首页 > 文献资料
-
丹参酮类化合物对NB4细胞的增殖抑制与构效关系探讨
目的 比较丹参酮类化合物对人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的体外增殖抑制作用,并探讨其分子结构与细胞毒性之间的关系.方法 采用改良MTT法测定不同浓度的丹参酮类化合物与细胞共培养一定时间后对NB4细胞的增殖抑制作用；采用倒置显微镜观察其细胞形态.结果 供试丹参酮类化合物均能有效抑制NB4细胞的增殖,其抑制作用呈明显的时间和剂量依赖性.与NB4细胞共培养24 h后,二氢丹参酮Ⅰ与丹参酮Ⅰ的IC50值分别为1.86、3.62 μg· mL-1,丹参酮ⅡA和隐丹参酮的IC50值均大于10 μg·ml-1；共培养48 h后二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮的IC50值分别为0.65、1.41、1.83、5.41μg·mL-1；72 h后的IC50值分别为0.28、0.33、0.45、2.59 μg· mL-1.结论4种丹参酮类化合物对NB4细胞均具有增殖抑制作用,作用强度大小依次为二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮,提示丹参酮类化合物的A环为芳环时可增强细胞毒性,C环的呋喃环结构可能影响其细胞毒性.
-
莪达夏提取物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用
目的 研究藏药莪达夏水提物对体外培养的人乳腺癌细胞MCF -7增殖的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用MTT法检测不同浓度的莪达夏水提物处理MCF -7肿瘤细胞12、24、48 h后细胞的存活率,光镜下观察MCF -7细胞形态学的变化,用Annexin V - FITC/PI双染色凋亡检测试剂盒和流式细胞术分析水提物对MCF -7细胞凋亡的影响.结果 莪达夏水提物对MCF -7肿瘤细胞的增殖产生抑制作用,且高抑制率达62％,不同浓度的水提物作用细胞后可引起肿瘤细胞出现胞浆空泡和凋亡小体,低浓度的水提物处理细胞后,肿瘤细胞出现早期凋亡,随着药物浓度的增高,凋亡晚期的坏死细胞增多.结论 莪达夏水提物可抑制体外培养的MCF -7乳腺癌细胞的增殖,其抑制作用与诱导肿瘤细胞凋亡的机制有关.
-
青蒿琥酯对人淋巴细胞白血病/淋巴瘤细胞抑制作用及机理的研究
目的 观察青蒿琥酯(ART)对白血病/淋巴瘤细胞株Raji、Jurkat和急性淋巴细胞白血病(ALL)原代细胞的增殖抑制作用,以及ART与长春新碱(VCR)、阿糖胞苷(Ara-C)的细胞毒协同效应,并探讨其作用机制.方法 MTT法观察ART对Raji、Jurkat、ALL原代细胞的增殖抑制效应及ART与VCR、Ara-C的协同效应.Wright-Giemsa染色光镜下及透射电镜观察细胞凋亡的形态变化,Rhodamine-123检测线粒体跨膜电位(MMP)变化,比色法检测细胞内caspase-3浓度变化.结果 ART在体外能显著抑制Raji、Jurket细胞的增殖,对ALL原代细胞亦具有增殖抑制作用.低浓度ART与VCR、Ara-C联合,能增加VCR、Ara-C的细胞毒作用.ART作用后B/T淋巴细胞白血病/淋巴瘤细胞光镜及电镜均表现出凋亡形态学改变,线粒体跨膜电位下降,细胞内caspase-3的表达增加,呈浓度依赖性.与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 ART对淋巴细胞白血病/淋巴瘤细胞具有抑制作用,且与VCR、Ara-C联用具有协同效应,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关.ART有望开发成治疗ALL/淋巴瘤的新药.
