2005年上海地区儿童流行性腮腺炎890例临床流行病学特征

目的 了解2005年上海儿童流行性腮腺炎(流腮)的流行情况、临床特征和直接经济负担.方法 回顾性横断面临床分析我院传染科确诊的流行性腮腺炎(流腮)890例门诊儿童和270例住院儿童临床资料.结果 流腮在上海地区全年均有发病,4～7月为发病高峰季节,占全年的54.2%.270例住院患儿中,以外来儿童居多,占67.8%,有8例(3.0%)曾经接种过1剂麻疹-风疹-腮腺炎(MMR)疫苗.96.6%的门诊患儿和99.6%的住院患儿为3岁以上儿童.在890例流腮儿童中有并发症患儿234例,占26.3%,其中并发脑膜炎和(或)脑炎205例(87.6%),并发睾丸炎14例(6.0%),并发胰腺炎11例(4.7%),并发耳聋1例(0.4%),有2种或2种以上并发症18例(7.7%).无死亡病例发生,但有耳听神经损伤后遗症.每一患儿病程中就诊1～3次,平均为1.4次.门诊1次就诊的医疗费用为114.9～184.7元,平均为(142.9±20.5)元,住院患儿总医疗费用624.6～6 190.2元,平均为(1 897.8±744.2)元.结论 流腮仍是上海儿童中常见的急性呼吸道传染病,并发症较高,幼托机构幼儿和学龄儿童是易感人群,应加强和推广易感人群的疫苗接种,疫苗接种经济有效,可大大降低疾病治疗负担.

乙型肝炎病毒表面抗原-抗体复合物治疗慢性乙型肝炎患者病毒S基因变异研究

目的 研究应用乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)-抗体复合物治疗性疫苗(YIC)治疗慢性乙型肝炎患者是否会诱生S基因免疫逃逸变异株的出现.方法 选取5例用30μg或60μgYIC治疗后血清乙型肝炎病毒(HBV)DNA水平下降》2log10、伴有乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)转阴应答,但在随访6个月后病毒DNA水平重复升高的患者作为研究对象,另选取1例对YIC治疗始终无应答患者和1例注射安慰剂患者作为对照,用聚合酶链反应(PCR)方法扩增治疗前(0周)及治疗后(4.4周)血清中HBV DNA的S基因、前核心基因、核心基因启动子片段,并进行序列比对分析.结果 S基因"a"决定簇及前-核心基因均未发生变异,但YIC治疗后有3例HBV的核心基因启动子1762/1764位点序列有变异,另有2例在核心基因启动子的其他位点有核苷酸变异.结论 研究显示5例出现病毒重新复制的患者并非由于发生了病毒S基因逃逸变异所致.

人疱疹病毒7型pp85重组表达及抗体制备

目的 制备人疱疹病毒7型(HHV-7)pp85蛋白及其抗体.方法 采用聚合酶链反应(PCR)方法自HHV-7型YY5分离株中扩增出pp85基因,经测序后构建原核表达质粒PGEX-6p-1+pp85b.重组质粒转化大肠埃希菌Rosetta,诱导蛋白表达.应用酶切鉴定、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白质印迹法等方法确保基因片段的正确性及表达蛋白的特异性.表达的蛋白经亲和层析纯化后,免疫动物制备多克隆抗体,并通过免疫荧光法鉴定抗体的特异性.结果 成功地获得了高纯度的pp85融合蛋白,纯度可达90%以上;免疫动物后制备的多克隆抗体效价可达1:102 400,该抗体能特异识别HHV-7抗原,而不与HHV-6反应.结论 获得高纯度的HHV-7 pp85融合蛋白及其高效价的抗体,将进一步应用于临床检验.

肝移植后真菌感染易感因素分析

目的 了解肝移植后受体发生真菌感染的特点,分析相关危险因素,并探讨预防措施.方法 回顾性分析我院肝移植中心2003年1月～2005年1月实施的195例肝移植患者发生真菌感染的情况.结果 195例肝移植患者,有25例发生真菌感染,共分离出40株真菌,感染率为12.8%.其中25株为白假丝酵母(62.5%),9株为光滑假丝酵母(22.5%),5株为热带假丝酵母(12.5%),1株为曲霉(2.5%);感染部位以呼吸道为主(占49.0%).真菌感染与移植前后广谱抗生素应用时间、住院总天数、静脉导管使用天数、术后24 h白细胞和中性粒细胞数、术后24 h总胆红素、直接胆红素以及输血量有明显相关性(P《0.05).肝移植真菌感染死亡3例,病死率12%.结论 多种临床易感因素均可导致肝移植术后真菌感染,尽量缩短广谱抗生素使用时间、严格掌握静脉穿刺的适应证、缩短导管留置时间、及时监测血常规和肝功能、控制并发症,是预防肝移植术后真菌感染的重要措施.

