化应激反应模型,观察红景天醇提物对乙醇诱导细胞活力和氧化应激损伤的保护作用.实验分设红景天醇提物3个不同浓度(50、100、200 mg/L)的预防给药组和治疗给药组、阳性对照组(200 mmol/乙醇干预)和阴性对照组(不加受试物).预防给药组用红景天醇提物预处理QZG细胞12 h后,再加入200 mmol/L乙醇处理6 h,治疗给药组采用红景天醇提物和乙醇同时处理QZG细胞6 h.用MTT试验和生化法测定细胞活力、细胞丙二醛(MDA)、还原型和氧化型谷胱甘肽(GSH、GSSG)和总巯基(T-SH)含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧阴离子歧化酶(SOD)活力;免疫印迹法检测细胞抗氧化酶血红素加氧酶-1(HO-1)和核因子相关因子2(NRF-2)蛋白的表达.结果:红景天醇提物对自由基的生成具有显著的抑制作用,呈现较为明显的剂量-效应关系;红景天醇提物可有效保护乙醇所致的肝细胞活力损伤,且治疗组具有明显的剂量-效应关系.与阳性对照组相比,红景天醇提物干预组细胞的MDA含量和GSSG含量下降(P<0.05),GSH和T-SH含量显著升高(P<0.05);CAT和SOD活性也显著升高(P<0.05).免疫印迹测定结果表明,红景天醇提物可以诱导HO-1蛋白和NRF-2蛋白表达上调(P<0.05).结论:红景天醇提物在体外自由基模型中具有较强的抗自由基作用,可保护乙醇导致的QZG细胞氧化损伤,其作用机制可能和抗氧化作用相关.
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川芎提取物的多模型体系抗氧化活性测定
目的:研究川芎醇提物和水提物在几种自由基体外模型中的抗氧化作用位点与活性强度,以及此两种提取物在小鼠氧化损伤模型中的综合抗氧化作用.方法:建立DPPH体系,观察川芎醇提物和水提物对DPPH自由基的清除率;建立OH和O<,2><'->化学发光体系观察川芎的两种提取物对发光强度的抑制作用;采用CHP、Vc,Fe<'2+>和CCl<,4>/NADP<'+>作为激发剂,建立微粒体脂质过氧化(LPO)损伤模型,观察川芎两种提取物对MDA生成的抑制作用.建立小鼠氧化损伤模型,观察川芎两种提取物对SOD和CAT蛋白表达水平的影响,以及对MDA生成的抑制作用.结果:在DPPH体系中,川芎的醇和水两种提取物对DPPH的清除率均显著高于对照组(P<0.01),且呈明显剂量-效应关系,川芎醇提物和水提物对DPPH的IC<,50>,分别为3.47和6.19 mg/ml;在两种化学发光体系中,川芎的醇提物和水提物对O<,2><'->和OH的清除率均显著高于对照组(P<0.01),且呈明显剂量-效应关系,川芎醇提物对O<,2><'->和OH的IC<,50>分别为2.56和4.21 mg/ml,水提物对O<,2><'->和OH为2.34和2.80ml;3种LPO损伤模型中川芎两种提取物各浓度组的MDA含量均显著低于对照组(P<0.05);在体内实验中,与对照组相比,川芎水提物和醇提物组均明显降低肝组织和血清内MDA的含量(P<0.05);川芎水提物和醇提物能明显提高肝组织内SOD蛋白表达水平;川芎醇提物可以提高肝组织内CAT蛋白表达水平.结论:川芎提取物在几种体外模型和体内模型中均具有较好的抗氧化作用.