关键词： 青蒿琥酯 急性淋巴细胞白血病/淋巴瘤 增殖抑制 细胞凋亡 -
TCLA诱导大鼠脑胶质瘤细胞增殖抑制及凋亡的研究
目的 探讨共轭三烯酸(TCLA)对大鼠脑胶质瘤细胞体外增殖抑制、凋亡作用及其作用机制.方法 采用细胞增殖实验(MTT法)、克隆形成实验、BrdU掺入实验检测TCLA对大鼠脑胶质瘤细胞系C6的体外增殖抑制作用;Hoechst33342染色、流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;RT-PCR检测调亡相关基因腺苷二磷酸核糖转移酶1(ADPRTL1)、细胞色素P4501A1(CYP1A1),过氧化物酶增殖体激活受体-γ(PPAR-γ)的表达.结果 MTT法发现,TCLA可显著抑制C6细胞株增殖(40 μmol/L,72 h,细胞存活率56.71%±0.98%),并存在量-效、时-效关系,克隆形成下降,40μmol/L的TCLA可完全抑制克隆形成;实验组BrdU标记率63.1%±1.0%,较对照组(95.6%±1.4%)明显降低(P<0.05);Hoechst33342荧光染色示,实验组凋亡率10.0%±0.3%,较对照组(1.6%±0.6%)明显升高(P<0.05);流式细胞术分析结果示,TCLA使C6细胞凋亡指数升高,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,与对照组的差异均有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,实验组ADPRTL1、CYP1A1、PPAR-γ mRNA表达均较对照组增强,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 TCLA对大鼠脑胶质瘤细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用.其作用机制可能与抑制肿瘤细胞DNA合成、细胞周期阻滞、上调凋亡相关基因(ADPRTL1、CYP1A1、PPAR-γ)表达有关.
-
CAG治疗方案药物对人Jurkat细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用
目的:探讨CAG治疗方案药物阿糖胞苷(Ara-c)、阿克拉霉素(ACR)及粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对人T细胞性急性淋巴细胞白血病细胞(Jurkat细胞)的生长抑制和诱导凋亡的情况.方法:用CAG治疗方案药物分别处理Jurkat细胞和缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞,CCK-8法检测细胞增殖抑制率, 流式细胞仪检测细胞凋亡率. 结果:CAG治疗方案药物作用Jurkat细胞48 h后增殖抑制率为93.67%,与Jurkat细胞PBS对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);与缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞CAG组比较,差异具有统计学意义(P<0.05). CAG治疗方案药物作用缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞48 h后增殖抑制率为7.16%, 与缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞PBS对照组比较, 差异不具有统计学意义 (P>0.05). CAG治疗方案作用Jurkat细胞株12 h后,细胞早期凋亡率为46.12%,晚期凋亡率为5.79%;作用24 h后,细胞早期凋亡率为55.21%,晚期凋亡率为28.31%,Jurkat细胞PBS对照组细胞凋亡率为0,差异具有统计学意义(P<0.05). 结论:CAG治疗方案对缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞的增殖抑制不明显,对缺铁性贫血患者骨髓淋巴细胞副作用小.CAG治疗方案药物能明显抑制Jurkat细胞的生长并杀伤Jurkat细胞,且能诱导较多细胞发生早期、晚期凋亡,凋亡在Jurkat细胞株死亡中起决定性作用,通过凋亡清除绝大多数细胞.
-
不同能量等级钬激光照射对膀胱癌细胞株T-24增殖活性与凋亡的影响
目的 观察不同能量等级钬激光照射人膀胱癌细胞株对膀胱肿瘤细胞增殖活性的影响与诱导肿瘤细胞凋亡中的作用.方法 人膀胱癌细胞株T-24细胞以不同等级低剂量钬激光直接照射48h后,应用MTT法观察细胞增殖受抑制情况以及光镜下观察细胞形态学的改变;并根据结果选择适宜的钬激光能量值照射T-24细胞后,采用免疫荧光分析钬激光照射肿瘤细胞株后对肿瘤细胞增殖的抑制情况以及对细胞凋亡情况的影响.结果 随着钬激光辐射能量的增大,细胞增殖抑制率上升,呈现出一定的剂量依赖关系.根据预试验结果选取钬激光能量值为800mJ辐射细胞株干预后48h采用普通光镜及荧光显微镜观察细胞形态均提示实验组细胞生长密度降低,与对照组细胞在形态学上差异明显,符合细胞凋亡的改变.结论 体外细胞试验结果表明,采用钬激光照射人膀胱癌细胞株T-24,能够抑制肿瘤细胞增殖活性并诱发肿瘤细胞凋亡.
-
光动力对结肠癌细胞周期阻滞作用的相关研究
目的:探讨ALA-PDT后结肠癌细胞关卡相关因子P21、P27、cyclinE、CDK2 mRNA的表达情况.方法:应用RT-PCR技术对ALA-PDT后结肠癌细胞株SW480 P21、P27、cyclinE、CDK2 mRNA的含量进行检测.结果:ALA-PDT后P21 mRNA含量较PDT前明显提高(P<0.01),而cyclinE、CDK2 mRNA的含量下降(P<0.01), P27 mRNA含量无明显改变.结论:ALA-PDT对肿瘤细胞的增殖抑制作用可能与其诱导P21 mRNA的过表达,进而下调cyclinE、CDK2的表达有关.
