细胞免疫表型分析在急性白血病诊断中的作用

采用流式细胞术对45例急性白血病病人进行免疫表型分析.急性髓系白血病均表达髓系抗原,部分同时伴有淋系统抗原(CD47)表达,急性淋系白血病均表达淋系抗原,少数伴有髓系抗原(CD13、CD33)表达.1例慢粒急淋变既表达髓系抗原标记,又表达B系抗原标记.结果表明,白血病免疫表型是急性白血病诊断与分型的重要手段,但仍需结合细胞形态学、组织化学检测.

国有与私营企业焦炉工人淋巴细胞免疫表型的比较

为探讨国有企业(国企)与私营企业(私企)炼焦工人淋巴细胞免疫表型的变化,我们进行了以下研究.一、对象与方法1.对象:选择某国有焦化厂与某私营焦化厂炉顶作业工人各31人为炼焦工人组,均为男性.国企:年龄24～50岁,平均38.0岁,专业工龄8～30年,平均19.7年;私企:年龄20～52岁,平均37.0岁,专业工龄5～30年,平均17.8年.对照组选择同一地区不接触焦炉逸散物(COE)及其他有毒、有害因素的粮库男性工人29人,年龄21～53岁,平均39.0岁,专业工龄5～32年,平均18.2年.国企和私企炼焦工人组及对照组的年龄、工龄、吸烟、饮酒等流行病学资料均差异无显著性.以上人员体检时均未发现有明显疾病和遗传缺陷,近期无接种疫苗和服用影响免疫功能的药物史.

细胞免疫表型对确定骨髓增生异常综合征髓系病态的作用

目的 探讨细胞免疫表型分析在确定骨髓增生异常综合征(MDS)患者是否存在髓系细胞异常中的价值.方法 以具有外周血一系以上血细胞减少、且骨髓原始细胞数＜5％的患者为研究对象,以免疫性血小板减少患者为对照,回顾性分析流式细胞术中患者骨髓髓系细胞的免疫表型,观察粒细胞群和单核细胞群SSC强度是否异常,是否存在抗原跨阶段表达、抗原跨系列表达和分化抗原表达异常,并与细胞形态学粒系病态造血的结果进行比较.结果 在符合研究条件的255例患者中,有127例确定诊断为低危MDS、95例为非MDS,另有33例为意义未明血细胞减少(ICUS).在MDS患者中,髓系免疫表型异常的检出率(85.8％)显著高于形态学病态造血检出率(57.5％)(P=0.000);在非MDS患者中,具有髓系免疫表型异常的比例(1.1％)显著低于形态学病态造血比例(4.2％) (P =0.042);ICUS患者虽然形态学无病态造血,但48.5％的患者具有髓系免疫表型异常.结论 细胞免疫表型分析对髓系异常的确定,有助于MDS的早期诊断和鉴别诊断.

骨髓增殖性疾病转化为急性髓系白血病后细胞免疫表型的变化

一些骨髓增殖性疾病(MPD)病例有可能转化为急性髓系白血病(AML),但是迄今尚未观察到体内MPD细胞转化为AML细胞的分化过程.本研究旨在揭示这一分化过程.采用流式细胞术分析了2例MPD短期内转为AML患者骨髓分化细胞的免疫表型特征.研究结果表明,体内发展相对缓慢的MPD增殖细胞演化为迅速扩增的急性白血病细胞时,存在不同分化阶段的亚克隆.结论:了解MPD急变过程将有助干早期诊断和治疗MPD转化的急性白血病.

骨髓细胞免疫表型分析在低幼稚细胞骨髓增生异常综合征诊断中的价值

本研究旨在探讨低幼稚细胞骨髓增生异常综合征(MDS)患者细胞免疫表型特征,确定其在诊断中的价值.应用流式细胞术(FCM)检测222例血细胞减少伴骨髓病态造血、骨髓幼稚细胞数<5%的患者的细胞免疫表型;测定成熟粒细胞群和单核细胞群的抗原跨阶段表达(粒系或单核系CD34或CD117表达或成熟粒细胞群HLADR的表达).抗原跨系列表达(粒系或单核系CD7或CD56表达),CD45/SSC异常(成熟粒细胞群或单核细胞群),分化抗原表达(粒细胞群CD13/CD16和单核细胞群HLA-DR表达缺失);确定阳性结果的敏感性与特异性.结果表明:在222例患者中经临床检测及鉴别诊断,有127例确定诊断为MDS,95例为非MDS(药物性粒细胞减少,自身免疫性血细胞减少及特发性血小板减少).在成熟粒细胞群抗原跨阶段、跨系列表达,CD45/SSC及抗原分化异常的敏感性分别为31.5%、30.7%、49.6%和60.6%,其特异性分别为100%、100%、88.4%和52.6%.单核细胞群抗原跨阶段、跨系列表达、CD45/SSC及抗原分化异常的敏感性分别为2.3%、11%、37%和12.6%.特异性均为100%.在如上观察的粒细胞群和单核细胞群的8个项目中,≥2项异常的敏感性为77.9%,特异性为95.8%,阳性结果预测值为96.1%.结论:抗原的跨阶段表达、跨系列表达及CD45/SSC异常具有较高的特异性,但敏感性差;而分化抗原异常虽敏感性较高但特异性差.多项表达异常对于MDS的诊断具有较高的诊断特异性及敏感性.