77例人类免疫缺陷病毒感染者临床特征分析

目的 分析人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的临床特点及其意义.方法 用微粒酶免疫试验和蛋白质印迹法对HIV感染者的血清进行HIV抗体初筛和确认,并对感染者的流行病学、机会性感染及免疫学特点进行分析.结果 在1998～2006年期间,我院共发现77例HIV感染者,其中上海户籍患者占了50.7%,男、女比例为2.85:1,年龄以30～49岁为主,传播途径中以性传播常见(40.3%).早期症状常被忽略,以消化道及肺部真菌、假单胞菌感染,性传播疾病,病毒性肝炎,皮损等就诊于各科室.多重或多部位的机会性感染可见于大多数临床已发病患者.结论 HIV感染的及时诊断,对感染者的治疗、机会性感染的预防以及减少传播具有重要的意义.

MyD88抑制乙型肝炎病毒复制依赖活化NF-κB信号通路

目的 研究髓样细胞分化蛋白(MyD88)抗乙型肝炎病毒(HBV)效应的作用机制.方法 构建MyD88的截短突变体,获得核因子kappa B(NF-κB)超抑制剂IkBa-SR或者NF-κB信号通路激活剂IKKα/IKKβ的表达质粒,分别与HBV复制型质粒瞬时转染Huh7细胞,检测细胞上清液中HBeAg,HBsAg的表达以及胞质中HBV复制中间体DNA的含量,并以NF-κB依赖的荧光素酶报道系统检测它们活化NF-kB出的程度.结果 MyD88全长蛋白和2个截短突变体M(1-151)、M(151-296)活化NF-κB的程度与其抑制HBV蛋白以及复制中间体DNA合成的能力相一致.与空载相比,表达NF-κB信号通路激活剂IKKα/IKKβ的质粒共同瞬转细胞后,转染MyD88和HBV表达质粒的细胞中NF-κB的通路明显活化,同时HBV core蛋白的合成显著降低;而NF-κB的超抑制剂IkBα-SR共同瞬转的细胞中core蛋白的表达量显著增加,检测细胞培养上清液中HBeAg和HBsAg及胞质中HBV复制中间体DNA的合成,得到相似结果.结论 NF-κB信号通路的活化在MyD88抑制HBV复制中发挥了关键作用.

丙型肝炎病毒F蛋白磷酸化位点突变与细胞内分布

目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白磷酸化位点突变对其在细胞内分布位置及功能的影响.方法 应用NetPhos2.0 Server软件预测F蛋白的磷酸化位点,据此设计重叠引物,利用引物之间相互延伸获得突变型HCV f基因,该基因第13、14、114、121和124位密码子由野生型f基因的TCT突变为GAT,对应氨基酸由丝氨酸(S)突变为天冬氨酸(D).将突变型f基因及野生型f基因定向克隆至pEGFP-N1,得到pEGFP-mf和pEGFP-f重组子.采用脂质体法将重组子转染HepG2细胞,再用激光共聚焦显微镜观察突变型F蛋白以及野生型F蛋白在细胞内的分布情况,拍照并进行半定量分析.结果 在HepG2细胞中,突变型F蛋白主要分布在细胞核内(90%),细胞质内有少量分布(10%),平均荧光强度分别为63.70±3.20和7.06±0.34,两者差异有统计学意义(P《0.001,t=99.2);野生型F蛋白主要分布在细胞质内(94.9%),细胞核内有少量分布(5.1%),平均荧光强度分别为83.34±4.07和4.48±0.22,两者差异有统计学意义(P《0.001,t=106.5).结论 HCV F蛋白在细胞内存在磷酸化和非磷酸化2种形式,其功能也不同.细胞质内以磷酸化F蛋白为主,非磷酸化F蛋白主要位于细胞核内.磷酸化F蛋白可能参与HCV复制调节,非磷酸化F蛋白可能影响细胞核内基因转录.