-
转化生长因子β1基因转染对结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用
目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)基因转染对结肠癌细胞SW480体外增殖的抑制作用.方法:以腺病毒为载体将人TGF-β1基因导入体外培养的人结肠癌细胞株SW480, 应用免疫组织化学及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SW480细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白及mRNA的表达情况.通过MTT法检测转染后细胞增殖的抑制情况.结果:转染hTGF-β1基因后,与对照组相比,TGF-β1蛋白和mRNA在细胞中的表达均增强.SW480的增殖受到明显抑制(P<0.05),抑制率为60%～80%.结论:转染hTGF-β1基因对体外培养的结肠癌细胞SW480的增殖有明显抑制作用.
-
蒙药升阳十一味丸对三种人消化系肿瘤细胞的增殖抑制作用
目的:研究蒙药升阳十一味丸对体外培养的人胃癌MGC-803细胞、结肠癌LoVo细胞、胰腺癌K-3细胞增殖的影响.方法:采用不同浓度升阳十一味丸处理细胞后,通过MTT法检测升阳十一味丸对三种癌细胞生长的影响,并计算增殖抑制率;应用倒置光显微镜观察细胞形态改变.结果:MTT显示,蒙药升阳十一味丸能抑制人三种消化系肿瘤细胞的增殖,并具有良好的量效关系;光镜下可见药物作用后,胃癌MGC-803细胞呈现凋亡细胞的形态改变;结肠癌LoVo细胞、胰腺癌PC-3细胞呈现坏死细胞的形态改变.结论:蒙药升阳十一味丸对三种肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用.
-
美洲大蠊、斑蝥提取物对3株人肿瘤细胞增殖抑制作用的研究
目的:研究从昆虫美洲大蠊和斑蝥中提取的3个活性部位YS-Ⅰ、YS-Ⅱ、YS-Ⅲ对人胃癌细胞MGC-803、人食管癌细胞Eca-109和人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用.方法:将从昆虫美洲大蠊、斑蝥中提取的3个活性部位分别作用于MGC-803、Eca-109、HepG2细胞株,采用MTT法检测受试物作用24、48、72小时后细胞增殖抑制情况,计算IC50值,并研究其量效、时效关系.结果:3个由昆虫中提取的活性部位对人源MGC-803、Eca-109、HepG2肿瘤细胞株均有一定的增殖抑制作用,并呈现较好的时间依赖和剂量依赖关系.结论:美洲大蠊提取物YS-Ⅰ及斑蝥不同极性提取物YS-Ⅱ、YS-Ⅲ对人胃癌、食管癌、肝癌细胞具有较好的增殖抑制作用,为今后进一步研发昆虫源低毒、高效的抗肿瘤药物奠定了一定基础.
-
Runt相关转录因子3依赖的维生素D3抑制结肠癌细胞的增殖
目的:探讨维生素D3在结肠癌中的抗肿瘤机制及其与抑癌基因runt相关转录因子3(RUNX3)的关系, 为临床有效治疗结肠癌提供依据.方法:不同浓度维生素D3作用于SW480结肠癌细胞系, RT-PCR和Western blot分别检测RUNX3在mRNA和蛋白水平的表达情况.构建RUNX3基因的小干扰RNA载体并将其转染SW480结肠癌细胞, 经G418 筛选获得稳定表达的细胞系.MTT法和流式细胞术检测维生素D3对转染前后的细胞生长作用的影响.结果:随着维生素D3作用浓度增加, SW480细胞中RUNX3基因在mRNA和蛋白表达水平均呈剂量依赖性增加.成功构建了RUNX3的小干扰RNA载体并将其转染SW480细胞;筛选到稳定的敲除RUNX3的结肠癌细胞系.与其他对照组相比, 维生素D3对RUNX3敲除的SW480细胞的生长抑制作用减弱.结论:维生素D3在转录和翻译水平正性调控RUNX3的表达而抑制结肠癌细胞的增殖.