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刺五加提取物在自由基模型中的活性作用
背景与目的:研究刺五加醇提物和水提物在几种自由基体外模型中的抗氧化作用.材料与方法:建立DPPH体系,观察刺五加不同浓度的醇提物和水提取物对DPPH自由基的抑制作用;建立OH和O2+两种化学发光体系观察刺五加不同浓度的两种提取物对发光强度的抑制作用;采用CHP、VC/Fe2+和CCl4/NADP作为激发剂,建立微粒体脂质过氧化(LPO)损伤模型,观察不同浓度的刺五加两种提取物对MDA生成的抑制作用.结果:在DPPH体系中,刺五加两种提取物对DPPH的抑制率均显著高于对照组(P<0.01),呈明显剂量-效应关系,刺五加醇提物和水提物对DPPH的IC50分别为0.18 mg/ml和0.09 mg/ml;在两种化学发光的体系中,除了0.625 mg/ml的刺五加醇提物与对照组的差异无统计学意义外(P=0.102),其它浓度的两种提取物对O2+和OH的抑制率均显著高于对照组(P<0.01),呈明显剂量-效应关系,刺五加醇提物的IC50分别为0.488 mg/ml和1.29 mg/ml;水提物为0.24 mg/ml和0.37 mg/ml;在ClIP模型中,1.25 mg/.d的刺五加水提物表现出了一定的促氧化作用,但差异无统计学意义(P>0.05).3种LPO损伤模型中刺五加两种提取物各浓度组的MDA含量均显著低于对照组(P<0.05),且有一定的剂量-效应关系.结论:刺五加在几种体外模型中均具有较强的抗氧化作用,在DPPH和两种化学发光体系中,刺五加水提物的抗氧化活性强于醇提物;而在3种LPO模型中,刺五加醇提物的抗氧化活性强于水提物.
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玉米须提取物清除自由基和抑制脂质过氧化作用
背景与目的:探讨玉米须提取物的自由基清除能力和抑制不同氧化剂激发的脂质过氧化作用及其剂量反应关系.材料与方法:回流法制备玉米须醇提物(maydis stigma extract,MSE).采用·OH和O2两种化学发光体系,加入不同浓度玉米须醇提物后测定发光强度来检测其自由基清除能力.采用差速离心法提取10只雄性SD大鼠肝微粒体,并以Vit C/Fez+、过氧基异丙苯(curnine hydroperoxide,CHP)和CCl4/辅酶Ⅱ(nieotinamide-adenine dinueleotide phosphate,NADP+)为激发剂建立微粒体脂质过氧化(lipid peroxidation,LPO)模型,加人不同浓度的玉米须提取物及阳性药物对照,通过比色法测定其对脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的抑制作用.结果:玉米须提取物能显著清除化学发光体系产生的·OH和O2,且随着浓度的升高,发光强度呈下降趋务,均呈明显量效关系(r=0.922,P＜0.05;r=0.863,P＜0.05).在微粒体脂质过氧化模型中,玉米须提取物各浓度组MDA含量低于阴性对照组,并且在一定终浓度内(6.25～2000 μg/ml)有剂量-效应关系(r分别为0.935,0.931,0.79;P均＜0.05).结论:玉米须提取物在3.55～2000 μg/ml浓度范围内具有较强的自由基清除能力和抑制不同氧化剂激发的脂质过氧化作用.该结果为玉米须在与自由基相关疾病中的保护作用提供了实验依据.
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脂肪乳影响甲状腺激素测定结果的实验研究
[目的]探讨加入不同浓度脂肪乳标本对甲状腺激素测定的干扰.[方法]制备含有0%、5%、15%、25%脂肪乳的血清各20份.使用德国拜耳公司的ACS:180SE全自动化学发光免疫分析仪测定其FT4、TT4的浓度.[结果]加入脂肪乳的血清其FT4、TT4测定值高于无脂肪乳血清组.加入5%、15%、25%的脂肪乳标本对FT4的测定造成干扰(P＜0.05).加入15%、25%的脂肪乳标本对TT4的测定也产生了干扰(P＜0.05).[结论]加入一定量的脂肪乳标本对FF4、TT4的测定有干扰,而且随着脂肪乳浓度的加大干扰程度也相应加大.
