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全自动DNA定量分析检测对恶性胸腔积液诊断的价值
正常人体细胞为整倍体细胞, DNA异倍体的出现是肿瘤形成过程中的一个生物标志物。目前, DNA定量分析对胸腔积液细胞学诊断的辅助作用已有研究报道,但有关DNA异倍体阳性诊断标准的意见尚不统一。本研究以组织病理学诊断结果作为金标准,对DNA异倍体在胸腔积液细胞学诊断中的应用价值进行分析,并讨论其阳性诊断的佳阈值。
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结直肠腺瘤组织的细胞DNA定量分析研究
目的:用细胞DNA定量分析的方法比较结直肠腺瘤患者腺瘤组织和正常组织DNA含量的差异,探讨DNA定量分析系统在结直肠腺瘤诊断中的应用。方法选取2013年3至4月于北京大学人民医院行结直肠腺瘤性息肉切除治疗的患者18例,取患者结直肠腺瘤组织和配对的正常结肠黏膜组织制备单细胞悬液,液基细胞保存液固定细胞,制作 Feulgen 染色片,用全自动细胞图像分析系统(AICM)行扫描处理。结果腺瘤组织18例检出异倍体的有11例,配对正常结肠黏膜组织18例1例检出异倍体细胞(P<0.01)。腺瘤旁的正常结肠黏膜组织中白细胞与上皮细胞的比值比腺瘤组织高(P<0.05)。结论结直肠腺瘤组织异倍体有较高的检出率,全自动细胞 DNA 分析可用于辅助诊断患者结直肠腺瘤。
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免疫磁珠与DNA倍体检测肿瘤患者外周血中癌细胞的初步临床应用
DNA异倍体是恶性肿瘤的重要标志之一[1-2],检测外周血中肿瘤DNA异倍体为无创性肿瘤诊断开辟了一条新途径[3].流式细胞术 (FCM)-DNA倍体分析技术具有特异性强的优点,但该方法在外周血中检测的阳性率不高[4].本研究先用免疫磁珠(IMB)阴性分选富集癌细胞,后用FCM-DNA倍体检测外周血中癌细胞,现报告如下.
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脑脊液DNA含量的流式细胞分析脑膜转移癌患者一例
流式细胞术(FCM)测定细胞DNA含量已逐渐应用于肿瘤诊断、治疗及预后判定.我们用流式细胞仪测定1例肺癌脑膜转移患者脑脊液标本中细胞的DNA含量,并检测到肿瘤细胞的DNA异倍体.
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DNA倍体分析与癌胚抗原检测对良、恶性腹水鉴别诊断的意义
目的:探讨DNA倍体分析与癌胚抗原(carcinoembryonic antigen.CEA)检测对良、恶性腹水鉴别诊断的意义.方法:应用流式细胞术对106例腹水患者(良性腹水50例.原发性肝癌并腹水31例,非肝癌恶性腹水25例)进行腹水细胞DNA倍体分析,以腹水细胞中发现异倍体为阳性;同时采用ELISA法进行腹水及血清CEA测定,以血清或腹水CEA浓度>5μg/L、腹水/血清CEA比值>1为阳性.结果:腹水CEA、腹水/血清CEA比值阳性和腹水中检出异倍体鉴别肝癌并腹水及非肝癌恶性腹水与良性腹水的灵敏度和特异度分别为35.48%,84%及72%,84%;35.48%%,98%及72%,98%;70.97%,86%和71.43%,86%.腹水中检出异倍体与腹水/血清CEA比值阳性联合检测鉴别肝癌并腹水及非肝癌恶性腹水与良性腹水的灵敏度分别为93.55%和92%,特异度均为100.00%.结论:DNA倍体分析联合腹水/血清CEA比值检测对于鉴别良、恶性腹水是有价值的生物学指标.
