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女贞子对正常大鼠肝脏COX活性的影响及其DNA甲基化调节机制的初步研究
探讨女贞子对大鼠肝脏细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)活性的影响及可能的DNA甲基化机制.实验采用女贞子的水提物按2.0 g·kg-1和6.0 g·kg-1灌胃大鼠30 d,处死大鼠后,取肝脏测定COX活性、COX的亚基之一COX4I1蛋白浓度、测定Cox4i1,Dnmt3a,Tet1基因mRNA表达水平、TET1和DNMT3A的蛋白水平以及检测Cox4i1DNA甲基化频率.结果显示女贞子低剂量和高剂量能显著性升高COX的活性和COX4I1的浓度(P<0.05);有降低TET1蛋白和DNMT3A的蛋白表达量的趋势;但未显著改变Cox4i1,Dnmt3a,Tet1基因mRNA表达.与空白对照组相比,女贞子高剂量组甲基化频率有降低的趋势但未达到显著水平.该研究表明:女贞子对大鼠肝脏的COX酶活性有促进作用,其可能通过促进COX4I1的蛋白量增加实现;女贞子对DNMT3A的蛋白表达有降低趋势,其可能是Cox4i1DNA甲基化频率有降低趋势的原因.女贞子对于DNMT3A和TET1的蛋白表达可能有同向调节作用,具体机制仍不明确.
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女贞子化学成分的UPLC-ESI-Q-TOF-MS分析
目的:采用UPLC-ESI-Q-TOF-MS技术对女贞子中的化学成分进行定性分析.方法:采用ACQUITY UPLC BEHC18色谱柱(2.1mm×100 mm,1.7 μm),以乙腈-0.1％甲酸溶液为流动相梯度洗脱；质谱使用ESI离子源,正离子与负离子模式下采集数据.结果:通过正、负离子质谱信息及元素组成分析并结合对照品与相关文献数据对照,共鉴定出14个化合物.结论:通过超高效液相色谱分离,质谱测定相对分子质量及相关文献数据信息检索确定女贞子中的化学成分,为阐明女贞子的药效物质基础提供有力的证据.
关键词： 女贞子 化学成分 UPLC-ESI-Q-TOF-MS -
基于DPPH、ABTS和FRAP的中药女贞子抗氧化谱效关系研究
运用HPLC测定不同加热条件处理的女贞子药材的特征图谱,通过DPPH、ABTS和FRAP法测定不同条件处理女贞子的抗氧化能力,运用偏小二乘法进行数据分析,研究女贞子量化特征图谱和抗氧化活性的相关性,探讨女贞子抗氧化活性的物质基础,并筛选活性色谱峰.从35个匹配特征图谱中筛选出S1,S2,S15,S.15,S27,S29,S32,S33,S35与女贞子清除DPPH自由基能力呈显著正相关;S1,S2,S5,S8,S16,S27,S33与女贞子清除ABTS自由基显著正相关;S12,S20,S22,S28,S30,S31,S32,S34与女贞子还原Fe3+能力显著正相关.其中S1,S2,S27,S33与女贞子清除DPPH自由基、ABTS自由基均正相关,S32与女贞子清除DPPH自由基、还原Fe3+能力均正相关.通过与对照品比对确定了S3为红景天苷、S19为木犀草苷、S21为特女贞苷、S22为橄榄苦苷、S23为女贞苷、S33为木犀草素、S34为芹菜素.试验结果表明特女贞苷和红景天苷等虽是规定的表征女贞子药材优劣的指标成分,但女贞子药效并不是靠个别成分含量决定.通过分析与药效相关的化合物群的含量才能真实反映药材的质量.
