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免疫蛋白质组学方法对内脏利什曼病人血清识别主要抗原的鉴定
目的 鉴定我国内脏利什曼病人血清识别的主要抗原蛋白. 方法 培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化成无鞭毛体,提取总蛋白,经2-DE电泳,以内脏利什曼病人血清为一抗进行2-DWestern blot,对强免疫识别点相应抗原蛋白进行MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定. 结果 等量的杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体蛋白经2-DE电泳均可呈现约700个蛋白点,内脏利什曼病人血清识别的主要无鞭毛体抗原蛋白为p微管蛋白、磷酸多糖β-1,3半乳糖基转移酶、PA7为磷酸多糖β-1,3阿拉伯糖基转移酶及延伸因子1等,识别的主要前鞭毛体抗原蛋白为热休克蛋白 70及延伸因子1等. 结论 人内脏利什曼病患者血清能识别多种杜氏利什曼原虫蛋白,有利于筛选抗内脏利什曼病疫苗抗原和新的血清学诊断抗原.
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不同种株利什曼原虫抗原的多样性研究
目的 观察不同种株利什曼原虫抗原的异质性.方法 培养杜氏利什曼原虫、热带利什曼原虫及婴儿利什曼原虫前鞭毛体及体外转化无鞭毛体,提取总蛋白,经SDS-PAGE电泳后,分别以抗杜氏利什曼原虫及热带利什曼原虫前鞭毛体血清进行Western blot,分析抗原的多样性.结果 经SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色,杜氏利什曼原虫、热带利什曼原虫及婴儿利什曼原虫前鞭毛体及体外转化无鞭毛体总蛋白呈现出分子质量单位为12~150 ku的相似蛋白带型;Western blot显示,抗杜氏利什曼原虫前鞭毛体多克隆血清识别的抗原组分与抗热带利什曼原虫前鞭毛体多克隆血清识别的抗原相似;3种利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体存在48、65及35 ku共同抗原,杜氏利什原虫和婴儿利什曼原虫的无鞭毛体存在38 ku期特异抗原,热带利什曼原虫的前鞭毛体和无鞭毛体存在45、24 ku种特异抗原.结论 杜氏利什曼原虫、热带利什曼原虫及婴儿利什曼原虫间存在抗原多样性,为认识利什曼病感染免疫提供了新的视角.
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多房棘球蚴感染小鼠辅助Th17细胞,转录因子RORγτ及相关细胞因子的实验研究
目的 探讨多房棘球蚴感染小鼠脾脏细胞中辅助性T细胞17比例,转录因子RORγτ和IL-17因子的表达及其意义.方法 选用6~8周龄BALB/c小鼠共30只,随机分为多房棘球蚴感染组(Em)、多房棘球蚴感染阿苯达唑治疗组(Em+ Albendazole,Em+ ABZ)和健康对照组(healthy controls,HC),每组10只.通过腹腔注射法建立泡型包虫病小鼠模型.Em+ ABZ治疗组给予灌胃阿苯达唑治疗(100 μl/d,35 d)通过流式细胞术检测小鼠脾脏细胞中辅助性T17细胞(CD4+ IL-17+ Th17细胞/CD4+T细胞)比例,采用实时荧光定量PCR检测脾脏细胞中维甲酸孤独受体(retin-oid acid orphan receptor-γτ,RORγτ) mRNA的表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-17水平.结果 CD4+IL-17+ Th17细胞/CD4+T细胞比例,Em组为(2.10士1.00)%,与HC组(0.85±0.71)%比较,差异有统计学意义(F=3.07,t=2.66,P<0.01).Em+ ABZ组为(1.54±1.19)%,与HC组和Em组比较,差异无统计学意义(F=3.07,P>0.05);脾脏细胞RORγτ mRNA在Em组中的表达(6.1×10-4±5.8×10-4)高于在Em+ ABZ组(6.0×10-4±3.5×10-4)和HC组(3.4×10-4±2.4×10-4)中的表达,但差异无统计学意义(F=0.66,P>0.05).Em+ ABZ组与HC组比较,差异亦无统计学意义(F=0.66,P>0.05).脾脏细胞培养上清液中IL-17A,Em组为(10.71±1.85) ng/ml,明显高于Em+ ABZ组[(5.58±3.56)ng/ml]和HC组[(7.31士1.22)ng/ml],差异有统计学意义(F=9.82,t1=3.12,t2=5.57,P<0.01).Em+ ABZ组与HC组比较差异无统计学意义(F=9.82,t=0.84,P>0.05).结论 Th17细胞参与BALB/c小鼠多房棘球蚴感染免疫和炎性应答过程,阿苯达唑治疗能够减轻免疫损伤和炎症反应.Th17细胞及IL-17A可能是潜在的多房棘球蚴病新的分子免疫干预靶点.