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直肠癌组织CD44v6,DNA含量的联合检测及临床意义
目的:探讨直肠癌CD44v6表达情况和DNA含量及其临床意义.方法:应用流式细胞术同时检测40例直肠癌及10例正常组织中CD44v6表达量和DNA含量.结果:直肠癌中CD44v6表达量和DNA含量均显著高于正常组织(70%vs0%,1.11±0.6vs0.9±0.65,P<0.01),肿瘤组织中CD44v6阳性表达与直肠癌浸润深度(0%vs50%vs80%vs100%)、淋巴结转移(93.3%vs56.0%)及Dukes分期(56.0%vs93.3%)有关(P<0.05);DNA异倍体与淋巴结转移(100%vs68%)及Dukes分期(68%vs100%)有关(P<0.05).CD44v6表达与肿瘤细胞DNA倍体无关(85.7%vs68.7%,P>0.05).结论:CD44v6表达异常及DNA倍体异常在直肠癌进展和浸润转移中起作用,联合检测CD44v6和DNA倍体可作为预测直肠癌进展程度、淋巴结转移有用的指标.
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子宫颈癌前病变组织DNA倍体分析与人乳头状瘤病毒亚型检测
宫颈癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,它由宫颈上皮内瘤变(CIN)发展而来,大部分CIN可自然消退,只有一小部分发展为浸润癌.宫颈癌筛查主要依靠细胞学检查, 但其对宫颈病变预测的相对特异性较低,单靠细胞学检查不能区分进展性和非进展性病变,因而需要检测其他标志物,如人乳头状瘤病毒(HPV)亚型和DNA倍体等来提高其诊断的特异性[1].本研究通过检测宫颈癌前病变组织中DNA倍体状态和HPV亚型感染情况,探讨HPV亚型、DNA异倍体在宫颈癌发生过程中的生物学特征以及对宫颈癌早期诊断的意义.
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引物原位标记技术快速检测胎儿13、21号染色体
染色体病是由于先天性染色体数目异常或结构畸变而引起的疾病.新生儿普查显示,13、18、21、X、Y异倍体染色体病占新生儿缺陷的95%[1].引物原位标记(PRINS)技术是将荧光原位杂交(FISH)的特异性与聚合酶链反应(PCR)的敏感性相结合,是快速、简便、可靠的检测染色体数目的方法.我们采用PRINS技术检测脐血13、21号染色体数目异常,探讨PRINS用于快速产前诊断的可行性.
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流式细胞仪DNA倍体分析用于良恶性胸腔积液的鉴别诊断
流式细胞术是近年来应用较广泛的一种现代细胞分析技术.研究显示,流式细胞术DNA倍体分析可以在92%的实体肿瘤上检测到DNA异倍体的存在.因此也被用到了恶性胸腔积液的诊断中.本文回顾了现有流式细胞术DNA倍体分析用于恶性胸腔积液诊断的研究,评估其临床可行性.
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胃癌端粒酶活性与DNA倍体的关系及临床意义
目的:探讨胃癌组织中端粒酶活性与DNA倍体的关系及临床意义.方法:用端粒酶重复序列扩增法(TRAP)检测胃癌组织中端粒酶的活性,用DNA图像分析仪(ICM)检测肿瘤细胞核DNA倍体.结果:胃癌组织中端粒酶的阳性表达率为81.25%,早期胃癌病例的阳性率55.5%,进展期胃癌的阳性率87.2%.48例中异倍体肿瘤33例,占68.7%.33例异倍体胃癌中91%(30/33)显示端粒酶活性.结论:胃癌组织中端粒酶活性与DNA异倍体率有明显的相关性,端粒酶的表达与胃癌的病程进展有关.
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B超引导下细针胰腺穿刺对胰腺癌诊断价值的探讨
目的 探讨B超引导下细针胰腺穿刺结合DNA倍体检查对胰腺癌的诊断价值.方法 选择2005年1月至2007年12月于我院就诊的疑似胰腺癌患者100例为研究对象.术前均行细针胰腺穿刺、细胞DNA倍体检查,并与术中探查结果进行比较.结果 B超引导下细针胰腺穿刺结合DNA倍体检查对胰腺癌诊断的灵敏度、特异度、约登指数分别为94.44%、85.71%、0.8015.结论 B超引导下细针胰腺穿刺结合DNA倍体检查对胰腺癌早期诊断具有较高的价值.
