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快检设备精品推荐
拜发分析系统销售北京有限公司产品1:RIDASCREEN(R)葡萄球菌肠毒素检测试剂盒检测技术:酶联免疫技术检测对象:葡萄球菌肠毒素适用条件:孵育时间为2小时45分钟,符合国家标准.产品性能:适宜大批样品集中检测,具有快速、操作简便、无需贵重仪器设备,且对样品纯度要求不高等特性.
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增强免疫组化检测方法的探讨
近,在宫颈癌病因多因素分析研究中,对1995~1999年收集的46例经病理学诊断的宫颈癌和38例慢性宫颈炎的活检标本,采用免疫组织化学方法做了PCNA、p53、C-erbB-2、RB、E6等指标的检测。在免疫组化技术的具体操作和运用中,如何增强其检测效果,减少非特异性染色,摸索出了一些经验,现介绍如下。1 材料与方法1.1 免疫生化试剂 SP试剂盒、DAB试剂盒、单克隆抗体购于北京中山生物技术有限公司(系美国ZYMED公司的产品)。1.2 标本 系病理科宫颈癌手术送检标本和部分活检标本。1.3 方法 经10%福尔马林固定,常规石蜡制片。切片厚度为5μm,采用SP法做多种抗体免疫组化染色,同时设阳性、阴性和空白对照。选取相应的阳性切片,分4组对影响免疫组化染色效果的部分因素作对比实验。①抗原修复的不同方法:酶消化、微波炉、压力煮沸;②一抗稀释度1∶30、1∶50、1∶100;③一抗孵育时间:4℃过夜、37℃1~2h;④二抗、三抗的孵育时间:37℃30min、37℃45min。基本步骤:切片常规脱蜡至水,H2O2处理10~15min,抗原修复,PBS冲洗5min×3次,加山羊血清10~15min,加一抗孵育。PBS洗,加二抗孵育,PBS洗,加三抗孵育,PBS冲洗,DAB显色,苏木素复染,脱水、透明、封固。
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COMPACT微生物全自动分析系统的质量控制
VITEK 2 COMPACT是法国生物梅里埃公司生产的快速细菌鉴定及药敏试验全自动分析仪,带有专家分析系统,使用简单、方便,在细菌的鉴定及药敏传统方法上缩小了孵育时间,快速地给临床提供细菌鉴定结果和用药情况,但其鉴定的细菌种类数相对较窄,不是绝对的无菌操作所以我们必须从细菌鉴定及药敏试验步骤的精密度和准确度、试验所用试剂和仪器的质量,工作人员的操作规范进行严格的质量控制.
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细胞种类及孵育时间对血卟啉单甲醚在细胞内分布的影响
目的探讨细胞种类和孵育时间对光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)在细胞内分布的影响.方法传代培养小鼠肺内皮细胞(1H11)和A549肺癌细胞,分别与光敏剂HMME孵育2 h和12 h.应用由荧光显微镜及CCD组成的高分辨率荧光显微成像系统,结合荧光探针标记技术,采用细胞器-细胞荧光强度比值法研究HMME在不同条件下的亚细胞分布情况.结果在2 h和12 h 2个孵育时间点高尔基体的J1/J2值都高;随着孵育时间延长,A549细胞的4种细胞器的J1/J2值都升高且溶酶体幅度大,而小鼠肺内皮细胞只有溶酶体的J1/J2值呈升高趋势,高尔基体、内质网和线粒体等细胞器的J1/J2值均呈下降趋势;A549细胞溶酶体的J1/J2值升高的幅度明显高于鼠肺内皮细胞.结论HMME在不同种类细胞内的亚细胞分布是不同的.孵育时间对HMME亚细胞分布的影响显著.随着孵育时间的延长,A549肺癌细胞各细胞器吸收HMME能力逐渐增强,尤以溶酶体显著;小鼠肺内皮细胞中除溶酶体外各细胞器吸收HMME能力逐渐减弱.孵育12 h后,A549肺癌细胞各细胞器吸收HMME能力均强于鼠肺内皮细胞.
