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微波法提取沙棘总黄酮的工艺研究
目的 研究微波法提取沙棘总黄酮的佳提取条件.方法 首先用石油醚对沙棘进行脱脂处理,然后在单因素试验基础上,以乙醇浓度、微波功率、提取时间、料液比为因素,选取不同水平,以沙棘总黄酮提取率为评价指标,通过正交试验筛选出佳提取工艺.结果 实验选取的四个因素中,乙醇浓度和料液比对沙棘总黄酮提取率影响显著;微波法提取沙棘总黄酮的佳提取工艺条件为乙醇浓度75%,微波功率300 W,提取时间2 min,料液为1:20,沙棘总黄酮提取率高可达3.9%.结论 微波法提取沙棘总黄酮有时间短、提取效率高、对沙棘活性成分破坏较少等优点,可以为沙棘资源的综合开发提供参考.
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UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用分析黄芪根及其茎叶中黄酮和皂苷类成分
目的 利用UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪联用技术,分析黄芪根及其茎叶中的黄酮和皂苷类成分.方法 以90%甲醇提取黄芪根及其茎叶作为提取液制备供试品溶液,采用Hypersil GOLD C18(100×2.1 mm,1.9 μm)进行色谱分离,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,质谱采用正负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描的方法,对黄芪根及其茎叶中的黄酮和皂苷类成分进行分析和鉴定.结果 通过高分辨质谱采集的数据,终黄芪根中共鉴定了18种化合物,黄芪茎叶中共鉴定了17种化合物.其中,黄芪根中有12个化合物通过与对照品进行比对明确指认,黄芪茎叶中有10个化合物通过与对照品进行比对明确指认.结论 通过利用 UPLC-Q-Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术,将黄芪根及其茎叶中黄酮和皂苷类成分进行了指认和比较,两者有12个共有成分、11个区别成分,表明黄芪根与其茎叶相比较,虽来源于药用植物黄芪的不同药用部位,但就其主要化学成分而言,有很多相同的成分,也有区别的成分,相关这些区别成分的研究为进一步探究黄芪茎叶药效物质基础指明了方向.
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返魂草有效成分的提取工艺研究
目的：优化返魂草总黄酮的提取工艺。方法：以返魂草中总黄酮含量为考察指标，通过单因素实验考察超声时间、温度、功率等对返魂草有效成分含量的影响，采用正交设计实验法确定佳提取工艺。结果：乙醇回流法提取佳工艺为：提取时间150 min，溶剂70％乙醇，液料比22∶1。结论：乙醇回流法提取返魂草总黄酮操作方便，工艺稳定，重现性好，适于工业化生产。
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蝉拟青霉/黄芪双向发酵体系建立及成分研究
目的:建立蝉拟青霉/黄芪药材、黄芪药渣双向发酵体系,探究发酵过程中有效成分含量变化.方法:选取正交设计法对接种量、发酵温度、湿度进行优化,并采用硫酸-苯酚比色法、NaNO2-Al(NO3)3比色法及香草醛-高氯酸氧化法对发酵黄芪及黄芪药渣菌质中的多糖、总黄酮、总皂苷的含量进行测定.结果:药材菌质优发酵条件为温度26℃,湿度90％,接种比例3 mL/5 g,药渣菌质优发酵条件为温度26℃,湿度80％,接种比例3 mL/5 g;经发酵后,黄芪药材菌质中多糖、总皂苷含量略减少,而黄酮含量有所增加;黄芪药渣菌质中黄酮、皂苷含量均增加.结论:蝉拟青霉可对黄芪药材和药渣基质进行发酵,且发酵后菌质中有效成分的得率显著增加,增强了黄芪药材的药用价值,并为药渣的处理提供了新的思路.
