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DENLEY DRAGON WASH4洗板机维修经验
洗板机用于清洗酶联反应板,其自动、方便、快捷,被广泛应用于检验科和供血科等.我院供血科自1996年开始使用英国DENLEY公司的DRAGONWASH4洗板机,使用频繁,经常需要维护.现将其维护、修理中常见问题归纳如下.
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介绍一种简单、快速的ACL-200型凝血仪反应盘清洗器的制作及浸泡消毒过程
ACL-200型凝血仪为美国生产的、已被广泛应用于临床的常用仪器,其反应盘和反应杯原要求为一次性使用,但许多医院为节省开支常反复洗涤、反复使用,洗涤方法常采用手工冲洗,一个反应板上有20只孔,只能一只一只的冲洗,非常费时费力.本室自制一种冲洗器,一次即可同时冲洗20只孔,大大缩短了洗涤时间,节省了人力.这种洗涤器的制作过程较为简单,制作过程如下.
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免疫-PCR实验技术条件的探讨
ELISA是免疫学检测经典实验技术,多年来已广泛用于检测各种疾病,其检测抗原/抗体的灵敏度可达pg级.但对于早期、轻症患者及产生抗体滴度较低的疾病,其检测阳性率仍不能令人满意.1992年Sano等创立了免疫-PCR方法[1],此方法将ELISA反应的灵敏度至少提高了103倍,可检测到0.5 fg的小鼠ApoE抗原.然而我们在应用中发现,由于免疫-PCR反应需在0.5 mL小离心管中进行,而离心管的包被效果远逊于ELISA反应板(酶标板),制约了免疫-PCR灵敏度优势的发挥.为克服这一难题,我们分别观察了硅化、紫外线照射、戊二醛浸泡以及增大抗原质量浓度4种处理方法对包被效果的影响.
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亚型引起溶血性输血反应1例报告
1 病例简介患者,女,18 岁,因贫血输注3袋(每袋2 U)A型浓红,随后出现血红蛋白尿症状,来我院就诊,我们当即复查鉴定血型,用西班牙戴安娜公司生产的微柱凝胶血型反应板试验,正定型AB型,反定型A型,并将患者血样送上一级血型参比试验室.
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双抗原夹心法检测抗-HIV的效果评价
从97年始,我院血库就用间接ELISA法对献血者进行抗-HIV(1+2)的筛选试验,发现间接ELISA法普遍存在特异性、重复性差及灰色带反应较多等缺点.近两年市场上推出了抗-HIV的第三代检测试剂-双抗原夹心法,该法以高纯度基因重组HIV抗原包被反应板、以酶标HIV特异性抗原代替间接ELISA法中的酶标二抗,具双重识别机制,可同时检测IgG和IgM抗体.我科从去年11月份起即用双抗原夹心法对献血者血液进行复检(包括间接法初检阳性的标本),经比较觉得双抗原夹心法的特异性和灵敏度均明显优于间接法.现把有关检测结果总结报告如下.
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妊娠期假性丙肝1例报告
患者，女31岁，停经25＋3周，第二胎活胎，第一胎自然分娩，未有输血史。孕期体检：乙丙肝、梅毒、艾滋病、生化常规。结果：肝功能正常，梅毒、艾滋病阴性，用ELISA方法检测特异性抗HCV抗体，采用酶联免疫吸附法进行丙肝抗体的检测，抗HCV抗体强阳性，同一批号，同一盒反应板复检丙肝强阳性，随后诊断该患者为丙肝病毒感染。留取血清－20度保存。四个月后，患者停经40周，重新抽血复查丙肝，不同批号反应板结果HCV抗体阴性，冰冻血清复检结果HCV抗体阴性，排除了该名患者感染丙肝病毒的可能。
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妊娠期假性丙肝1例报告
患者，女31岁，停经25＋3周，第二胎活胎，第一胎自然分娩，未有输血史。孕期体检：乙丙肝、梅毒、艾滋病、生化常规。结果：肝功能正常，梅毒、艾滋病阴性，用ELISA方法检测特异性抗 HCV 抗体，采用酶联免疫吸附法进行丙肝抗体的检测，抗HCV抗体强阳性，同一批号，同一盒反应板复检丙肝强阳性，随后诊断该患者为丙肝病毒感染。留取血清－20度保存。四个月后，患者停经40周，重新抽血复查丙肝，不同批号反应板结果HCV抗体阴性，冰冻血清复检结果 HCV 抗体阴性，排除了该名患者感染丙肝病毒的可能。
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ELISA快速法检测HBsAg时洗板对检测结果的影响
乙肝病毒ELISA检测法具有敏感、特异、快速等特点,目前在国内被广泛使用,但在操作中影响结果的因素也很多,尤其是洗板甚为关键,若洗板次数不够或洗板不干净,就会出现假阳性的结果.笔者对30份经放射免疫法和ELISA法(二步法)确证为阴性的血清标本分别用洗1次、2次、3次、4次、5次后的反应板,实验检测,进行比较,由酶标仪判读结果,现报告如下.
