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高效液相色谱法同时测定麻仁丸中大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素的含量
目的 建立麻仁丸中大黄素,大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素的含量测定方法.方法 采用奥泰ALLTIMA-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱[0～9min,60%A;9～20 min,60%→80%A;20～45 min,80%A];流速:1.0 mL·min-1;柱温:30℃;检测波长254 nm.结果 大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素线性范围分别为在9.08～81.72、8.4～75.6、13.42～120.7、7.56～68.04、8.2～73.8 μg·mL 1,与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为99.1%、99.6%、99.4%、99.8%、99.2%,RSD分别为2.0%、1.8、3.2%、1.1%、1.5%.结论 本方法可作为麻仁丸中大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素含量测定的一种准确、灵敏、可行的方法.
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变换波长HPLC法同时测定黄连上清丸中12种成分的含量
目的 建立高效液相色谱波长切换法测定黄连上清丸中12种成分含量的方法.方法 采用Welch-Ultimate-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5(u)m);以乙腈-0.3％磷酸溶液为流动相;柱温30℃;流速1 mL·min-;切换波长检测.结果 在HPLC法中,黄柏碱、甘草苷、黄芩苷、小檗碱、黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、欧前胡素、大黄素、异欧前胡素、大黄酚、大黄素甲醚的线性范围分别是:248～1736 ng (r=0.9996)、82.94～580.58 ng(r=1.0000)、68.54～685.4 ng(r=0.9999)、33.8～236.6 ng(r=0.9996)、149.6～1047.2 ng(r=0.9999)、31.54～220.78 ng(r=1.0000)、27.74～267.4 ng(r=0.9998)、7.68～53.76 ng(r=0.9999)、32.84～229.88 ng(r.=0.9998)、4.26～29.82 ng(r=0.9999)、49.26～492.6 ng(r=0.9999)、9.86～98.6 ng (r=1.0000);平均回收率及RSD均符合药典规定.结论 所建方法专属性强,重复性好,可用黄连上清片的质量控制.
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大承气汤微米制剂与传统汤剂化学成分的对比分析
目的 对比分析大承气汤微米制剂与传统汤剂的化学成分.方法 采用TIE法鉴别大黄、辛弗林;用HPLC法测定芦荟大黄素、大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚、辛弗林、抽皮苷的含量.结果 TLC法鉴别大黄、辛弗棒,大承气汤微米制剂主要成分斑点较大承气传统汤荆更明显、清晰.微米制剂中的化学成分的含量分别是传统汤荆的1.53、1.46、1.25、1.33、1.08、1.10和1.23倍.结论 大承气汤微米制荆主要成分均高于大承气汤传统汤剂.
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芦荟大黄素对肺炎链球菌侵袭A549细胞的抑制作用
目的通过体外实验,研究芦荟大黄素(aloe-emdion,AE)是否能阻断肺炎链球菌(Streptococcus prteumoniae,S.pn)触发人肺Ⅱ型上皮细胞A549微丝肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)细胞骨架重排.方法采用F-actin特异性荧光染料观察S.pn作用A549细胞前后的F-actin细胞骨架重排情况并用AE预处理A549细胞,观察其与F-actin细胞骨架重排关系.结果用AE预处理A549后S.pn侵袭数为(22±4)CFU/孔,而没有用AE预处理的A549 S.pn侵袭数为(138±21)CFU/孔,经两样本均数t检验,有显著差异(P＜0.01).结论AE对S.pn侵袭人肺Ⅱ型上皮细胞A549 F-actin细胞骨架的重排有抑制作用.
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芦荟大黄素对人膀胱癌细胞T24增殖及凋亡的影响
目的:探讨芦荟大黄素(AE)对人膀胱癌细胞株T24细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制.方法:采用甲基噻唑(MTT)比色法测定AE对体外培养的T24细胞的抑制率,并用作图法计算半数有效抑制浓度(IC50);光学显微镜下观察AE作用前后细胞形态学变化;流式细胞技术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测mRNA表达.结果:MTT法测定显示,在5～160μg/mL浓度范围内,AE对膀胱癌T24细胞生长有抑制作用,并呈量-效关系,IC50为31.55μg/mL;光学显微镜下药物IC50剂量(32μ g/mL)作用T24细胞后呈现明显的死亡形态变化;流式细胞仪检测显示AE可阻滞T24细胞进入G2/M期;Annexin V-FITC/PI双染法显示早期凋亡细胞数明显增加;RT-PCR法显示myc基因表达下降.结论:AE能抑制人膀胱癌T24细胞生长,并阻断细胞周期和诱导细胞凋亡.其机制可能与myc基因表达下调有关.