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HPLC 法测定药用菊花中10个主要化学成分的含量
目的：建立 HPLC 法测定菊花药材中10个主要化学成分的含量，包括5个咖啡酰奎宁酸类成分和5个黄酮类成分。方法：采用 DiamonsilTMC18（4．6 mm ×250 mm，5μm）色谱柱，流动相为乙腈-0．05％甲酸，流速1．0 mL／min，检测波长335 nm，柱温40℃。结果：10个化合物在一定范围内与峰面积呈良好的线性关系，r 值均大于0．9995；平均加样回收率（n ＝6）范围为95．6％～100．3％，RSD 为0．66％～1．95％。结论：本文所建立含量测定方法可作为中药菊花的质量控制的有效方法，为明确不同品种菊花的基原关系和品种鉴定研究提供了数据基础。
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臭牡丹总黄酮抑制小鼠 Lewis 肺癌实体瘤及其与 p53、bcl-2、bax 表达相关性研究
目的：探讨臭牡丹总黄酮对 Lewis 肺癌小鼠的抑瘤作用及其与 p53、bcl-2、bax 基因表达的相关性。方法：取近交系雄性 C57BL／6小鼠50只，造模，将造模成功的 Lewis 肺癌小鼠40只随机分成模型组，顺铂组，臭牡丹总黄酮高、低剂量组；另取10只无瘤小鼠作为空白对照组。腹腔注射给药，模型组给予生理盐水0.01 mL／g，连续14 d；顺铂组给予顺铂0.4 mg／kg 连续5 d；臭牡丹高、低剂量组分别予臭牡丹总黄酮提取物0.6 g／kg、0.3 g／（kg·d），连续14 d。给药结束后次日处死小鼠，称取瘤重，计算肿瘤抑制率，采用 Real-time PCR 法检测 p53、bcl-2及 bax mRNA 的表达水平。结果：1）对瘤重影响：4组瘤重结果如下（珋x ±s）：模型组（4.70＋1.29）g、顺铂组（2.24＋0.68）g、总黄酮高剂量组（3.26±1.06）g、总黄酮低剂量组（3.99±1.31）g；其中顺铂组、总黄酮高剂量组瘤重低于模型组（P ＜0.05），并且该2组瘤重无统计学意义（P ＞0.05）。2）肿瘤抑制率：顺铂组：53.4％；臭牡丹总黄酮高剂量组：30.6％，臭牡丹总黄酮低剂量组：15.1％。3）对基因表达影响：臭牡丹总黄酮高、低剂量组皆能上调 p53和 bax mRNA 表达（高剂量组 P ＜0.01，低剂量组 P ＜0.05）；顺铂组能下调bcl-2（P ＜0.05）及上调 bax mRNA 表达（P ＜0.01）。结论：臭牡丹总黄酮能够改善 Lewis 肺癌小鼠生存状况，能有效抑制肿瘤生长；并且其抑制肿瘤生长的分子机制可能与上调 p53和 bax mRNA 的表达以诱导肿瘤细胞凋亡有关。
关键词： 臭牡丹 黄酮 Lewis 肺癌 Real-time PCR -
骨碎补总黄酮通过激活mTOR信号通路促进大鼠腱骨愈合的实验研究
目的:探讨骨碎补总黄酮对大鼠腱骨愈合的作用及相关分子机制.方法:选取10只8周龄雄性SD大鼠(体重180～220 g),培养原代跟腱干细胞,取第3代跟腱干细胞用于实验.向大鼠跟腱干细胞中加入不同浓度(0、0.1、1、10 ng/ml)骨碎补总黄酮处理,14d后分别检测ALP、Runx2、OCN、VEGF、P-S6和P-4E/BP1表达的变化.选取40只8周龄的雄性SD大鼠(体重180～220 g)行大鼠关节外骨隧道-游离肌腱移植造模,术后随机分为实验组和对照组,实验组灌胃骨碎补总黄酮(100 mg· kg-1· d-1),对照组灌胃等量的生理盐水.分别于术后3、6周取材进行生物力学检测腱骨愈合强度,组织学切片观察腱骨愈合情况及新生血管数目.结果:不同浓度的骨碎补总黄酮处理后,ALP染色及活性指标检测提示0 ng/ml组(0.55±0.11)、0.1 ng/ml组(0.87±0.08)、1 ng/ml组(1.18±0.11)、10 ng/ml组(1.48±0.10),各组比较差异有统计学意义(P＜0.05);体外培养14d后提取细胞蛋白免疫印迹实验提示,随着骨碎补总黄酮浓度的增加,mTOR下游标记蛋白P-S6蛋白表达量逐渐增加(P＜0.05),P-4E/BP1蛋白表达量逐渐减少(P＜0.05),成骨相关蛋白Runx2、OCN,VEGF表达量逐渐增加(P＜0.05).生物力学检测显示术后3周时,对照组(0.51±0.02) N/mm和实验组(0.78±0.05) N/mm力学强度比较差异无统计学意义(P＞0.05),而6周时实验组(1.36±0.09) N/mm的力学强度明显高于对照组(1.01±0.08) N/mm (P＜0.05).组织学结果显示实验组3周和6周时腱骨界面细胞成熟程度更高,Sharpey纤维生长更加密集,间质钙化程度更高,新骨和血管发生明显增多.结论:骨碎补总黄酮可以通过激活mTOR信号通路,促进肌腱干细胞的成骨分化,在活体可以加快腱骨愈合速度,提高腱骨愈合质量.