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杜氏利什曼原虫无鞭毛体表达抗原的Western blot和MALDI-TOF/TOF分析
目的 鉴定杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达抗原. 方法 培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化无鞭毛体,其总蛋白经2-DE电泳后以小鼠抗杜氏利什曼原虫无鞭毛体血清进行Western blot,对前鞭毛体与无鞭毛体特异表达抗原蛋白进行MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定.重组表达无鞭毛体特异表达抗原编码基因,以Western blot法对重组蛋白进行鉴定. 结果 等量的杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体蛋白经2-DE电泳均可呈现680~742个蛋白点,Western blot及MALDI-TOF/TOF-MS分析甘油醛3磷酸脱氢酶与延伸因子2为杜氏利什曼原虫前鞭毛体特异表达抗原,核苷二磷酸激酶为无鞭毛体特异表达抗原.重组核苷二磷酸激酶编码基因表达产物经Western blot证实为杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达强抗原. 结论 杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体抗原表达存在差异,核苷二磷酸激酶为杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达强抗原.
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调节性B细胞在感染免疫中的作用研究进展
B细胞主要通过呈递抗原和产生抗体发挥免疫调节作用.近年来研究发现部分B细胞具有调节功能,这部分B细胞被命名为调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs).Bregs可通过产生白细胞介素10(IL-10)和(或)转化生长因子β1(TGF-β1)等抑制性细胞因子介导免疫耐受,抑制过度炎症反应,加快炎症的恢复.相关研究表明Bregs在寄生虫、细菌、病毒感染中发挥重要作用.本文综述了Bregs的生物学特征、功能、微信号调节及其在感染性疾病中所发挥的作用机制及相关研究进展.
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寡核苷酸表达谱芯片揭示的抗结核分枝杆菌感染免疫特征
目的研究临床分离的结核分枝杆菌菌株感染人巨噬细胞所引起的表达变化,寻找与其它细菌在诱导细胞表达方面的共性和特性. 方法用19*!200个基因的寡核苷酸芯片比较临床分离细菌感染U937前后细胞基因的表达变化,以生物信息学统计分析其它细菌引起宿主细胞的基因表达变化. 结果结核分枝杆菌感染导致1*!395个基因(7.26%)差异表达,特别显著的是细胞因子、锌指蛋白、转录因子和凋亡有关因子.与沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌、单孢李斯特菌、百日咳菌等细菌感染引起的免疫反应具有相似之处. 结论结核分枝杆菌感染与其它细菌感染引起的免疫反应在转录水平具有共性,也富有特性.锌指蛋白和fibronectin受体等因子在抗结核分枝杆菌感染免疫中的作用值得深入研究.
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《中华微生物学和免疫学杂志》征订启事
《中华微生物学和免疫学杂志》为中华医学会主办。1981年创刊,主要报道医学微生物学和免疫学方面的研究论文、简报、评论、综述、国内外学术动态、书评及消息等。
本刊辟有:细菌学、病毒学、分子微生物学、临床微生物学、疫苗学、感染免疫、基础免疫学、临床免疫学、分子免疫学、免疫遗传学、肿瘤免疫学、中药与免疫、免疫学技术、检测技术等栏目。 -
戊型肝炎病毒感染免疫研究进展
戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)是引起戊型肝炎的病原体.在发展中国家戊型肝炎是一个重要的公共卫生问题,我国是HEV的流行区.本文就近期HEV感染后的体液免疫反应、细胞免疫反应、免疫损伤机制的研究以及HEV疫苗研制的进展进行综述.
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Toll样受体与肝脏疾病
1997年发现的Toll样受体(TLR)为存在于人细胞表面的跨膜蛋白,对机体免疫、特别是感染免疫具有重要意义.目前在人体内已发现10个TLR,广泛分布于各种组织中, 其细胞及组织分布有特异性[1].TLR形成了一个复杂的、联合性的网络,特异地识别大量病原体及组织代谢产物等的信号识别系统.新近的研究显示TLR在肝脏疾病的发生及发展机制中亦有通过影响TNF、IFN及调节Th1和Th2反应平衡等起着重要作用,一些TLR在抗病毒机制中显示出相当作用,这对肝脏疾病的发病和防治研究或有所帮助.