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产孢丝状真菌NCCLS药敏试验方法的应用
美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)于1997年推出了关于酵母菌的液体培养基稀释(多量法与微量法)抗真菌药敏试验方案M27-A,建立了被众多实验室认同的重复性好、准确性较高的标准化体外药敏试验方法。但由于丝状真菌本身的诸多特点如产孢条件难以控制、接种量难以精确量化、孵育时间长等,使其试验方法标准化具有一定难度。近年来NCCLS分会成员以M27-A的微量法为基础进行了多中心广泛深入研究[1,2],于1998年提出了《产孢丝状真菌的液基稀释抗真菌药敏试验参考方案》(M38-P)。该方案在提出了一些建设性意见的同时,重申了多量法与微量法的一致性。现将其方法简介如下。 一、材料和方法 1.抗真菌药物:测试用药物包括氟康唑(FCZ),5-氟胞啶(5-FC)、酮康唑(KCZ)、伊曲康唑(ICZ)和两性霉素B(AmB)。药物来源、贮备液的制备等同M-27方案[3]。 2.被检测的真菌:本方案主要针对常见侵袭性真菌感染的菌种:曲霉、镰刀霉、根霉,波氏假阿利什霉及申克孢子丝菌的菌丝相。不包括其他非产孢丝状真菌,也不适应于双相真菌的酵母相。 3.培养基:建议应用RPMI-1640培养基,配制方法要求同M27-A方案。 4.真菌接种液的制备:(1)为保证受试菌的纯度及活性,需在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上35℃培养7 d或35℃培养48~72 h后,转至25~28℃至7 d(镰刀菌)。(2)取1 ml无菌0.85%盐水加入培养7 d的培养皿中,用巴氏吸管轻轻抽吸,制备菌悬液(加入1滴吐温20将有利于曲霉的接种),将菌悬液吸至无菌试管中,静置3~5 min后,取上部匀质液体(含孢子或孢子囊孢子和菌丝片断),在振荡器上振荡15 s。(3)用分光光度计调整菌悬液浓度,波长530 nm,A值曲霉、申克孢子丝菌0.09~0.11,镰刀霉、波氏假阿利什霉及根霉0.15~0.17。(4)将上述菌悬液用RPMI-1640稀释50倍得2倍终浓度(0.4~5×104)的菌悬液备用。(5)为保证试验准确性应做菌落计数,取0.01 ml终浓度菌悬液接种于改良的沙氏萄葡糖琼脂培养基的平皿中(28~30℃),每天观察并计数肉眼可见的真菌菌落(尤其是对于镰刀菌),孵育时间为24 h以内(镰刀菌)至5 d(波氏霉)。 5.液体培养基的接种:在96孔板的1~10列孔中每孔加入0.1 ml的2倍终浓度的菌悬液。每次试验均应包括质控、参考菌株。 6.培养:35℃条件下(不要摇动)大多数菌需46~60 h判定低抑菌浓度(MIC)结果,根霉则需21~26 h,波氏假阿利什霉则需70~74h。
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缩短人精卵共同孵育时间对体外受精-胚胎移植中胚胎质量与临床结果的影响
在常规进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的过程中,精子和卵子共同孵育的时间平均为16~20 h.在此期间,大量已获得受精能力的精子围绕着卵冠丘的复合体、高浓度的精子代谢产物以及因精子穿透卵丘而驱散的颗粒细胞、部分退化和死亡的精子,可能析出一些不利于胚胎发育的物质[1].已有研究表明,人类精-卵相互作用和受精发生在性交后20 min内,因此,缩短IVF-ET过程中精-卵接触的时间至1~2 h是可行的.本研究通过缩短IVF-ET过程中人精卵共同孵育的时间,观察并探讨其对胚胎质量和临床结果的影响.
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基于表面增强拉曼散射的血清指纹谱检测方法研究
目的:对基于表面增强拉曼光谱检测血清指纹谱的试验条件进行优化。方法以正常人血清为例,银胶溶液为活性基底,分别检测不同血清用量(2.5~500μl)、不同孵育时间(10~30 min)、不同孵育温度(4℃、室温、37℃)及不同血清处理方法(萃取、去蛋白)的增强拉曼信号。结果及结论血清用量不宜超过50μl,与增强基底材料的比例1∶1到5∶1均适宜;孵育时间在10~30 min均可;孵育温度为4℃、室温、37℃均可;血清直接与增强基底混合信号效果极强,进行萃取和去蛋白处理后,拉曼信号会减弱。
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胚胎复苏后体外孵育时间对妊娠结局的影响
目的 探讨复苏后的体外孵育时间对冻存胚胎妊娠结局的影响.方法 对100例进行回顾性分析.结果 100例冷冻胚胎移植周期,临床妊娠率为21%,复苏后体外孵育时间的不同妊娠率无显著差异,但流产率差异显著.结论 复苏后延长体外孵育时间可以更好的观察胚胎的发育潜能,但增加流产率,应缩短复苏后体外孵育时间.