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万寿菊茎叶中2种黄酮类化合物的体外抗肿瘤活性
目的:研究万寿菊茎叶中两种黄酮类化合物4'-甲氧基-泽兰素-3-O-β-D-葡萄糖苷(化合物Ⅰ)和山柰酚-3,7-O-α-L-双鼠李糖苷(化合物Ⅱ)的抗肿瘤活性.方法:人胃癌细胞SGC7901与人肝癌细胞SMMC7721经20,40,80,120,160μmol·L-1的两种化合物作用24,48,72 h后,使用MTT法测定抑制率,并以5-氟脲嘧啶作为阳性对照.使用吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法观察浓度为160 μmol·L-1的两种化合物作用于细胞密度为1×106个/mL的2种肿瘤细胞48 h细胞形态学变化及细胞凋亡情况.结果:不同浓度的两种黄酮类化合物均可抑制人胃癌细胞SGC7901和人肝癌细胞SMMC7721的增殖,且呈现浓度与时间依赖性.化合物Ⅰ作用这2种癌细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为111.7,330.4 mg·L-1.化合物Ⅱ作用这两种癌细胞48 h的IC50分别为683.8,464.7 mg·L-1.2种化合物作用肿瘤细胞后细胞形态发生改变,并有部分细胞发生凋亡.结论:万寿菊茎叶中分离的2种黄酮类化合物具有体外抗肝癌和胃癌活性.
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夏枯草对氧化应激损伤的保护作用研究
目的:研究夏枯草对小鼠急性束缚应激损伤的保护作用和主要功效成分分析.方法:将雄性Balb/C小鼠分为正常组,束缚模型组,1.25,2.50,7.50 g·kg-1夏枯草干预组.连续给药5d后,束缚模型组和夏枯草干预组小鼠急性束缚2h,所有小鼠分别检测脑组织的总活性氧(总ROS),过氧化氢(H2O2),丙二醛(MDA),8羟基鸟嘌呤(8-OHdG)和蛋白质羰基含量,并观察超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.以硝酸铝显色法测定总黄酮,香草醛显色法检测总三萜,硫酸-苯酚法测量总多糖含量,并以ORAC法分别检测3种物质的总抗氧化能力.结果:与正常组比较,2h急性束缚可增加小鼠脑组织中的H2O2,MDA,8-OHdG,蛋白质羰基含量,降低SOD酶活性(P ＜0.05,P＜0.01),但总ROS含量和GSH-Px酶活性变化不明显.与束缚模型组比较,夏枯草能减少小鼠脑组织中H2O2,MDA和蛋白质羰基含量,增强SOD酶活性(P＜0.05,P＜0.01).夏枯草的总黄酮、总三萜和总多糖含量分别为8.91,2.45,10.16 mg·g-1.总黄酮、总三萜和总多糖ORAC结果分别为(127.5±1.0),(45.75±2.5),(2.25±0.75) mmol· L-1.结论:夏枯草对急性束缚应激诱发小鼠氧化损伤具有一定的保护作用,黄酮可能是抗氧化应激作用的主要功效成分.
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鸡血藤黄酮类组分抗肿瘤活性研究
目的:通过体外、体内实验研究鸡血藤黄酮类组分的抗肿瘤作用.方法:采用MTT法,观察鸡血藤黄酮类组分体外对人肺癌(A549)和人大肠癌(HT-29)细胞系的生长抑制率;应用流式细胞术检测肿瘤细胞周期的改变.采用小鼠移植性Lewis肺癌模型,观察鸡血藤黄酮类组分体内的抑瘤效应及对荷瘤小鼠造血功能的影响.结果:鸡血藤黄酮类组分对人肺癌A549和人大肠癌HT-29细胞系有明显生长抑制作用,IC50分别为70.17±12.17 μg·mL-1和126.81±43.00 μg·mL-1.高剂量(0.6g·kg-1)灌胃时,对小鼠Lewis肺癌的抑制率为31.01%.该组分能促进红细胞生成,高剂量组红细胞计数比对照组增加40.52%.进一步研究发现,鸡血藤黄酮类组分能阻滞肺癌细胞系A549于S和G2/M期,阻滞肠癌细胞系HT-29于G2/M期.结论:鸡血藤黄酮类组分具有直接抗肿瘤作用,细胞周期阻滞是其药效作用机制之一.该组分无骨髓抑制作用,对红细胞生成有一定促进作用.