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检测宫颈癌中肿瘤细胞增殖相关因子的表达
目的:探讨p16、Cyclin D1、PTEN蛋白和DNA异倍体在宫颈癌中的表达意义.方法:采用免疫组织化学SP法和流式细胞仪技术检测19例正常宫颈NC、22例CIN.82例浸润性宫颈癌ICC中p16、CyclinD1、PTEN和DNA异倍体数的表达.结果:p16、CyclinD1、DNA异倍体从NC到CIN再到ICC中逐渐升高,而PTEN逐渐缺失,P<0.05;p16、FrrEN、CyclinD1与临床分期、淋巴转移相关,P<0.05;而DNA异倍体与各项参数均不相关(P>0.05).CyclinD1与p16、DNA异倍体、PTEN,P1EN和DNA异倍体表达相关(P<0.05),p16与PTEN、DNA异倍体不相关(P>0.05).结论:p16、CyclinD1、PTEN和DNA异倍体的异常表达共同影响了宫颈癌细胞的分裂周期,可以联合起来作为宫颈癌恶性生物学行为的观测和干预指标.
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端粒酶活性联合DNA异倍体检测在良恶性腹水鉴别诊断中的价值
目的:通过联合检测腹水端粒酶活性与流式细胞仪DNA异倍体检测,探讨两种检测方法在良恶性腹水鉴别诊断中的价值。方法收集良恶性腹水标本,使用端粒酶活性检测试剂盒检测端粒酶活性,使用流式细胞仪检测DNA异倍体。结果端粒酶活性检测和DNA异倍体检测诊断恶性腹水的敏感度分别为82.35%、78.43%,特异度分别为94.87%、97.87%。当同时联合两种检测方法,联合检测的敏感度可以达到96.07%,特异度和单个指标并无明显差异。结论端粒酶活性检测和DNA异倍体检测可以作为良恶性腹水鉴别诊断的有效方法。同时联合端粒酶活性检测和DNA异倍体检测可以增加恶性腹水的检出率。
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术前细针穿刺细胞DNA倍体检测在胰腺癌诊断中的应用价值
目的通过术前检测细胞DNA倍体情况,探讨DNA指数(DI)在胰腺癌诊断中的应用价值.方法选取疑诊胰腺癌病人30例行术前B超引导经皮穿刺,涂片行HE和改良Feulgen法染色,用ICM进行DNA含量测定.结果在终确诊的27例胰腺癌中,异倍体25例,其中HE诊断的敏感性是66.67%,DI值诊断的敏感性为92.6%,其差异具有统计学意义(P<0.05),良性病变3例均不属异倍体.在HE漏诊的9个病例中,8例根据DI值可作出正确判断,3例良性的DI值无假阳性结果.结论细针穿刺细胞DNA含量检测在术前胰腺癌的确诊中有着较重要的应用价值.
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流式细胞术检测宫颈细胞DNA倍体在宫颈病变中的应用
目的:探讨流式细胞术检测宫颈细胞DNA倍体在宫颈病变中的应用价值.方法:对290例患者的液基细胞学检测后剩余细胞行流式细胞术DNA倍体分析,其中非典型鳞状上皮增生(ASCUS)120例、低度宫颈上皮内瘤变(LSIL)90例、高度宫颈上皮内瘤变(HSIL)60例、鳞状上皮癌(SCC)20例.结果:①异倍体在ASCUS组、LSIL组、HSIL组、SCC组中检出率分别为3.3%、31.1%、85.0%、96.7%.②LSIL、HSIL、SCC 3组的异倍体率与ASCUS组比较有显著性差异(P<0.05);HSIL、SCC 2组的异倍体率与LSIL组比较差异显著(P<0.05);HSIL、SCC 2组的异倍体率之间无统计学差异(P>0.05).结论:DNA倍体分析可以作为宫颈病变早期的筛查手段.
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细胞周期检测、DNA倍体分析在乳腺癌诊断中的应用
乳腺癌是女性常见的乳腺疾病,占全身恶性肿瘤的1/5,其发病率有上升趋势,现已成为女性发病率高的恶性肿瘤[1].乳腺癌的发病机制非常复杂,其中细胞内DNA的异常增殖是导致乳腺细胞恶性增生的内在因素[2].乳腺癌的诊断方法目前虽然较成熟,但是从乳腺细胞内DNA含量的变化上、特点上对乳腺癌进行早期诊断,预后估测的方法尚不够成熟.有文献报道DNA异倍体几乎存在于所有的恶性乳腺肿瘤细胞中.有学者认为细胞核DNA含量和异倍体情况与乳腺导管癌的组织学诊断密切相关,低分化癌DNA含量往往表现为DNA异倍体[3].
