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  • 人血浆及粪便中微小RNA-92a-1表达水平在结直肠肿瘤筛查中的意义

    作者:王静;张金平;桂银莉;李建生

    目的 探讨联合检测人血浆及粪便中微小RNA-92a-1(miRNA-92a-1)表达水平作为结直肠肿瘤筛查标志物的可行性及临床意义.方法 收集2011年8月至10月间60例结直肠癌患者、23例结直肠腺瘤患者及30名健康对照者的粪便及血浆标本,采用实时定量RT-PCR的方法检测miRNA-92a-1的表达水平.组间采用Mann-Whitney U检验进行差异性检验,然后根据受试者工作特征曲线(ROC曲线)确定截断点,对实验结果的敏感度及特异度进行分析.结果 结直肠癌和结直肠腺瘤患者血浆中miRNA-92a-1的表达水平均高于健康对照者(U=288.5和151.0,P均<0.01).结直肠癌患者粪便中miRNA-92a-1的表达水平高于健康对照者(U=627.5,P=0.0199).根据ROC曲线分析,当截断点值>1.22时,miRNA-92a-1在结直肠癌和结直肠腺瘤患者血浆中的敏感度分别为85.0%(51/60)和73.9%(17/23),在健康对照者血浆中的特异度为76.7%(23/30);当截断点值>1.14时,miRNA-92a-1在结直肠癌和结直肠腺瘤患者粪便中的敏感度分别为31.7%(19/60)和26.1%(6/23),在健康对照者粪便中的特异度为90.0%(27/30).联合血浆及粪便中的检测结果,miRNA-92a-1在结直肠癌和结直肠腺瘤患者中的敏感度分别为88.3%(53/60)和82.6%(19/23),在健康对照者中的特异度为73.3%(22/30),敏感度高于单样本检测.结论 联合检测结直肠癌及结直肠腺瘤患者血浆及粪便中miRNA-92a-1的表达水平,具有较高的敏感度和特异度.miRNA-92a-1可作为结直肠癌诊断及筛查的一个潜在指标.

  • 微 RNA-21和微 RNA-146a 在结直肠肿瘤中的表达及临床意义

    作者:刘华;娄杰;刘晓英;尹晓燕;田字彬

    目的探讨结直肠肿瘤患者组织和血清中 miRNA-21和 miRNA-146a 的表达情况,并分析其临床意义。方法收集100例结直肠癌、80例结直肠腺瘤患者和65名健康对照者的内镜活检组织,同时收集其血清标本,应用实时荧光定量 PCR 检测 miRNA-21和 miRNA-146a 的表达水平,分析其表达与临床病理特征间的关系,并评估血清差异表达的 miRNA 在结直肠肿瘤诊断中的价值。组间比较采用 Mann-WhitneyU 检验和 Kruskal-Wallis 检验;Spearman 相关性检验用于分析组织和血清中 miRNA 表达的关联性。结果在结直肠癌和结直肠腺瘤患者病变组织中 miRNA-21的表达分别为8.573±0.898和7.746±1.183,显著高于健康对照者的6.160±0.835(U =120.129、33.230,P 均<0.01);在结直肠癌和结直肠腺瘤患者血清中的表达分别为1.829±0.303和1.624±0.226,也高于健康对照者的1.391±0.221(U =40.353、15.512,P 均<0.01);miRNA-21在结直肠癌患者组织中和血清中的表达均高于结直肠腺瘤患者(U=11.384、10.189,P 均<0.01)。miRNA-21在结直肠癌患者中的高表达与肿瘤临床分期、淋巴结转移有关;miRNA-21在结直肠腺瘤中的表达水平与病理类型有关。Spearman 分析结果示,miRNA-21在结直肠癌患者组织和血清中的表达呈正相关(r =0.459,P <0.01)。miRNA-146a 在结直肠癌患者组织中为2.556±0.351,血清中为0.249±0.038,低于健康对照者的3.428±0.328和0.279±0.053(U =102.134、30.111,P 均<0.01);其在结直肠腺瘤患者组织中为3.255±0.332,血清中为0.290±0.036,与健康对照者比较差异无统计学意义(U=3.936、3.180,P 均>0.05)。miRNA-146a 在结直肠癌患者组织中和血清中的表达均低于结直肠腺瘤患者(U=73.809、21.123,P 均<0.01)。结直肠癌患者miRNA-146a 的下降程度与肿瘤临床分期、肿瘤分化程度有关,而在结直肠腺瘤中的表达与临床特征间无明显关系。根据 ROC 曲线分析,鉴别结直肠癌与健康者,血清 miRNA-21、miRNA-146a 及二者联合检测 ROC 的 AUC 分别为0.889、0.791和0.863;鉴别结直肠腺瘤与健康者,其 AUC 分别为0.784、0.692和0.761;鉴别结直肠癌与结直肠腺瘤患者,其 AUC 分别为0.705、0.820和0.713。结论血清 miRNA-21和 miRNA-146a 的差异表达在结直肠癌的早期诊断中具有潜在的价值。

