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医海春秋总关情
郭应禄中国工程院院士.1930年5月出生于山西定襄.1956年毕业于北京医学院.现任北京大学泌尿外科研究所所长,北京大学泌尿外科培训中心主任,北京大学男科病防治中心主任,博士生导师,教授,主任医师;中国政治协商会议第八、第九届全国委员,科教文卫体专门委员会委员.中华泌尿外科学会主任委员,中华泌尿外科杂志总编辑,中华男科学会名誉主任委员,中国计划生育协会副会长,吴阶平医学基金会理事长.主编著作12部,论文264篇,成果20项.培养研究生硕士9名、博士24名.在泌尿外科的诸多领域进行了开创性工作.
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狠抓关键环节确保研究生培养质量
研究生教育是加速高层次人才培养,提高科技队伍水平和素质的重要途径.我院自1978年招收研究生以来,先后培养研究生565名,其中"九五"以来培养博士生63名、硕士生163名,并开展了博士后研究人员的培养.毕业研究生无论是留院还是分往外单位工作的,都在各自岗位上取得了较好的成绩.据不完全统计,毕业研究生中有33名晋升为高级职称,25名担任科室正、副主任职务,18名获国家自然科学基金面上项目资助,15名获得军队科技进步二等奖.在研究生培养的实践中,我们的体会是正确处理好研究生培养与学科建设、指导教师和研究生以及临床工作与科学研究的关系,不但有利于研究生的培养,而且有利于学科上水平和医院业务建设的发展.
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关于临床医学研究生的培养
在培养临床医学人才方面，不仅要培养学生缜密的逻辑思维、良好的科研方法，同时还要培养学生发现问题、解决和处理问题的能力。根据我国目前专业人才培养体制，研究生是进入某一专业领域中高层次人才的基础。如何培养和怎样培养研究生是十分重要的，它直接关系到个人能否成才，更重要的是关系到这一领域中未来的发展与走势。现结合多年来对博士、硕士研究生的培养，对于临床医学研究生的培养体会如下：
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狠抓关键环节 确保研究生培养质量
研究生教育是促进学科建设和人才培养的重要途径[1].我院自1978年招收研究生以来,先后培养研究生565名,其中"九五"以来培养博士生63名、硕士生163名,并开展了博士后研究人员的培养.毕业研究生无论是留院还是分往外单位工作的,都在各自岗位上取得了较好地成绩,据不完全统计,毕业研究生中有33名晋升为高级职称,25名担任科室正、副主任职务,18名获国家自然科学基金项目资助,15名获得军队科技进步二等奖.在研究生培养的实践中,我们体会到正确处理好研究生培养与学科建设、指导教师与研究生以及临床工作与科学研究的关系,不但有利于研究生的培养,而且有利于提高学科水平和促进医院业务建设的发展.
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千层塔茎尖组织培养灭菌方法的研究
千层塔为石杉科的蕨类植物,它含有的石杉碱甲素是一种高效胆碱酯醇抑制剂,对重症肌无力症的治疗有效率高达99.2%,且还能提高脑内乙酰胆碱的含量.石杉碱甲素制剂(石杉碱甲素片、哈伯因等)现已应用于临床,用于治疗老年人记忆减退和早期老年性痴呆症.由于全合成石杉碱甲素步骤繁琐、价格昂贵且有副作用.因此,现在无论是结构改造还是直接作为药品,石杉碱甲的主要来源还是少数石杉科植物的提取.该类植物是古老的蕨类植物群,现已大多灭绝,现存的该类植物大多生长缓慢,对环境要求苛刻,且只有千层塔Huperzia serrata、小杉兰Lycopodium selago等少数种类含有石杉碱甲素,故资源极其有限.目前,国内外对石杉科植物的组织培养研究较少.我们采用千层塔为实验材料,对其外植体进行组织培养,筛选出一套理论上较完善的灭菌方法和组织培养条件,且进一步推断出其植株中有内源真菌的共生,并标记了内源真菌的共生部位,为内源真菌的大规模培养提供了依据.
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诱导子对丹参毛状根中丹参酮类成分积累影响
丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根.丹参原植物具有繁殖能力强,易于栽培的特点,目前国内外展开了大量的组织和细胞培养研究[1-2].
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热爱生活勤奋工作
1991年元月12日,<健康报>刊登了该报记者对我采访的照片,并用"搞医学,一辈子不能偷懒"对我进行了概括.说真的,假如下边所述算什么成就的话,我自觉确与我热爱工作密切相关.我一生坎坷多难,但不论是读书、学习、教学、科研、培养研究生,还是劳动、种田,我都勤勤恳恳、老老实实地把它做好.此外,我热爱公益事业,乐于助人,因此受过工会的表彰.以下就是我经历中比较大的几个段落.
