首页 > 文献资料
-
高效液相色谱法测定宁神补心片丹参酮ⅡA的含量
目的:建立高效液相色谱法测定宁神补心片中丹参的丹参酮ⅡA含量.方法:利用Lichrospher5-C18色谱柱,流动相甲醇-水为73∶27,检测波长为270 nm,流速1.6 mL/min,柱温为30℃.结果:进样量在0.208～1.664 μg范围内呈现良好的线性关系,回归方程为Y=2.735×107X+8.870×105,r=0.9996,平均回收率为98.54%,RSD=1.33%(n=5).结论:该方法快速简便,准确可靠,灵敏度高,可用于宁神补心片的质量控制.
-
丹参酮ⅡA对大鼠急性脊髓损伤SOCS3/STAT3信号通路的影响
目的:通过观察丹参酮ⅡA对大鼠急性脊髓损伤后细胞因子信号抑制因子3(Suppressors of Cyto-kine Signaling-3,SOCS3)/信号转导与转录激活子3(Signal Transducer and Activator of Transcription-3,STAT3)信号通路表达的影响,探讨丹参酮ⅡA对大鼠急性脊髓损伤炎性反应的影响.方法:60只健康SD大鼠随机分为脊髓损伤组(对照组)、脊髓损伤/丹参酮IIA治疗组(观察组)2组,每组30只.制作脊髓损伤动物模型.各组分别在脊髓损伤后8 h、1 d、3 d、7 d、14 d取材.分析大鼠脊髓损伤后运动诱发电位(MEP)的潜伏期及波幅;RT-PCR半定量分析脊髓组织中SOCS3 mRNA、STAT3 mRNA的表达;TUNEL法行神经细胞凋亡检测.结果:与对照组比较,观察组MEP潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),MEP波幅则明显增高(P<0.05);SOCS3 mRNA表达明显增高、STAT3mRNA表达明显下降;神经细胞凋亡有所减少(P<0.05).结论:丹参酮IIA可提高SOCS3表达,抑制STAT3表达,抑制神经细胞的凋亡,减轻神经功能缺失,对急性脊髓损伤大鼠有一定的保护作用.
-
丹参酮ⅡA对心血管系统药理作用的研究进展
丹参酮ⅡA是中药丹参中主要有效活性成分,能通过多种机制等发挥保护心血管系统的作用.文中总结了近年来科研工作者对丹参酮ⅡA对心血管系统的保护作用的基础研究,为丹参酮ⅡA更广泛应用于临床心脑血管等疾病的治疗提供保障.
-
丹参酮ⅡA对房颤大鼠心房肌组织LTCCα1c mRNA表达的干预研究
目的:探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对房颤(AF)大鼠心房肌细胞L型钙通道α1c亚单位(LTCCα1c或CaLα1c)mRNA表达的影响,揭示活血祛瘀中药预防和治疗房颤的作用机制.方法:采用乙酞胆碱-氯化钙(Ach-CaC12)药物经尾静脉注射法复制AF大鼠模型,随机分成3组:模型组、丹参酮治疗组、维拉帕米干预组,并设正常对照组.2周后,应用免疫组化方法和RT-PCR法检测心房肌细胞CaLα1 c mRNA及蛋白表达变化.结果:与正常对照组相比,模型组CaLα1c亚单位mRNA表达水平降低,L型钙通道(LTCC)蛋白表达水平减低,两组比较具有差异性(P＜0.05)；与模型组比较,丹参酮治疗组、维拉帕米干预组均明显改善了房颤大鼠心房组织CaLα1c亚单位mRNA表达和蛋白表达水平减低状态(P＜0.05).结论:丹参酮ⅡA能够改善房颤大鼠心房肌细胞重构过程的损伤程度,可能是其干预治疗房颤的靶点之一.
