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分子生物学方法在人类杯状病毒诊断和分型中的应用
人类杯状病毒(HuCVs)是引起急性胃肠炎的主要病原之一.自1990年NV全基因克隆测序以来,相继建立了多种新的诊断方法,为灵敏、特异而又简便地检测HuCVs感染开辟了新途径.本文主要就分子生物学方法在人类杯状病毒诊断和分型中的应用作一综述.
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急性病毒性心肌炎
肌炎这一术语初由Corvisart于19世纪早期提出.然而,在20世纪初期随着人们认识到冠状动脉疾病是心脏病的一个重要原因,心肌炎这一术语在很大程度上被摈弃了.为使心肌炎的诊断指标标准化,于1987年提出了达拉斯分类.但是这一分类存在一些缺陷,如病理学诊断上易出现不一致,取样误差,以及未考虑病理性改变的确切原因.更由于缺少用于明确炎症的其他免疫学染色和用于病毒诊断的聚合酶链反应(PCR),这一分类不再作为金标准用于病毒性或自身免疫性心肌炎的诊断.所以近年来对病毒和自身免疫性心脏病进行重新定义的努力可能会导致所谓的"达拉斯标准的灭亡".
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信号放大系统的原理及在病毒核酸检测中的应用
t在病毒性疾病诊断中,核酸检测是直接、确切的手段.对难于分离培养,或不易用免疫学方法检测特异性抗原、抗体的病毒,更为重要.但单纯核酸探针的敏感性不高,为提高检测敏感性,有两种主要途径;1.模板扩增技术,它通过扩增靶序列来提高敏感性;2.信号放大系统,它通过放大杂交后信号强度来提高敏感性.它反应迅速,简便易行,没有模板扩增的干扰因素,近年来在核酸检测越来越受到重视.常用的信号放大系统有分支DNA探针,3DNA树状体,DNA标记脂质体等,本文拟就常用信号放大系统的原理及其在病毒核酸检测中的应用作一综述.
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诊断风疹病毒感染的研究进展
风疹病毒的诊断对于风疹的监测、预防、判断预后及其恰当的处理措施,都有着重要的理论和现实意义。本文从风疹病毒颗粒、病毒蛋白及其病毒基因3个方面,总结了近年来国外学者对风疹病毒诊断的研究。
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西尼罗病毒诊断的研究进展
西尼罗病毒(West Nile Virus,WNV)首次于1937年12月在乌干达西尼罗地区的一名发热成年女性血液标本分离到,属黄病毒科(Flavivirdae)黄病毒属(Flavivirus)的乙型脑炎病毒血清群.可导致人类西尼罗热(West Nile Fever)或西尼罗脑炎(West Nile Encephalitis).发病者常常出现发烧、头痛、皮疹、淋巴结肿大等症状,严重时表现为无菌性脑膜炎,甚至死亡.
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登革热血清学诊断研究进展
登革热(dengue fever, DF)是由黄病毒属的登革病毒(dengue virus, DENV) 通过埃及伊蚊或白纹伊蚊叮咬传播引起的一种急性蚊媒传播疾病,现已成为全球性的严重公共卫生问题.目前登革病毒诊断方法主要包括病毒分离、分子生物学检测和血清学方法.其中,前者作为登革病毒诊断的金标准,不但可以检出病毒的存在,还能对病毒的型别进行鉴定,但该方法比较耗时,而且需要一定的仪器设备和专业技术人员[1];从Banditti早期报道的巢式RT-PCT检测到现在实时荧光PCR检测的应用以及核酸序列扩增技术,分子生物学检测技术在这近十几年来有了较大的发展,其敏感性、特异性和重复性都有了很大的提高,但该方法也存在较高的实验室设备和专业技术人员要求;而利用抗原或抗体检测原理的血清学实验方法,具有操作方便、试剂廉价、诊断快速等特点,较适用于现场诊断,并得到了广泛的应用.
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呼吸道病毒诊断的研究进展
呼吸道病毒感染严重影响着人类的健康,由于其感染后的临床症状相似,不能很好地区分,易造成抗生素的滥用.此外,由于下呼吸道感染的患者经常需要住院治疗,虽然目前有抗呼吸道病毒的特异性药物,但由于其种类很多,且变异率高,其变异速度往往超过了目前人类所能快速检测和诊断的能力,因此呼吸道病毒的特异性诊断已愈来愈成为患者治疗所必需.而特异性的呼吸道病毒诊断有利于尽早发现病毒类型,及时给予正确有效的治疗措施,减少抗生素的滥用、降低一些不必要的检查费用、缩短住院时间等,对于阻断病毒传播有着重要意义.过去40年里陆续出现的许多诊断技术,包括血清学诊断、细胞培养技术等都被应用于呼吸道病毒诊断.但这些方法逐渐被更敏感更快速的诊断技术所取代.现就呼吸道病毒实验室诊断的研究进展介绍如下.