-
马钱子碱对人慢性粒细胞白血病KCL-22细胞的增殖及凋亡作用
目的：探索马钱子碱对人慢性粒细胞白血病KCL-22细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用，为白血病的治疗提供新的方向。方法体外培养白血病 KCL-22细胞株，采用 MTS法检测不同浓度马钱子碱对 KCL-22细胞增殖的影响；通过FITC-Annexin V／PI双染法检测不同浓度马钱子碱处理后细胞的凋亡作用；运用 Western blotting法检测凋亡相关蛋白的表达水平变化。结果马钱子碱可明显抑制 KCL-22细胞增殖，且具有浓度和时间依赖性。马钱子碱可诱导 KCL-22细胞发生凋亡，并以早期凋亡为主，在50～400μg／ml范围内呈剂量效应关系。经马钱子碱处理后，Bcl-2蛋白表达降低、Bax和Cyt-C蛋白表达增高，Caspase-9，Caspase-3均被切割活化。结论马钱子碱可显著抑制慢性白血病 KCL-22细胞增殖，并可能通过调控Bax／Bcl-2平衡、释放Cyt-C及激活Caspase-3，9依赖的内源性线粒体途径诱导细胞凋亡。
-
甘氨鹅脱氧胆酸钠对肝癌SMMC7721细胞凋亡诱导的影响
目的 探讨甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)对人肝癌细胞SMMC7721增殖以及细胞凋亡的影响.方法 采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721,GCDCA分别处理细胞24,48,72 h,进行MTT实验,计算肝癌细胞的生长抑制率;采用流式细胞仪检测GCDCA对SMMC7721细胞凋亡的影响.结果 不同浓度的GCDCA对肝癌细胞SMMC7721均有一定程度的生长抑制作用,高浓度的GCDCA(300 μmol/L)处理组对SMMC7721细胞有较强的毒性损伤.低浓度的GCDCA(200 μmol/L)处理组能明显诱导细胞凋亡,凋亡率随处理时间的延长而增加.结论 GCDCA对人肝癌细胞有增殖抑制作用并能诱导SMMC7721细胞凋亡.
关键词： 甘氨鹅脱氧胆酸 肝癌SMMC7721细胞 细胞凋亡 增殖抑制 -
亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用及机制研究
目的:探讨亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用.方法:MTT法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Hoechst33258染色观察细胞染色质固缩情况,碘化丙啶PI单染法检测细胞周期,Western blot检测p-GSK3β、GSK3β及凋亡相关蛋白PARP、bcl-2的表达.结果:不同浓度的亚砷酸钠或粉防己碱单用均可抑制MDA-MB-231细胞增殖(P<0.01);与单独用药相比,两药联合使用可显著增强细胞增殖抑制效果(P<0.0001).两药联用可显著诱导MDA-MB-231细胞凋亡(P<0.01),细胞凋亡率呈现浓度依赖性递增,并出现细胞核染色质固缩.联合用药浓度为亚砷酸钠10μmol/L+粉防己碱4μg/ml时,S期细胞所占百分比显著增高(P<0.05);联合用药浓度为亚砷酸钠15μmol/L+粉防己碱4.5μg/ml时,G2/M期细胞所占百分比显著增高(P<0.001).联合用药后,凋亡相关蛋白PARP的表达显著上调(P<0.0001);bcl-2的表达显著下调(P<0.05);p-GSK3β、GSK3β蛋白表达均显著上调(P<0.0001).结论:亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有增殖抑制作用,其机制与诱导细胞周期S期、G2/M期阻滞、GSK3β蛋白水平上调及促进细胞凋亡有关,促凋亡作用与bcl-2蛋白水平下调、PARP蛋白水平上调有关.
-
NDRG2调控HGF/c-MET通路抑制结肠癌细胞的增殖
目的:探讨抑癌基因NDRG2通过调节HGF/c-MET信号通路,抑制结肠癌HT29细胞增殖的机制.方法:建立NDRG2过表达细胞株HT29-NDRG2及对照组HT29-Cherry,并于第1、2、3、4、5天以MTT法检测细胞增殖;以不同浓度的HGF(0ng/ml、1 ng/ml、2ng/ml、4ng/ml、8ng/ml、10ng/ml)刺激HT29亲本细胞,并于第1、2、3天以MTT法检测HT29细胞的增殖;采用qPCR法检测NDRG2过表达细胞株HT29-NDRG2与对照组HT29-Cherry两组细胞中HGF的表达水平;Western blot检测HT29-Cherry和HT29-NDRG2两组细胞以及添加HGF(10ng/ml)刺激HT29亲本细胞后各组细胞中HGF/c-MET通路中关键分子的表达.结果:过表达NDRG2以及HGF刺激均可以显著抑制HT29细胞的增殖能力;NDRG2的高表达可以上调HGF的转录水平;HGF可以刺激c-MET和p-ERK1/2,并上调p21和p 27,抑制HT29细胞的增殖;过表达NDRG2明显上调c-MET、p-ERK1/2,并诱导p21和p 27的高表达,从而抑制HT29细胞的增殖.结论:NDRG2可以通过调节HGF/c-MET信号通路从而抑制结肠癌细胞HT29细胞的增殖能力.