关键词： 丹参酮ⅡA L型钙通道α1c亚单位 房颤 -
丹参酮ⅡA对血管平滑肌细胞内质网应激相关基因表达的影响
目的:研究丹参酮ⅡA对同型半胱氨酸(HCY)诱导增殖血管平滑肌细胞(VSMC)内质网应激(ERS)相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)表达的影响,探讨丹参酮ⅡA抗动脉粥样硬化的机制.方法:建立HCY诱导的兔VSMC增殖模型,与不同浓度的丹参酮ⅡA共同培养,Annexin/PI双染法、原位缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率,观察凋亡细胞形态；实时荧光定量PCR检测Bip基因表达.结果:丹参酮ⅡA可显著促进兔VSMC凋亡,细胞凋亡率与HCY组相比差异显著(P＜0.01),且存在剂量依赖性；丹参酮ⅡA组Bip mRNA表达水平显著升高,与HCY组相比差异显著(P＜0.05,P＜0.01).结论:丹参酮ⅡA上调Bip基因表达,放大ERS信号,诱导兔VSMC凋亡,可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一.
关键词： 丹参酮ⅡA 血管平滑肌细胞 同型半胱氨酸 免疫球蛋白重链结合蛋白 细胞凋亡 -
丹参素和丹参酮ⅡA对大鼠肠系膜微循环障碍的影响
目的:探讨丹参素和丹参酮ⅡA对肠系膜微循环障碍的影响.方法:将SD大鼠40只,随机分成5组,分别为正常组、模型组、阳性药酚妥拉明组(10 mg·kg-1),丹参素组(30 mg·kg-1)和丹参酮ⅡA组(30 mg·kg-1).通过向肠系膜滴加去甲肾上腺素(NA)造成局部微循环障碍,一次性经舌下静脉注入药物(丹参素、丹参酮ⅡA和酚妥拉明或者生理盐水),10 min后向将近回盲部的20 cm的肠系膜区域滴加0.05 g·L-1的NA溶液100 μL,观察滴加NA后1,3,5,10,20,30 min时的大鼠肠系膜微动脉管径,并记录肠系膜微动脉血液流态镜下血液流态、毛细血管开放率和血流恢复时间.结果:与正常组比较,模型组NA对肠系膜微动脉有明显的收缩作用,血液流态分数明显增加,毛细血管开放率明显降低,血流恢复时间明显升高,均具有明显统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,丹参素和丹参酮ⅡA能在一定程度减轻NA对肠系膜微动脉的收缩作用,改善血液流态,提高肠系膜毛细血管网交点开放率,缩短微循环障碍的恢复时间(P ＜0.05,P＜0.01).结论:丹参素和丹参酮ⅡA能改善NA引起的大鼠肠系膜微循环障碍.
-
丹参酮ⅡA抗心肌细胞氧化应激作用及抗增殖蛋白功能研究
目的:观察丹参酮ⅡA对过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的保护作用及其对抗增殖蛋白(prohibitin,PHB)表达的影响,研究PH B蛋白在心肌细胞氧化应激中的作用.方法:实验组分为正常对照组、氧化应激组、丹参酮ⅡA高、中、低剂量组、siRNA组、siRNA +氧化应激组、siRNA阴性对照组.采用差数贴壁法体外分离培养新生乳鼠心肌细胞,以200 μmol·L(-1)过氧化氢作用2h模拟心肌细胞氧化应激损伤,心肌细胞在氧化应激前给予丹参酮ⅡA(1×10-4,5×10-5,1 ×10-5mol·L(-1))预先干预24 h.采用PHB特异性的siRNA干扰心肌细胞PHB蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率、[ca2+]i及心肌细胞线粒体膜电位的变化,Western blotting检测PHB蛋白表达水平.结果:与正常对照组比较,氧化应激组心肌细胞经200 μmol· L(-1)过氧化氢作用2h后,PHB蛋白表达显著增加,细胞内游离钙浓度、凋亡率显著增高,线粒体膜电位显著降低.与氧化应激组比较,丹参酮ⅡA可呈浓度依赖性显著降低细胞内游离钙浓度及细胞凋亡率,增加线粒体膜电位,降低PHB蛋白表达水平.与siRNA阴性对照组比较,siRNA组心肌细胞内PHB蛋白表达可被显著抑制,且细胞内游离钙浓度和细胞凋亡率显著增加,线粒体膜电位显著降低.结论:PHB蛋白在心肌细胞氧化应激中可代偿性增加,对心肌细胞具有保护作用.丹参酮ⅡA可减少氧化应激损伤心肌细胞内PHB蛋白表达,其机制可能与丹参酮ⅡA减轻心肌细胞氧化应激损伤从而减少心肌细胞自身代偿性作用有关.
