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mdm2基因研究进展及其与肺癌的关系
1 mdm2基因及其作用mdm2是一种癌基因,该基因定位在染色体12q13-14.人的mdm2基因编码区为1467bp,该基因在进化上比较保守,在许多动物细胞的染色体都有同源序列,如人和小鼠mdm2基因编码区有80.3%的同源性.mdm2基因表达的调节相当复杂,并且有不同的mRNA剪接形式.研究表明在培养细胞中至少存在p90、p85、p76、p75、p58和p57共6种mdm2异构体,在体内仅有全长的p90-95和p57能与p53结合[1].
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灯盏花素对氯化钾诱导的培养平滑肌细胞内游离钙的影响
目的:观察灯盏花素对氯化钾诱导的培养的家兔平滑肌细胞内游离钙的影响.方法:用RF_5000荧光光度仪检测Fura-2AM负载的培养平滑肌细胞内游离钙的浓度.结果:在有细胞外钙存在时,静息条件下细胞内游离钙为330±100nmol·L-1,灯盏花素能轻度降低静息状态下细胞内游离钙,但无统计学意义.氯化钾50mmol·L-1将细胞内游离钙增加到420±104nmol·L-1,而灯盏花素10-6、10-5、3×10-5mol·L-1能进一步加强由氯化钾引起的细胞内游离钙的增加.然而,在无细胞外钙时,灯盏花素对细胞内游离钙却没有影响.结论:灯盏花素通过电压依赖性钙通道加强钙离子内流.
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猴骨髓间充质干细胞的分离及原代培养特性的研究
目的:探讨猴骨髓间充质干细胞(MSCs)低分化干细胞方面的特性.方法:以Percoll(质量密度1073g/L)非连续密度梯度离心分离出骨髓悬液中的骨髓间充质干细胞,用含100mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养,观察细胞的形态、生长状况及其超微结构.结果:原代培养的骨髓间充质干细胞增殖缓慢,细胞增殖率和形态分化不均一.如有一些细胞在4wk的培养时间内未见明显增殖,这些增殖不明显的细胞有的未见明显的伸展,呈圆形,有的伸展充分,成片状;在培养2wk后也可见一些明显增殖的细胞,分别形成克隆团状或条状的增生细胞群;培养过程中可见有神经元样及多核细胞出现.原代培养的骨髓间充质干细胞的超微结构也显示了低分化的干细胞特点,如细胞表面具有微绒毛,胞浆内内质网丰富、激离核糖体数量多、线粒体小,核仁大而不规则、可见核裂,超微结构还显示了一些中胚层来源干细胞的结构特点,如大量的微丝.结论:经Percoll细胞分离介质分离出的骨髓间充质干细胞,在非诱导条件下原代培养过程中,从形态分化、增殖率等方面显示了其多向分化潜能;从超微结构等方面显示了其中胚层来源低分化细胞的特点.这些特点可作为骨髓间充质干细胞鉴定的佐证之一,说明Percoll非连续密度梯度离心法对骨髓间充质于细胞的分离具有可靠性.
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淋巴细胞培养条件及常见失败原因探讨
淋巴细胞培养是实验研究常用的一项技术,对于培养器皿,可以选用培养板,培养瓶,培养皿,三角烧瓶,试管,青、链霉素小瓶等[1,2].目前,关于淋巴细胞分离方法的文献资料较多,论述较详细,而对淋巴细胞培养则论述较少,较简单.细胞培养工作十分繁琐,环节较多,探讨细胞培养的条件,对于成功培养细胞具有十分重要的意义.本文选用1.5ml离心管培养淋巴细胞,观察了淋巴细胞培养前后的变化,探讨了淋巴细胞培养的条件及失败的常见原因.现报道如下.
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桑蚕丝低温成形组织工程支架的研究
组织工程学是材料学、工程学和生命科学共同发展并相互融合的产物,其基本思路是在体外分离、培养细胞,将一定量的细胞接种到具有一定空间结构的支架上,通过细胞之间的相互黏附、生长繁殖、分泌细胞外基质,从而形成具有一定结构和功能的组织或器官[1].组织工程的主要步骤为培养增殖目标组织细胞,将高浓度的细胞种植于支架材料上,在支架材料上培养、扩增种子细胞,把体外构建的组织植入患者体内,随着生物支架材料的逐渐降解和吸收,细胞不断增殖并分泌细胞外基质,终形成具有正常结构与功能的活体组织[2].支架材料作为组织工程研究的人工细胞外基质,是组织工程研究的一个重要的方面,它为细胞的附着、生长、繁殖、新陈代谢、新组织的形成提供支持.
