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胶体金免疫层析法快速检测四种血源传播性疾病在临床中的应用
胶体金免疫层析法(GICA )是将胶体金标记、免疫检测和层析技术有机结合在一起的固相标记免疫检测技术,操作简便、快速,特异性强,并不易污染[1]。经血液传播的疾病如乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒、艾滋病等引起的院内感染时有报道。这些疾病的感染途径多样化。不仅给患者带来痛苦,而且也常引起医患纠纷。医疗机构和医务人员对此应高度重视。避免由其引起传染性疾病的传播,减少医院交叉感染和医疗纠纷的发生。为此我院开展的快速血源传染性疾病四项对患者进行初筛检测,已成为我院常规检查的必检项目之一。
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人绒毛膜促性腺激素在妇产科的应用
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由合体滋养细胞分泌的糖蛋白激素,由α、β亚基组成,HCGα亚基抗体与卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、TSHα亚基均能发生交叉反应,而HCGβ亚基片段为其所特有而不受LH干扰,因此临床利用HCGβ亚基的特异抗血清,测定母体血清中HCGβ亚基,现已采用β-HCG放射免疫测定法正确地反应了受试者的HCG水平,检测HCG的酶联免疫方法具有特异性强、灵敏度高、试剂廉价、操作简单特点,应用比较广泛.
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免疫发光仪节约成本对策分析
AXSYM全自动免疫化学发光分析仪是美国雅培公司的产品.其通过微粒子酶免疫分析法(MEIA)、荧光偏振免疫分析法(FPIA)、离子捕捉免疫分析法(ICIA)及辐射能衰减分析法(REA)等4种方法对多种人体指标进行检测.如肿瘤标记物、性激素、甲状腺激素、病毒及药物浓度等,其特点是检测快速、准确、简便、重复性好,主要是其特异性强、抗体(原)纯度高.
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如何提高PCR检测的准确率
PCR是近年来发展起来的一种快速的特定DNA片断体外扩增的一种方法.广泛应用于传染病、遗传性疾病和血液病等.具有特异性强、灵敏度高、简便快速、样品取材范围广等特点.但是,由于PCR强大的扩增能力与检测的敏感性,极微量的污染即可导致假阳性、假阴性的产生.如何在检测中避免污染,提高实验的准确率呢?根据我室多年的实践,总结了几点体会和建议,仅供参考.现简述如下.
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ELISA法实验操作体会
酶联免疫吸附实验(ELISA)是免疫反应第三代实验方法,具有灵敏度高、特异性强、操作简便的特点,已广泛运用于各种疾病的实验诊断,特别在筛选献血员HBsAg、抗-HCV、抗-HIV都选用了酶免试剂盒,由于酶免法敏感性较高,在检测中常会出现一些误差和问题,作者在大量的实验操作中,注意观察分析总结,认为酶免法检验结果准确与否取决于质优可靠的诊断试剂盒,性能良好的实验仪器和正确规范的操作方法.具体的做法和体会如下:
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尿微量白蛋白测定在临床应用中的优越性分析
随着人们生活水平的不断提高,糖尿病和高血压的发病率在不断增加,由它们引起的肾功能损伤也在不断增多,尿蛋白测定是判断肾功能好坏的一项重要指标,以往主要用化学法来检测,现阶段主要用尿分析仪干化学法来检测.由于其敏感性差,干扰因素多,因此只能作为一种过筛试验.尿微量白蛋白是指超过尿蛋白正常范围的上限而用化学法检测不出来的阶段,尿微量白蛋白主要用免疫比浊法测定,由于其灵敏度高,特异性强,弥补了化学法的不足.为了了解两种方法的一致性,我们在用尿分析仪干化学法来检测的同时,采用免疫透射比浊法对尿微量白蛋白进行检测,现将两种测定结果对比分析如下.
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高压锅和微波抗原修复法的对比分析
免疫组织化学技术是用已知抗体或抗原检测组织细胞中的未知抗原或抗体的技术,具有操作简单、敏感性和特异性强等优点,已广泛用于病理诊断.但在甲醛固定、石蜡包埋后的组织有部分抗原决定簇与核酸或其他蛋白发生交联,形成网络,固定液中的醛基在使蛋白质变性的同时,自身也会交联形成网络结构,使组织抗原决定簇封闭.
