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风味罗非鱼休闲食品的研制
本实验以罗非鱼为原料,探讨风味罗非鱼休闲食品的研制,着重研究了五香风味罗非鱼块软罐头的制作工艺.通过脱腥试验、五香料的配制试验、调味试验、烘干脱水试验以及杀菌试验对其进行研究.结果表明,对其进行盐渍脱腥时,盐溶液佳浓度为1%,盐渍时间为60 min,经过此步罗非鱼块的腥味几乎去除.五香料的配制佳方案为每煮1 kg的水,放入八角20 g、桂皮10 g、丁香10 g、小茴香10 g、花椒2.5 g.通过正交试验确定调味的配比为五香料35%、盐4%、糖1%、味精0.6%,均为鱼块质量的百分比.对鱼块进行脱水时,采用烘干温度80℃、烘干时间60 min,对鱼块软罐头杀菌时采用高压杀菌,佳杀菌条件为121℃、20 min,产品在0~4℃下冷藏储存.
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鱼类泰式柠檬烤鱼
原料新鲜罗非鱼2 条(合计约600 克),青柠檬4 个(留半个后使用),小米椒4 根,盐15 克,白糖5 克,大蒜4 瓣,姜3 片,黑胡椒5 克,柠檬草适量1.罗非鱼洗净后平分成两半,注意鱼头也要切成两半,在鱼背上稍微划几刀,先放入盐用手揉捏均匀,腌制20分钟.2.放入剩余的调料,柠檬留半个后使用.拌匀后腌制3 个小时,或者放入冰箱冷藏室隔夜腌制效果更好,期间要注意翻拌以便入味均匀.
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四种罗非鱼营养成分的比较
罗非鱼(Tilapia)原产地非洲,是我国主要养殖水产品,其主要特点为肉质鲜美,少刺,蛋白质含量高,深受消费者喜爱[1-2].莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus),上世纪五十年代称为越南鱼.1956、1957年分别由泰国和越南引入我国广东省试养,因其个体小、生长慢、体色黑,现已淘汰.荷那龙罗非鱼(O.hornorum),2001年由中国水产科学研究院珠江水产研究所引入中国,作父本与橙色莫桑比克罗非鱼杂交生产高雄性苗种.尼罗罗非鱼(O.niloticus),1978年以来多次引入我国,现已广泛养殖.罗非鱼雄性比雌性生长快,目前常采用单雄性罗非鱼进行养殖生产[3-4].
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罗非鱼链球菌的浓度测定方法的确定及体外抑菌研究
目的:①确定核酸蛋白测定仪对罗非鱼链球菌浓度测定的可靠性;②采用药敏试验的方法确定几种中药醇提物对罗非鱼链球菌的抑菌效果.方法:①采用平板菌落计数法验证核酸蛋白测定仪法测定培养的链球菌液浓度的准确性;②制备含生药量1g/mL 的五倍子、溪黄草、薄荷和穿心莲等中药醇提物,采用药敏试纸试验的方法对罗非鱼链球菌进行抑菌实验,通过测量抑菌圈直径的方法来判断药物的抑菌效果.结果:①两组方法测定菌液浓度相近似,采用核酸蛋白测定仪(OD600)进行浓度的测定的方法可行;②抑菌圈大小:五倍子为21mm、溪黄草为18mm、薄荷为9mm、穿心莲为9mm、阳性对照(头孢氨苄)为26mm.结论:采用核酸蛋白测定仪测定细菌菌液浓度方法简便、可靠,将会在以后实验中应用;抑菌实验结果显示,五倍子醇提物对链球菌抑制极为敏感,溪黄草为高敏,薄荷、穿心莲等为低敏.
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出口罗非鱼中沙门菌的分离鉴定
沙门菌(salmonella)一直是世界范围内的细菌性腹泻和食物中毒的常见病原菌,它主要存在于动物性食品中,人类通过食用被污染的食品而被感染.在各类细菌性食物中毒事件中,在我国是以沙门菌占第一位.2001年8月,本局在贵阳某水产公司出口冷冻罗非鱼中分离出沙门菌,并对该污染水产品的沙门菌进行了分离鉴定.