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女贞子的化学成分研究
目的:研究女贞Ligustrum lucidum的干燥成熟果实的化学成分.方法:采用硅胶柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱和ODS柱色谱等色谱方法进行分离纯化,并根据NMR,MS等波谱方法和理化性质鉴定其化学结构.结果:从女贞子中分离得到20个化合物,其中三萜类化合物15个,分别鉴定为齐墩果酸(1),2α-羟基齐墩果酸(2),乙酰齐墩果酸(3),羽扇豆醇(4),白桦脂醇(5),达玛烯二醇(6),3β-乙酰氧基-20,25-环氧-24α-羟基-达玛烷(7),20,25-环氧-3β,24α-二羟基-达玛烷(8),3β-乙酰氧基-达玛烯二醇(9),3β,20S-二羟基-24R-过氧羟基-25-烯-达玛烷(10),fouquierol(11),oliganthas A(12),达玛烯二醇3-O-棕榈酸酯(13),拟人参皂苷元Ⅱ3-O-棕榈酸酯(14),3β,20S-二羟基-25-过氧羟基-23E-烯-达玛烷(15);苯乙醇类化合物5个,分别为毛蕊花苷(16),北升麻宁(17),2-(3,4-二羟基苯基)乙基-O-β-D吡喃葡萄糖苷(18),osmanthuside H (19),3,4-二羟基苯基乙醇(20).结论:化合物4,16.17,19为首次从本植物中分离得到,化合物12～15为首次从本属植物中分离得到.
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高效液相色谱法测定安神补心丸中丹参酮ⅡA的含量
安神补心丸由丹参、五味子、石菖蒲、安神膏(取合欢皮、菟丝子、墨旱莲、女贞子、首乌藤、地黄、珍珠经水煮两次后浓缩制成的浸膏)组成,具有养心安神的功能,临床上用于阴血不足引起的心悸,失眠,头晕耳鸣.为<中国药典>2000年版一部收载[1].现行药典标准中仅收载了丹参的薄层鉴别方法,未见含量测定方法的报道.方中丹参为君药,其有效成分为丹参酮ⅡA,本试验利用高效液相色谱法对丹参酮ⅡA进行了含量测定.
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骨仙片中柚皮苷的含量测定
骨仙片是由骨碎补、熟地黄、黑豆、女贞子、菟丝子、牛膝、仙茅、广防己、枸杞子9味药材组成的复方制剂,具有补益肝肾、舒筋活络,用治骨关节病.原质量标准无含量测定指标,为提高产品质量的可控性,对其建立含量测定.骨碎补为制剂中的君药,其柚皮苷的含量测定方法较多[1,2],本文采用高效液相色谱法测定制剂中的柚皮苷含量[3],简单、可靠.
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HPLC测定健脾益肾软胶囊中补骨脂素和异补骨脂素的含量
健脾益肾软胶囊是在中药部颁标准收载的健脾益肾冲剂[1]基础上进行的二次开发,该制剂由补骨脂、党参、枸杞、女贞子、白术及菟丝子组成,具有健脾益肾的功效,用于减轻肿瘤病人术后放、化疗副反应,提高机体免疫功能以及脾肾虚弱所引起的疾病.
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芪贞舒痞颗粒质量控制方法的研究
芪贞舒痞颗粒是由黄芪、女贞子、半枝莲等药味组成,具有健脾益胃、行气化瘀、散瘀解毒的功效,临床用于治疗慢性萎缩性胃炎之脘腹痞满或疼痛、食欲不振、体瘦乏力、嗳气泛酸等.为控制产品的内在质量,对方中的半枝莲、女贞子、莪术进行了薄层色谱鉴别,并采用薄层扫描法测定了黄芪中黄芪甲苷的含量.
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不同生长期女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量变化
女贞子是木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait.的果实.在我国资源丰富,华东、华南、西南及华中各地均产.具有滋补肝肾、明目乌发之功效[1].本实验旨在测定不同生长期女贞子中有效成分齐墩果酸和熊果酸的含量,对于指导该药的采收时间及合理应用具有实际意义.