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卡氏肺孢子虫肺炎动物模型及虫体体外培养研究
肺孢子虫(Pneumocystis)是一种机会性致病病原体,免疫功能受损的宿主感染后,可引起肺孢子虫肺炎(Pneumocystis pneumonia,PCP)或称肺孢子虫病(Pneumocystosis).长期以来,人们一直认为卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carinii,Pc)是一种原虫,是引起人体"卡氏肺孢子虫肺炎"(Pneumocystis carinii pneumonia,PCP)的病原体.然而,20世纪80年代末的分子生物学和生物化学的研究结果证实,它属于真菌[1、2].引起人体肺孢子虫肺炎的病原体为Pneumocystis jeroveci(国内有学者译为"耶氏肺孢子虫"),而卡氏肺孢子虫仅感染大鼠和其他一些动物.鉴于目前国内对上述归类和新名尚缺乏统一认识,本文仍将之称为"肺孢子虫",暂不称"真菌".近年来,由于免疫抑制剂、抗肿瘤药物的广泛应用,以及世界各地AIDS病例的增加,PCP病例也随之急剧增多,使得肺孢子虫成为目前研究的热点.建立PCP动物模型和体外培养肺孢子虫,是开展肺孢子虫分类、生活史、发病机制、药物筛选、疫苗研制,以及免疫学与分子生物学等研究的基础.本文就卡氏肺孢子虫肺炎动物模型及其体外培养的研究进展综述如下.
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"病原生物学"学科称谓浅议
1"病原生物学"学科称谓的由来1997年国务院学位委员会和国家教育委员会批准颁布了<授予博士、硕士学位和培养研究生的学科、专业目录>(以下简称新目录).在新目录学科门类的医学部分,出现了一个新的学科、专业,称谓"病原生物学",其涵盖了原目录中微生物学(部分)和寄生虫学,同时,在新目录学科门类的理学部分,还保留有微生物学(部分).由此可见,原目录中的微生物学被一分为二,其中与人类疾病相关的部分(即我们通常称为"医学微生物学"部分)与寄生虫学整合为一个新的学科、专业,即"病原生物学"[1].
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应用转瓶和生物反应器培养表达HBsAg的哺乳动物细胞系的比较研究
大规模培养哺乳动物细胞是生产具有重要医用价值的生物制品,如疫苗、生长因子、单抗等的重要方法.哺乳动物细胞的大规模培养方式主要有传统的转瓶和现代的各种生物反应器.目前,我国乙型肝炎疫苗(转基因中华地鼠卵巢细胞产品)的生产采用转瓶培养方式.但近年来,应用载体和生物反应器大规模培养哺乳动物细胞已成为国际上细胞培养工业化有发展前途的技术[1].本室引进了国外新的篮式载体型生物反应器系统用于哺乳动物细胞系的大规模培养研究.
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应用小鼠体外全胚胎培养研究金葡菌L型对胚胎发育的影响
金葡菌是细菌感染性疾病中常见的细菌之一,在体内外因素作用下可以缺壁变异成L型.金葡菌L型除可引起各种化脓性感染和败血症外,实验证明也可引起小鼠的不孕和肿瘤,可通过胎盘垂直感染并与子代先天畸形有一定的关系,但这些研究均是通过母体感染的体内试验,本实验采用体外全胚胎培养(WEC)方法观察金葡菌L型对体外胚胎发育的影响.
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眼科硕士专业学位研究生教育中存在的问题及其对策
现代医学是一门系统的科学,其目的是医治病人疾患,保障人类健康.经过二十余年的发展,作为高等医学教育中较高层次的医学研究生教育,目前已基本建立起自己的教育规范,分别在基础医学、临床医学、口腔医学、公共卫生与预防医学、中医学、中西医结合、药学和中药学等一级学科培养研究生.
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论康复医学研究生自主创新能力的培养
康复医学具有多科性、广泛性、社会性的特点,充分体现生物-心理-社会的医学模式;康复医学又是一门应用性、技能性很强的学科.所以,康复医学人才培养也有其特殊性,是关系到康复医学事业可持续发展和康复医学总体水平提高的重要问题,而康复医学专业研究生教育是培养康复医学领域高素质人才的重要基地.自主创新能力是高层次康复人才的核心素质.因此,培养研究生自主创新能力,是康复医学专业研究生教育中亟待解决的问题.
