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ω-3多不饱和脂肪酸与人类健康
ω-3多不饱和脂肪酸是指从脂肪酸的甲基端(ω端)开始,第一个不饱和双键出现在第3和第4个碳原子之间,这一类型的多不饱和脂肪酸主要包括:α-亚麻酸(α-linolenic acid)、二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA).ω-3型多不饱和脂肪酸特别引人关注,不仅因为它们是生物细胞膜的重要组分,而且在生物体内有着十分重要的生理功能和保健作用[1].
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DHA和EPA的抗癌机制研究进展
二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid DHA)与二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid EPA)是人体必需的两种n-3多烯不饱和脂肪酸(n-3 polyunsaturated fatty acid n-3PUFA),在深海鱼油中含量较高.
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响应面法优化南极磷虾源磷脂的人参皂苷磷脂复合物制备工艺
目的 采用响应面法对南极磷虾源磷脂的人参皂苷磷脂复合物制备工艺进行优化,并初步探讨其理化性质.方法 以人参皂苷复合物的复合率为评估标准,采用单因素及响应面Box-Behnken设计考察各因素对复合物复合率的影响,优化制备工艺.利用扫描电镜观察磷脂复合物的固体粒子表面形态.结果 终影响磷脂复合物复合率的因素有3个:反应时间,人参皂苷浓度,投料比(人参皂苷:磷脂),佳制备工艺为:以四氢呋喃作为反应溶剂,温度为40℃,反应时间为1.5h,投料比为1∶1.6,人参皂苷浓度为35 mg·mL-1,在此条件下复合率可达98.08％.经3次验证实验平均复合率可达97.45％,实验值与预测值之间的相对误差为o.64％.结论响应面法对复合物制备工艺条件进行优化后,提高了复合物制备的复合率.
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尿素浓度对粉核油球藻Pinguiococcus pyrenoidosus CCMP2078生长和二十碳五烯酸积累特性的影响
目的 探索不同尿素浓度对粉核油球藻(Pinguiococcus pyrenoidosus CCMP 2078)生长、脂肪酸组成、二十碳五烯酸(EPA)和多不饱和脂肪酸(PUFAs)含量的影响.方法 采用GC-MS测定脂肪酸组成和含量.结果 以尿素为氮源,氮浓度低于0.069 mmol·L-1时,藻几乎不生长;氮浓度为1.38 mmol·L-1时的细胞密度、干重和比生长率高,随氮浓度继续升高,藻生长受到明显抑制.不同氮浓度条件下的脂肪酸组成不同.氮浓度为1.38 mmol·L-1的培养条件下,粉核油球藻的EPA和PUFAs含量高,分别为15.66%和28.65%.在0.0069-1.38 mmol·L-1的氮浓度范围内.EPA和PUFAs含量随着氮浓度的增加而上升;而在1.38 mmol·L-1～5.52 mmol·L-1的氮浓度范围内,EPA和PUFAs含量随着氮浓度的增加而下降.结论 采用1.38 mmol·L-1的尿素浓度进行藻的培养可以提高粉核油球藻P.pyrenoidosus CCMP 2078的EPA含量.
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海燕Asterina pectinifera生殖腺营养成分的研究
对黄海产海燕生殖腺进行了营养成分分析.结果如下:海燕生殖腺蛋白质含量为43.25%,脂肪含量为14.22%,还原糖含量为3.48%,总糖含量为18.60%.并进一步对氨基酸、不饱和脂肪酸作了定性定量分析,其中总氨基酸中必需氨基酸含量为36.24%,半必需氨基酸含量为10.46%,其它氨基酸含量为53.30%;高不饱和脂肪酸含量丰富,其中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)分别占总不饱和脂肪酸的22.39%和0.30%,EPA含量显著.