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全国资源普查女贞子药材质量特征关系探究及对《中国药典》女贞子药材标准规定的思考
该实验采用HPLC同时测定酪醇、红景天苷、松果菊苷、芦丁、毛蕊花糖苷、女贞苷、特女贞苷、槲皮素含量,用比色卡对照法确定女贞子颜色,果实百粒重用称量法称定.采用相关性分析、单因素方差分析等统计学方法分析女贞子药材的性状、化学成分、采收时间及地理位置之间的关系,综合评价女贞子药材质量.结果 显示,92％女贞子药材符合药典标准,颜色偏褐色的女贞子中7种成分(除槲皮素)含量高于颜色偏黑色的药材;6月份采收的女贞子中红景天苷含量达到高,8-10月采收的女贞子中其他7种成分含量相对较高;根据女贞子质量参数并未能将6个产地女贞子药材有效区分.实验结果表明,女贞子药材颜色、采收季节与成分含量之间存在一定的关系,产地与女贞子质量参数无关.该研究以期为本土女贞子药材资源现状提供一定的数据支持,为今后女贞子药材标准的修订提供理论依据.
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基于UPLC技术的女贞子中主要成分炮制变化规律研究及酒女贞子特色质量标准的探讨
采用UPLC技术建立了女贞子中红ε 苷和特女贞苷的同步测定方法,通过测定二者在不同炮制时间的酒女贞子(炮制12,15,18,21,24 h)中的含量探讨女贞子炮制中主要成分的变化规律,并且采用同一方法探讨建立了酒女贞子的特色质量标准.采用Waters Acquity UPLC@BEH C18色谱柱(2.1 mm×50mm,1.7μm)进行分离,乙腈-0.2％甲酸水为流动相,梯度洗脱,检测波长280 nm,流速0.5 mL* min-,柱温40℃.在上述色谱条件下2成分分离良好,红ε 苷和特女贞苷分别在10.19～ 326,49.53～1 585 ng线性关系良好,平均加样回收率分别为103.4％,101.7％,RSD分别为0.81％,0.79％.不同炮制时间的酒女贞子中红ε 苷的含量随炮制时间延长逐渐升高,而特女贞苷含量则随炮制时间延长逐渐降低.27批次女贞子药材中红ε 苷的质量分数在0.042 5％ ～0.192 4％,特女贞苷在0.829 7％ ～5.218％;25批酒女贞子中前者在0.229 2％ ～1.045 8％,后者在0.743 8％ ～3.645 4％.与女贞子药材相比,酒女贞子中特女贞苷含量和红ε 苷含量的比值明显减小.依据实验结果,该文暂定女贞子药材中特女贞苷不低于0.80％,特女贞苷含量/红ε 苷含量不小于15;而酒女贞子中红ε 苷不低于0.20％,特女贞苷不低于0.70％,二者比值不大于8.该文所建立方法的简便可靠,可用于女贞子样品中红ε 苷和特女贞苷的测定,所建立的标准可区分女贞子和酒女贞子.
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首乌丸致肝功能损害1例
患者,男,17岁,因少白头,自购首乌丸(制何首乌、地黄、牛膝、桑椹、女贞子、墨旱莲、桑叶、黑芝麻、菟丝子、金樱子、补骨脂、豨莶草、金银花;甘肃天水歧黄药业有限责任公司,批号050407,另一批号不详),口服,1次6 g,1日2次,2005年4月20日开始,服药40 d.2005年5月30日无明显诱因出现乏力、纳差、食欲不振、厌油.自认为学习劳累所致,未经治疗.上述症状逐日加重,6月2日出现尿黄、皮肤、巩膜黄染.
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特女贞苷与红景天苷的大鼠在体胃肠吸收比较
特女贞苷与红景天苷是女贞子炮制前后含量变化较大的2种活性成分.为探讨女贞子炮制增效机制,该实验采用大鼠在体胃肠灌流模型,用HPLC测定给药后不同时间点大鼠胃与小肠灌流流出液中特女贞苷与红景天苷含量并计算吸收速率常数和吸收百分率,结果在特女贞苷的胃肠灌流流出液中均可检出其次级苷红景天苷.特女贞苷与红景天苷在小肠中的吸收速率常数分别为0.055 3,0.1442 h-1,4h累计吸收率分别为24.46％,60.14％,在胃中吸收速率常数分别为5.70,8.26 h-1,4h累计吸收率分别为34.21％,47.23％.实验证明特女贞苷在大鼠胃与小肠内均可被代谢为红景天苷,红景天苷较特女贞苷更利于胃肠吸收.结果提示女贞子炮制后补肝肾药效增强与特女贞苷转化为红景天苷后更利于机体吸收有关.