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影响泌尿生殖道沙眼衣原体分离培养的关键因素
笔者多年从事沙眼衣原体分离培养研究，取得点滴经验如下。 标本采集：同时采集患者宫颈及尿道标本或间隔1周连续多个宫颈标本，用细头拭子需插入宫颈口3～5 cm,旋转1周（5～10 s）取出；男性患者在症状出现7～8 d后，采集尿道(3～5 cm)拭子，以不含精液为好。标本采集前应避免使用避孕药及抗生素。 标本培养：初次分离培养细胞系以McCoy敏感。培养基以RPMI-1640、DMEM好，其中加入庆大霉素、制霉菌素或万古霉素，勿用青霉素，因其影响富含半胱氨酸的蛋白质合成，阻止始体向原体转变，不能形成感染性原体。10%新生牛血清有助于包涵体形成，培养液中尚需加入放线菌酮（终浓度为1 μg/ml），抑制宿主细胞的核酸、蛋白质合成，以便有充足的营养和大分子前身物质供衣原体利用。
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丙型肝炎病毒细胞培养研究进展
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是引起人类丙型肝炎的病原体.全球HCV的感染率约为3%,约1.7亿人感染HCV.HCV感染易慢性化,其慢性化率可高达85%,部分慢性丙型肝炎患者终可发展为肝纤维化、肝硬化,甚至肝细胞癌.目前主要采用干扰素和利巴韦林联合治疗丙型肝炎,但并非对所有慢性丙型肝炎患者均有效.
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幽门螺杆菌对体外原代培养的人胆囊上皮细胞损伤作用
目的:探讨幽门螺杆菌(Hpylori)在体外对人胆囊上皮细胞(HGBEC)的损伤作用.方法:采用液体增菌及人胆囊上皮细胞原代培养研究Hpylori对HGBEC的损伤作用.结果:从Hpylori的生长曲线可知观察其他因素对HGBEC的影响在细胞生长旺盛期即培养的2-6 d为合适,Hpylori增菌上清液及菌体破碎液对培养的HGBEC形态学及上清酶学指标ALP(33.84±6.00 vs 27.01±4.67,P＜0.05),LDH(168.37±20.84 vs 55.51±17.17,P＜0.01),GGT(42.01±6.18 vs 25.34±4.33 P＜0.01)有明显影响.结论:Hpylori增菌上清液及菌体破碎液对培养的HGBEC有明显损伤作用.
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将骨科的基础研究提高到一个新水平
我国骨科的基础研究工作近十多年来得到了快速发展.20世纪六、七十年代,除了在北京、上海等城市的个别医院有骨科研究所之外,各医院的骨科大多只是从事临床工作或开展以病例随访总结为主的临床研究,没有临床实验室.1978年我国开始招收研究生以后,因培养研究生的需要,相关医院的骨科开始建立了各种实验室.
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虹膜色素上皮细胞自体移植研究进展
虹膜色素上皮细胞(IPE)自体移植术是继视网膜色素上皮细胞(RPE)移植术之后发展起来的一项新技术.它不但避免了异体RPE移植的免疫排斥反应,还克服了自体RPE移植取材操作的困难,为老年性黄斑变性等与视网膜色素上皮损害相关眼病的治愈带来了新的希望.本文介绍IPE的体外培养研究、IPE自体移植的动物实验、临床初步研究及新进展.
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解析免疫组化实验中手工操作失误导致不良结果及对策分析
免疫组织化学技术（immunohistochemistry）是由免疫学和传统组织化学相互结合发展而来的一类实验技术，其是利用抗原（antigen）和抗体（antibody）间特异结合的原理，对组织片或细胞标本中的某些多肽和蛋白质等大分子物质进行原位的定性、定位或定量研究的技术，简称免疫组化[1，2]。随着免疫学、免疫化学和组织化学的不断发展进步，以及显微镜的更新进步，免疫组化技术也取得了长足发展，越来越多地渗透到医学及生命科学的各个领域。免疫组化种类很多，按照标记物的不同分类，可分为免疫荧光技术、免疫酶组织化学技术、免疫胶体金组织化学技术、亲和免疫组织化学技术四类，常用的是亲和免疫组织化学技术。因各类技术基本原理相同，使得不同类实验步骤大致相近，但因每一类技术的独特性，其操作步骤本身又都具有其特定性。免疫组化实验步骤繁琐，从取材、固定、组织处理、制片到抗原修复、染色步骤繁多，涉及的试剂至少十种，周期长，而且每个环节环环相扣，看似简单的实验操作，却往往不能得到理想的实验结果。本研究汲取多年科研工作中及培养研究生进行免疫组化技术操作中发现的一系列操作失误及所造成的不良后果进行分析总结如下。
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皮肤科临床教师培养研究生临床能力的体会
皮肤科硕士研究生临床能力的培养需要注重基础理论的学习和临床技能的训练，带教老师应从培养研究生专科思维模式入手，采用多种形式的教学方式培养其独立思考和解决问题的能力。