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三种酶联免疫吸附试验法试剂对低值乙型肝炎病毒e抗原检出的比较
乙型肝炎病毒e 抗原(HBeAg)为一种可溶性蛋白抗原 ,是乙型肝炎(HBV) 活动性复制和有传染性的重要标志 ,HBeAg 检测对于乙型肝炎的诊断、机体免疫状态的评价及病程的转归具有重要意义.目前广泛应用的酶联免疫吸附试验(ELISA)法存在不同的特异性和敏感性的差异 ,且结果仅可提示抗原是否存在.微粒子酶免法(MEIA)为一种新的检测方法 ,可半定量地检测HBeAg , MEIA 法特异性强和敏感高 ,更客观地反映其存在情况[1].本研究对720 份血清HBeAg 在半定量检测同时进行了定性检测 , 根据MEIA 半定量结果及3种ELISA 定性试剂检测结果比较 ,可以得到ELISA 定性检出低值血清HBeAg 的符合率.
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在检验工作中应用酶联免疫吸附试验方法的几点体会
酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,以及既适用于大规模筛查实验又可以用于少量标本的检测,既可以做定性也可以做定量分析等优点,而被广泛应用.
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三种方法检测乙型肝炎表面抗原的结果分析
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一种乙类传染病,也是目前流行广泛、危害严重的病毒性肝炎之一,我国为乙型肝炎病毒感染的高流行区,健康人群的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带率一般为10%~15%[1],目前检测乙型肝炎表面抗原的方法主要有金标法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、电化学发光法(ECLIA)等.金标法因其操作简便快捷,广泛应用于单份急查标本的初筛检测;ELISA开展广泛,应用较早,其灵敏度和准确度与金标法相比均有很大提高,且重复性好,但受钩状效应等因素影响,HBsAg有漏检现象,主要用于大批标本的HBsAg初筛检测;ECLIA作为新一代免疫标记测定技术,具有自动、快速、特异性强、灵敏度高、线性范围宽等优点,弥补了ELISA受钩状效应影响的缺陷,正逐步应用于临床检验.现对3种方法的检测结果进行比较,探讨其差异性.
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免疫组织化学实验技术的体会
免疫组织化学技术是在组织化学的方法上结合免疫学的理论和技术发展起来的一门新技术.它具有较高的敏感性、精确性、特异性强和操作简单等优点.其原理是利用抗原与抗体间的特异性结合原理和特殊的标记技术,对组织和细胞内的特定抗原与抗体进行定位、定性,通过化学反应使标记物显示一定的颜色,并借助显微镜等对其颜色进行观察,以达到检测抗原物的目的.在科研和临床病理诊断应用广泛.但在实验操作过程中经常会出现脱片、假阳性或者假阴性等问题,所以,科学地规范免疫组织化学技术的操作对保证结果的准确判读,实验的重复性有着重要意义.工作质量时控制的关键是:抗原的高压修复,抗原的阴性阳性对照设置[1].现从按免疫组织化学操作流程对各步骤中的注意事项进行总结,以提高免疫组织化学化技术水平.
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西门子ADVIA Centaur CP型全自动化学发光仪残余试剂的回收再利用
ADVIA Centaur CP型全自动化学发光免疫分析仪由德国西门子公司生产,该仪器具有测试速度快、特异性强、灵敏度高、配套试剂有效期长、无放射污染、人机对话操作方便、人为输入样本号错误或重复输入样本号错误零容忍等优点。但由于其配套试剂均需进口,检测成本高,独立包装,测试个数固定,自动记录条形码和测试个数,使其盒内残留的试剂不能再利用而造成医疗资源的浪费。如何降低成本,使其技术更好地为临床服务,成为用户为关心的问题。经过多年对ADVIA Centaur CP的使用观察研究,发现每个试剂盒在完成标注的测试后,却有约15%左右的试剂残留盒内,若能在保证检测结果准确的前提下充分利用这部分试剂,就可以使医疗资源得到大限度的利用,降低检测成本,提高经济效益。本研究文献[1,2]报道和生化分析仪试剂续添的操作说明,根据试剂使用量情况,对游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)这部分残余试剂的再利用的方法及被选择的原因做简单介绍。
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浅论酶标仪的质控方法及其意义
自从1 971年酶联免疫吸附试验(ELISA)方法建立以来,由于其敏感性高,特异性强,操作简便而得到迅速推广,同时,相关的各型酶标仪也应运而生并得到快速发展.卫生部卫医发(1995)第32号文件中明文规定"酶标试剂不得使用目测法判断结果",因此酶标仪的质量优劣显得更加重要.本文通过对Multiskan MK3型酶标仪的质控,简述酶标仪的质控方法及其重要性.