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大鼠血清中二十碳五烯酸与二十二碳六烯酸的气相色谱测定法研究
目的:用气相色谱测定法观察改变大鼠饲料成分后,其血清中二十碳五烯酸(EPA)与二十二碳六烯酸(DHA)组分含量的变化.方法:选用丁二酸二乙二醇酯(DEGS)色谱柱.样品经提取后用三氟化硼-乙醚/甲醇,甲酯化处理.结果:两者酯化率均为97.1%～100.8%,回收率前者为92.8%,后者为91.2%.线性关系前者为10～160mg/L,后者为20～200mg/L.结论:用气相色谱法测定大鼠血清中的EPA与DHA快速、准确且灵敏度高.
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EPA、DHA对脂多糖诱导的大鼠系膜细胞增殖及凋亡的影响
目的 观察二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)对正常及在脂多糖(LPS)诱导下的肾小球系膜细胞(GMCs)增殖和凋亡的影响.方法 EPA和DHA各设两个终浓度(10 μmol/L和100 μmol/L),LPS终浓度为10 μg/mL,培养时间为24、48和72 h,采用MTT法测定细胞增殖;EPA和DHA终浓度为100 μmol/L,培养48 h后,采用双染色流式细胞术检测细胞凋亡.结果 EPA和DHA对正常GMCs无明显影响;对LPS诱导的GMCs增殖有明显抑制作用(P＜0.01),在同等浓度下,DHA的作用强于EPA(P＜0.01);EPA、DHA可明显促进GMCs凋亡.结论 EPA和DHA明显抑制LPS诱导的GMCs增殖并促进其凋亡.
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毛细管气相色谱法在血液DHA、EPA测定中的应用及评价
目的 评价毛细管气相色谱法在血液二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)检测中的应用效果.方法 建立毛细管气相色谱法,测定血液中的DHA、EPA,并对该方法进行评价.结果 高中低三个浓度的加标回收试验,DHA平均回收率为92.0％ ～ 93.6％,RSD为3.0％ ～3.6％,EPA的平均回收率为92.3％ ～ 94.0％,RSD为2.8％ ～4.0％.结论 毛细管气相色谱法精密度、准确度和重复性较好,且短时间内稳定,适用于检测血液中的DHA和EPA.
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精神分裂症患者治疗前后血浆多不饱和脂肪酸水平变化的研究
目的 研究精神分裂症患者血浆中的4种多不饱和脂肪酸(亚油酸,LA;花生四烯酸,AA;二十碳五烯酸,EPA;二十二碳六烯酸,DHA)治疗前后的变化,探讨脂肪酸代谢在精神分裂症病理生理机制中的作用.方法 以30例精神分裂症为研究对象,27名正常人群作为对照.用气相色谱仪(GC)测定其血浆中LA、AA 、EPA和DHA等4种多不饱和脂肪酸的浓度.治疗6周后重测1次.结果 抗精神病药物治疗前后,精神分裂症患者血浆中ω-6族脂肪酸LA浓度[分别是(735.86±40.48)mg/L,(783.75±29.05)mg/L]均低于正常对照组[(995.83±14.23)mg/L,(991.39±14.20)mg/L,P<0.01],而AA浓度与对照差异无显著性.ω-3族脂肪酸EPA和DHA浓度在治疗前高于对照组(P<0.05),治疗后恢复正常.结论 精神分裂症血浆中ω-3族脂肪酸EPA和DHA增多,治疗后恢复正常,支持精神分裂症的脂质过氧化假说.
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ω3脂肪酸与抑郁症
什么是ω3脂肪酸ω3脂肪酸是一种人体不可或缺的自身不能合成、只能从饮食中获得的多不饱和脂肪酸,是人体必需脂肪酸的一种,另一种必需脂肪酸是ω6脂肪酸,如亚油酸.ω3脂肪酸主要包括α亚麻酸、EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸).α亚麻酸对抑郁症无明显作用.EPA在脑内含量很少,是生成许多抗炎症激素的关键,具有抗抑郁作用.研究发现,抑郁症病人脑内,特别是前额叶皮质DHA减少.一些抑郁症研究者已经研究了EPA和DHA各自对抑郁症的作用,表明EPA有着重要作用.