  • 汉族儿童细胞色素P450单核苷酸多态性及其代谢表型分布的研究

    作者:肖婧;顾艺;孙琳;苗青;焦伟伟;冯卫星;吴喜蓉;郭雅洁;申阿东

    目的 了解中国汉族人群细胞色素P450(CYP450)重要单核苷酸多态性(SNPs)及其代谢表型的分布情况,丰富相应位点中国汉族人群的遗传学数据库.方法 选择首都医科大学附属北京儿童医院300例中国汉族分析人群的DNA样本,应用实时PCR基因分型法结合测序,对CYP450 6个亚型的8个SNPs位点:CYP2C9 1075A>C、CYP2C19 636G>A、CYP2C19 681G>A/C、CYP2D6 100C>T、CYP2E1 -1053C>T、CYP2E1 7632T>A、CYP3A4 878T>C和CYP3A5 6986A>G的基因型进行检测,计算基因型和等位基因频率;同时初步获得CYP450 6个亚型代谢表型的分布特点.结果 ①中国汉族分析人群CYP2C19 681G>A/C、CYP2D6 100C>T和CYP3A5 6986A>G位点野生型杂合子的基因型频率较高,分别为46.3%、47.0%和43.7%,其突变等位基因的频率也较高,分别为58.8%、34.5%和63.5%;CYP2C9 1075A>C、CYP2C19 636G>A、CYP2E1 -1053C>T、CYP2E1 7632T>A和CYP3A4 878T>C位点野生型纯合子的基因型频率较高,分别为100%、89.3%、61.3%、58.3%和98.0%.②中国汉族分析人群CYP450代谢表型的分布情况为CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4和CYP3A5的快代谢型和超快代谢型比例分别为100%,83.3%,64.7%,95.0%,100%和58.3%;CYP2C19、CYP2D6和CYP3A5中间代谢型和慢代谢型比例分别为11.4%、35.3%和41.7%.结论 CYP2D6 100C>T、CYP2C19 681G>A/C和CYP3A5 6986A>G位点在中国汉族人群中的突变频率较高,且其中间代谢型和慢代谢型比例较高,可为后续优化SNPs入选位点和指导临床个体化用药提供依据.