急性髓系白血病DNA甲基化及治疗进展

急性髓系白血病（ AML）是成人常见的急性白血病类型，主要累及老年人，发病中位年龄为67岁，在年轻人患病率约2～3／100000人，而在70岁以上人群则升至13～15／100000人。AML是一组异质性疾病，根据形态学、白血病细胞免疫组化、细胞免疫表型、细胞遗传学、分子学异常可以将其区分为不同类型。随着对白血病细胞遗传学和分子学研究深入，越来越多的证据显示白血病的预后与白血病的生物学特性相关。近年来随着新的治疗药物的发现，部分类型的AML疗效得到巨大改善（如急性早幼粒细胞白血病），但非早幼粒急性髓细胞白血病生存率仍很低（40％～45％左右），尤其是老年人AML中位生存＜1年，寻找新的治疗靶点成为改善AML疗效的关键。

急性髓细胞白血病合并眼眶髓细胞肉瘤一例及文献复习

患儿女，1岁9个月，因发现“右眼球突出1月余、右眼眶后肿块切除术后20余天”收入我科。入院前1个多月患儿因右眼球突出，院外头颅MRI检查发现右侧眼眶下、右侧上颌窦区及左侧中颅窝底肿块影，不伴发热、畏光、视物模糊等。术中发现上颌窦内灰绿色腐肉样新生物，内含骨质样碎渣性新生物，含毛发样物质和牙组织。术后病理检查示恶性肿瘤细胞，免疫组化结果：瘤细胞 CD43（＋）、MPO（＋）、CD99（部分＋）、LCA（-）、desmin（-）、CD56（-）、myogenin（-）、NSE （-）、CD1a（-）、Langerin（-）、Ki67约30%左右，牙齿脱钙未见异常。结合免疫表型结果考虑为：（1）髓细胞肉瘤；（2）畸胎瘤（成熟型）。为进一步诊治入院。入院查体：T 36.2℃，P 102次/min，R 20次/min，BP 80/53 mm Hg，右眼突出，右侧颌下扪及一约1.5 cm×1.5 cm的淋巴结，活动度可，质中，无压痛，皮温不高。双侧瞳孔等大等圆，对光反射正常，心、肺、腹及神经系统查体未见异常。血常规：WBC 3.5×109/L，ANC 0.49×109/L，Hb 116 g/L， PLT 187×109/L。AFP 5.2 ng/L。骨髓涂片检查：骨髓有核细胞增生明显活跃，髓系原始细胞占51%，胞质内大量颗粒，胞核折叠卷曲，原始细胞 POX染色阳性率78%，考虑急性髓细胞性白血病（AML）。骨髓细胞免疫表型检查结果：CD13（＋）， CD33（＋），CD64（＋），MPO（＋），CD34（-）， CD117（-），CD16（-），CD56（-），CD10（-）， CD19（-），CD20（-），CD5（-），CD3（-）， CD7（-），CD79a（-）。AML 相关融合基因及FLT-ITD、C-kit/D816V、NPM1、CEBPA等突变基因均阴性。染色体核型未见异常。头颅CT示：扫描层面内右侧上颌窦内软组织影填充，累及鼻中隔，窦壁骨质破坏，左侧上颌窦内少许软组织影，左侧颞窝软组织块影。结合骨髓涂片检查结果，考虑诊断“AML”和“髓细胞肉瘤”。但因手术切除组织中含骨质样碎渣样新生物以及含毛发样物质和牙组织，不能排除畸胎瘤（成熟型）。再次行肿瘤组织免疫组化检查：瘤细胞MPO（弥漫＋）、ERG （弥漫核＋）、CD34（-）、CD68（PGM1-）、CD25（-）、TRAP（±/-）。结合病史、临床表现及相关检查，终诊断为：（1）AML；（2）髓细胞肉瘤；（3）畸胎瘤（成熟型）。按照AML 化疗给予DAE 方案诱导化疗（柔红霉素20 mg d1，3，5，阿糖胞苷50 mg d1～3，VP1650 mg d1～5）。化疗d18复查骨髓提示AML 完全缓解。患儿右眼无突出，复查头颅CT 示较之前右上颌窦及左颞窝肿块影有减小，左上颌窦软组织影消失。随即行第二疗程DAE 方案化疗，过程顺利。复查骨髓示AML 完全缓解像。第三次（2014-7-11至2014-7-17）予以MA 方案（米托蒽醌及阿糖胞苷）治疗，现患者一般情况好，继续于我院化疗。