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罗非鱼鱼皮酶解液对体外培养大鼠骨髓基质细胞的影响
目的:观察两种罗非鱼鱼皮酶解液对大鼠骨髓基质细胞的影响.方法:用密度梯度离心和贴壁筛选的方法获得骨髓基质细胞,用碱性磷酸酶染色法观察是否成功诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化,并分别采用MTT法和PNPP法测定两种酶解液对骨髓基质细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响.结果:密度梯度离心和贴壁筛选可得到较为均一的骨髓基质细胞.这些骨髓基质细胞诱导后可以向成骨细胞分化.两种酶解液作用于骨髓基质细胞时,在浓度0.1mg·ml-1均可以促进骨髓基质细胞增殖,在浓度0.1mg·ml-1,0.01mg·ml-1均可以提高骨髓基质细胞碱性磷酸酶活力.实验用两种酶解液的三个浓度与成骨诱导液协同作用于骨髓基质细胞时,均没有促进细胞增殖和提高碱性磷酸酶活性的显著作用.结论:两种酶解液可以促进骨髓基质细胞增殖,提高细胞碱性磷酸酶活力;与成骨诱导液协同作用于骨髓基质细胞时,对细胞增殖和碱性磷酸酶活性没有显著促进及提高作用.
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胶原酶冷消化法分离制备罗非鱼肝细胞
目的 研究罗非鱼肝细胞的分离提取的方法、鉴定.方法 将鱼肝脏经D-Hank液反复洗涤后剪碎经IV型胶原酶消化后过滤、离心、经DMEM洗涤后用Percoll分离液行肝细胞纯化、细胞计数,光镜下观察其形态结构.结果 胶原冷消化法分离后的细胞中仍含有一定量的杂细胞,可采用90g,60g,30g离心进一步分离提纯.结论 胶原酶冷消化法获得满意结果,60g离心2min和30g离心3min可达到纯度和产量均较理想的结果.
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罗非鱼中拟除虫菊酯类农药检测净化条件的优化
目的 研究罗非鱼中9种拟除虫菊酯类农药残留前处理的佳净化方法.方法 优化样品的净化条件,包括净化柱的选择、洗脱剂的选择和洗脱液体积等.后用气相色谱-电子捕获法(GC-ECD)验证.结果 佳填充料为无水硫酸钠-Florisil吸附剂-无水硫酸钠(2∶3∶2,v/v/v),洗脱剂为乙酸乙酯-正己烷(1∶9,v/v),洗脱剂体积15mL.净化后的9种拟除虫菊酯在气相色谱图中分离良好,在1～100 ng/mL范围内线性关系良好(r≥0.991);平均回收率76.3％～117.6％,精密度3.1％～14.6％,低检出限0.4～3.2μg/kg.结论 在实验室建立的优分析条件下,拟除虫菊酯类药物的回收率和样品的测定效果均能满足农药残留检测标准的要求.
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气相色谱法测定罗非鱼中的多种有机磷农药残留量
[目的]建立毛细管柱气相色谱法测定罗非鱼中9种有机磷农药残留量的方法.[方法]样品粉碎后经溶剂提取、固相萃取分离净化和浓缩后,进入GC/FPD分析,外标法定量.[结果]方法在0.5～3.0 μg/ml浓度范围内有良好的线性关系(r=0.998),平均回收率为65.0%～94.0%,RSD为2.23%～3.90%;方法低检出浓度为0.01～0.05 mg/kg.[结论]该方法操作简便快速,灵敏度高,符合实际应用需要.
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2012年-2015年湛江市出口罗非鱼微生物污染状况调查
目的 了解2012年-2015年湛江市出口罗非鱼中微生物污染状况,为该类产品监管提供参考依据.方法 采用GB 4789系列微生物检验方法,检测待出口罗非鱼中菌落总数、大肠菌群、沙门菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌及霍乱弧菌,并对2012年-2015年微生物检验结果进行总结分析.结果 共检验5 607份罗非鱼类产品,菌落总数污染量均＜5×105cfu/g,不超标;大肠菌群超标率为2.70％;沙门菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌和霍乱弧菌的检出率分别为0.20％、2.81％、0.80％和0.51％.结论 湛江市出口罗非鱼类产品中存在不同程度的微生物污染,单核细胞增生李斯特菌的污染尤为严重,应该引起重视.