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芦荟大黄素对高转移乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭与转移的影响
目的:研究芦荟大黄素(Aloe emodin,AE)对人高转移乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭与转移的影响.方法:MTT法检测AE对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;细胞-基质粘附试验检测AE对MDA-MB-231细胞粘附纤连蛋白(FN)、层连蛋白(LN)能力的影响;Transwell chamber法检测AE对MDA-MB-231细胞侵袭重组基底膜能力的影响;伤口愈合试验检测AE对MDA-MB-231细胞迁移能力的影响.裸小鼠模型观察AE对MDA-MB-231细胞实验性转移的影响.结果:80 μmol/L AE能显著抑制MDA-MB-231细胞体外侵袭重组基底膜能力,显著抑制MDA-MB-231细胞粘附FN、LN的能力,其抑制率分别为(52.98±5.46)％,(34.99±2.63)％,(28.73±7.00)％.作用于MDA-MB-231细胞24 h后,AE能显著抑制MDA-MB-231细胞的迁移,80 μmol/L AE处理的MDA-MB-231细胞在裸小鼠中形成肺转移结节的数量、体积明显减少.结论:AE抑制MDA-MB-231细胞的转移,其作用机制与抑制MDA-MB-231细胞的侵袭和迁移能力有关.
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虎杖药材中蒽醌衍生物及其苷类成分的测定
目的:建立虎杖药材中芦荟大黄素,大黄酸,大黄素和大黄素甲醚含量测定方法.方法:采用高效液相色谱方法,以甲醇-1%高氯酸水溶液(85:15)为流动相,检测波长:220 nm.结果:操作方便,结果准确,可供本品质量控制.
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HPLC法测定上清丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量
目的:以HPLC法测定上清丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量.方法:采用Phenomenex C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1％磷酸(85∶15),检测波长为254 nm,柱温为30℃.结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在2.030～10.15 μg(r1 =0.9995)、0.5045～2.522 μg(r2 =0.9998)、2.032 ～ 10.16 μg(r3=0.9997)、20.48 ～ 122.88 μg(r4 =0.9994)、0.5060 ～2.024 μg(r5=0.9993)范围内进样量与峰面积线性关系良好.平均加样回收率分别为99.81％(RSD=1.2％)、100.5％(RSD=1.4％)、100.1％(RSD=1.5％)、100.0％(RSD=1.5％)、100.6％(RSD=1.2％).结论:该方法灵敏、准确,专属性强,重现性好,可作为上清丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量测定方法.
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RP-HPLC法同时测定久芝清心胶囊中5种蒽醌类成分的含量
目的:建立同时测定久芝清心胶囊中5种蒽醌类成分含量的方法,完善现有标准.方法:采用Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),甲醇-0.1%磷酸(85∶15)为流动相,流速:1.0 mL/min,柱温:35℃,检测波长:254 nm.结果:芦荟大黄素在15.34～153.4 μg/mL(r1=0.9996),大黄酸在10.89～108.9 μg/mL(r2=0.9998),大黄素在10.23～102.3 μg/mL(r3=0.9998),大黄酚在11.24～112.4 μg/mL(r4=0.9999),大黄素甲醚在4.89～48.9 μg/mL(r5=0.9995)线性关系良好;平均回收率分别为100.67%(RSD=1.00%)、100.47%(RSD=0.65%)、99.16%(RSD=1.96%)、100.40%(RSD=1.98%)、99.67%(RSD=1.60%).结论:该方法简便、可靠、准确,可用于久芝清心胶囊的质量控制.
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芦荟大黄素对易卒中型肾血管性高血压大鼠大脑中动脉重塑的影响
目的 观察芦荟大黄素对易卒中型肾血管性高血压大鼠(RHRSP)大脑中动脉结构改变的影响. 方法 取造模成功的36只RHRSP大鼠随机分成3组:芦荟大黄素低剂量治疗组、高剂量治疗组和高血压组,另取10只作为假手术对照组(除不上银夹外,其余措施同高血压模型组).测量收缩压(SBP)和血浆中ET水平.血管平滑肌细胞经α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)免疫组化染色后,应用计算机图像分析测量大脑中动脉血管外径、中膜厚度、管腔内径、壁腔比和中膜平滑肌面积. 结果 低剂量治疗组血浆ET水平显著低于高血压组(P＜0.05),而高剂量治疗组则稍低(P＞0.05).镜下观察发现低剂量治疗组血管形态损害比高血压组轻,而高剂量治疗组则无减轻甚至更重.低剂量治疗组血管外径、管腔内径、中膜厚度均大于高血压组(P＜0.05),壁腔比则小于高血压组(P＜0.05).低剂量治疗组中膜平滑肌面积比高血压组大(P＞0.05),但在高剂量治疗组反而缩小(P＞0.05). 结论 低剂量芦荟大黄素可降低RHRSP血浆ET水平,改善血管内皮功能,具有一定的改善血管重塑的作用.