坏死性淋巴结炎伴高IgE血症一例的淋巴细胞亚群动态分析

组织细胞性坏死性淋巴结炎(HNL)是一类亚急性自限性发展病因未明的良性淋巴结病变.从1972年日本学者报道首例病例以来,世界各地均有散发病例报道.HNL可继发于红斑狼疮(SLE)、恶性淋巴瘤、病毒感染和细菌感染等疾病,但未见HNL合并高IgE血症的报道.我们发现1例HNL合并高IgE血症患者,并进行外周血淋巴细胞免疫表型等动态检测,现报告如下.

多种细胞因子联合诱导大肠癌患者外周血单个核细胞为CIK细胞的免疫表型

目的:用多种细胞因子联合诱导大肠癌患者外周血单个核细胞为细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞,并了解其在体外的增殖能力及免疫表型的变化.方法:用Ficoll Hypaque淋巴细胞分离液分离获取10例大肠癌患者外周血单个核细胞,rhIFN-γ,rhIL-2,Anti-CD3mAb共孵育.分别在第0,4,7,10,13 d计细胞数,并通过流式细胞术检测细胞免疫表型.结果:大肠癌患者外周血单个核细胞与IFN-γ,IL-2,Anti-CD3mAb共孵育4,7,10,13 d,细胞数分别增加2.69±0.9,14.1±3.7,23.0±5.0和31.2±3.0倍.CD3+,CD4+,CD8+和CD3+CDl6+CD56+细胞在培养第13 d分别从(62.8±7.6)%,(31.5±5.8)%,(44.9±8.2)%和(1.9±0.9)%增加到(90.6±9.0)%,(48.0±6.3)%,(57.3±9.0)%和(41.0±12.7)%.结论:rhIFN-γ,rhIL-2和Anti-CD3mAb能诱导大肠癌患者外周血单个核细胞为CIK细胞,体外增殖力强,是以CD3+CDl6+CD56+为主的异质细胞群.

CD28在肾综合征出血热患者外周血T淋巴细胞免疫表型的检测及意义

肾综合征出血热(HFRS)的免疫学发病机制尚未完全阐明.近年关于HFRS患者外周血T淋巴细胞亚群及免疫表型变化的研究受到关注并取得了一定的进展[1,2].本研究应用双色荧光单克隆抗体及流式细胞仪技术对HFRS患者外周血CD+8细胞毒性T细胞及CD28在该亚群表达的动态变化进行检测.探讨细胞免疫在HFRS发病机制中的作用.

大鼠椎间盘巢源性干细胞的体外分离、培养和特性鉴定

目的:对大鼠椎间盘干细胞巢来源的干细胞(ISN-SCs)进行体外分离、培养和特性鉴定.方法:以10周龄雄性SD大鼠作为研究对象,按照解剖区域分离椎间盘干细胞巢组织(骺板外周软骨膜部分),用Ⅱ型胶原酶消化获取细胞后进行体外培养,选用第四代细胞进行干细胞相关特性的鉴定:采用流式细胞技术测定细胞周期;MTT法测定增殖曲线;流式细胞技术检测干细胞相关表型;qPCR检测干细胞相关基因的表达水平;细胞三系诱导分化培养后采用茜素红染色及钙钴染色检测成骨分化能力,阿利新蓝染色检测成软骨分化能力,油红O染色检测成脂肪分化能力,qPCR检测多向分化相关基因的表达水平.结果:大鼠ISN-SCs呈成纤维样细胞,多触角,具有贴壁能力,是一种慢周期细胞,高表达干细胞相关阳性表面抗原分子CD29、CD90、CD44,低表达干细胞相关阴性表面抗原分子CD34、CD45、CD19、CD11b;成骨诱导分化后茜素红染色和钙钴染色均为阳性,成软骨分化后阿利新蓝染色阳性,成脂肪分化后油红O染色阳性,且各分化相关基因(成骨:Runx2、OPN、OCN;成软骨:SOX-9、COL2a1、ACAN;成脂肪:PPARγ、C/EBPα)表达水平较对照组显著增高,其与骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有相似的干细胞相关基因(NANOG、SOX-2、OCT-4)表达水平.结论:ISN-SCs具备干细胞的生物学特性,在体外经诱导后可以向软骨细胞及脂肪细胞转化,可为椎间盘的自体生物学修复研究提供良好的细胞来源.