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高酮酸血症对单试剂法测定ALT结果的影响
血清中内源性α-酮酸(如丙酮酸)对单试剂法测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)有干扰[1].一般血清标本内源性酮酸含量低,试剂中高浓度的LDH(1200U/L,IFCC)能在较短的延迟时间(60秒)内将其转化为乳酸,有效防止干扰反应对测定结果的影响[2].双试剂法因孵育时间长,能彻底清除内源性酮酸的干扰.笔者对高酮酸血症对ALT测定结果的影响,进行了实验观察,结果报道如下.
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低离子溶液凝聚胺快速测定血浆冷凝集素
常规检测血浆冷凝集素是在4 ℃冰箱放置2 h,甚至24 h,时间较长,给我们的工作和临床诊断带来不便.为了缩短孵育时间,我们采用低离子溶液凝聚胺方法用于血浆冷凝集素检测,使其快速、敏感,适用于临床急诊患者的诊断,并与常规盐水法作对照,现将结果报告如下.
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去神经肌肉组织的代谢变化及其萎缩的预防
肌肉失神经支配后,肌肉的各种生理活动随即发生变化,肌肉萎缩,甚至纤维化。长时间的肌肉失神经支配会导致肌肉功能恢复障碍。失神经支配后,与肌萎缩直接相关的是肌肉的代谢变化。不论去神经肌萎缩的机制如何,其终途径都是通过影响代谢来完成的,不同原因所致的肌萎缩其代谢变化各不相同。因此,研究和认识肌肉萎缩的代谢变化,有助于我们寻找预防肌肉萎缩的治疗方法,为肌肉的再神经支配创造条件。现将有关文献综述如下。1 肌肉去神经后的代谢变化 1.1 去神经后酶活性的变化 1.1.1 磷酸肌酸激酶的变化 肌肉纤维根据其生理生化特点可分成Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型肌肉纤维内富含磷酸肌酸激酶(CPK),而Ⅱ型肌肉纤维较少含有,该酶位于肌肉线粒体内。去神经后,Ⅰ型肌肉纤维CPK显著降低[1],Ⅱ型肌肉纤维CPK于去神经1周后有一过性升高,去神经1个月后降低,但是,当延长孵育时间后,Ⅱ型肌肉纤维的CPK显色较Ⅰ型深,即I型肌肉纤维的CPK降低较严重。
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Ham实验延长孵育时间阳性的PNH 1例报告
患者,男,70岁.3个月前无明显诱因出现乏力,食量减少,腹胀,体重下降20~25 kg,2个月前出现皮肤黄染,豆油色尿,16天前在当地医院就诊静点"肝胆宁,丹参”病情未见好转.4天前,腰痛、乏力加重,静点"地塞米松,肌注VB12”,症状无明显好转,于2001年3月24日住我院.
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体外阻断卵巢颗粒细胞转化生长因子β信号转导通路模型的建立
本实验以选取转化生长因子βⅡ受体(transforming growth factor-βreceptor typeⅡ,TGF-βRⅡ)抗体的不同剂量和不同孵育时间,对原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞表面TGF-βRⅡ进行中和,从而达到建立体外阻断TGF-β信号转导通路模型的目的.为研究与TGF-β信号转导通路相关的各种调节因素提供了体外研究的新模型.
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用新激光衍射法研究钙离子及离子载体A23187对红细胞流变特性的影晌
本文用新激光衍射法研究了钙离子、钙离子载体A23187对红细胞流变特性的影响.用不同浓度的钙离子、钙离子载体A23187及不同孵育时间的离子载体A23187处理红细胞后,用新激光衍射法分别测量了各样品的取向指数和小变形指数.