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高效毛细管电泳法分析库拉索芦荟中的多种成分
目的 建立分离芦荟苷同分异构体及同时测定不同库拉索芦荟样品中芦荟苷、异芦荟色苷D、芦荟大黄素含量的毛细管区带电泳法(CZE),并对各种影响电泳分离的因素进行了探讨.方法 以芦丁为内标,采用未涂层弹性熔融石英毛细管柱(57 cm×75 μm,有效长度50 cm),以20 mmol·L-1 硼砂+2 mmol·L-1β-环糊精(pH=9.65)为背景电解质溶液,分离电压为18 kV,重力进样5 s(高度15 cm),检测波长365 nm.结果 芦荟苷的一对同分异构体能够达到良好的分离,以芦丁为内标,库拉索芦荟样品中的芦荟苷、异芦荟色苷D、芦荟大黄素3种成分在7 min内得到良好的分离测定.结论 此方法简便,快速,成本低,可用于芦荟样品的质量控制.
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芦荟大黄素对人肺Ⅱ型上皮细胞F-actin细胞骨架的保护作用
目的了解芦荟大黄素(aloe-emodin AE)对肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)侵袭人肺Ⅱ型上皮细胞A549后微丝肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)细胞骨架是否具有保护作用.方法采用F-actin特异性荧光染料phalloidin观察S.pn作用A549细胞前后的F-actin细胞骨架重排情况,并用芦荟大黄素(aloe-emodin,AE)预处理A549细胞后观察其与F-actin细胞骨架重排的关系.结果用AE预处理A549后S.pn侵袭数为(22±4)CFU/孔,而没有用AE预处理的A549 S.pn侵袭数为(138±21)CFU/孔,经两样本均数t检验,有显著差异(P＜0.01).结论AE对S.pn侵袭人肺Ⅱ型上皮细胞A549 F-actin细胞骨架的重排有抑制作用.
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芦荟大黄素对人肺癌A549细胞的体外抑制作用研究
目的:探讨芦荟大黄素(AE)对人肺癌A549细胞的体外抑制作用及其可能的作用机制.方法:MTT法检测AE对A549细胞的生长抑制作用,流式细胞仪分析A549细胞周期分布和免疫组化法检测A549细胞中caspase-3和caspase-8表达的变化.结果:AE对人肺癌A549细胞的生长抑制率随浓度和作用时间的增加而呈明显上升趋势,表现出一定的浓度-时间-效应依赖关系.随着AE浓度的增加,A549细胞的G0/G1期比率逐渐上升,而G2/M期比率逐渐下降;同时A549细胞中caspase-3和caspase-8表达均上调.结论:AE能通过诱导人肺癌A549细胞周期阻滞于G2/M期来抑制癌细胞的生长增殖.其机制可能与caspase-3和caspase-8表达上调有关.
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芦荟大黄素对神经细胞PC12缺氧损伤模型保护作用的研究
目的：探讨中药芦荟大黄素的细胞保护作用。方法通过建立PC12细胞缺氧缺血模型，对芦荟大黄素的保护作用进行研究。结果芦荟大黄素200μg?mL-1及50μg?mL-1浓度组的细胞重排率显著低于各模型组，芦荟大黄素组（浓度为200μg?mL-1、50μg?mL-1及10μg?mL-1)胞内钙离子浓度显著低于各模型组。结论芦荟大黄素对缺氧缺血造成的PC12细胞具有保护作用。
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妙用芦荟12法
芦荟主要含有芦荟大黄素、芦荟苦素、芦荟宁、芦荟多糖、芦荟皂甙、黄酮类、氨基酸(包括人体必需的8种氨基酸)、多种维生素,以及有机酸、矿物质和微量元素、缓激肽酶等.众多的化学成分决定了芦荟具有多种功能:泻下、健胃、抗溃疡、保护肝脏、调节血糖、抗肿瘤、抗菌(真菌、细菌)、抗病毒、增强人体免疫功能、促进创伤愈合、护肤美容、防晒等.