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机械应力作用成纤维细胞的研究进展
用机械应力作用于培养的细胞,研究其受应力作用后的各种变化,是目前细胞生物学领域发展十分迅速的一种研究方法,在机械应力作用于体外培养细胞的相关实验研究中,目前比较活跃的领域为骨细胞(研究骨延长技术)、血管平滑肌细胞(研究高血压)、肾小球系膜细胞(研究肾小球高血压)以及肺上皮细胞等,其中对成纤维细胞研究亦比较多,由其心血管系统成纤维细胞在该领域的研究报道较多,但与整形外科关系比较密切的皮肤成纤维细胞研究报道相对较少.
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放射性131Ⅰ照射与分化型甲状腺癌细胞摄碘(125Ⅰ)率关系的实验研究
目的:探讨分化型甲状腺癌培养细胞接受放射性碘(131I)照射剂量与摄取放射性碘间的相关性,为放射性碘去除治疗甲状腺癌提供新的思路.方法:设两个实验组,对分化型甲状腺癌细胞进行培养,其一应用同一活度(20μCi)的放射性131I对培养细胞进行不同时间的照射,另组应用不同活度的放射性131I对培养细胞进行相同时间(12h)的照射,分别测定两组甲状腺癌细胞摄取放射性125I水平.结果:不同活度或不同时间的放射性131I照射使甲状腺癌细胞摄取碘的水平降低,受照射组与未照射对照组细胞摄碘率比较有显著性差异(P<0.01).结论:放射性131I照射可以使分化型甲状腺癌细胞摄碘率显著降低.
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抗龋IgY和IgY牙膏对体外培养细胞影响的形态学观察
目的:了解抗龋IgY和IgY牙膏对体外培养细胞的影响.方法:体外培养人成纤维细胞(human skin fibrobasts,HSF)和中国仓鼠卵巢癌细胞(chinese hamster ovary,CHO),分别经不同浓度的抗龋IgY和IgY牙膏处理后常规培养,通过倒置显微镜和电子显微镜观察细胞生长情况和细胞超微结构.结果:经抗龋IgY处理的HSF和CHO细胞生长旺盛,超微结构无变化;经抗龋IgY牙膏处理的HSF和CHO细胞加药后部分细胞出现变圆或脱落、细胞生长缓慢和细胞器变性等变化,第2天恢复良好生长状态.结论:抗龋IgY对体外培养细胞生长、形态无影响;抗龋IgY牙膏中的某些成分可能对培养细胞有短暂的不良影响.
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猴骨髓间充质干细胞的分离及多向诱导分化
目的探讨猴骨髓间充质干细胞(MSCs)体外生长特性及多向分化潜力. 方法以Percoll(质量密度1073 g*L-1)非连续密度梯度离心分离出骨髓悬液中的MSCs,在非诱导条件下进行培养,观察细胞的形态、生长状况. 取原代体外培养3 wk的MSCs分别向成软骨细胞、成骨细胞、成脂肪细胞及成肌细胞方向诱导,观察其诱导分化结果. 结果原代培养的MSCs增殖缓慢,细胞增殖率和形态分化不均一,在培养过程中有多种形态的细胞出现,如伸展及增殖均不明显的圆形细胞,伸展充分但增值不明显的片状细胞、神经元样细胞,还可见增殖明显的克隆团状或条带状细胞群出现. 传代培养的MSCs细胞仍可见增殖情况及形态分化的多样性,但有"拉网"现象出现. 所培养的MSCs 经诱导可向软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞发展分化. 结论体外培养的猴MSCs细胞具有形态分化、增殖情况多样性的特点,并具有多向分化潜能.
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90例不孕不育患者的染色体分析
自1999年-2002年,对我院妇科及不育门诊就诊患者,经过遗传咨询的筛选,然后进行外周血培养细胞的染色体检查,采用G 显带技术处理,对90例进行了核型分析,现报告如下.
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贴附生长型细胞铺片的制备
在研究体细胞生物学、体细胞遗传学的疾病诊断方面,细胞培养日渐成为一种不可缺少的手段.细胞培养成功后需要用各种方法进行检测,其检测观察的原理及技术与一般方法基本相同,但检测样本的制备略有差异[1].以盖玻片为组织细胞的生长基质表面,可以更方便的培养细胞,并进行观察及培养后的染色处理和保存[2].