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女贞子炮制法之我见
女贞子传统方法是酒蒸法，但笔者在长期从事药物炮制工作的实践中，结合对其性味、功效的分析及查阅有关资料后认为，女贞子用黑豆汁蒸，可能获得更好的疗效。 早在明代的《炮制大法》中有记载：“霜后采，阴干，去粗皮内更有细皮，实白色。酒拌黑 豆同蒸九次。”可见黑豆汁蒸或隔水炖制女贞子的方法是有其历史依据的。在理论上是行得 通的。 黑豆汁含有蛋白质、脂肪、维生素、淀粉等人体所需物质。黑豆色黑入肾经，肾藏精，又具养血祛风作用，故说“其华在发”。女贞子经黑豆汁炮制后，增强了补肝肾、养精血的作 用，精血充盈则发长光泽，从理论上讲应有乌发、生发、美发的作用。 黑豆汁制备：取黑豆10 kg，加水，煮约4 h，熬汁约15 kg，黑豆渣再加水，煮约3 h，熬汁约10kg，两次黑豆汁合并，共约25kg。
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促排卵的中医研究进展
卵泡发育成熟和排出障碍临床可表现为月经推后、月经过少、月经稀发、闭经、更年期综合征提前和不孕等.治疗当促卵泡成熟及排出,本文就中医对促排卵的研究状况作一综述.实验研究1 对下丘脑及垂体的影响刘金星等(1)将养精汤(女贞子、生地、山萸肉、紫河车粉、肉苁蓉、黄精、制首乌等)灌服雄激素所致不孕大鼠(ASR)4周后,用荧光分光光度计测定下丘脑单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HITT)含量,用放射免疫法测定β-内啡肽(β-EOP)含量.结果:NE、DA含量养精汤组较生理盐水组显著升高(P＜0.001、P＜0.05),5-HT、5-HITT、β-EOP含量养精汤组较生理盐水组显著下降(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.05),NE/DA、NE/5-HT比值养精汤组较生理盐水组明显增大.结果表明:养精汤能改善ASR下丘脑NE及DA神经原机能,其中尤以增强NE神经原机能为主,同时降低5-HT神经原机能,使下丘脑NE神经原机能相对增强,从而促进下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)释放,β-EOP的降低,以促进GnRH释放及正常脉冲节律恢复;大鼠垂体重量显著大于生理盐水组,且临床无排卵患者低水平促卵泡激素/促黄体激素(FSH/LH)经养精汤治疗后,FSH/LH明显升高,说明养精汤能增强垂体内分泌功能,促进促性腺激素的合成和释放,提高垂体促性腺激素水平.孙斐等(2)用滋肾阴的中药天癸方(生地、菟丝子、仙灵脾、补骨脂、女贞子等)水溶液浸膏灌服ASR后,下丘脑神经肽Y(NPY)表达减弱,存在于NPY神经元上的雌激素受体(ER)数目减少,GnRH分泌升高,明显低下的促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)升高,明显增加的血雌激素(E2)、睾酮(T)、瘦素(leptin)水平下降,体重减轻,认为滋肾阴药能纠正神经内分泌-代谢失调而产生减肥及促排卵的作用.
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加味二至丸治疗便秘型肠易激综合征验案举隅
二至丸出自<医方集解>,由女贞子、旱莲草二味药物组成,具有补腰膝、壮筋骨、强肾阴、乌须发的功效.临床上常用于肝肾阴虚、头晕眼花、失眠多梦、腰膝疲软、遗精、须发早白等症.笔者用本方加枳实、火麻仁治疗便秘型肠易激综合症疗效显著,介绍如下.