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微囊化罗非鱼胰岛移植治疗小鼠糖尿病
目的 观察微囊化罗非鱼胰岛移植对糖尿病小鼠的治疗作用.方法 胶原酶消化分离罗非鱼胰岛.链脲霉素小鼠腹腔内注射,建立药物性糖尿病小鼠模型.微囊包裹罗非鱼胰岛后,移植入糖尿病小鼠腹腔内,即微囊化组(12只)；设立生理盐水(10只)为对照组.比较移植后两组糖尿病小鼠的存活率；动态观察小鼠血糖的变化.并对移植物进行动态病理检查.结果 移植后4周微囊化组受体存活率为40％,明显高于生理盐水组(P＜0.05).微囊化组糖尿病小鼠血糖降低,持续(15.70±3.09)d,与生理盐水组比较差异有统计学意义(P＜0.05).微囊化组在移植后7d,可从受体腹腔中收集到形态完整的微囊,其内罗非鱼胰岛活力良好.移植后14 d可见微囊形态依然完整,其中罗非鱼胰岛大多已死亡.结论 微囊化包裹的罗非鱼胰岛腹腔内移植能降低糖尿病小鼠血糖,提高糖尿病小鼠的存活率.
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高温对罗非鱼肝细胞原代培养的影响
目的观察温度对罗非鱼肝细胞原代培养的影响.方法胶原酶冷消化法分离罗非鱼肝细胞,以含多种辅助因子的培养基培养.台盼蓝拒染法测细胞活力.倒置光显微镜观察罗非鱼肝细胞的形态,透射电镜观察超微结构.按不同培养温度分为A(28℃)、B(37℃)和C(39℃)三组.比较各组不同时期培养上清液中白蛋白和谷丙转氨酶含量.结果新分离的罗非鱼肝细胞形态完整.37℃下与28℃下培养,生长良好、可存活2～3周.39℃下培养,可存活5～7 d.A组和B组培养上清液中白蛋白和谷丙转氨酶含量比较差异均无统计学意义(P＞0.05),C组和A、B组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论胶原酶冷消化法是一种较好的鱼肝细胞分离方法.罗非鱼肝细胞体外培养可耐受37～39℃高温.
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胶原酶分离罗非鱼胰岛的实验观察
临床同种胰岛移植的技术已经取得显著进步[1],但面临着供体紧缺的难题.为此人们更加关注异种胰岛移植的可能性,目前相关研究多在哺乳动物间进行,有关鱼类胰岛移植到哺乳动物的报道较少.罗非鱼具有来源广、耐高温[2]、耐低氧、胰岛制备方便而且生物安全度高的特点.本文报道罗非鱼胰岛的制备方法,为鱼类到哺乳类动物间的胰岛移植提供实验基础.
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自然杀伤细胞在异纲(罗非鱼/小鼠)胰岛移植的作用
目的 观察自然杀伤(NK)细胞在异纲(罗非鱼/小鼠)胰岛移植免疫排斥中的作用.方法 胶原酶消化分离罗非鱼胰岛.链脲霉素小鼠腹腔内注射,建立药物性糖尿病小鼠模型.消化分离罗非鱼胰岛后,移植入糖尿病小鼠肝脏内,作为移植组(18只)；设立生理盐水注射组(12只)(简称盐水组)为对照组.动态观察移植后两组小鼠血糖的变化.并对移植物进行病理检查和对NK细胞免疫组织化学检测.结果 移植后1、12h时,移植组的血糖水平明显下降,浓度分别为(9.34±3.05) mmol/L及(7.80±2.10) mmol/L,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).但在移植后24h时血糖浓度为(28.13±1.56) mmol/L,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).实验组在移植后12h,病理检查可见移植物周围有轻度的炎性反应,各级血管处可见明显的凝血反应,有炎性细胞的聚集,胰岛结构仍完整；在移植后24 h,可见移植物周围有明显的炎性细胞浸润.免疫组织化学检查显示在移植物周围有少量的NK细胞浸润.移植后3d,病理检查可见移植物周围可见大量炎性细胞浸润及纤维化表现.对照组在移植后的病理检查始终未发现移植部位周围有任何炎性细胞聚集.结论 罗非鱼胰岛肝脏内移植能短暂的降低糖尿病小鼠血糖,血液介导的即刻炎性反应是导致胰岛早期死亡的原因,NK细胞参与了这个排斥反应.
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感染罗非鱼的无乳链球菌对人致病性的研究进展
无乳链球菌是引起链球菌病的重要致病菌,具有广泛的宿主感染性,既能感染人类引起新生儿脑膜炎,感染奶牛引起乳腺炎,又能引起鱼类链球菌病.近年来罗非鱼感染无乳链球菌的情况越来越严重,给全世界的罗非鱼养殖业造成极大的损失,我国南方地区近年来也出现了严重的罗非鱼链球菌病的暴发流行.本文对无乳链球菌的病原特征、毒力因子、对罗非鱼的感染情况,以及对人及哺乳类动物的致病性等方面进行综述,旨在探讨人源性无乳链球菌与罗非鱼源性无乳链球菌之间的联系,以及感染罗非鱼的无乳链球菌对人类的致病作用,同时为我国罗非鱼链球菌病的防控提供科学依据.