  • 氯氮平联合二甲双胍对SD大鼠空腹血糖及胰岛GLUT2表达水平的影响

    作者:高兰;王高华;刘浩;阎超慧

    背景:抗精神病药物可引起血糖升高甚至导致2型糖尿病.二甲双胍可能会减轻上述副作用.目的:评价二甲双胍能否减轻使用抗精神病药氯氮平时发生的糖代谢异常.方法:将18只成年SD大鼠分为3组,分别用生理盐水、氯氮平(20mg/kg)及氯氮平(20mg/kg)+二甲双胍(78mg/kg)灌胃28d.在基线及其后每隔7天测空腹血糖.实验第28d麻醉大鼠使其安乐死,此时取腹主静脉血,用放射免疫法检测血胰岛素和C肽水平;取胰腺组织,采用实时聚合酶链反应和Western Blot技术检测葡萄糖转运体2(glucose transporter-2,GLUT2)的表达水平.结果:氯氮平组第14天、21天和28天的空腹血糖值均显著高于基线值,但氯氮平+二甲双胍组仅第14天时的空腹血糖值较基线明显升高.尽管如此,重复测量的方差分析并未发现三组间随时间变化的血糖水平差异有统计学意义(p=0.136).多组比较发现氯氮平+二甲双胍组的胰岛素均值显著低于盐水组及氯氮平组.组间GLUT2 mRNA的表达差异具有统计学意义(氯氮平+二甲双胍组<氯氮平组<盐水组),组间GLUT2 蛋白的表达差异亦有统计学意义(氯氮平+二甲双胍组,氯氮平组<盐水组).结论:本研究发现氯氮平一定程度上能使SD大鼠空腹血糖水平升高,联合使用二甲双胍可部分抵消血糖的升高.正如预期,接受氯氮平的SD大鼠GLUT2的表达水平降低.然而,意料之外的是氯氮平联合二甲双胍治疗28 d并未使GLUT2的表达水平正常化.

  • 感染根管机械预备联合不同化学方法预备后细菌残余量的实时定量检测

    作者:姜云涛;夏文薇;梁景平;马善奋;闫培芳

    目的:探讨快速、敏感定量检测感染根管病原菌的方法;并在RNA水平评估不同根管化学预备方法清除根管细菌的效果.方法:选择慢性根尖周炎单根管患牙24颗,随机分为实验组与对照组.常规根管机械预备后,对照组用3%H2O2、1%NaClO交替冲洗根管;实验组加用EDTA凝胶根管化学预备,联合3%H2O2、1%NaClO交替冲洗.预备前后根管采样.提取总RNA并反转录为cDNA,进行实时PCR定量分析,采用SAS6.12软件包对数据进行方差分析.结果:机械预备联合化学预备后,根管内细菌数量显著降低(P<0.01);其中实验组清除病原菌的效果显著优于对照组(P<0.05).结论:实时PCR定量检测技术可以快速、敏感的检测根管内病原菌,机械预备联合化学预备可有效降低根管内细菌的数量.

  • 提高丙型肝炎诊断准确性的检测方法

    作者:陈暖;张俏忻;程碧珍

    目的 探讨避免丙型肝炎病毒感染的漏诊及提高诊断效率的检测方法. 方法 采用RT-PCR和ELISA法,检测186例疑似HCV感染患者血浆中的HCV-RNA及血清中的抗-HCV抗体. 结果 186份标本中RT-PCR检测HCV-RNA阳性标本104份,阳性率为55.91%;HCV抗体检测阳性标本116份,阳性率为62.37%,2者符合率89.66%.2种检测方法均为阳性的标本92份,阳性率49.46%. 结论 同时开展HCV-RNA与抗-HCV抗体检测可以避免HCV感染的漏诊,提高丙型肝炎诊断的准确性.

  • 通用TaqMan探针技术在apoE基因3937T/C单核苷酸多态性检测中的应用

    作者:郑卫东;郑怀竞;杨泽;从冠宁

    目的建立一种基于通用TaqMan探针技术的快速、准确且经济的实时荧光PCR方法,用于检测apoE基因第四外显子上的一个单核苷酸多态性(SNP)位点(3937T/C).方法应用PCR-RFLP分型方法建立apoE 3937T/C多态性分析的参考样本,同时对部分样本进行PCR产物直接测序以验证PCR-RFLP分型结果.选择一对能够有效区分3937T/C多态性的等位基因特异的上游引物,配对进行通用YaqMan探针实时PCR扩增,然后通过比较两个平行反应达到阈值时所经历的循环数(Ct)的大小,对apoE 3937T/C多态性进行区分.结果建立的基于通用TaqMan探针技术的实时荧光PCR方法,用于apoE基因第四外显子上3937T/C SNP分析,检测结果与PCR-RFLP方法、DNA测序法结果完全一致.结论在进行PCR扩增条件优化的前提下,应用通用TaqMan探针对PCR进行全程监测是可行而且是非常经济的;基于通用TaqMan探针技术的等位基因特异的实时荧光PCR方法敏感、简单、快速,可实现对apoE基因3937T/C单核苷酸多态性的快速检测,而且在其他的SNP位点高通量分析中具有潜在的应用价值.