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营养师眼里的“深海鱼油”
什么是深海鱼油?要想了解这个问题,我们首先要知道什么是鱼油.鱼油是用鱼或鱼加工的下脚料制取的油脂,它包括体油、肝油和脑油,它含有甘油三酯、多不饱和脂肪酸、磷脂、类脂、脂溶性维生素以及蛋白质降解物等.由于某些寒冷地区深海里的鱼,如三文鱼、沙丁鱼等体内EPA(二十碳五烯酸)、DHA(二十二碳六烯酸)含量很高,由它们提取的油脂也富含EPA和DHA,有一些特殊的保健功效,所以把这些特定鱼类提取的鱼油称为深海鱼油.而且也是人类在海洋鱼类中首先发现的天然DHA.
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人血清中ALA、EPA气相色谱方法的建立及临床应用
目的 建立检测血清中十八碳三烯酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)2种多不饱和脂肪酸的新方法,并用该方法检测危重症患者与正常人血清中ALA、EPA的含量.方法 将人血清中的十八碳三烯酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)经正己烷萃取浓缩,经硫酸-甲醇甲酯化,用气相色谱法定性、定量检测.结果 危重患者和正常人血清中的ALA、EPA含量差异均无统计学意义(P＞0.05).检出限(S/N =3):ALA:2.3 μg/ml,EPA:1.4 μg/ml.ALA,EPA的RSD(n =6)分别为2.32％、3.94％.结论 此方法重复性好、敏感度高,可用于Omega-3多不饱和脂肪酸含量的测定.
关键词： 气相色谱法 Omega-3多不饱和脂肪酸 十八碳三烯酸 二十碳五烯酸 危重患者 -
毛细管气相色谱法同时检测分析鱼油中十八碳三烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸
目的 建立毛细管气相色谱法同时测定鱼油中十八碳三烯酸(α-LNA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量的方法.方法 样品经氢氧化钾-甲醇溶液直接甲酯化后用极性色谱柱分离,气相色谱分析,外标法定量.结果 鱼油中α-LNA、EPA和DHA均获得到良好的分离,3种被测组分的峰面积与其质量浓度之间有良好的线性关系(相关系数均＞0.999),方法检出限分别为2.7 mg/L、4.6 mg/L和4.2 m1g/L;样品加标回收率为92.6％～101.2％,相对标准偏差为1.2％ ～3.9％.应用该法对市售的10批次鱼油样品进行检测,大部分样品被检测物含量均在其产品的标示量范围内.结论 该方法前处理简单,分析时间短,选择性好,灵敏度高,适用于鱼油中α-LNA、EPA和DHA含量的检测.