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黄芩主要黄酮成分的抗抑郁活性筛选
目的:对黄芩中4种主要黄酮成分进行抗抑郁活性筛选.方法:雄性ICR小鼠随机分为10组,分别为:空白对照组、阳性对照氟西汀组(20 mg·kg-1)、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷和汉黄芩素治疗组.其中4种黄酮各自分为10 mg·kg-1和20 mg·kg-12个剂量组.连续ig给药7d.末次给药1h后,分别采用强迫游泳、悬尾和开场实验对小鼠进行行为学观察.结果:与空白对照组相比,20 mg· kg -1的黄芩苷、黄芩索、汉黄芩苷和汉黄芩素可分别将强迫游泳小鼠不动时间由(107.6±28.5)s缩短至(64.4±25.1),(73.2±30.B),(69.6±20.4),(79.7±32.6) s.并将悬尾不动时间由(85.2±27.3)s缩短至(43.1±16.4),(52.0±21.1),(48.3±25.9),(62.2±35.8)s,差异具有显著性意义,其中以黄芩苷和汉黄芩苷的作用尤为显著.另外,4种黄酮成分对小鼠的自发活动无明显影响.结论:4种黄酮成分均具有不同程度的抗抑郁活性,其中黄芩苷、汉黄芩苷的活性较强,这可能与这些药物在体内的代谢过程有关.
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青天葵中黄酮类化合物的体外抗肿瘤实验研究
目的:观察青天葵中黄酮类化合物鼠李柠檬素和鼠李秦素对7种肿瘤细胞的抑制作用.方法:采用MTr法测定了它们各自对白血病细胞株L1210和P388DI、宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SC,C7901、黑色素瘤细胞株B16、神经性肿瘤细胞株NGl08.15、人肝癌细胞株Hele7404的生长抑制情况.结果:鼠李柠檬素对L1210,P388DI,Hela,B16,NGl08-15和 Hele7404 6种瘤株都有直接抑制作用,而且都随着浓度的增加,抑制作用增强.但鼠李柠檬素对瘤株SC,C7901基本无抑制作用,鼠李秦素对7种瘤株均无抑制作用.结论:鼠李柠檬素具有一定的体外抗肿瘤作用,初步确定鼠李柠檬素为青天葵抗肿瘤的活性成分之一.鼠李秦紊基本无抗肿瘤作用.
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荞麦花叶总黄酮对阿霉素致心力衰竭大鼠的保护作用及机制
目的:观察养麦花叶总黄酮(TFBFL)对阿霉素致心力衰竭大鼠的保护作用并分析其可能机制.方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、养麦花叶总黄酮低、中、高剂量组(100,200,400 mg· kg-1)及卡托普利组(10 mg·kg-1).采用腹腔注射阿霉素建立大鼠心衰模型,于造模第4周各组同时灌胃给予治疗药物,1次/d,连续3周.末次给药后测定各组大鼠心功能指标;放射免疫法测定血清心钠素(ANP)、脑钠素(BNP)水平;ELISA法检测血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠心功能各项指标如左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压大上升、下降速度(±dp/dtmax)及血清中ANP,BNP,NO,NOS,IL-1β,IL-6及TNF-α水平均出现显著升高(P ＜0.05,P＜0.01);与模型对照组比较,TFBFL各剂量组大鼠上述心功能各项指标及血清中各指标均出现不同程度的降低(P ＜0.05,P＜0.01).结论:TFBFL可改善阿霉素致心衰大鼠心功能,其机制可能与其降低血清中ANP,BNP,NO,NOS,IL-1β,IL-6及TNF-α水平相关.