  • 长链非编码RNA IRAIN在肝癌组织中的表达及意义

    作者:赵炎斌;夏兵祥;李凡;袁振华;陆保成;郑苏文;张园;张业伟

    目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA) IRAIN在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达及临床意义.方法 采用实时定量PCR检测lncRNA IRAIN在36例肝癌组织和对应癌旁组织及24例正常肝组织中的表达,结合患者临床病理特征,分析二者之间的关系.结果 肝癌组织中,lncRNAIRAIN表达水平明显低于癌旁组织和正常肝组织,差异有统计学意义(均P<0.05);lncRNA IRAIN表达与肝癌患者性别、年龄及有无肝炎病史间比较,差异无统计学意义(均P >0.05),但与肿瘤大小、分化程度以及临床分期间比较,差异有统计学意义(均P< 0.05).结论 lncRNA IRAIN可能抑制肝癌的发生发展,有望成为肝癌早期诊断和判断预后的指标之一.

  • 巢式-实时PCR检测梅毒初诊患者不同样本中梅毒螺旋体靶DNA

    作者:叶兴东;高方铭;曹文苓;林宏达;任泽舫

    目的 探讨巢式-实时PCR(NR-PCR)检测初诊梅毒患者不同样本中梅毒螺旋体(Tp)靶DNA的可行性及应用前景.方法 以Tp polA为靶基因,用NR-PCR检测梅毒患者初诊时皮损拭子、血清、全血、脑脊液、末梢耳垂血等样本中的靶DNA,用统计软件SPSS.13分析结果.结果 NR-PCR检测Tp polA靶DNA的极限为2个Tp/ml,总体阳性率为71.7%,检测不同类样本的阳性率从高到低依次为:耳垂血92.0%>脑脊液90.2%>拭子74.3%>血清66.9%>全血64.2%.NR-PCR结果与血清学检查结果的一致性为76.0%(152/200).进一步分析显示:一期、二期梅毒拭子DNA阳性率(63.2%比87.5%)差异无统计学意义(χ2=2.62,P>0.05);血清样本中,二期梅毒DNA阳性率高于一期梅毒(χ2=3.6,P=0.06);全血样本中,二期梅毒DNA阳性率高于其他各类型梅毒;神经梅毒耳垂末梢血阳性率与脑脊液比较,P=0.06.隐性梅毒血清(RPR)滴度≥1:8组的Tp DNA阳性率高于RPR≤1:4组.结论 NR-PCR方法检测梅毒患者不同样本中Tp DNA是可行的,不同类型梅毒、不同类型样本以及其血清RPR滴度水平都影响Tp DNA阳性率.

  • 实时聚合酶链反应定量沙眼衣原体

    作者:李珊山;田亚平

    以往定量临床标本中的沙眼衣原体(Ct)依赖于细胞培养,即把标本接种于细胞单层上,72 h后在显微镜下计数细胞内荧光单克隆抗体染色的衣原体包涵体.

  • 实时聚合酶链反应检测切割穹窿海马伞大鼠海马内磷脂酰乙醇胺结合蛋白mRNA的表达变化

    作者:秦建兵;张蕾;李浩明;朱蕙霞;田美玲;金国华

    目的 探讨切割穹窿海马伞大鼠海马与正常海马内磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA的表达差异.方法 42只SD大鼠随机分成正常对照组和切割穹隆海马伞后1、3、7、14、2l及28 d组,每组6只.提取各组大鼠的海马组织总RNA,应用实时PCR技术观察切割穹窿海马伞后海马中PEBP mRNA的表达变化.结果 PEBP mRNA在切割后3 d表达开始上升,7 d达高水平,随后缓慢下降,21 d时降至正常.结论 切割穹窿海马伞后海马中PEBp的高表达可能与诱导神经干细胞向胆碱能神经元分化的海马神经再生有关.