乔本氏病针吸细胞学免疫表型观察研究

目的 探讨乔本氏病针吸甲状腺内浸润淋巴细胞免疫表型活性及临床意义.方法 利用流式细胞仪检验技术测定甲状腺内浸润淋巴细胞CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、CD7、CD19、NK、CD44、CD95/Fas、Bcl-2免疫活性,同时利用放免检验技术,测定T3、FT3、T4、FT4、γT3、TSH、TGA、MCA 8项指标.结果 表明乔本氏病甲状腺内浸润淋巴细胞大部分为T淋巴细胞,少数为B淋巴细胞,并且CD3+、CD7+T淋巴细胞比值高,CD4+T淋巴细胞次之,但均明显高于CD8+T淋巴细胞,CD4/CD8比值与正常外周血相似,CD19+B淋巴细胞及NK细胞比正常外周血B淋巴细胞不同程度减低,诱导细胞凋亡基因CD95/Fas表达明显增高,而抑制凋亡基因Bcl-2减低明显,CD44正常,显示该病良性免疫反应紊乱疾病.8项放免指标T3、FT3、T4、FT4、γT3各项指标仅有20～22%增高,69～79%均呈正常,2～7%减低,TSH增高有20%,TGA、MCA增高有79.5～79.9%,20.1～20.5%在正常范围内.结论 乔本氏病甲状腺内浸润淋巴细胞免疫活性及分布和功能异常.更有助于进一步探讨了解乔本氏病发病机制,为自身免疫性甲状腺疾病诊断、预防、治疗及预后观察提供理论依据,并认为小针头甲状腺针吸细胞病理学对乔本氏病诊断及鉴别诊断有重要诊断价值,明显优越其它传统方法,是目前甲状腺疾病诊断权威性诊断和鉴别诊断指标.

细胞免疫表型检测在急性淋巴细胞白血病诊断中的应用价值

目的:对 26 例初诊或化疗未缓解的急性淋巴细胞白血病(ALL)患者进行免疫表型检测分析.方法:采集白血病患者 EDTA-K2 抗凝外周血或骨髓液,用流式细胞术检测髓系、T 系、B 系、红系、巨系分化抗原及非特异性抗原.结果:ALL 患者均表达淋巴系抗原,但有部分病例同时表达髓系抗原(CD13 或 CD33).3 例髓系淋系双表型杂合性白血病同时表达 2 个以上淋系和髓系抗原标志,1 例 T 系、B 系双克隆杂合性自血病细胞分别表达两种以上 T 系和 B 系抗原.结论:细胞免疫表型检测可弥补形态学的不足,提高分型正确性,结合细胞形态学检验能为急性淋巴细胞白病的诊断、治疗、预后判定及基础研究提供可靠的依据.

流式细胞术单平台法检测HIV/AIDS个体血液淋巴细胞免疫表型时影响因素的研究

T淋巴细胞亚群的免疫分型能够提供人类获得性免疫功能缺陷综合征(AIDS)患者免疫状态的重要信息,作为人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的主要靶细胞,CD4+T细胞首先被感染,其数量随着进程不断减少.现认为,随着CD4+T细胞计数的不断下降,患者临床综合征的严重程度将不断加深.因此,对于HIV感染的人群,定期监测CD4+T的绝对数可以了解他们的免疫状态.HIV感染使CD4+T淋巴细胞减少的同时,CD8+细胞计数在感染早期和慢性感染过程中明显升高,感染晚期降至与正常人相当的水平.整个感染过程中,CD8+T细胞发生异常的免疫激活,与病毒复制程度高度相关,可以反映病毒的活跃程度,预示疾病的进展,对临床实践具有重要的指导意义和实用价值,是判断疾病进展的辅助指标 [1,2].目前,应用流式细胞仪测定全血中T细胞亚群有两种方法,其一为多平台法,它包括三项实验室技术[3].另一种为单平台法[4,5],即应用三色、四色流式试剂盒配以TruCOUNT计数管,加上全自动的Multiset获取和分析软件,一步即可获得T细胞亚群的相对数(百分比)和绝对数,因此,较为简便和实用省时.过去,对多平台法实验过程中的影响因素研究较多,本研究对可能影响单平台法实验结果的因素进行了探讨,现将结果报道如下.