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金钱草黄酮提取物对大鼠肾脏草酸钙结石形成的影响
目的:探讨金钱草黄酮提取物对大鼠肾草酸钙结石形成的影响.方法:饲喂1％乙二醇溶液建立大鼠肾草酸钙结石模型,分别给予100,200,400 mg·kg-13种剂量的金钱草黄酮提取物6周.用离子对高效液相色谱法测定大鼠尿中草酸浓度、含量,全自动生化分析仪测定血清尿素氮(BUN),Cr及Ca2,p3+,K+,Na+含量,原子吸收光谱仪测定肾组织及尿Ca2+,Mg2+含量,尿总Ca2+,Mg2+含量测定,显微镜下观察肾小管中草酸钙结晶分布和肾小管扩张情况.结果:不同剂量黄酮组大鼠肾Ca2+含量、24 h尿Ca2+分泌量,肾组织的草酸钙晶体沉积及肾小管扩张均明显低于草酸钙结石模型组(P＜0.05),黄酮组大鼠尿草酸浓度和24 h累积草酸含量和草酸钙结石模型组间无明显差异.结论:金钱草黄酮提取物能抑制实验性高草酸尿症大鼠肾脏草酸钙晶体的形成.干预实验大鼠体内钙代谢可能是金钱草黄酮提取物抑制大鼠肾脏草酸钙晶体形成的途径之一.
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玉郎伞黄酮对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用
目的:研究玉郎伞黄酮(YLSF)对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用及机制.方法:将小鼠分为正常对照组(NC),模型对照组(MC),YLSF高(YLSFH)、YLSF中(YLSFM)、YLSF低(YLSFL)剂量组,及联苯双酯组(BPDC).NC组及MC组以生理盐水ig,各剂量YLSF组和阳性对照组分别给予YLSF(112,56,28 mg·kg-1)和BPDC(150 mg·kg-1) ig,连续给药7d,每天1次.以分光光度法测定各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性、白蛋白(Alb)含量以及总抗氧化能力(T-AOC),以及肝组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,并于光镜观察小鼠肝损伤程度.结果:YLSF高、中剂量YLSF能降低血清AST、ALT、ALP含量(P＜0.01)及肝组织MDA含量(P＜0.01),增加血清Alb含量(P＜0.01),提升血清T-AOC水平(P＜0.01)及肝组织T-SOD活力(P＜0.01)；低剂量YLSF能降低血清AST、ALP含量(P＜0.01或P＜0.05)及肝组织MDA含量(P＜0.01),增加血清Alb含量,但对小鼠血清ALT含量、血清T-AOC水平及肝组织T-SOD活力的影响无统计学意义.同时,各剂量YLSF均能减轻肝细胞损伤程度(P＜0.01,P＜0.05).结论:YLSF对CCl4诱导的小鼠急性化学性肝损伤具有显著保护作用,其作用机制可能与其抗氧自由基抑制脂质过氧化作用有关.
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坤泰胶囊化学成分的LC-ESI-MS/MS分析
目的:建立坤泰胶囊中化学成分的高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-ESI-MS/MS)并对其化学成分进行初步鉴定.方法:采用LC-ESI-MS/MS对坤泰胶囊进行成分分析与鉴定,选用C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-,柱温30℃.质谱使用电喷雾(ESI)离子源,正离子模式采集数据.质量扫描范围为m/z 50～1 500.对各色谱峰质谱图进行分析,根据准分子离子峰判断相对分子质量,进一步根据各主要碎片离子、紫外光谱、保留时间等信息,与文献数据进行比较推测化合物的结构.结果:从坤泰胶囊中鉴定了21个化合物,主要为黄酮类化合物和生物碱类化合物,并对化合物的药材来源进行了归属.其中,主要有来自黄芩的黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等,来自黄连的巴马汀、小檗碱、黄连碱、药根碱、非洲防己碱、木兰花碱等,来自白芍的芍药苷等.结论:采用LC-ESI-MS/MS能够对坤泰胶囊中主要成分进行快速分析与鉴定,为坤泰胶囊进一步开展指纹图谱、质量控制、药物代谢研究和谱效关系研究奠定了基础.
关键词： 坤泰胶囊 化学成分 生物碱 黄酮 高效液相色谱-电喷雾质谱 -
香椿果抗补体活性成分
目的:研究香椿果抗补体活性成分.方法:采用溶血法进行抗补体活性筛选,然后利用溶剂萃取和多种色谱技术分离纯化,以1H-NMR,13C-NMR波谱方法,结合文献数据,鉴定化合物结构.结果:香椿果提取物具有显著抗补体活性,经溶剂萃取,其中乙酸乙酯部位为活性部位,从中分离得到14个化合物,分别鉴定为没食子酸(1),没食子酸甲酯(2),6-O-没食子酰基-葡萄糖(3),1,2,3-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(4),1,2,6-三-O-没食子酰基β-D-葡萄糖(5),1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(6),1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(7),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(8),芦丁(9),异鼠李素-3-O-β-半乳糖苷(10),槲皮素-3-O-β-半乳糖苷(11),山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(12),山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(13),槲皮素(14).其中化合物3 ～ 14为首次从香椿果中分离得到,化合物5,10,11为首次从香椿中分离得到.化合物4～7有显著抗补体活性,半数抑制浓度(IC50)分别为88.3,76.2,13.9,9.6 μmol·L-1.结论:香椿果活性部位为乙酸乙酯萃取部位,活性成分为其中没食子酰基葡萄糖苷衍生物和黄酮苷,前者抗补体活性显著强于后者,并且其抗补体活性随着与葡萄糖羟基相连接的没食子酰基数目的增加而增强.
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连钱草中黄酮、有机酸类成分的HPLC指纹图谱
目的:建立连钱草药材中黄酮、有机酸类成分的HPLC指纹图谱分析方法,为整体控制和评价连钱草药材的质量提供依据.方法:采用大连依利特Hypersil BDS C18(4.6 mm ×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1％磷酸梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长330nm.结果:建立了连钱草药材黄酮、有机酸类成分的HPLC指纹图谱,标定了17个共有峰,其精密度、稳定性、重复性均符合指纹图谱技术要求(RSD＜5％),13批连钱草药材的相似度在0.713 ～0.987.结论:该指纹图谱方法简便、准确、重复性好,可作为连钱草药材质量控制的依据.
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野生与栽培苦参药材的黄酮含量比较
目的:建立了苦参药材中10种黄酮类成分(染料木苷,三叶豆紫檀苷,马卡因,异黄腐醇,苦参醇Ⅰ,槐黄醇,苦参酮,降苦参酮,2-O-甲基苦参酮及异苦参酮)HPLC测定方法,并对野生与栽培苦参黄酮类成分含量进行比较研究.方法:色谱条件为Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇(A)-0.3％甲酸水(B)为流动相进行梯度洗脱(0～5 min,50％A;5 ～ 25 min,50％ ～70％ A;25 ～35 min,70％ A;35 ～50 min,70％ ～90％ A;50 ～55 min,90％ A),流速0.8 mL· min-1,检测波长设定295 nm,数据处理采用独立样本t检验,辅以聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)方法进行评价.结果:独立样本t检验显示,各类成分均表现为P＞0.05,即野生品与栽培品在黄酮类含量上无差异;聚类分析和主成分分析也表现为栽培品与野生品苦参黄酮类成分无差异.方法学考察表明10种黄酮类成分具有较好的线性,在其线性范围内r值均＞0.999.平均加样回收率在95.0％ ～ 105.0％,RSD均在5％以内,符合含量测定的要求.结论:该测定方法快速、准确,可为苦参的质量控制方法提供参考.
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荔枝黄酮提取和大孔树脂分离及其组分的HPLC分析
目的:研究荔枝黄酮提取分离工艺及其产物黄酮组分构成.方法:采用紫外吸收芦丁标准曲线法测定荔枝黄酮含量,比较乙醇水溶液和酸化乙醇水溶液提取荔枝黄酮效果,优化大孔树脂分离荔枝黄酮粗提物,采用HPLC图谱法分析荔枝黄酮提取分离产物的黄酮组分.结果:采用紫外吸收芦丁标准曲线法检测荔枝黄酮含量方法简便、有效；70％乙醇水溶液提取荔枝黄酮较其酸化溶液有更好的提取效果,且粗提物黄酮组分更简单,该法提取荔枝皮黄酮粗提物得率达到(92.5±2.0)％,纯度(28.7±1.8)％；在比较的6种大孔树脂中,AB-8分离荔枝黄酮效果好,以80％乙醇水溶液为洗脱剂分离荔枝黄酮,得率为(86.5±2.1)％,纯度达到(68.6±1.5)％.结论:采用70％乙醇水溶液提取结合大孔树脂AB-8分离荔枝黄酮工艺简单而有效.