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胃癌及癌前病变中DNA倍体分析及其临床意义
人体正常的体细胞均有较恒定的DNA二倍体含量,而在细胞癌变过程中将伴随细胞DNA含量的异常改变,当细胞内DNA含量异常时,用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测可检出DNA异倍体[1].
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胞浆内精子注射术后人受精卵显示3个原核和1个极体
Rosenbusch B, Schneider M, Kreienberg et al. Cytogenetic analysis of human zygotes displaying three pronuclei and one polar body after intracytoplasmic sperm injection. Hum Reprod , 2001 ,16(11):2362~2367.为探讨胞浆内精子注射术(ICSI)怀孕早阶段染色体异常的频率和机理,作者用细胞遗传学的方法分析受精卵的3个原核和1个极体,即用鬼臼毒素和长春碱孵育未被分开的单细胞受精卵,并用渐增固定的空气干燥法固定,染色体用吉姆萨染色.结果表明: 44个受精卵中有22个(50%)显示细胞遗传学的改变,包括异倍体(6,13.6%)、结构畸变(10,22.7%)、数量结构上的异常(2,4.5%);有1个病例(2.3%)不能区别是双异倍体或染色体异位、1个受精卵(2.3%)由于注射了二倍体精子而变成四倍体、有2个受精卵(4.5%)显示不规则的母体染色体分离.在完全可被分析的细胞中,性染色XXX:XXY为17∶ 15. 研究提示 ICSI产生的受精卵会出现由卵母细胞和精子带来的高比率的细胞遗传明显异常,这可能是由于ICSI导致的不规则的卵母细胞染色体分离引起,而卵母细胞中的异倍体则可能由前分裂代替不分裂引起.(王书奎摘译, 黄宇烽审校)
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实性型成釉细胞瘤的体外培养与检测
目的 观察体外培养的实性型成釉细胞瘤的生长特点.方法 对实性型成釉细胞瘤细胞进行体外培养,免疫组化证实其细胞来源,倒置显微镜观察细胞形态及生长情况,并用流式细胞仪分析细胞周期、噻唑蓝比色(MTT)法绘制细胞生长曲线.结果 贴壁的实性型成釉细胞瘤细胞为上皮来源,在体外原代培养的肿瘤细胞包含2种形态不同的细胞,肿瘤细胞生长缓慢.1例复发型的丛状型成釉细胞瘤的第2代细胞DI值出现异倍体.结论 成釉细胞瘤细胞增殖缓慢,复发型的成釉细胞瘤细胞在体外培养中随着传代次数的增加,细胞向恶性转化,可能与其恶变及侵袭性有关.
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口腔鳞状细胞癌的DNA定量分析及临床意义
目的 运用ICM?DNA定量分析系统研究口腔鳞状细胞癌的DI值及倍体分布情况,评估其与口腔鳞状细胞癌的临床病理因素的关系.方法 收集口腔鳞癌石蜡标本79例作为实验组,25例口腔正常黏膜组织和30例口腔黏膜异常增生作为对照组,经Feulgen染色后分组进行ICM?DNA定量分析.结果 实验组79例口腔鳞状细胞癌中异倍体出现率为55.7%(44/79),均明显高于对照组正常组织的0.0%(0/25)和口腔黏膜异常增生的46.7%(14/30),P=0.000;口腔黏膜异常增生组轻、中、重度三组间比较,异倍体出现率分别为0%(0/2)、14.3%(1/7)、61.9%(13/21),P=0.036;口腔鳞癌组高及中低分化组间比较,高分化组异倍体出现率42.5%(20/47)低于中低分化组为75%(24/32),P=0.004;有淋巴结转移的有78.6%出现异倍体(22/28),高于无淋巴结转移的43.1%(22/51),P=0.002.结论 口腔鳞状细胞癌中DNA异倍体出现率均高于正常组织和黏膜异常增生.ICM?DNA定量分析对于口腔鳞癌的诊断以及恶性程度的判断提供有价值的临床指标,有望用于口腔鳞癌的辅助性临床预测及诊断.