-
HPLC同时测定益心舒片中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹参酮ⅡA的含量
目的:建立HPLC同时测定益心舒片中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹参酮ⅡA的含量.方法:采用Phenomenex Kinetex C18柱,以乙腈-水梯度洗脱,流速1 mL· min-1,柱温30℃,检测波长250 nm.结果:五味子醇甲在21.56～215.6mg·L-1(r=0.999 9),五味子酯甲在6.500～65.00 mg·L -1(r=1),五味子甲素在3.460～34.60 mg·L-1(r=0.999 9),五味子乙素在6.920～69.20 mg·L-1(r=0.999 9),丹参酮ⅡA在2.400～24.00 mg·L-1(r =0.999 9)呈良好的线性关系,平均回收率五味子醇甲为97.92％,RSD 2.34％(n=6)；五味子酯甲为100.28％,RSD 2.57％(n=6)；五味子甲素为98.34％,RSD 2.73％ (n =6)；五昧子乙素为98.06％,RSD 1.61％ (n =6)；丹参酮ⅡA为99.13％,RSD 1.42％ (n =6)；结论:本法简便、灵敏度高、重复性好,可用于益心舒片的质量控制.
-
双波长HPLC同时测定丹参中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA的含量
目的:建立双波长HPLC测定丹参中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA的含量的方法.方法:使用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,流速1 mL· min-1,检测波长245 nm (丹参酮Ⅰ)和269nm(隐丹参酮和丹参酮ⅡA).结果:隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA分别在各自进样量范围内与峰面积的线性关系良好,相关系数均在0.9997以上,各成分平均回收率均在98.0％ ～ 100.1％ (n =6),各成分回收率RSD均不过3.0.结论:该方法快速、准确、简便,可作为丹参中主要菲醌类成分的质控与评价方法.
-
超高效液相色谱-质谱联用同时测定丹参中7种成分含量
目的:建立同时测定丹参中原儿茶醛,丹酚酸B,迷迭香酸,丹参酮Ⅰ,丹参酮ⅡA,隐丹参酮,二氢丹参酮7种成分含量的超高效液相色谱-质谱联用分析方法.方法:采用Hypersil Gold C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9 μm),以0.1％甲酸溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL· min-1,柱温30℃.采用电喷雾离子源(ESI),正负离子交替扫描模式,选择反应离子检测(SRM).结果:7种成分在1～460 μg·L-1有良好的线性关系,平均回收率83.41％ ～116.05％,检测限0.046～0.5μg·L1,RSD均＜4.7％.结论:该方法快捷、准确、重复性好、灵敏度高,可同时测定丹参药品中7种成分的含量,可用于丹参药材及其制剂的研究和质量控制.
