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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌胞外酶及核酸酶编码基因研究
目的:调查一组耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RS A )中蛋白酶、葡激酶、透明质酸酶、脂酶及核酸酶编码基因携带状况,分析M RS A胞外酶基因的构成。方法24株M RS A分离自浙江湖州解放军98医院,用仪器法和金黄色葡萄球菌看家基因spa PCR法鉴定菌种后,再作甲氧西林耐药决定基因 mecA PCR检测,确认为MR-SA ,采用聚合酶链反应(PCR)的方法检测丝氨酸蛋白酶编码基因 ssp、splB、葡激酶编码基因 sak、透明质酸酶编码基因 hysA、脂酶编码基因 lip及核酸酶编码基因nuc。结果6种酶分子编码基因均呈阳性,阳性率100.0%;杀白细胞素编码基因 pvl、lukE、psm-mec检出率分别为62.5%、100.0%、100.0%,lukM、psmα等两种基因中无阳性发现;溶血素编码基因 hla、hld、hlg-2检出率分别为91.7%、100.0%、100.0%,hlb、hlg等两种基因中无阳性发现;24株MRSA基因检测结果可分为3种阳性检出模式,其中 ssp、splB、sak、hysA、lip、nuc、pvl、lukE、psm-mec、hla、hld、hlg-2共12种基因阳性模式有15株,占62.5%。结论24株M RSA中的每一株均有多种胞外酶和多种细胞毒素编码基因阳性,胞外酶与细胞毒素的共同作用可能是金黄色葡萄球菌导致宿主炎症的主要机制, M RS A同时携带多种胞外酶和多种细胞毒素编码基因为国内首次发现。
关键词: 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 胞外酶 杀白细胞素 溶血素 致病性 -
CCN蛋白的功能与机制
近来研究发现细胞外基质(ECM)并不只是细胞的支架,它还能动态调节各种细胞的功能和行为.ECM能结合生长因子、细胞因子、化学因子和细胞外酶,并调节它们的生物利用度和活性.
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尿海藻糖酶活性催化光度法测定
海藻糖酶(Trehalase,T,EC3.2.1.28)是许多动物体内存在的一种胞外酶.人海藻糖酶仅产生于肾小管和小肠粘膜上皮细胞.由于尿海藻糖酶只特异性来源于损伤的近端肾小管上皮细胞,并且海藻糖酶在尿液中生理活性稳定,因此,尿海藻糖酶可作为一种较理想的反映近端肾小管损伤的标志物,其活性测定对于重金属盐中毒与药物的肾毒性、急慢性肾小球疾病以及肾小管-间质疾病等的诊断和病情监测具有重要应用价值[1-5].
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微生物硫酸软骨素裂解酶的研究进展
目的综述硫酸软骨素裂解酶的种类、分离纯化方法及药理学作用的研究进展.方法在检索国内外相关文献的基础上,对硫酸软骨素裂解酶的种类、分离纯化方法及药理学作用进行整理和归纳.结果硫酸软骨素裂解酶具有4种类型;硫酸软骨素裂解酶可作为工具酶及药用酶用于基础理论及药学领域的研究中.结论作为工具酶和药用酶,硫酸软骨素裂解酶在科研及医药领域拥有广阔的发展前景.
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提高耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎的临床诊治水平
金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)是一种具有显著耐药性和致病性的革兰阳性球菌,其有大量可移动的DNA片段能实现基因交换,这些特点使其成为主要的病原菌.金葡菌容易在皮肤、黏膜表面定植,一旦定植成功,金葡菌能产生多种毒力因子致病,如胞外酶和毒素.胞外酶包括蛋白酶、脂肪酶和透明质酸酶,可致组织破坏和促使感染播散.毒素包括溶血素、剥脱性毒素、杀白细胞毒素(PVL)、中毒性休克综合征毒素、肠毒素和a-毒素等,这些毒素与特定的疾病相关,可引起严重的局部和全身反应[1].临床上金葡菌常引起皮肤软组织感染、血流感染和肺炎.
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不典型双相型马尔尼菲青霉变异株的胞外蛋白酶测定
目的 比较马尔尼菲青霉变异株与普通株的胞外蛋白酶浓度.方法 将马尔尼菲青霉变异株(Y株)、标准株(A株)及普通株(M株、P株)同批分别接种到pH 4.0的沙氏、牛血红蛋白.酵母碳基(Hb-YCB)和牛血清清蛋白一酵母碳基(BSA-YCB)3种液体培养基,37℃培养9 d,取上清液,测定蛋白酶浓度,比较株间胞外蛋白酶浓度的差异及不同培养基对蛋白酶浓度的影响.结果 在以上3种培养基中培养,Y株的上清液蛋白酶浓度均显著高于其他3株菌(P<0.01).结论 Y株为高胞外蛋白酶浓度变异株.