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微孔反应板培养法在阴道毛滴虫实验诊断中的应用
阴道毛滴虫感染是妇科常见病之一,并被列为性传播疾病.本病常用实验诊断方法有涂片法和培养法.近年,笔者对培养法进行了一些改进,以微孔反应板代替培养皿,并对培养液成分进行改进,效果比较理想.
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人血清、唾液、尿液中弓形虫抗原抗体的检测
选择弓形虫高危易感人群(肉类加工人员)为检测对象,在同一时间采取血液、唾液和尿液样本.用ELISA法对血清进行弓形虫循环抗原(CAg)、IgM、IgG抗体的检测,其中CAg采用双抗体夹心法,IgM和IgG抗体采用间接法,以筛选弓形虫感染者.取上述各项免疫学指标阳性的血清样本80份,并随机抽取3项指标均为阴性的血清样本102份,分别与其唾液和尿液标本在同一反应板上同步进行测定,比较其阳性和阴性符合率.以探讨用唾液、尿液替代血清进行弓形虫感染免疫学诊断的可行性.
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对ELISA检测中拍板方法的改进
ELISA检测中,在每次冲洗完反应板(杯)后,一般的拍板方法是将反应板(杯)面朝下完全地拍扣在台面平铺的吸水纸(常用卫生纸)上.在日常工作中,我们感到此方法存在着对检测结果造成随机性的弱的假阳性的可能.
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一次性反应板检测大肠菌群方法的研究
大肠菌群是我国食品卫生检验中的一项主要指标.用此来评价食品卫生质量、推断食品中有否污染肠道致病菌的可能.目前我国检测大肠菌群的常规方法是"试管发酵法".此方法操作繁琐,检验时间较长,培养基用量大,需现用现配,所用器械较多,而且用后需洗刷,耗时间、人力、物力.为了克服上述存在的问题,我们研制了一种"一次性反应板"用以检测大肠菌群.
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一种ELISA法中节省反应板的方法
近年来,ELISA法由于其敏感度高,特异性强,广泛应用于临床免疫学实验中.血液HBsAg,抗-HCV,抗-HIV检测也多数用ELISA法.随着洗板机的应用和普及,其所具有的无法比拟的优越性而逐步取代手工洗板,然而,多数洗板机的洗板针是固定的(8针或者12针),这就要求所对应的反应条需是8倍数或者12倍数.在实际的操作中,按照要求设置和加入各种对照及室内质控后,剩余的反应孔按顺序加入标本,有时实际需要测定的标本数与剩余的反应孔数不一致,必然造成反应板的浪费.
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平底微孔板-酶标仪法筛查Rh阴性血型的探讨
采用试管法检测Rh血型,操作繁锁,肉眼判读结果缺乏客观性.针对上述不足,笔者经反复摸索,将平底微板法与酶标仪扫描,电脑自动判读打印技术相结合,用TCEAN全自动加样分析系统完成.经常规13032份标本的检测,符合率达100%.