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二十碳五烯酸对大鼠角膜新生血管核转录因子κB及细胞因子表达的抑制作用
背景 角膜新生血管(CNV)是炎症性角膜病变导致视力下降和角膜移植后发生排斥反应的重要原因,其发生机制和治疗一直是国内外角膜病研究的热点.目的 探讨二十碳五烯酸(EPA)对碱烧伤大鼠CNV核转录因子κB(NF-κB)、白细胞介素1α(IL-1α)、IL-6表达的影响及作用机制.方法 用浸有1 mol/L NaOH的3 mm圆形滤纸贴附于72只SD大鼠的右眼角膜中央30 s制作角膜碱烧伤模型,用随机数字表法将大鼠随机分为3个组,另6只匹配的正常大鼠作为正常对照组.碱烧伤0.02mg EPA治疗组和碱烧伤0.03mg EPA治疗组大鼠分别于碱烧伤后即刻结膜下注射0.04 ml剂量为0.02 mg或0.03mg EPA,碱烧伤模型组结膜下注射0.04ml生理盐水,正常对照组大鼠未行结膜下注射.大鼠干预后每天裂隙灯下观察CNV的生长面积和角膜水肿.分别于造模后24 h,4、7、14 d过量麻醉处死动物后制备角膜标本,采用苏木精-伊红染色法检测各组大鼠角膜的组织病理学变化,免疫组织化学方法检测各组大鼠角膜组织中CD34的表达以计数血管内皮细胞,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹法分别检测各组大鼠角膜组织中IL-1α mRNA和IL-6 mRNA的表达及NF-κBp65的蛋白表达.结果 裂隙灯下见造模后2～4 d,CNV缓慢生长,角膜水肿,上皮缺损;造模后7～10 d,CNV面积增加,角膜水肿减轻;造模后14 d,CNV面积大,血管变细.苏木精-伊红染色显示,碱烧伤后7 d碱烧伤组角膜上皮部分缺损,基质层水肿明显,可见较多炎性细胞及大量CNV;碱烧伤0.03 mg EPA治疗组与碱烧伤0.02 mg EPA治疗组均可见角膜上皮修复,基质层水肿减轻,少量炎性细胞,未见CNV.碱烧伤后7 d和14 d,碱烧伤0.02 mg EPA治疗组CNV相对面积分别为(15.80±6.43)%、(11.06±2.14)%,碱烧伤0.03 mg EPA治疗组为(16.10±7.41)%、(11.06±2.51)%,均明显小于碱烧伤组的(84.74±7.77)%、(89.63±7.50)%,差异均有统计学意义(P＜0.05).碱烧伤后7 d,碱烧伤组CD34在CNV的内皮细胞中呈强阳性表达,而在碱烧伤0.02 mg EPA治疗组、0.03mg EPA治疗组角膜中未见表达.RT-PCR检测结果表明,碱烧伤后4 d,碱烧伤0.02 mg EPA治疗组、0.03 mg EPA治疗组IL-1α、IL-6mRNA在角膜组织中的表达量明显低于碱烧伤组,蛋白印迹检测证实NF-κB p65蛋白在角膜组织中的表达低于碱烧伤组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 EPA能够抑制NF-κB-IL-1α、IL-6的表达,从而抑制碱烧伤后CNV的生长.
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二十碳五烯酸眼表用药对大鼠角膜不良反应的研究
角膜新生血管( corneal neovascularization,CNV)是角膜病变导致视力下降和角膜移植排斥反应发生的重要原因[1].我们以往的研究表明[2-3],二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)是一种核转录因子κB( nuclear factor kappa B,NF-κB)抑制剂,有降低NF-κB表达进而降低白细胞介素-1α(interleukinlα,IL-1α)、IL-6表达的抗炎作用,还可降低血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor,VEGF)及VEGF受体2(fetal liver kinase l,Flk-1)的表达水平,抑制大鼠CNV的形成.
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二十碳五烯酸对糖尿病大鼠冠状动脉的舒张作用及其机制
目的 探讨不同浓度二十碳五烯酸(EPA)对糖尿病大鼠冠状动脉的舒张作用及其机制.方法 40只SD大鼠随机分为正常组和糖尿病组,分离冠状动脉.采用微血管张力测定技术评估不同浓度(0.1、1、3、10、30、100μmol/L) EPA对正常和糖尿病大鼠冠状动脉的舒张作用并观察孵育(100 nmol/L)大电导钙激活钾通道(BK通道)特异性阻滞剂伊比蝎毒素(IBTX)后血管张力的变化;酶消化法分离正常和糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞并采用单通道膜片钳技术记录灌流不同浓度(0、10、30、100、300、1 000 pmol/L)EPA时BK通道开放概率的变化;采用蛋白印迹技术测定正常和糖尿病大鼠冠状动脉BK通道亚单位蛋白表达.结果 EPA对正常组和糖尿病组大鼠冠状动脉舒张的比例随浓度升高而增加,孵育IBTX后舒张作用明显减弱;EPA对正常组和糖尿病组大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道的激活随浓度升高而增强,且与正常组比较,EPA对糖尿病组大鼠冠状动脉的舒张作用及BK通道的激活作用较弱.两组大鼠冠状动脉BK通道蛋白α亚单位表达无差异,但糖尿病大鼠冠状动脉BK通道蛋白β1亚单位表达明显低于正常组(0.424 7±0.036 2 vs 0.892 3±0.053 5,n=6,P＜0.05).结论 EPA对糖尿病冠状动脉具有舒张作用,其机制与激活BK通道有关,糖尿病时BK通道β1亚单位表达减少,EPA对BK通道的激活作用减弱.