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LOXL1基因rs2165241C/T多态性与开角型青光眼易感性的meta分析
青光眼是眼科常见病,其中约50%为原发性开角型青光眼(POAG)。流行病学研究提示POAG有遗传背景。随着分子遗传学的发展,发现10多个与POAG发生有关的基因,其中LOXL1是研究较多的基因之一。该基因属于赖氨酸氧化细胞外酶家族,编码的蛋白质具有多种生物学功能,如弹性蛋白的产生与交联等,因而, LOXLl基因与弹性蛋白在睫状体、角膜、晶状体囊膜、虹膜、视神经等部位的表达相关。近年来的研究显示LOXL1基因rs2165241C/T多态性与开角型青光眼易感性存在一定的关系,但结果并不完全一致[1,2]。为此,本文采用meta分析对LOXL1基因rs2165241C/T多态性与开角型青光眼易感性关系做一系统评价。
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单克隆抗体导向治疗血液肿瘤的研究进展
自从1975年Kohler和Milstein发明了杂交瘤单克隆抗体(单抗)技术以来,已有数百类人类血细胞分化抗原单抗研究成功.截至2000年6月第7届国际人类白细胞分化抗原命名大会(HLDA7),已有247个分化簇(clusterof differentiation)被正式命名.根据抗原分子在血细胞上的不同表达及功能,可分为T细胞、B细胞、髓细胞、NK细胞、树突状细胞、非谱系、血小板、内皮细胞、黏附分子、细胞因子及受体、细胞外酶、红细胞、造血干/祖细胞、碳水化合物/凝集素、动物同源分子共15组.白细胞分化抗原单抗的制作成功,为血液恶性肿瘤的导向治疗提供了工具.
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小儿扁桃体炎和咽喉炎化脓性链球菌感染率及药物敏感试验
化脓性链球菌是人类疾病和医院感染的主要病原菌之一,其引起的疾病约占人类链球菌感染的90%[1-3],该菌有较强的侵袭力,能产生多种胞外酶和外毒素[3].随着抗菌药品种和使用数量的大幅度增加,病原菌耐药性日益严重,对其耐药性进行监测,以便临床掌握合理选用抗菌药,有效地控制感染是临床微生物工作者一项重要工作.
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酵母样真菌胞外酶法快速鉴定可信度的评价
目的:评价酵母样真菌快速鉴定板(Rapid Yeast ID)对不同培养基培养出的酵母样真菌鉴定结果的可信度.方法:采用酵母样真菌快速鉴定板对沙保氏葡萄糖培养基、血液琼脂培养基、普通营养琼脂培养基、科玛嘉显色培养基生长菌落直接鉴定的结果,与采用传统常规生化鉴定结果进行一致性的比较.结果:酵母样真菌快速鉴定板对沙保氏葡萄糖培养基鉴定结果与传统生化鉴定符合率为97.3%,而其它培养基(血液琼脂培养基、普通营养琼脂培养基、科玛嘉显色培养基)符合率为86.0%,经χ2检验有显著性差异(P<0.01).结论:酵母样真菌快速鉴定板适合沙保氏葡萄糖培养基,对其它培养基鉴定结果的可信度低.
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API-ZYM系统在部分真菌胞外酶种类分析中的应用
目的 探讨API-ZYM系统在真菌胞外酶种类分析中的应用价值.方法 4种马拉色菌(糠秕、钝形、合轴、斯洛菲)、白念珠菌和烟曲霉经纯化培养后用生理盐水终配成浊度为0.5麦氏单位的菌悬液,使用API-ZYM系统对菌悬液进行19种酶定性测定.结果 马拉色菌、白念珠菌和烟曲霉间胞外酶谱有较大差异,但均含有碱性磷酸酶、酯酶C4、类脂酯酶C8、白氨酸芳胺酶、酸性磷酸酶、萘酚-AS-BI-磷酸水解酶;4种马拉色菌胞外酶谱相似,均含有3种酯酶.结论 API-ZYM系统对真菌胞外酶谱的测定可用于菌属间鉴别.