Grp78/Bip介导戊型肝炎病毒衣壳蛋白对宿主细胞的吸附

目的 探讨Grp78/Bip在戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白进入宿主细胞过程中的作用.方法 采用pull-down和免疫共沉淀技术进一步验证p239与Grp78/Bip的相互作用;采用激光共聚焦显微镜技术检测p239与细胞膜表面Grp78/Bip共定位情况;采用原核表达纯化的Grp78/Bip蛋白封闭p239的Grp78/Bip结合位点,检测其阻断p239吸附细胞的效果.结果 p239与Grp78/Bip可以直接结合,而且这种结合是可逆的生理性结合;p239与Grp78/Bip在细胞膜上存在部分共定位;Grp78/Bip能部分阻断p239对肝细胞的吸附.结论 Grp78/Bip参与并介导HEV衣壳蛋白对宿主细胞的吸附.

慢性乙型肝炎抗病毒药物的选择

慢性乙型肝炎抗病毒治疗的研究有了明显的进展.1998年前,抗乙型肝炎病毒(HBV)注册药物只有标准α干扰素;1998年之后,核苷(酸)类似物拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦和替比夫定相继用于临床;2005年聚乙二醇化干扰素α-2a(PAGasys)批准上市用于慢性乙型肝炎治疗.这些研究的进展,一方面使临床医生在慢性乙型肝炎抗病毒治疗时有了更多的选择,另一方面也使临床医生在决定治疗方案时面临困难.

狂犬病病毒研究进展

狂犬病是一种古老的流行病,由狂犬病病毒(Rabies virus)引起.人类患者多因病畜咬伤而感染,出现以恐水、畏光、吞咽困难、狂躁等为主要特征的中枢神经系统感染疾病.

PD-1及其配体在慢性病毒感染中的作用

慢性病毒感染是严重威胁人类健康的世界性问题.据统计,仅由人类免疫缺陷病毒(HIV、乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)引致慢性感染的人口即达5亿之多.

模式识别受体与肝脏疾病

天然免疫系统发挥防御作用的关键是对病原体的识别,这一识别主要由模式识别受体(patternrecognition receptors,PRR)完成.

美国微生物学会杂志摘要

1.纽约大学Martin Blaser等提出:人体皮肤上有十分广谱的细菌种类.皮肤可认为是人体大的器官.

丙型肝炎病毒的细胞培养系统

丙型肝炎病毒(HCV)自1989年被鉴定并命名以来,对其研究一直很难全面展开,对它的生活周期人们知之甚少,主要原因之一是该病毒在体外很难培养.

克-雅病2例及文献复习

克-雅病(creutzfeldt-Jakob disease)是由朊毒体感染的一类临床罕见疾病.其临床表现为进行性痴呆伴共济失调、肌痉挛、视力障碍等.近期我院收治2例,报道如下.

狂犬病13例临床分析

狂犬病是一种病死率极高的传染性疾病.随着我国犬类数目增加,狂犬病病例也随之增多.2005～2006年我院共收治狂犬病患者13例.现对狂犬病的发病、临床特点及预后情况分析如下.

病毒拮抗干扰素的作用

1957年,英国细菌学家Alick lsaacs与瑞士微生物学家Jean Lindenmann将经热灭活(后来用紫外灭活)的流感病毒处理鸡胚尿囊绒毛膜,再用活的流感病毒攻击,发现绒毛膜不能被活病毒感染,进一步从细胞培养上清液中提纯了一种蛋白质,将此蛋白加入新鲜的绒毛膜后同样呈现拮抗病毒感染的现象,他们将此现象称为"干扰(interference)",将此蛋白则称为"干扰素(interferon)"[1],由此拉开了干扰素时代的序幕.

开拓病毒性肝炎"转译型"研究的新领域

近来,国际及国内在提出研究策略时常用的一个词是"转译型研究"(translational research),此含义为将基础型研究转化为服务于实践的应用型研究.其含义是否也可包括由临床、预防实践向基础"转译"值得商榷.在我国,大多数基础研究均从不同层次与应用挂钩,在这方面似乎较欧、美各国更"先进".

IN Cell Analyzer 1000系统在药物筛选及评价中的应用

随着新药筛选研究的深入,在活细胞水平上检测特定蛋白质的变化或化合物作用于细胞的活性和毒性成为药物筛选研究的重要环节之一.

复旦大学遗传学研究所、遗传工程国家重点实验室