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马鞭草治疗痛经、阴痒
马鞭草,始载《名医别录》,为马鞭草科植物马鞭草的全草,苦,微寒,入肝、脾经,有清热、利水、破血、消肿、杀虫等功效。在临床中,善用马鞭草为主药,口服治疗痛经,外用治疗阴痒。 痛经:刘某,痛经2年余。他医皆以温经散寒止痛为法,效不显。查看其人形体偏瘦,木火偏旺,舌红苔薄黄,脉弦数。月经先后无定期,经前2天小腹疼痛,乳房胀痛,月经色暗红,有血块。平素白带量多色黄。辨证:湿热瘀阻。治则:清热化瘀,凉血和血止痛。自拟痛经汤:马鞭草30g,玄参15g,生地黄15g,赤芍、白芍各15g,地骨皮15g,女贞子15g,旱莲草12g,川楝子15g,郁金10g,牡丹皮12g。水煎服,日1剂。月经前连服6剂,2个月后痛经消失。临床上凡遇痛经较轻者,用马鞭草30g,益母草30g,月经前煎水服3剂,效佳。
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马鞭草治疗口腔溃疡有效
先师李永才系长春中医学院教授,笔者有幸随诊,目睹其每遇口腔溃疡于辨证遣方中加入马鞭草20～50g,疑而问之,其曰:“马鞭草微寒、入脾经,清热消肿,杀虫止痛,且有活血生新之功,乃口腔粘膜修复之良药,如以鲜品取汁漱口效果更佳。”近20年反复验证,临证加用马鞭草皆可获事半功倍之效。现录验案如下。 例1:张某,男,38岁。口腔溃疡反复发作5年,临证细观诸医之方,不外知柏地黄、清胃、导赤、左归之类。查患者腰膝酸软,五心烦热,失眠多梦,唇、颊粘膜片状溃疡,舌前部点状溃疡,舌红少苔,脉细数。证属阴虚火旺,心肾不交。处方:马鞭草30g,黄连15g,肉桂8g,生地黄20g,麦冬15g,百合10g,枸杞子10g,女贞子15g,旱莲草10g,何首乌10g,盐黄柏15g,山茱萸15g,炒酸枣仁15g,白术10g。3剂水煎服。服药后舌前部点状溃疡部分愈合,继服15剂痊愈,随访3年未发。
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重用旱莲草治疗脂肪肝
旱莲草功能滋养肝肾,笔者在临床实践中发现,以旱莲草为主组方治疗脂肪肝疗效显著,现介绍如下.基本方:旱莲草30～100g,女贞子20g,泽泻15g,当归15g.酒精性脂肪肝加葛根30g,枳椇子15g,蒲公英15g;病毒性肝炎特别是慢性乙型肝炎所致者,加蜂房15g,半边莲20g,虎杖15g;糖尿病者加玄参15g,苍术15g;肥胖所致者,加大黄6～10g,荷叶15g;脾虚加茯苓12g,白术20g.每日1剂.
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土茯苓治疗蛋白尿
近年来,笔者治疗慢性肾病,发现在配方中重用土茯苓能收到较好的消除蛋白尿的效果,兹举2例介绍如下.例1:张某某,男,55岁,1994年2月15日初诊.患者10年前因重感冒后,发现尿中有蛋白(+～++).每于劳累或感冒后出现腰痛,近几年来症状加重伴有轻度浮肿.曾去某医院检查,确诊为尿酸性肾病及肾功能不全.此次就诊查尿常规尿蛋白(+++),伴腰痛,周身乏力,舌胖质淡,脉沉滑.处方:土茯苓30g,苦参15g,,蒲公英15g,白花蛇舌草15g,生黄芪15g,山药15g,白术15g,菟丝子15g,女贞子15g,生杜仲15g,金樱子15g,芡实10g,6剂,水煎服.二诊:服药后自觉周身乏力减轻,查尿蛋白(++),继前方又服6剂.三诊诸症明显好转,查尿蛋白少许,宗前旨随症加减继服2个多月,尿蛋白转阴,后随访生活起居如常.