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反应时间对国产丙肝抗体酶联免疫诊断试剂的影响
目前,绝大部分丙肝抗体酶联免疫诊断试剂,都通过国家标准,但灵敏度低于进口试剂,这主要与包被抗原的质量有很大关系,但反应时间特别是加入样品后的孵育时间对试剂灵敏度的影响不可忽视.
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孵育时间不同对嗜麦芽窄食单胞菌药敏结果的影响
嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)药敏试验方法至今尚无统一标准.美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐采用琼脂稀释法或微量稀释法,并将嗜麦芽窄食单胞菌的药敏判断标准归入铜绿假单胞菌外的其他非肠杆菌科细菌中[1],日常工作我们常在16~20 h中判断结果.为了解药敏判断时间对结果的影响,对24株嗜麦芽窄食单胞菌在16 h和24 h分别判读药敏结果,并作初步探讨.
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精子优化处理后孵育时间与夫精宫腔内人工授精临床妊娠率的相关性研究
目的:研究精子优化处理后孵育时间对夫精宫腔内人工授精(AIH-IUI)临床妊娠率的影响.方法:相同促排卵方案的191个AIH-IUI周期,男方精液经密度梯度离心优化处理后,将孵育时间分为0~19、20 ~39、40~59、60~80 min 4组;根据优化处理后前向运动精子总数(TPMC)分为(0~9) ×106、(10~20)×106、(21 ~30)×106、> 30×106 4组,分析孵育时间和优化处理后TPMC与临床妊娠率的关系,并对患者年龄、不孕年限、孵育时间、优化处理后TPMC与临床妊娠率进行Logistic多因素回归分析. 结果:不同孵育时间临床妊娠率分别为12.7%、18.3%、11.4%、9.1%,孵育20 ~39 min组显著高于其他3组(P均<0.05);优化处理后4组TPMC临床妊娠率分别为0%、16.7%、11.4%、8.3%,(10 ~ 20)×106组显著高于其他3组(P均<0.05);Logistic多因素回归结果显示,女方年龄的增加会导致临床妊娠率显著下降(OR 0.89,95%CI 0.83 ~0.94),而孵育时间20 ~ 39 min(OR 2.11,95%CI 1.34 ~3.13)和处理后TPMC(10~ 20)×106(OR 2.06,95% CI 1.32 ~ 3.46)均可显著增加临床妊娠率.结论:精子优化处理后的孵育时间是AIH-IUI临床妊娠率的重要影响因素.
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嗜血杆菌鉴定卡孵育时间对结果的影响探讨
目的比较不同的孵育时间对嗜血杆菌鉴定卡(简称NHI卡)鉴定和分型结果准确性的影响.方法115株嗜血杆菌测定触酶和吲哚后,调至3号麦氏浊度的菌液充入NHI卡,然后置35℃孵箱中孵育4小时读卡鉴定后,每隔1小时读卡鉴定一次,到8小时鉴定后再放置过夜读卡鉴定.结果所有受检菌株在4~8小时之间读卡对鉴定和生物分型结果无影响,而过夜后青霉素酶孔阴性变为阳性,阳性则不变,但对鉴定和生物分型结果无影响.在4~8小时的孵育时间内,85株青霉素孔阴性的菌株β-内酰胺酶全部阴性,30株青霉素孔阳性的菌株中β-内酰胺酶阳性26株,β-内酰胺酶阴性4株.结论NHI卡读卡时间可以适当延长.青霉素孔检测结果与β-内酰胺酶结果有很好的相关性.
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外出采血用胶体金免疫渗滤法对HBsAg进行初筛
随着<中华人民共和国献血法>的颁布实施,血站全部实行无偿献血.无偿献血基本上在站外采血,用ELISA法检测HBsAg比较困难,需要37℃水浴、板机等设备,加上孵育时间长,不可能在采血现场对献血员进行初筛.胶体金免疫渗滤法(金标法)的问世,使外出采血HBsAg的初筛成为可能,可简单快速地判断出阳性结果.
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微柱凝胶抗人球蛋白交叉配血试验中遇到的问题及处理
输血前必须进行交叉配血实验,而传统的交叉配血试验方法繁杂,时间长,随着免疫学技术的发展,新式的微柱凝胶抗人球蛋白交叉配血方法具有操作简便、不必洗涤红细胞、孵育时间短、反应体系微量等诸多优点被广泛应用.我院自2003年开始使用,现将在使用中遇到的问题及处理方法总结如下.