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CLOUTER XL型流式细胞仪常见报警的检修及预防
流式细胞仪是一种能够快速定性、定量分析细胞的高新技术仪器,它集中了计算机、流体力学、激光光学、电子学和单克隆抗体技术等多项先进技术,能对细胞进行多参数分析及分选纯化.随着免疫学和细胞化学、单克隆抗体技术的发展,流式细胞仪在许多大中型医院及科研单位中得到了广泛应用.但要使检测顺利进行,得到准确的测量结果,对流式细胞仪的维护保养尤其重要.
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试论艾滋病的治疗方向
自从艾滋病问世之后,其治愈方法便一直不为人知.由于艾滋病本身属于RNA病毒,其遗传物质并不稳定,时常发生突变,因此没有任何一种抗体能够长期与之特异性结合,作为药用.但是基因突变的低频性,造成了HIV病毒种类虽多但仍有部分基因不发生改变,至少HIV将T淋巴细胞作为主要攻击对象的自其问世以来从未改变,这也是艾滋病难以治疗的重要原因.
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流式细胞术的应用及发展
流式细胞仪(Flow cytometer)是一项集激光技术、电子物理、流体力学、光电测量技术、计算机技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,被誉为试验室的"CT",是一种可以对细胞(或亚细胞)结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术.简单说流式细胞术(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或亚细胞结构,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或亚细胞)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行快速定性或定量检测的一种现代细胞分析技术.
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单抗板淋巴细胞毒法与PCR-SSP法检测强直性脊柱炎患者HLA-B27结果的比较
HLA-B27对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的早期诊断和预后的判断具有重要意义,故准确地检测HLA-B27、减少漏诊率与误诊率非常重要.PCR-SSP技术特异性检测HLA-B27 DNA模板,已取代以往的传统血清学方法而广泛应用于临床患者HLA-B27基因的检测[1,2].伴随单克隆抗体技术的成熟,HLA-B27单抗已从实验室阶段进入商品化,其特异性显著提高,弥补了传统血清学方法中的多价抗血清特异性较差、效价不统一的不足,其商品化的干板成为检测HLA-B27的新工具.本文将探讨此法与PCR-SSP法比较的优劣.
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CD55 CD59检测在阵发性睡眠性血红白尿诊断中的意义
阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)是一种起源于造血干细胞的获得性疾病,临床上可有红细胞、粒细胞及血小板的异常改变[1],与再生障碍性贫血(AA)关系密切,有11.1%~28.8%的AA患者可演变PNH,而1/3 PNH有AA的临床表现[2]。可有贫血、血红蛋白尿、感染及血栓形成等临床表现[3],也有报道PNH伴发于淋巴瘤,骨髓增生异常综合征(MDS)和白血病[4]。随着流式技术和单克隆抗体技术的发展,利用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测患者外周血中红细胞与粒细胞表面CD55和CD59的抗原用于诊断PNH已成为临床较常用的诊断方法,且与传统检测方法比较有较好的敏感性[5]。我们采用流式细胞术分别对在我院确诊的PNH、MDS、AA、急性白血病(AL)患者的外周血的粒细胞,红细胞CD55、CD59抗原进行检测,总结报告如下。
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单克隆抗体及基因工程抗体在肿瘤临床诊治中的应用
自1975年单克隆抗体技术问世后,1982年第一例应用单克隆抗体治疗淋巴瘤取得了成功后,掀起了单克隆抗体热,一些基于单克隆抗体技术的公司也相继成立,但是由于临床治疗效果并未取得预想的结果,单克隆抗体的研究进入了低潮.而近5年来由于基因工程抗体的迅速发展,使得抗体治疗肿瘤重现了原先的预想,带来了新的希望.
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孕妇外周血中胎儿细胞的分选富集及其在无创伤性产前诊断中的应用
20世纪90年代以来,随着单克隆抗体技术、流式细胞计数技术以及聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术的发展,已使从孕妇外周血中分离、纯化胎儿细胞,并进行无创伤性产前诊断成为可能,但目前对这一问题还存在不少争论.我们复习了国内外有关文献,对这方面的进展综述如下.