  • 白介素1β在干眼患者眼表的表达

    作者:高雅;李冰;陈研遐;常静;郑晓汾

    目的 探讨白介素1β(IL-1β)在干眼患者眼表的表达,及其与干眼症状、体征的相关性,阐明IL-1β在干眼发病中的作用.方法 临床试验研究.选取2012年9月至2013年2月来山西省眼科医院就诊的干眼患者30例(60眼,干眼组),无干眼症状体征且年龄与性别构成匹配的个体15例(30眼)作为对照组.所有受检者均做如下检测:眼表失衡指数(OSDI)干眼调查问卷、泪液分泌试验(SIT)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素钠染色、结膜丽丝胺绿染色.同时应用印迹细胞法收集所有2组对象球结膜上皮细胞,分别进行免疫组化染色,以及实时PCR检测结膜细胞中IL-1β的基因表达.采用独立样本t检验,Spearman相关进行数据分析.结果 干眼组与对照组OSDI评分值分别为24.1±2.2、14.3±1.3;SIT分别为(4.13±1.68)mm、(10.53±0.74) mm;BUT分别为(4.17±1.10)s、(8.80±1.21)s;角膜荧光素钠染色评分值分别为4.3±1.5、0.6±0.5;结膜丽丝胺绿染色评分值分别为5.7±2.0、1.9±1.4.干眼组与对照组以上5个指标比较差异均有统计学意义(t=22.23、-19.88、-18.20、12.85、9.62,P<0.05).干眼组IL-1β相对基因含量为0.65±0.37,对照组为0.22±0.06,二者比较差异有统计学意义(t=6.31,P<0.05).干眼组IL-1β在结膜上皮细胞中的表达与OSDI评分、角膜荧光素钠染色评分、结膜丽丝胺绿染色评分呈正相关(r=0.81、0.58、0.48,P<0.05),与SIT、BUT结果呈负相关(r=-0.43、-0.45,P<0.05).通过免疫组化法染色,在干眼患者结膜细胞中可见棕褐色颗粒,而在正常人群中未见棕褐色颗粒.结论 IL-1β作为炎性介质不仅参与了干眼的发病,与干眼的严重程度相关,同时也引起了眼表的损害.

  • TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应检测登革病毒

    作者:柯昌文;郑夔;张欣;周惠琼;段金花;林立丰

    目的建立一种敏感、特异、重复性好的登革病毒(Dengue Virus, DV)鉴定方法.方法根据DV 3'端非编码区基因保守序列,设计一套特异性引物和TaqMan MGB探针.利用1998~2004年收集的26份登革热病人临床血清标本,15例乙脑病人血清,DV 4个血清型标准毒株及23株1978~1997年DV 地方流行株和相关西尼罗病毒、日本脑炎病毒、麻疹病毒、基孔肯亚病毒等毒株,同时用克隆了1型DV 基因组3'端非编码区序列片段的质粒DNA作为阳性对照,检测所建立方法的特异性、敏感性.结果所建立方法的低检测限约为每反应5个基因拷贝.用该方法检测4个血清型DV 标准毒株、23株DV 地方流行株和26例分离到DV 的阳性血清标本,检出率为100 %;用该方法检测15例乙脑病人血清、10例麻疹病人血清和西尼罗病毒、日本脑炎病毒、麻疹病毒、基孔肯亚病毒,结果均为阴性.结论新建的TaqMan MGB探针检测DV 方法是实验室早期诊断登革热较理想的方法.

  • 高糖对人脐静脉内皮细胞TLR4表达的影响

    作者:邓慧慧;汪大望

    目的 观察高糖对人脐静脉内皮细胞TLR4表达的影响,比较加用脂多糖后不同浓度的高糖培养下对人脐静脉内皮细胞TLR4表达水平变化.方法 将体外培养人脐静脉内皮细胞株分对照组(5mmol/L GS)、高糖组(10mmol/L GS、20mmol/L GS、40mmol/L GS)、高糖+LPS组(10mmol/L GS、20mmol/L GS、40mmol/L GS/+100ng/L LPS),培养24h后,用ELISA法检测各组上清IL-6水平,实时定量PCR检测各组细胞TLR4及MyD88基因表达水平.结果 (1)高糖培养能促使人脐静脉内皮细胞产生IL-6水平增加,具有统计学意义(P<0.05),在LPS诱导下高糖能进一步促进该细胞产生IL-6,具有统计学意义(P<0.05).(2)随着葡萄糖浓度增高,从5mmol/L到20mmol/L,人脐静脉内皮细胞产生的IL-6逐渐增多,具有统计学意义(P<0.05),但再增高糖浓度(到40mmol/L),该细胞产生IL-6水平不再继续增加(P>0.05).(3)在LPS存在的前提下,高糖能诱导人脐静脉内皮细胞TLR4和MyD88基因表达增加,具有统计学意义(P<0.05),但仅高糖培养对该细胞TLR4和MyD88基因表达无影响(P>0.05).结论 高糖能刺激人脐静脉内皮细胞炎症反应,使炎症因子IL-6产生增多,但对TLR4和MyD88表达无明显增高;而高糖联合LPS培养能诱导人脐静脉内皮细胞TLR4和MyD88表达上调,说明高糖在LPS存在前提下可能激发TLR4信号通路.

  • Rac1基因在子宫内膜癌组织表达及其临床意义

    作者:宋俊霞;孔令普;杜增利

    目的 探讨Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)基因在子宫内膜癌组织中表达情况及其临床意义.方法 应用实时荧光定量PCR检测96例子宫内膜癌和40例正常子宫内膜组织Rac1基因的表达,并分析其与子宫内膜癌病人生存的关系以及子宫内膜癌病人预后的影响因素.结果 子宫内膜癌组织Rac1 mRNA相对表达量为1.75±0.16,显著高于正常子宫内膜组织(1.38±0.14),差异有统计学意义(t=14.095,P<0.01).子宫内膜癌组织Rac1 mRNA相对表达量与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和血管浸润有关(t=5.322~9.739,P<0.05).Kaplan-Meier生存分析显示,Rac1低表达组病人平均生存时间为58.82个月,高表达组为45.98个月,两组比较差异有显著性(x 2 =4.972,P<0.05).Cox比例风险回归模型分析显示,肿瘤分化程度、淋巴结转移和Rac1mRNA相对表达量是影响子宫内膜癌病人预后的风险因素(HR=2.449~13.582,P<0.05).结论 Rac1基因在子宫内膜癌组织中呈高表达,是影响预后的风险因素之一.

  • 胃癌组织中GTSE1的表达及意义

    作者:许昊;喻鑫;裴世界;于东风;刘弋

    目的 观察G2/S期应答相关蛋白1(GTSE1)在胃癌和癌旁正常胃组织中的表达并探讨其意义.方法 采用qRT-PCR和Western blotting法分别检测12例份新鲜胃癌和癌旁正常胃组织标本中GTSE1 mRNA和蛋白表达.免疫组化法检测56例胃癌患者癌组织及癌旁正常胃组织中GTSE1蛋白表达.分析GTSE1蛋白表达与胃癌患者临床病理特征的关系.COX回归模型分析胃癌患者预后的影响因素.结果 与癌旁正常胃组织相比,GTSE1蛋白和mRNA在胃癌组织中表达升高(P均<0.05);GTSE1高表达与肿瘤大小、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关(P均<0.05);COX回归模型分析显示,TNM分期和GTSE1表达是胃癌患者预后的独立影响因素(P均<0.05).结论 GTSE1在胃癌组织中呈高表达,且GTSE1蛋白过表达与胃癌患者恶性病理特征及不良预后密切相关.

  • 人乳头状瘤病毒分子生物学检测方法研究进展

    作者:宋晓霞

    乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是宫颈癌及癌前病变的主要致病因素.HPV检测对早期诊断、正确处理宫颈病变以及预测病变进展具有重要意义.本文就HPV分子生物学检测方法研究进展作-综述.