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二十碳五烯酸抑制自噬反应提高膀胱癌细胞化疗敏感性
目的 探讨二十碳五烯酸(EPA)对膀胱癌T24细胞顺铂(DDP)化疗敏感性的影响及其机制.方法 根据不同药物干预情况分为5组:对照组、EPA组,DDP组、EPA+ DDP组、EPA+DDP+雷帕霉素组(EPA+ Rapa+ DDP组).细胞计数(CCK-8)试剂盒法和流式细胞仪检测T24细胞增殖抑制率和凋亡率,Western blot法检测凋亡因子[活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)],抗凋亡因子(bcl-2)和自噬反应相关因子(LC3-Ⅱ、Beclin-1)的表达.结果 与DDP组比较,EPA+ DDP组T24细胞的增殖抑制率明显增高[(73.19±6.92)％比(48.62±4.0)％,P=0.000],凋亡率明显增高[(64.30±6.53)％比(35.90±4.21％,P=0.010].Western blot检测显示,与DDP组比较,EPA+DDP组Cleaved Caspase-3、bax表达增加,而bcl-2、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达减少(P均=0.000).EPA+ Rapa+DDP组增殖抑制率和凋亡率较EPA+ DDP组明显降低,同时自噬反应表达增加.结论 EPA预处理增强DDP抑制膀胱癌T24细胞增殖,促进细胞凋亡,提高DDP化疗敏感性,其机制可能是通过抑制化疗后增高的自噬反应.
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ω-3多不饱和脂肪酸对树突状细胞表型和功能的抑制作用
目的研究ω-3多不饱和脂肪酸对树突状细胞的影响.方法采用GM-CSF及白细胞介素(IL)-4诱导人外周单核细胞获得非成熟树突状细胞(DCs),然后以不饱和脂肪酸二十碳五烯酸(EPA),二十二碳六烯酸(DHA)或饱和脂肪酸硬脂酸(SA)处理细胞24 h,并将其分为5组:非成熟DCs组、成熟DCs组、EPA处理组、DHA处理组和SA处理组.内毒素脂多糖(LPS)诱导细胞成熟后用流式细胞仪分别检测DCs表面抗原提呈分子HLA-DR及共刺激分子CD40、CD80、CD86的表达率;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞上清中白细胞介素-12及肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量;混合T淋巴细胞反应检测DCs刺激细胞增殖能力.结果非成熟DCs组CD80、CD86及HLA-DR的表达率为(48.7±17.5)%、(57.3±16.9)%及(78.5±15.1)%,成熟DCs组这3种分子高表达,其表达率为分别为(86.3±10.8)%、(77.4±13.5)%及(79.6±14.5)%,EPA及DHA处理组CD80、CD86及HLA-DR的表达率分别为(65.5±17.2)%、(60.2±9.1)%、(56.9±12.3)%和(64.7±13.5)%、(57.7±13.6)%、(64.9±5.8)%,与成熟DCs组相比有统计学意义(P＜0.05),而SA处理的DCs表达率分别为(88.1±4.5)%、(71.2±14.5)%、(75.9±10.7)%与成熟组相比差异无统计学意义(P＞0.05).细胞上清IL-12及TNF-α的含量,5个组分别为(70.8±1.9)、(286.8±80.4)、(158.5±43.5)、(161.0±20.1)、(271.5±45.6)和(4.7±2.3)、(32.1±12.5)、(13.7±4.8)、(9.0±6.5)、(27.6±11.4)ng/L,EPA及DHA处理组与成熟DCs组相比差异有统计学意义(P＜0.01),而SA组与成熟DCs组相比差异无统计学意义(P＞0.05).EPA及DHA组其DCs刺激T细胞增殖的能力亦显著下降(P＜0.05),并且随着EPA及DHA浓度的增加,其下降越明显.结论ω-3多不饱和脂肪酸可以在体外抑制树突状细胞免疫表型的表达及细胞因子的释放,降低其刺激T细胞增殖的能力.