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芦荟大黄素对肺癌A549细胞生长、迁移及F-actin的作用
目的:探讨芦荟大黄素对肺癌A549细胞生长、迁移及F-actin的影响.方法:将肺癌A549细胞分为对照组、芦荟大黄素低剂量组(10 μmol/L)、中剂量组(30 μmol/L)和高剂量组(50 μmol/L).采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,Transwell小室检测细胞迁移能力,高内涵细胞成像系统分析芦荟大黄素对肺癌细胞骨架蛋白F-actin表达的影响,westem blotting检测各组细胞小窝蛋白-1 (Caveolin-1)、磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)、p65的表达.结果:与对照组相比,芦荟大黄素低剂量组细胞增殖抑制率、迁移能力、细胞骨架蛋白的面积未见明显变化(P＞0.05),而中、高剂量组细胞增殖抑制率增加、迁移能力降低,细骨胞架蛋白面积缩小,差异均有统计学意义(均P＜0.05).与对照组相比,低剂量组细胞中Caveolin-1、p-eNOS、p65蛋白的相对表达量并无明显变化(P＞0.05):中、高剂量组细胞Caveolin-1、p65表达增多,p-eNOS表达减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:芦荟大黄素能够抑制肺癌A549细胞的生长和迁移,其机制可能与影响Caveolin-1/eNOS/p65信号通路,增加F-actin的解聚、减少微丝的形成有关.
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芦荟大黄素对小鼠破骨细胞增殖的抑制作用研究
目的:探讨芦荟大黄素对小鼠破骨细胞增殖的抑制作用研究.方法:体外实验:诱导培养破骨细胞,在诱导过程中加入不同浓度的芦荟大黄素.培养7d后固定,抗酒石酸酸性磷酸酶染色,计数破骨细胞的数量.体内试验:30只8周大小雌性C57小鼠,随机平均分为空白对照组、模型对照组、雌激素组、低剂量芦荟大黄素组(3 mg/kg)和高剂量芦荟大黄素组(6 mg/kg),建模后按组别腹腔注射药物,持续4周,给药结束后收集小鼠胫骨,使用micro-CT分别测定胫骨的骨量指标.结果:芦荟大黄素对破骨细胞增值的抑制作用呈剂量依赖性(P ＜0.01).芦荟大黄素同雌激素一样对小鼠骨组织有保护作用,并且效果优于雌激素(P ＜0.01),同时随着芦荟大黄素浓度的升高,小鼠胫骨的骨量丢失越少,对骨质疏松小鼠的保护作用越强.结论:芦荟大黄素可以通过抑制破骨细胞增殖来对骨质疏松小鼠起保护作用.
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HPLC同时测定清火胶囊中芦荟大黄素、大黄素和大黄酚含量的方法
目的:建立高效液相色谱法(HPLC)法测定清火胶囊中芦荟大黄素、大黄素和大黄酚含量的方法.方法:采用EclipseXDB(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液(80:20),流速为0.80 mL/min,检测波长:254 nm,柱温30℃.结果:芦荟大黄素、大黄素和大黄酚与其相邻质峰能完全分离.芦荟大黄素、大黄素和大黄酚的线性范围分别为:0.63～31.5 μg/mL(r =0.999 9)、0.34～17.2 μg/mL(r=1.000 0)、0.72～36.0 μg/mL(r=0.999 8).方法回收率均不低于97％.结论:本方法简便、准确、重现性好,能排除其他成分的干扰,可用于该制剂的质量控制的评价.
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大黄在临床的应用
大黄又名川军、将军、绵纹,为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.唐古特大黄R.tanguticum Maxim.ex Balf.及药用大黄R.Officinal Beill的干燥根及根茎.大黄在我国药用已久,是中医常用药物之一.近代医学研究可从中分离出以蒽醌衍生物为其主要化学成分的大黄酚、番泻甙、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、α-儿茶素、没食子酸等15种.其它尚有双蒽醌类、二苯乙烯类、苯基酞酮类、鞣质、荼类、色酮等共计80种化合物,及钙、镁、铁等多种微量元素[1].近年来经过国内各科研、医疗单位的反复临床验证,本品的各种制剂(汤、粉、片、水、丸等)外用或内服,在止血,抗菌消炎止痛,改善肝、肾功能等方面均获良好效果.
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芦荟大黄素抗肿瘤作用的研究进展
芦荟大黄素(aloe-emodin,AE)是从芦荟和大黄中提取的一种有生物活性的蒽醌类化合物,具有多种药理学活性.芦荟大黄素对多种肿瘤细胞均有显著的抗肿瘤效应,其作用机制涉及多种途径,包括阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡及作为佐剂在抗肿瘤中的作用.笔者主要对芦荟大黄素抗肿瘤机制作一综述,为进一步研究提供参考.