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广东五地区养殖罗非鱼无乳链球菌的分离、鉴定与特性分析
目的 了解广东省罗非鱼主要养殖区内感染罗非鱼的无乳链球菌感染状况.方法 从广东省内5个罗非鱼主要养殖区内收集罗非鱼样本,分离可疑病原菌,生理生化鉴定分离菌株种类;特异性PCR鉴定;多重PCR鉴定分离菌株的血清型.结果 从广东5个罗非鱼主要养殖区发生病害的养殖场采集成鱼206条,共分离到单菌落172个,分离阳性率介于75.29％～89.47％.经生化鉴定无乳链球菌145株、戊糖片球菌18株、血链球菌7株、粪肠球菌2株.特异PCR鉴定显示171株为无乳链球菌,1株生理生化鉴定为戊糖片球菌菌株(GDSA078),特异性PCR扩增结果阴性.血清型多重PCR鉴定显示170株为Ia血清型,两株扩增结果阴性(GDSA078,GDSA017).结论 广东省主要罗非鱼养殖区内感染链球菌为无乳链球菌,血清型高度一致,均为Ia型.
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基于细胞色素b序列的罗非鱼选育群体遗传变异分析
对吉富品系尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)不同世代选育群体细胞色素b序列进行测定和分析,45个样本经重排比较后获得1 064bp的同源序列.共检测到161个变异位点,占分析位点数的15.13％.同源序列中多态位点比例随着选育世代数的累进,呈现出降低的趋势,F0、F6、F7、F8、F9代分别为14.38％、13.47％、13.38％、10.24％、9.49％.核苷酸多样性指数也呈现出同样的降低趋势,Fo、F6、F7、F8、F9代分别为0.065 47、0.049 05、0.048 81、0.036 19、0.033 81.本研究结果表明,新吉富罗非鱼仍保持了一定程度的遗传变异水平,新吉富罗非鱼逐步趋于纯化.
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热水提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白的研究
目的 研究热水水解法提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白的佳工艺及检测鱼皮胶原蛋白的氨基酸组成. 方法 采用热水水解提取法,探讨于不同温度、pH值、提取时间和液固化等因素对罗非鱼鱼皮胶原蛋白提取的影响,并和多因素正交试验确定佳工艺流程. 结果 罗非鱼鳞胶原蛋白热水提取佳提取工艺为温度90℃,pH值6.0,固液比1:13,时间2h,蛋白得率为212mg/g原料.特征氨基酸羟脯氨酸为9.7%. 结论 研究建立的热水水解法提取罗非鱼皮胶原蛋白纯度高、色泽洁白无异味.
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罗非鱼加工下脚料酶法制备液化蛋白的研究
目的 探讨罗非鱼片加工下脚料提取液化蛋白的工艺,为有效利用罗非鱼片加工下脚料中的蛋白质提供科学依据.方法 使用不同的蛋白酶和不同的工艺对罗非鱼片下脚料的蛋白质进行水解,通过测定其水解率进行优选.结果 采用复合酶,在温度50℃,pH7,酶解6h,水解得率高.结论 复合酶法用于罗非鱼下脚料制取液化蛋白,生产工艺简单、周期短.并显示液化蛋白质营养丰富,含有大量鲜氨基酸,具有良好的开发价值和广阔的市场前景.
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海口市区菜市场鳙鱼和罗非鱼肠道内剑水蚤情况调查
目的 了解海口市区菜市场鳙鱼和罗非鱼肠道内含有剑水蚤的情况.方法 用生理盐水涂片法和离心沉淀法镜检海口市区菜市场鳙鱼和罗非鱼两种淡水鱼肠道中的剑水蚤.结果 鳙鱼肠道内剑水蚤的检出率为2.12％(28/1 319),罗非鱼肠道内剑水蚤的检出率为2.45％(11/449),鳙鱼春季检出率高于秋季检出率(P＜0.05),旱季总检出率高于雨季总检出率(P＜0.05),鳙鱼旱季检出率高于雨季检出率(P＜0.05).结论 海口市区居民食用菜市场鳙鱼和罗非鱼应当妥善清理鱼肠和烹煮淡水鱼进而预防寄生虫病.