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幽门螺杆菌感染免疫预防研究的现状与未来
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是世界上感染率高的病原菌,流行病学研究表明,全球约一半人口感染此菌.近20年的研究证实,Hp是上消化道疾病的重要致病菌,与慢性胃炎、消化性溃疡以及胃癌、胃黏膜淋巴组织相关性淋巴瘤的发病密切相关.虽然现有联合药物治疗可使Hp根除率达85%左右,但也存在诸如药物副反应较多、耐药菌株不断增多、药物价格昂贵等不可避免的问题.与其他感染性疾病一样,若能通过免疫途径进行防治,应是有效降低Hp感染率,从而降低与其相关的上消化道疾病发病率的佳选择.
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基于转化医学理念构建感染免疫实验室研究生培养模式
在研究生培养中引入转化医学理念,根据临床诊治的问题制定感染免疫研究生的培养计划。构建转化型指导教师队伍,调整感染免疫研究生的培养模式,采取有利于医学科研和临床高素质创新型复合型人才培养的措施。基于转化医学理念的研究生培育模式也是基础与临床医学研究生教育培养改革中的重大转折。
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论感染免疫专业研究生整体科研思路的培养
免疫学与现代医学领域的快速交叉与融合,为我国免疫学专业研究生的培养提出了更高要求.整体科研思路,即在教学过程中渗透系统-器官-细胞-分子的整体观念,是开展感染免疫学研究的必要条件和重要基础,也是提高感染免疫学专业研究生的培养质量的重要途径.全面的免疫学及其相关领域知识和整体科研的思维方式,有助于培养研究生的科研思路,拓展其科研视野,同时,将有助于激发学生学习潜力,从而提高研究生教学质量.
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2010年全国小儿免疫学术会议纪要
中华医学会儿科学分会免疫学组、<中华儿科杂志>编辑委员会联合举办的"2010年全国小儿免疫学术会议"于2010年10月28-30日在广东省中山市召开.来自全国30个省市自治区的参会代表达到177人,创历届全国性儿科免疫会议参会代表人数之.大会邀请了5位国际儿科免疫学专家进行主题讲座,4位风湿病循证诊疗建议撰写组负责人汇报了撰写工作进展情况,2位教授汇报了全国原发性免疫缺陷病多中心协作研究结果.48位代表大会发言,围绕原发性免疫缺陷病(PID)、过敏、感染免疫及风湿性疾病的发病机制、诊断及治疗进行了广泛探索.以下分专题介绍本届会议主要内容.
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第七届国际酒精性肝病、胰腺疾病和病毒性肝炎研讨会暨全军传染病学专业委员会第十二次学术会议纪要
2012年9月6-8日"第七届国际酒精性肝病、胰腺疾病和病毒性肝炎研讨会"暨"全军传染病学专业委员会第十二次学术会议"在北京世纪金源大酒店举行.本次大会由解放军302医院和美国国立卫生研究院(NI-H)共同主办,全军传染病学专业委员会和中国免疫学会感染免疫分会共同承办.来自全球近10个国家的60多位国际一流专家教授主持和担任主讲嘉宾,参会代表达300人.全军传染病学专业委员会(下称专委会)常务委员会选举产生了专委会第一届青年委员会委员.
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生理性衰老小鼠的感染免疫模型建立
目的 生理性衰老导致机体免疫功能下调,进而使老年人群感染免疫应答能力降低,针对新发突发传染病的病原体如重症流感病毒的易感性上升,罹患感染后,临床症状也更严重,预后不佳.因此,本课题组建立一个拟合临床重症流感病毒感染的老年小鼠模型,用于评价老年宿主感染免疫应答特征.方法 采用不同毒力的流感病毒H7N9(高致病性)、H9N2(低致病性)分别滴鼻感染老年C57小鼠(18~24月龄),分析其感染后体重变化和生存情况,并动态检测肺内病毒的复制,炎症因子的表达以及肺的病理损伤.结果 与成年对照组小鼠(6~8周龄)相比,老年小鼠感染H9N2后7天体重下降了30%(成年对照仅下降10%),生存率降低至50%(成年对照为100%).老年小鼠肺内H9N2病毒复制更高(P<0.01),感染后第2天达到峰值(每克肺内RNA病毒拷贝为3.2×104);以炎症因子IL?6、趋化因子MCP?1为代表的肺内炎症过量表达,是成年对照的100~1000倍;肺病理染色提示老年小鼠肺损伤更严重,感染后修复时间更长.结论 成功建立老年小鼠感染模型,在感染生存、肺病毒复制和炎症损伤等方面可以重现临床感染免疫应答的现象.可应用于深入理解老年宿主感染相关的机制研究与抗感染药物评价.