-
HPLC同时测定复方生脉颗粒中有效成分的含量
目的:同时测定复方生脉颗粒中丹参索和丹参酮ⅡA以及三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的含量.方法:用HPLC法,采用Discovery C18柱(25 cm ×4.6 mm,5μm)；丹参素和丹参酮ⅡA色谱条件:流动相为甲醇(A)-0.5％醋酸水(B),洗脱梯度(0 ～ 10 min,9％ ～75％A;10～40 min,75％A),流速为1 mL· min -,检测波长为275 nm;三七皂苷R1和人参皂苷Rg1色谱条件:流动相为乙腈-0.05％磷酸水(20:80),流速为1 mL· min-1,检测波长为203 nm.结果:丹参素的线性范围为0.099 6～1.195 2 μg(r= 0.999 9),丹参酮ⅡA的线性范围为0.026 ～0.312 μg(r =0.999 9),二者平均回收率分别为101.33％,100.24％,RSD 1.28％,1.53％；三七皂苷R1线性范围为0.0926～1.1822μg(r=0.9997),人参皂苷Rg1线性范围为0.1608～1.9296 μg (r=0.9999),二者平均回收率分别为99.87％,101.42％,RSD为1.07％,2.43％.结论:该含量测定方法简便,分离效果好,能同时测定复方生脉颗粒中丹参素和丹参酮ⅡA以及三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的含量,结果准确可靠.
-
HPLC同时测定复方丹参降浊丸中丹参酮ⅡA和丹酚酸B
目的:建立一种同时测定复方丹参降浊丸中丹参酮Ⅱ<,A>及丹酚酸B的方法.方法:色谱柱Agilent TC-C<,18>(2)(4.6 mm ×250 mm,5μm),甲醇-0.5%甲酸水梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长268 nm.结果:丹参酮Ⅱ<,A>及丹酚酸B分别在0.007～0.084μg,0.071 5～1.001μg内呈良好线性关系;平均回收率分别为100.9%(RSD 1.81%),101.4%(RSD1.55%).结论:该方法可以快速准确同时测定复方丹参降浊丸中丹参酮Ⅱ<,A>及丹酚酸B含量.
-
HPLC法测定千斤脑康宁胶囊中丹参酮ⅡA
目的:建立千斤脑康宁胶囊中丹参酮ⅡA的质量分数测定方法.方法:采用高效液相色谱法,以大连依利特C18色谱柱为分离柱,以甲醇-水(80:20)为流动相,270 nm为检测波长,柱温为室温.结果:丹参酮ⅡA在0.026～0.41 μg峰面积与其浓度呈良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.3%,RSD 1.26%(n=6).结论:该方法简便、准确、重复性好,可作为该制剂含量测定方法.
-
参花胶囊质量标准的研究
目的:建立参花胶囊的质量标准.方法:采用TLC法对本方中的川芎、丹参进行定性鉴别;采用HPLC法对处方中主要成分丹参酮ⅡA进行含量测定.结果:薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰.含量测定丹参酮ⅡA在0.03～0.64 μg范围呈良好的线性关系,r=0.999 8,平均回收率99.57%,RSD为0.99%(n=6).结论:所建立的方法可靠准确地进行定性、定量检测,可用于该制剂的质量控制.
-
抗癫止痫丸的质量标准研究
目的:建立抗癫止痫丸的质量标准.方法:用薄层扫描法对抗癫止痫丸中人工牛黄进行定性鉴别,用高效液相色谱仪色谱法测定制剂中丹参酮ⅡA的含量.结果:在薄层色谱中能检出人工牛黄,丹参酮ⅡA在0.10～0.80 μg具有良好的线性关系,r为0.999 6,平均回收率为97.89％,RSD 1.60％.结论:方法简便可行,专属性强,重复性好,可以用于抗癫止痫丸的质量控制.
-
HPLC测定市售丹参饮片中丹参酮ⅡA
目的:建立用HPLC法测定市售丹参饮片中丹参酮ⅡA含量的方法,制定丹参饮片的含量限度.方法:色谱柱采用Kromasil C(18),以甲醇-水(75:25)为流动相,检测波长为270 nm.结果:丹参酮ⅡA在0.016～0.16 μg线性良好(r=0.9999),回收率为101.1%(RSD0.869%,n=6),结论:方法简便,结果准确.