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霍乱弧菌的检测研究进展
霍乱是由霍乱弧菌引起的急性肠道传染病,属甲类传染病,在甲类传染病中因其处于鼠疫之后,故俗称"二号病".霍乱主要是在夏秋季节流行,传染源是病人和带菌者,通过病人或带菌者的粪便污染水源和食物,经口传入肠道,引起感染.人类是霍乱弧菌的惟一易感者.长期以来,对该菌的鉴定都采用传统的检验方法,即形态学、生理生化特征及血清学鉴定,系细胞水平鉴定,快也要十几个小时才能完成.近年来,国内外已开始采用PCR技术[1]、DNA探针技术对霍乱弧菌特别是流行株进行鉴定.这些方法简单、快速、特异性强,已得到广大医疗、卫生防疫实验室人员的关注,并成为研究的课题.
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气相色谱-质谱测定尿液中的克伦特罗
拉贝洛尔、克伦特罗属于肾上腺类-受体激动剂(神经兴奋剂),即β2-受体激动剂.我国和欧盟已经禁止其作为生长促进剂,并且规定了克伦特罗在动物组织中的大残留浓度为0.5μg/kg.这些物质在动物性食品中往往以痕量水平(μg/kg)存在,检测样品基质(如尿液和肝脏等)本身也具有复杂性[1~3],本文旨在建立一种简单、快速、灵敏度高、特异性强的分析方法,以满足目前其在生物样品中的检测需要.
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免疫胶体金层析法快速检测食品中吗啡
食品中罂粟的测定采用液相色谱法,因仪器价格昂贵,不易推广,基层常采用薄层层析法,但该法操作繁杂,而且由于被测样品中往往含有多种香料,对实验造成严重干扰,可能得到不准确结果.本实验采用免疫胶体金层析法进行食品中吗啡分析,该法特异性强、灵敏度高,取得了良好效果.现报告如下.
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雌二醇的免疫胶体金试纸法检测
雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分,为防止儿童性早熟等问题,食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视.胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视.其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显变化,所以它可以取代酶标记抗体[1,2].本实验采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定在硝酸纤维膜上的雌二醇结合物相结合,固定有雌二醇结合物的检测线处就显现明显的颜色[3,4].本法具有灵敏度高、特异性强、简便快速、成本较低、结果容易判读等优点,适用于样品的初步筛选.
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PCR法鉴定单核细胞增生李斯特菌
单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种人畜共患病的病原菌.Lm是重要的食源性病原体之一,主要污染肉类、乳制品和蔬菜等.Lm鉴定方法包括传统的分离鉴定法、免疫学鉴定方法等.分离培养鉴定法比较简单,但是操作烦琐、耗时长,不适合日常对于食品的检测.Lm免疫学检测操作简便,可在同一时间内检测大量样品,但由于菌体及鞭毛抗原交叉反应的存在,难以进行李斯特菌种间特异性鉴别.PCR法具有特异性强、灵敏度高和速度快等优点.本文选用hly基因作为扩增的目标片段对10株临床分离株、24株标准菌株、8株从食品中分离的Lm进行了再鉴定,显示PCR法具有特异性强、速度快和易操作等优点.
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奥扎格雷钠治疗频繁发作TIA临床疗效观察
奥扎格雷钠是用于临床的特异性强力血栓素合成酶抑制剂.临床主要用于治疗脑梗塞、TIA等.为观察其治疗TIA的疗效,2003-2006年我们对46例TIA患者进行治疗并与常规药物治疗组对比,评价其疗效.
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心肌肌钙蛋白Ⅰ快速测定及临床意义
1987年Cummins等[1]首次报道用放射免疫方法测定周围血中心肌肌钙蛋白Ⅰ(CTnⅠ)浓度诊断急性心肌梗塞(AMI),以其诊断敏感性高,特异性强,持续时间长,诊断时间窗宽[2,3]等优点,在临床上应用日益广泛.但在检测方法上,仍然采用由Boder等[4]改良的单克隆抗体和酶联免疫法[5],该方法操作过程复杂,耗时长达90分钟[6],而且需要有相应的仪器来配合,所有这些限制了它大诊断价值的发挥.CTnI快速测定方法的问世,弥补了这些不足,并经临床观察[7],效果可靠.本文着重介绍CTnI快速测定方法及其临床意义.