白血病干细胞免疫表型与急性白血病疗效及预后的关系

研究表明,白血病细胞中的CD34+ CD38- CD123+亚群[1]和CD34+ CD38 - CD96+亚群[2]同样具备白血病干细胞(LSC)的特性.但是,目前为止,还没有哪个表面标志是公认的LSC特异标志,如何准确界定LSC仍然是研究的难点和热点.LSC表面标志对白血病疗效和预后判断的作用如何?目前这方面的报道非常少.我们检测了这两种LSC表面标志(CD34+CD38-CD96+和CD34+ CD38- CD123+),并与急性白血病疗效和预后的关系进行了分析,报道如下.病例和方法1.病例:所收集病例为我院2008年8月至2010年8月住院的初诊急性白血病患者86例,中位年龄54(11 ～86)岁,男40例,女46例,其中急性髓系白血病(AML) 70例(M14例,M2a5例,M2b 4例,M3 18例,M4a5例,M4b 6例,M5a11例,M5b 9例,M6 8例),急性淋巴细胞白血病(ALL) 16例(B-ALL 10例,T-ALL 6例).所有患者均符合WHO诊断分型标准,并进行了免疫表型和染色体核型分析.

套细胞淋巴瘤的治疗进展

套细胞淋巴瘤(MCL)占全部成人非霍奇金淋巴瘤(NHL)的4%～6%.常见于老年人,男性多于女性(2～3)∶1,诊断时平均年龄为54～68岁,60%～70%的患者确诊时已为Ann Arbor Ⅳ期.MCL瘤细胞免疫表型为CD5(+),CD20(+),CD23(-),CD10(-),具有特征性的t(11;14)(q13;q32)细胞遗传学改变,并导致其基因产物cy-clin D1过表达.MCL虽对诱导化疗敏感,但多在短时间内出现疾病进展,中位存活时间仅3年左右,尚无有效的治愈方法.因此,MCL在各类型淋巴瘤中预后差,迫切需要探索新的方法来提高其疗效.

重组α-干扰素治疗滤泡型淋巴瘤进展

自70年代以来,非霍奇金淋巴瘤(NHL)的发病率增加了65%,已列新发恶性肿瘤的第5位[1].尽管在过去30年里NHL的5年生存率已从31%上升至52%,但同期的病死率也几乎翻了1倍多.滤泡型NHL占低至中度恶性NHL的绝大部分,其特征是:呈滤泡型生长,带有B细胞免疫表型,t(14;18)染色体易位,在几乎所有亚型均有bcl-2原癌基因的重排,bcl-2基因产物的过度表达阻滞淋巴瘤细胞的凋亡[2].

单克隆抗体CD系统及其在慢性

CD 是 Clusters of differentiation的缩写,国内译为"分化簇”或"抗原分化群”.1980年左右由于单克隆抗体(单抗)技术的迅速发展,出现了许多抗白细胞的单抗.这些单抗分别对白细胞某种分化抗原具有特异性的结合能力,但不同实验室制备的单抗,名称繁多.为了统一命名,1982年国际白细胞分化抗原研究小组对当时的139种抗白细胞单抗进行鉴定,将CD作为白细胞分化抗原的总称,把识别同一类抗原的单抗归为一类,并确定表达某一类分化抗原的靶细胞,抗原的分子质量,到1996年第6届会议时,已命名到CD166[1].CD系统的出现对鉴别各种白细胞系列、划分细胞的分化阶段、比较正常细胞和恶性细胞的不同表型作出了重要贡献,成为研究细胞免疫表型的基础.

戈谢病细胞免疫表型及吞噬功能研究

戈谢病(Gaucher's disease)是一种罕见的脂类代谢异常性疾病,临床资料报道较多,实验室研究资料尚少.我们通过对3例戈谢病骨髓中戈谢细胞的免疫表型及吞噬功能研究,发现戈谢细胞主要表达淋巴细胞抗原,高度表达B淋巴细胞抗原,同时证实戈谢细胞具有吞噬功能.

065 鼠树突状细胞免疫表型和功能的异质性在抗肿瘤细胞治疗中的作用