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美罗华治疗非霍奇金淋巴瘤的研究进展
非霍奇金淋巴瘤(NHL) 是常见的淋巴系统恶性肿瘤, 其中绝大多数为B 细胞来源.在过去的30年里,由于过量使用有机磷及噻嗪类农药,淋巴瘤的发病率每年增加了3-5%[1].随着单克隆抗体技术的进步,一些抗癌新药进入临床.单克隆抗体介导药物成为靶向治疗的先驱.1997年11月,美罗华(Rituximab)作为第一种单克隆抗体药物被FDA批准用于临床治疗.
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CA125对卵巢恶性肿瘤及腹盆腔结核诊断的意义
肿瘤标记物是肿瘤细胞异常表达所产生的抗原和生物活性物质.1981年单克隆抗体技术出现以Bast等用卵巢上皮癌细胞株(OVCA433)制备了一种可用于探测卵巢的单克隆抗体-OC125,后者可与卵巢癌相关抗原CA125特异结合[1].目前,测定血清CA125值,已成为一种敏感性很高的诊断卵巢恶性肿瘤的方法.我院自1997年11月以来,采用瑞士产CORE-Ⅱ型酶标免疫分析仪,对妇科住院病人选择性测定CA125值.发现除卵巢恶性肿瘤患者CA125值增高外,还有6例腹盆腔结核病人的CA125亦高于正常.现将其临床意义分析如下.
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嗜碱性粒细胞活化机制的研究进展
嗜碱性粒细胞已被认知130余年,特别是近年来随着动物敲除模型的建立、高纯度细胞分选技术的应用,以及单克隆抗体技术的发展,对其表型和功能认识更加的深入和全面,发现嗜碱性粒细胞不仅参与过敏反应,而且在固有性免疫及免疫调节方面也发挥了重要作用[1].已知,活化是嗜碱性粒细胞发挥其生物学功能的关键步骤,对其活化机制的研究,也已从经典的IgE介导的活化,发展到多途径的活化机制.本文谨对目前嗜碱性粒细胞的活化机制研究进展作一综述.
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器官移植——二十一世纪的外科
现代医学领域里,器官移植是一项先进的、重要的新课题,它已成为治疗完全丧失了功能的脏器的有效措施。扼要地说:心脏疾病如冠心病、心肌病,伴有广泛心肌损害、严重的心力衰竭,估计难以存活6个月以上的病人;肝脏疾病如终末期肝硬化、儿童先天性胆道闭锁、晚期肝癌等;胰腺疾病如胰岛素依赖型(I型)糖尿病伴有严重并发症者;肾脏疾病如慢性肾炎、多囊肾等所致的终末期肾功能衰竭,这类病人只能通过器官移植才能获得第二次生命。据统计,每年每百万人口因慢性肾功能衰竭而死亡的在100人左右,且多为青壮年,这就清楚地表明器官移植的重要性。 必须指出,这一项先进的、重要的新课题——器官移植与现代基础医学有着极其密切的关系,与其说现代基础医学的进展导致了人体器官移植的成功,毋宁说器官移植推动了现代基础医学的迅速进展,因此也就促使我们深入到基础学科中去,特别是遗传学、免疫学和药理学三门基础学科。①在遗传学方面主要是进行了人类白细胞抗原(HLA)系统的研究;器官移植的成败与受体和供体间的HLA配型有着密切的关系。根据近年来尸体肾移植的大量统计数据分析,HLA-A、B和DR完全相符合时,移植肾的一年存活率可高达93%;但如果HLA-A、B相符,而HLA-DR不相符时,移植肾的一年存活率就降至70%。这也说明了,研究HLA系统的动力主要来自临床器官移植配型的需要。②在免疫学方面主要是对免疫监测的研究,如何对器官移植后出现的排斥反应作出早期诊断和预后判断。单克隆抗体技术的建立,对器官移植的发展起到一定的推动作用,例如OKT3、OKT4、OKT8单克隆抗体,不仅可用于检测受体外周血中总T细胞和T4/T8细胞比值,从而对排斥反应作出辅助诊断,而且还可用于预防和治疗排斥反应的发生,延长移植器官的存活时间,这是免疫学对器官移植的一大贡献。③在药理学方面主要是对免疫抑制剂的研究。强有力的环孢素A的研制成功,大大提高了移植器官的存活率,因为它对T细胞介导的细胞免疫反应的抑制作用比对B细胞介导的体液免疫反应强,因而它不是对机体免疫反应的全面抑制。近更新一代的免疫抑制剂FK506已经问世,其疗效较环孢素A更加优越。以上简略地例举了基础学科中的遗传学、免疫学以及药理学等方面的近年进展,使我们认识到,脱离基础学科的研究,就难以实现临床器官移植工作的进一步发展。自1954年美国Murray在同卵双胎的个体间、不需使用抗排斥药物下首次进行肾移植手术获得成功以来,至1997年底,全世界各国所施行的人体三大器官(心、肝、肾)移植累计数已超过50万例次,其中心脏移植4万余例次,肝脏移植6万余例次,肾脏移植达40万余例次。一年有功能存活率,在心移植为90%,肝移植为85%,肾移植已达95%。这些数字充分表明,器官移植已被公认是一种新的医疗方法,它正处在一个飞跃的发展时期。
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放射性探头在前哨淋巴结定位中的应用
用放射性核素标记肿瘤组织,指导外科手术并非是新概念.早在1949年,Selverstore等[1]报道了用手持γ-探头探测放射性标记的骨骼病灶,引导手术切除原发骨肿瘤和骨转移性病灶.1977年,Cabanias[2]在阴茎癌病人中提出前哨淋巴结的概念,认为前哨淋巴结是癌转移的首发部位,并且常常是肿瘤唯一转移的淋巴结.近年,随着单克隆抗体技术的发展,肿瘤组织的特异性标记可通过发射γ-射线的核素标记抗体而达到.
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前列腺增生患者雌激素表达与组织成份定量比较的临床意义
前列腺增生是老年人的常见病,近年来有增多的趋势,我们应用免疫组化方法和单克隆抗体技术对前列腺增生组织雌激素受体(ER)、结蛋白(Desmin)、上皮膜抗原(EMA)、波形蛋白(Vimentin)的表达进行观察和分析,并对增生成份进行定量比较和临床治疗意义分析.
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血清CA72-4在临床应用中的研究进展
糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)是肿瘤细胞膜的结构成分,是肿瘤细胞在形成过程中,其细胞膜表面异常糖基化而成为糖类物质。这类抗原用单克隆抗体技术从肿瘤细胞系(株)中鉴定出来,因而可作为临床辅助肿瘤诊断、监测疗效及判断复发的标志[1]。糖类抗原72-4(CA72-4)是糖类抗原中的一种,又称糖链抗原72-4(CA72-4)、癌抗原72-4,是一种高分子量的血型类抗原,主要存在于胃、卵巢、胰腺、乳腺、大肠及肺等器官中,是一种广谱肿瘤标志物[2]。本文就近年来有关血清CA72-4在临床应用中的研究进展做一综述。
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刚地弓形虫表面抗原研究进展
刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种细胞内寄生原虫,可感染任何有核细胞,无论人或动物,感染率都很高。和其它细胞一样,弓形虫的表膜具有重要的作用,既是虫体与外界环境进行物质交换的界面,也是宿主免疫系统识别并杀伤虫体的主要部位。Handman,Goding和Remington(1980)首先对弓形虫表面抗原进行了分析,其后Johnson(1983)、Dubremetz(1985)、Rodriguez(1985)、Kasper(1982,1984,1987)亦对一些表面抗原进行了研究,虽然已发现的抗原种类很多,但由于技术方法差异,命名很混乱。G.Couver(1980)利用单克隆抗体技术对表面抗原进行了确认。随着分子生物学技术的发展,目前对表面抗原的研究已深入到基因水平,已能对编码P30、P22和P43的基因进行克隆和测序。本文将对近年来弓形虫表面抗原的研究进展作如下综述。1 速殖子的表面抗原1.1 蛋白抗原目前已知的速殖子表面蛋白抗原有五种,根据SDS-PAGE中显示的分子量大小,分别命名为P43、P35、P30、P23和P22[1-4]。编码P30抗原的基因首先被克隆、测序,根据分子遗传学的传统命名方法,编码P30的基因被称为SAG〔s〕。随后,编码P22和P43的基因相继被克隆和测序,依次命名为SAG2和SAG3。至今编码P23和P35的基因仍无法克隆、测序。SAG1、SAG2和SAG3的克隆均采用特异抗体和相关抗原对表达文库进行筛查的传统方法所得,三者具有一些明显特点:
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流式细胞术在临床检验中的应用及差错控制
流式细胞术(Flow CytoMeter,FCM)是一种将细胞生物化学技术、单克隆抗体技术、激光技术、流体力学、电子技术、计算机技术、分子生物学、临床医学等理论高度结合在一起的现代分析技术和产物能够对细胞或微球的物理学、生理学、生化学、免疫学、遗传学、分子生物学性状及功能状态等定性或定量检测并使用流式细胞仪进行对分类数据的多参数检测细胞分析技术[1-2].是当代先进的细胞定量分析技术.广泛的应用在临床的多个领域上,同时也一直走在科研的道路上.流式细胞学在临床检验的领域上也逐步的从免疫学、血液学逐步进入到肿瘤学、分子生物学等更多的方向[3-4].虽然流式细胞术被广泛的应用到各个领域,但其存在影响流式细胞术实验的因素却很多,所以相对于技术人员的要求也很高,以减少各种因素造成的影响[5-6].
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流式细胞术在血液肿瘤诊断、研究中的应用
流式细胞术(FCM)是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学和单克隆抗体技术、激光技术、电子计算机技术等学科高度发展、综合的结晶,FCM的应用标志着细胞学、肿瘤学、免疫学等进入了细胞和分子水平的研究.
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流式细胞术的临床应用
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是20世纪70年代发展起来的对单细胞定量分析的一种新技术.它借鉴了荧光标记技术、激光技术、单抗技术和计算机技术,具有极高的检测速度与统计精确性,而且从单一细胞可以测得多个参数,为生物医学与临床检验提供了全新视角和强有力手段.目前,随着单克隆抗体技术的发展,流式细胞仪检测技术已经广泛使用在基础研究和临床实践的各个方面,在肿瘤学、血液学,免疫学、微生物学、细胞生物学-遗传学及临床检验学等诸多领域内发挥着重要作用[1].本文就其在临床上的应用综述如下.
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微波消融对131I-chTNT在荷H22肝癌小鼠体内分布的影响
目的 观察微波消融对131I-肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体(131I-chTNT)在小鼠体内分布的影响.方法 将45只小鼠分为A、B、C组,建立H22肝癌模型后,分别予以131I-chTNT瘤内单点注射、微波消融后消融范围中心注射131I-chTNT、微波消融后消融范围以外的肿瘤组织注射131I-chTNT.注药后5 d,采用γ计数仪测定小鼠不同器官(肿瘤、血、心、肝、胃、肝、肾)每克组织的131I-chTNT摄取率;注药后3 d,行小鼠肿瘤组织切片的放射自显影及HE染色,观察131I-chTNT在小鼠瘤内分布情况.结果 与A组相比,B、C组每克肿瘤组织131I-chTNT摄取率明显升高(P均<0.05),肿瘤组织内坏死区域明显增大,药物在瘤内的分布增加.结论 微波消融可增加131I-chTNT在肿瘤组织内的浓聚,与注药部位无关.
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快速现场筛选农药中毒残留物的生物分析技术
农药是用来保护农作物及其产品,使之免受或少受病虫危害的农业投入品,在保证农作物高产方面具有重要作用.但是长期大量地使用农药也给人类带来许多负面影响,已成为环境和食品的重要污染源之一.