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二十碳五烯酸预防动脉瘤性蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的meta分析
目的 系统评价二十碳五烯酸(EPA)预防动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)后脑血管痉挛(CVS)的临床疗效.方法 计算机检索PubMed、EMBASE、Cochrane Library、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、维普数据库等收集EPA治疗aSAH后CVS的临床对照试验,评价纳入研究的质量、提取数据,采用RevMan 5.0分析数据.结果 共纳入3个研究,307例病人.Meta分析结果显示:EPA降低总症状性脑血管痉挛(SCVS)发生率[相对危险度(RR)=0.46,95％可信区间(CI)为0.29～0.72,P=0.0006]、持续性SCVS发生率(RR=0.13,95％CI为0.04～0.46,P=0.002)、血管痉挛性脑梗死发生率(RR=0.27,95％CI为0.14～0.51,P＜0.0001),但并不改善30 d改良Rankin量表(mRS)评分(RR=1.15,95％CI为0.98～1.33,P=0.08)、180 d mRS评分(RR=1.03,95％ CI为0.91～1.16,P=0.65).结论 EPA可预防aSAH后CVS,但其远期疗效仍需进一步研究.
关键词： 动脉瘤性蛛网膜下腔出血 脑血管痉挛 二十碳五烯酸 Meta分析 -
液相色谱串联质谱法测定兔眼玻璃体内二十碳五烯酸的浓度
目的:建立适用于兔眼玻璃体内二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)浓度测定的LC-MS/MS方法,为研究EPA在玻璃体内的药动学提供技术支持.方法:应用QTrap 4500液质联用仪,采用电喷雾电离源,在负离子方式选择反应监测(MRM)模式下测定兔眼玻璃体内注射EPA后不同时间的药物浓度.50μL玻璃体样品经乙腈沉淀蛋白并浓缩处理后用于定量分析.色谱分离采用XDB C18柱(50 mm×4.6mm,1.8 μm),流动相为甲醇-水-甲酸(90∶10∶0.1,V/V/V),流速:1.00 mL·min-1;进样量:2μL.监测的离子反应分别为m/z 301.0-m/z 257.3(EPA)和m/z 526.0→m/z 401.0(内标,格列喹酮).每个样品的分析时间为3 min.结果:玻璃体内EPA在0.02 ～5.00 mg·L-1范围内线性关系良好,低定量限为0.02mg·L-1;提取回收率大于90％;日内和日间精密度(RSD)均小于11.6％;基质效应可忽略;EPA玻璃体样品室温放置6h、-20℃放置3d、-70℃一次冻融稳定,处理后样品室温放置20h稳定.兔眼内注射EPA后的主要药动学参数如下:Gmax为1.05 mg·L-1,tmax为0.5 h,t1/2为4.72 h,AUC(0-t)为3.614 mg·L-1·h,AUC(01-∞)为4.296 mg·L-1·h.结论:所建立的EPA浓度测定的LC-MS/MS方法灵敏、准确、简便、稳定,适用于EPA在兔眼内的药动学研究.