-
地塞米松预处理人肺腺癌A549细胞对顺铂抗肿瘤活性的影响
目的:探讨地塞米松(dexamethasone,DEX)预处理人肺腺癌A549细胞后,对化疗药物顺铂(cisplatin,DDP)抗肿瘤活性的影响.方法:以不同浓度(500、1000nmol/L) DEX预先作用于人肺腺癌A549细胞12h后,再用不同浓度(1.25、2.5、5μg/ml)DDP处理.流式细胞术测定细胞凋亡,细胞计数观察细胞生长密度、形态.结果:DEX对A549细胞增殖有抑制作用.DDP能够明显抑制A549细胞增殖,促进其凋亡.DEX预处理后DDP干预A549细胞的增殖抑制作用较单一用DDP增强,且随着DEX浓度的增加,其对化疗药物DDP凋亡抑制作用的影响增强.结论:DEX预处理对顺铂诱导的人肺腺癌A549细胞的凋亡具有明显的促进作用,能增强DDP的抗肿瘤活性.
-
诃子水提取物对肺癌A549细胞抑制作用的实验研究
目的:探讨诃子水提物对人肺癌细胞A549体外增值的影响和作用机制.方法:利用MTT法检测不同剂量组的诃子水提物对肺癌A549细胞增殖的影响,通过倒置显微镜观察肺癌A549细胞的形态学变化,流式细胞仪测定各浓度组诃子水提物对肺癌细胞A549作用后的周期变化.结果:诃子水提物对人肺癌细胞A549的增殖具有抑制作用,且有浓度和时间依赖性;在显微镜下观察到典型的凋亡细胞形态特征;流式方法测定的结果显示,诃子水提物阻滞肺癌A549细胞于G0/G1期.结论:诃子水提物对人肺癌细胞A549增殖具有抑制作用,其机制是诃子水提物使细胞周期阻滞于G0/G1期并诱导细胞凋亡.
-
甘草查尔酮A对胶质瘤的增殖抑制及促凋亡作用机制研究
目的 探讨甘草查尔酮A(LCA)对人胶质瘤U87、U251细胞的增殖抑制和促凋亡作用及其机制研究.方法 通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制作用,并计算出半数抑制浓度(IC50),按IC50和100 μM不同浓度进行分组.采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡以及Western Blot从蛋白水平检测凋亡相关分子的改变情况.结果 MTT显示LCA对人胶质瘤U87、U251细胞具有明显的增殖抑制作用,呈浓度及时间依赖性,LCA对U87、U251细胞48 h的IC50值分别为61.54μM和53.02 μM,倒置显微镜下观察细胞密度减少,形态发生明显改变.流式细胞术结果显示,LCA可促进胶质瘤U87、U251的细胞凋亡(P＜0.01).Western Blot结果显示,LCA干预后可显著降低胶质瘤U87、U251细胞内Bcl-2的表达(P＜0.01),相反,增加Bax的表达(P＜0.05),呈浓度依赖性.结论 LCA对胶质瘤U87、U251细胞具有明显的增殖抑制作用,可能通过内源性凋亡途径诱导其凋亡.
-
丹参酮ⅡA对抑制翼状胬肉成纤维细胞增殖的研究
目的:观察丹参酮ⅡA对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增殖和凋亡的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉复发的新途径.方法:用0～320mg/L丹参酮ⅡA作用体外培养的HPF,24～96h后MTT法检测药物对HPF的影响,免疫组织化学染色增生细胞核抗原(PCNA)检测细胞生长活性.结果:80mg/L丹参酮ⅡA作用48h后能显著抑制HPF的增殖(P<0.05),呈剂量和时间依赖性.丹参酮ⅡA在80～320mg/L范围内能浓度依赖性地抑制细胞表达PCNA(P<0.05).结论:丹参酮ⅡA可显著抑制HPF的增殖.
-
抗CD81抗体对培养大鼠RPE增殖性的影响
目的:观察抗CD81抗体EAT2和H121对培养大鼠视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)增殖活性的影响.方法:分别将2,10mg/L抗CD81抗体EAT2与H121加入体外培养大鼠RPE中,7d后以MTT法测定细胞生长抑制率.结果:加入抗CD81抗体后RPE增殖活性下降,10mg/LEAT2对RPE的细胞生长抑制率达72.7%.抑制作用的强弱随抗体种类及抗体浓度的不同而不同.结论:抗CD81抗体EAT2和H121可以抑制培养大鼠RPE的细胞增殖活性.