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胰腺癌诊断中蛋白芯片检测法与化学发光法的对比研究
目的:探讨多肿瘤标志物蛋白芯片与化学发光检测对胰腺癌诊断的临床应用价值.方法:应用多肿瘤标志物蛋白芯片与化学发光技术,对40例健康体检者和36例胰腺癌病人进行多种肿瘤标志物联合检测,并对检测结果进行对比分析.结果:多肿瘤标志物蛋白芯片与化学发光检测两种方法在对健康体检组阳性率和特异性经统计学分析没有显著性差异(P＞0.05);对已患胰腺癌的36例患者CA199差异有统计学意义(P＜0.05),CA242、CA125、CEA 3项指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:多肿瘤标志物蛋白芯片与化学发光检测在对提高胰腺癌诊断的阳性率和特异性方面具有一定的相关性,但多肿瘤标志物蛋白芯片在健康体检中的应用价值优于化学发光检测,而对确诊的胰腺癌患者,化学发光检测优于多肿瘤标志物蛋白芯片检测.
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丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法化学发光检测的应用效果评价
目的:评价丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法化学发光检测的应用效果.方法:我院于2015年3月至2017年11月应用重组融合丙型肝炎病毒抗原对生物素、吖啶酯进行分别标记,建立双抗原夹心法化学发光监测试剂盒,结合间接法对75例阴性标本、38例阳性标本进行同时检测,3套BBI阳转学清盘.结果:间接法与双抗原夹心法的特异度分别为97.37％与94.74％,灵敏度皆为100％,特异度差别为2.63％,BBI阳转血清相对敏感性系数是-1.33.结论:相对间接法而言,双抗原夹心法检测丙型肝炎病毒抗体的特异度与早期感染检测能力良好,值得在临床上推广应用.
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3种肿瘤标志物在罗氏E411电化学发光法和科斯迈SMART 3000S化学发光免疫法两个检测系统间的结果分析
目的 研究电化学发光法(ECLIA)和化学发光法免疫法(CLIA)对糖类抗原199(CA199)、糖类抗原125(CA125)和癌胚抗原(CEA)检测结果的差异.方法 以体检、门诊及住院标本为研究对象,CLIA测定CA199、CA125、CEA,随机选取其中20例阴性标本,连同筛选出的阳性标本用ECLIA测定.结果 246份标本CLIA检测出CA199阳性12例,CA125阳性6例,CEA阳性7例.ECLIA定量检测,12例CA199标本11例阳性,符合率92％;6例CA125标本2例阳性,符合率33％;7例CEA标本7例阳性,符合率100％.20例阴性标本两种方法检测结果无差异,阳性标本结果无可比性.结论 CLIA检测CA125有较高的假阳性率,CA199相对较低,CEA一致性较好.
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甲胎蛋白(AFP)化学发光试剂盒的临床运用
本文采用郑州博赛公司生产的甲胎蛋白(AFP)化学发光试剂盒,同进口全自动化学发光检测仪进行对比,对71例临床血清进行测定,目的在于考察国产化学发光试剂盒的性能及临床符合率.结果表明,该试剂盒质量稳定,操作简便,完全可以满足临床需要.
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癌胚抗原(CEA)化学发光试剂盒的临床运用研究
癌胚抗原(CEA)属于非器官特异性肿瘤相关抗原,其检测可有助于判断肿瘤的发生以及进行疗效观察.本文采用郑州博赛公司生产的癌胚抗原(CEA)化学发光试剂盒,同进口全自动化学发光检测仪进行对比,对315例临床血清进行测定,目的在于考察国产化学发光试剂盒的性能及临床符合率.结果表明,该试剂盒质量稳定,操作简便,完全可以满足临床需要.
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分析流动注射化学发光法测定阿莫西林
目的：本文对流动注射化学发光法测定阿莫西林的方法进行了介绍。方法采用对比的方式，对流动注射技术与常规高效液相色谱法的应用效果进行了对比。流动注射化学发光法是将盐酸作为介质，高锰酸钾作为氧化剂，两种物质相互配合后，使阿莫西林呈现出发光的状态。结果在实验的过程中，确定线性范围为1.0×10-7--5.0×10-5g?ml-1；其中检出限为6.0×10-8g?ml-1；对1.0×10-5g?ml-1的阿莫西林进行多次测定，标准差要被控制在1.56%之内。结论流动注射化学发光法在测定阿莫西林时，具有简单、方便的优点，其灵敏程度比较高，而且可以准确的测定出阿莫西林的含量，与传统的测定方法相比，流动注射化学发光法具有较高的应用效果。