-
HPLC-CAD同时测定骨疏康胶囊中6种成分的含量
目的:建立HPLC-CAD同时测定骨疏康胶囊中柚皮苷,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,5-羟甲基糠醛(5-HMF)及丹参酮ⅡA的含量,为骨疏康胶囊的质量控制提供参考.方法:采用高效液相色谱法联合电雾式检测器法(HPLC-CAD),Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),乙腈(A)m.05％甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,10％A;10～25 min,10％ ～ 25％A;25 ～ 30 min,25％～30％A;30 ～ 45 min,30％ ～60％A;45 ～50 min,60％～75％A),流速0.8 mL· min-,雾化器温度为35℃,柱温35℃,进样量10 μL,测定骨疏康胶囊中6种成分的含量.结果:柚皮苷,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,5-羟甲基糠醛及丹参酮ⅡA的质量浓度分别在0.006 ～0.120 μg(r =0.999 7),0.041 ～0.820 μg (r=0.999 9),0.011 ～0.220 μg(r =0.999 6),0.022 ～0.440 μg(r=0.999 8),0.012～0.240 μg(r=0.999 8),0.005～0.100 μg(r =0.999 8)与峰面积呈良好的线性关系.柚皮苷,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,5-羟甲基糠醛及丹参酮ⅡA的平均加样回收率分别为99.26％,97.99％,98.17％,99.34％,98.26％及99.25％,RSD(n =6)分别为1.7％,1.0％,1.6％,1.4％,1.9％和1.3％.结论:该方法准确、简便、重复性好、灵敏度高,可用于骨疏康胶囊中多成分的质量控制研究.
-
HPLC同时检测丹参提取物中5种水溶性和脂溶性成分含量
目的:建立丹参提取物中丹酚酸A、丹酚酸B、紫草酸、丹参素及丹参酮ⅡA反相HPLC同步测定新方法.方法:选用Kromasil 100-5 C18(4.6 mm × 250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(含0.1％甲酸)为流动相梯度洗脱,流速1 mL· min-1,检测波长285 nm.结果:丹酚酸A、丹酚酸B、紫草酸、丹参素及丹参酮ⅡA分别在进样量范围内与峰面积线性关系良好,r＞0.999 5,仪器精密度和稳定性RSD均＜2％,成分的回收率在97％ ～ 103％(n=3).测定了其5批丹参提取物含量.结论:该方法快速、准确、重复性好,可同时定量丹参的5种水溶性及脂溶性成分.
-
丹参提取工艺优选
目的:优化丹参的提取工艺.方法:采用单因素和正交试验法,以丹参酮ⅡA及丹酚酸B为考察指标对丹参提取工艺进行优化.结果:优选的佳提取工艺为加6倍量体积分数为65%的乙醇,提取3次,每次30 min.结论:所优选的提取工艺合理、稳定、可行.
-
SPG膜乳化法制备丹参酮ⅡA聚乳酸-羟基乙酸微球的工艺优化
目的:优选SPG膜乳化法制备丹参酮ⅡA-聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)微球的工艺条件.方法:采用SPG膜乳化法制备丹参酮ⅡA-PLGA微球.在单因素试验基础上,以载药量、包封率及多分散系数(PDI)的综合评分为因变量,通过响应面法考察PLGA质量浓度、流动相流速、聚乙烯醇(PVA)质量浓度及油水相体积比等自变量对处方工艺的影响.结果:佳处方工艺为PLGA质量浓度44.29 g·L-1,流动相流速825.68 r·min-1,PVA质量浓度2.5 g·L-1,油水相体积比1∶7.86;制备的丹参酮ⅡA-PLGA微球表面光滑圆整且粒径均一,平均粒径2.338 μm,PDI指数0.328,载药量1.20％,包封率89.57％,与预测值相对误差较小.结论:采用SPG膜乳化法制备微球的工艺简单、方便,可用于提高丹参酮ⅡA的生物利用度.