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抗体依赖细胞介导的细胞毒性效应在抗蠕虫感染免疫中的作用
抗体依赖细胞介导的细胞毒性(Antibody DependentCell Mediated Cytotoxicity,ADCC)效应一方面具有保护作用,如可在某些肿瘤、抗病毒感染、清除自身衰老细胞以及抗寄生虫感染方面发挥作用;另一方面也可引起免疫损伤,如在器官移植中促进移植排斥反应的发生.一般认为,在宿主抗原虫感染中,免疫应答产生的抗体主要为非特异性抗体,宿主对原虫以细胞免疫为主,ADCC效应不甚重要.对蠕虫而言,其杀伤作用具有其特异性,只能杀伤早期幼虫,对成虫无效,这在血吸虫、丝虫、旋毛虫、肺吸虫[1]的实验中得到了证实.本文拟从参与ADCC杀伤蠕虫幼虫的抗体种类和效应细胞、ADCC杀伤蠕虫幼虫的作用机理等方面作一综述.
关键词: 抗体依赖细胞介导的细胞毒性 蠕虫 感染免疫 -
慢性病毒感染免疫研究实现重大突破
近日,《自然》杂志在线发表由第三军医大学主导的原创性研究成果,揭示了一群新的CD8+T细胞亚类,阐明了其抑制病毒复制的机制.这一发现有助于理解慢性病毒感染免疫的关键环节,为彻底根治HIV、乙肝等慢性病毒感染提供了新的可能.
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儿童中枢神经系统肺炎支原体感染免疫功能研究
肺炎支原体(MP)感染临床较为常见,好发年龄以儿童居多,且呈逐年增多趋势.主要通过呼吸道传播,不仅损害呼吸道,还可引起肺外多器官受损,尤其是中枢神经系统(CNS)受损更为明显,使病程迁延,严重者造成生命危险.MP感染发病机制尚无定论,目前认为除与病原体直接侵害有关外,还与免疫功能紊乱有关,认为免疫因素在肺炎支原体感染致肺外并发症中起重要作用[1].有关MP感染致呼吸道感染免疫功能的研究国内已有文献报道,但结果不一,存在争议[2,3],而MP致CNS感染患儿免疫功能变化尚未见报道.为进一步探讨MP致CNS感染患儿的免疫功能,对我院2011年1月至2012年12月神经内科收治的MP致CNS感染急性期患儿48例进行T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白检测,旨在探讨MP致CNS感染患儿免疫功能状况,并对该类患儿免疫治疗提供理论依据.
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沙眼衣原体生殖道感染免疫及疫苗研究进展
沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)是一种严格的细胞内寄生性微生物,是沙眼和性传播疾病的主要病原体;通过性接触传播,可引起男性尿道炎、附睾炎,女性宫颈炎、盆腔炎,还可继发不育和异位妊娠等,对人类健康构成极大危害[1].为了控制沙眼衣原体的感染,很多实验室从各个方面对沙眼衣原体做了大量的研究工作并取得了很大进展,包括在1998年获得了沙眼衣原体基因组的全部序列.沙眼衣原体疫苗的发展可以预防沙眼衣原体所致性传播疾病,迄今已从多种途径探讨疫苗的研制,但尚无成熟疫苗问世.沙眼衣原体感染免疫生物学基础的研究成果,指导着疫苗的发展.本文将近年来沙眼衣原体生殖道感染免疫及相关疫苗的研究进展作一概述.
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人NK细胞亚群与生物学功能关系的研究进展
NK细胞是机体免疫系统的重要组成部分,在抗病毒感染免疫、肿瘤免疫、移植的排斥反应以及在免疫的调节中起着十分重要的作用.长期以来的研究表明,NK细胞并不是一个均一的细胞群体,根据表面标志和功能的不同,可以将NK细胞分为不同的亚群.