  • 异黏蛋白在视网膜母细胞瘤中的表达及其与高危因素关系的研究

    作者:畅颖;高飞;李彬;张志豹;顼晓琳

    背景 异黏蛋白(MTDH)基因是近年来发现的一个原癌基因,在恶性实体肿瘤中呈高表达,与恶性肿瘤的浸润、侵袭及转移等生物学行为密切相关.目前,国内外鲜见关于MTDH与视网膜母细胞瘤(RB)的相关研究报道.目的 研究不同侵袭潜能人RB细胞系及RB组织(石蜡切片)中MTDH的表达,探讨其与肿瘤临床分期、病程、细胞分化、组织病理学高危因素之间的关系.方法 应用荧光实时定量PCR(real-time PCR)技术检测RB细胞系Y79、WERI-RB1、SO-RB50中MTDH mRNA的表达水平;采用免疫组织化学Elivision法检测MTDH在54例RB组织中的表达情况,并结合临床组织病理学资料进行统计学分析.结果 MTDH mRNA在Y79、SO-RB50、WERI-RB1细胞系中的相对表达量分别为6.11±±0.17、6.21±0.21及3.97±0.17,3种细胞系中的MTDH mRNA表达差异有统计学意义(F= 142.643,P<0.05),具有潜在侵袭性的Y79细胞系、SO-RB50细胞系中的表达量明显高于WERI-RB1细胞系,差异均有统计学意义(均P=0.000).MTDH在RB组织中主要表达于细胞膜及细胞质,其中35例(占64.81%)标本为MTDH呈强阳性表达,其中临床分期为E期者MTDH表达积分明显高于D期者,有组织病理学高危因素者MTDH表达积分明显高于无高危因素者,侵犯筛板后视神经者MTDH表达积分明显高于未侵犯者,差异均有统计学意义(P=0.035、0.002、0.017).不同年龄(P=0.579)、不同患者性别(P=0.513)、不同眼别(P=0.305)、不同病程(P=0.860)、不同细胞分化类型(P=0.537)、不同脉络膜受累范围(P=0.238)及眼前节是否受累(P=0.579)之间RB组织中MTDH表达积分的差异均无统计学意义.结论 MTDH在RB组织中呈高表达,MTDH基因的激活可能与RB的侵袭转移机制有关,MTDH基因的检测有可能成为判断RB患者预后的重要指标之一.

  • Wnt/β-catenin基因对骨髓瘤患者间充质干细胞成骨潜能的影响

    作者:黄瑞宏;王宁;李祎;张琼丽;楼瑾;李明;杜新;卓家才

    目的:探讨Wnt/β-catenin基因和多发性骨髓瘤骨病的关系.方法:分离培养多发性骨髓瘤患者和正常人的骨髓间充质干细胞(MSCs),体外诱导分化成骨细胞,茜素红实验检测矿化物沉积、荧光定量RT-PCR方法检成骨指标(OPN、OC、ALP、Cbfal)和Wnt/βcateninmRNA表达,分析MSCs细胞成骨能力变化及两组间Wnt/β-cateninmRNA表达差异.结果:骨髓MSCs体外成骨诱导后,茜素红染色阳性,呈现明显红色钙化结节;MSCs体外诱导成骨细胞,试验组与对照组比较,成骨指标OPN、OC、ALP、CbfalmRNA表达降低(P<0.05);骨髓MSCs体外成骨诱导后β-catenin mRNA表达降低(P<0.05).结论:骨髓MSCs体外可成功诱导分化为成骨细胞;多发性骨髓瘤患者MSCs向成骨细胞分化潜能比正常人降低,Wnt/β-catenin可作为多发性骨髓瘤骨病潜在治疗靶点.

  • 动态监测肾移植受者白细胞中巨细胞病毒DNA载量

    作者:曾文彤;叶青;罗光华;董选;何小舟

    我们采用实时聚合酶链反应(PCR)技术定量检测白细胞中巨细胞病毒(CMV)DNA载量,探索肾移植术后CMV肺炎与病毒载量的关系,并寻找预测CMV肺炎的合适载量阈值.报道如下.

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