关键词： 反应板 微孔 酶标仪 Rh血型 -
微孔反应板培养法在阴道毛滴虫实验诊断中的应用
近年,笔者对培养法进行了一些改进,以微孔反应板代替培养皿,并对培养液成分进行改进,效果比较理想.1 对象、材料及方法1.1 对象全部为妇科毛滴虫感染疑似病例,患者有白带增多,呈白色泡沫状,稀薄有臭味,外阴瘙痒与腰痛,部分患者有尿痛、尿急、尿频等尿路感染症状.
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全自动酶联免疫分析系统质量保证的主要影响因素探讨
全自动酶联免疫分析系统应用于临床,不仅减少了主观因素带来的误差,同时又降低了操作者的劳动强度,缩短了全程检测的时间[1].ELISA试验的影响因素多,包括试剂、仪器、加样、孵育温度、洗板、显色、读值等,我们主要探讨加样针的携带污染、洗板方式的选择、反应板的进板等待时间对结果的影响.
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BIOVUE血型工作站操作出现判断模糊及处理对策
BIOVUE血型工作站具有灵敏度高、速度快、正确率高、故障少、操作简便、可同时进行ABO系统及Rh系统血型鉴定和交叉配血等优点。该仪器在我科使用以来结果可靠，日渐被临床所接受。Rh血型系统引起溶血性输血反应，一直是临床安全输血的重点。通过使用BIOVUE血型工作站及柱凝反应系统以来，可同时检测ABO及Rh血型系统，对Rh血型引起溶血性输血反应，自身抗原及各种干扰素引起血型鉴别误解、判断不清，具有简便安全性。现将我们操作中体会介绍给同行，以供参考。1 操作中可能出现的问题仪器使用时，电压不稳定引起温度波动，离心速度与长短，血液和抗凝剂比例不恰当，反定型已知血细胞配制有效期因素，自身病理性抗原干扰素，过量加标本于柱凝反应板因素。以上都可能引起鉴定判断模糊。2 对操作中可能出现问题的对策 BIOVUE血型工作站应安装稳压器24 h待机状态，抗凝剂与血液比例应1∶9，血液标本应及时检测，如不能及时检测，应将血液标本置于2～8 ℃保存。应防止凝集反应板被细菌污染，离心标本应严格控制2 000 r/min 5 min，反定型已知血细胞应在有效期内使用，对患有自身抗原干扰素血细胞应洗涤，标本血细胞悬液浓度在3%～5%，标本加入柱凝集反应板每柱应10 μl。注意以上因素即可明确判断，确保输血工作安全可靠。
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用过氧乙酸-吐温20洗液洗血凝反应板
用过的血凝反应板如何洗涤,一直没有令人满意的方法.我们曾试用过尿素法、加酶洗衣粉法、十二烷基硫酸钠加甲醛法,但结果都不理想.洗过的反应板干燥后用显微镜检查,底部仍有蛋白膜和残留血细胞.用20 g/L联苯胺(冰醋酸配)过氧化氢溶液检查,均出现蓝色反应.
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延长水浴时间对竞争ELISA法检测HBcAb的影响
在用竞争ELISA法一步检测HBcAb的工作中,我们发现,如果待测血清中的HBcAb在酶结合物(酶标HBcAb)之前加入的话,那么检测结果的阳性率将偏高,并且偏高程度会随着两者加样的时间间隔延长而加大,特别是对于吸光度结果处于cutoff值周围的血清标本,更容易引起检测误差.我们认为,在加入酶结合物后,延长水浴时间,让酶结合物和待测HBcAb充分竞争反应,以消除后者因为先加入而优先与包被在反应板上的核心抗原结合反应的影响,所以特将水浴时间延长到60 min,并观察对检测结果的影响.
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不同反应板对免疫胶乳反应的影响
由于免疫胶乳凝集法具有灵敏度高、操作简便、成本低廉等特点,在临床检验中得到普遍应用.笔者在实际工作中发现不同的反应板对免疫胶乳反应速度、凝集颗粒的大小以及结果观察有着极大的影响,用平板玻璃作胶乳反应板优于凹型孔乳胶反应板.现报告如下:
