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骨髓干细胞移植治疗糖尿病足的理论基础及临床应用进展
糖尿病足(DF)是糖尿病(DM)并发症中致残率极高的疾病,大约有60%的非创伤性小腿截肢由DF引起[1].糖尿病足会延长糖尿病患者大约60%的住院时间,并且导致患者5年内病死率达39%~68%[2].DF主要发病原因是侧支循环形成能力减退,导致下肢血液供应障碍,常以静息痛和足部溃疡为主要表现.传统的治疗手段有药物、血管搭桥和介入手术等,因其主要为流出道闭塞,因此这些传统治疗手段有各自的局限性,且效果不佳[3].自体骨髓干细胞移植(ABMSCT)是近年来迅速发展的一项治疗技术.本文对自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病足的理论基础、临床应用现状及其安全性等进行综述.
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骨髓干细胞移植治疗糖尿病兔下肢缺血效果观察
目的:对比骨髓干细胞移植、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员及局部骨髓干细胞移植联合G-CSF动员3种方法对糖尿病兔缺血组织血管新生的作用.方法:40只健康新西兰兔,用四氧嘧啶(ALX)诱导成为糖尿病兔后,均结扎右后肢股动脉,建立糖尿病下肢缺血动物模型,然后随机分为4组,每组10只.其中1组不进行治疗作对照(A组),余3组分别用G-CSF动员(B组)、局部骨髓干细胞移植(C组)及G-CSF动员联合局部骨髓干细胞移植(D组)进行治疗.28 d后均以右侧股内侧正中部位为中心等距离取局部肌肉组织,免疫组织化学染色检测肌组织微血管密度及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平.结果:上述A、B、C、D 4组缺血组织微血管密度(1)分别为(22.0±6.0)、(35.8 4±7.5)、(38.1±7.2)和(48.7±9.1)个/高倍视野,VEGF蛋白表达水平(2)分别为(8.87 4-1.51)%、(11.83 4-1.65)%、(12.32±1.34)%和(17.13±2.73)%,局部干细胞移植(1)和G-CSF动员(2)对微血管密度和VEGF的表达有影响(F1分别为50.599、35.930,F2分别为39.846,25.435,P均<0.001,但F1x2分别为2.256,0.437,P>0.05).结论:G-CSF动员和局部骨髓干细胞移植均可用于治疗糖尿病下肢缺血性疾病.
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宫腔粘连分离联合胶原膜复合自体骨髓干细胞移植患者的护理
目的 总结宫腔镜下宫腔粘连分离联合胶原膜复合自体骨髓干细胞移植患者的护理方法.方法 对64例宫腔粘连患者行宫腔粘连分离及胶原膜复合自体骨髓干细胞移植术,术前加强心理护理、术前准备、阴道护理、自体骨髓干细胞采集的护理,术后密切观察病情变化、管道护理、用药护理、并发症护理等.结果 患者均顺利完成手术,住院3~4 d.术后随访至1年,55例患者粘连程度均得到改善,月经情况恢复或接近正常;9例月经情况未得到明显改善.2例已成功分娩健康新生儿;2例妊娠中,无妊娠并发症;1例自然流产;其余妊娠情况仍在随访中.结论 中、重度宫腔粘连患者在宫腔镜下行宫腔粘连分离联合胶原膜复合自体骨髓干细胞移植手术创伤小;优质的护理是提高手术成功率的保障.
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自体骨髓干细胞移植治疗急性心肌梗死患者的护理
采用自体骨髓干细胞移植治疗急性心肌梗死患者.提出术前加强心理护理,认真做好各项检查及准备工作;术中严密监测生命体征,及时纠正心律失常;术后密切观察病情变化,做好详细的出院指导,有利于减少术后并发症的发生,促进患者早日康复.
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骨髓干细胞移植促进缺血肢体血管新生的研究
我们通过建立大鼠肢体缺血模型,采用骨髓内皮祖细胞(EPC)移植于缺血肢体,观察缺血组织血管新生及血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,探讨自体骨髓干细胞移植在治疗肢体缺血性疾病中的价值.
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骨髓干细胞移植辅助风湿性二尖瓣疾病合并心衰患者外科治疗中的应用
进行外科治疗的二尖瓣疾病,常常合并有心脏扩大、舒缩能力下降,这样增加了手术风险和影响患者术后康复[1].近年来,我们将骨髓干细胞移植辅助应用于风湿性二尖瓣疾病合并心力衰竭患者的外科治疗,取得了较好疗效.
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骨髓单个核细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心肌修复的远期效果
目的研究骨髓单个核细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心肌的修复作用及其远期效果观察.方法建立慢性心力衰竭大鼠模型.造模后通过心肌直接注射的方法,于移植组移植DAPI标记过的骨髓单个核细胞;对照组注射同等剂量PBS溶液;假手术组仅开胸和关胸.并于造模后即刻、移植后4、8和12周,分批分组进行免疫组织化学和透射电镜的检测.结果心脏标本切片,荧光显微镜检查证实在细胞移植区有细胞核因被标记而呈荧光的新生心肌和血管.免疫组织化学检查发现细胞移植区有类似心肌细胞的细胞团、心肌特异性结蛋白和肌动蛋白,增殖细胞核抗原检测阳性.透射电镜检查可见不成熟的心肌细胞,有细胞超微结构的变化,胞质中有散在肌丝样物质,还可见内膜不完整的新生血管,且阳性物质随时间推移而逐渐增多.对照组和假手术组则没有这些改变,并且在不同时间段出现死亡病例.结论骨髓单个核细胞移植可有效防止慢性心力衰竭大鼠心功能恶化,促进心肌和血管再生,在移植后长时间内没有出现新的心肌缺血损害、炎症反应和恶性心律失常,持续修复受损心肌,远期效果明显.
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自体骨髓干细胞移植治疗终末期心力衰竭
目的 研究自体骨髓干细胞经冠状动脉移植对终末期心力衰竭患者心功能的影响及安全性.方法 8例终末期心力衰竭患者,常规药物治疗基础上进行自体骨髓干细胞经冠状动脉移植,单纯药物治疗8例慢性心力衰竭患者作为对照组.术前及术后6个月观察两组心肌灌注情况、左心室射血分数(EF)、左心室舒张末径(LVEDD)、左心室收缩末径(LVESD)及心律失常情况.结果 治疗组及对照组比较,治疗组NYHA分级提高Ⅰ~Ⅱ级.左心室射血分数提高(P<0.05).治疗组与对照组比较术后射血分数提高(P<0.05).治疗组心肌灌注显像得到明显改善.结论 终末期心力衰竭患者进行自体骨髓干细胞经冠状动脉移植术可提高患者生存率.
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补肾方辅助骨髓干细胞移植治疗DMD的实验研究
目的:观察补肾方辅助骨髓干细胞移植治疗mdx小鼠的效果.方法:体外培养正常C57BL/6小鼠骨髓细胞对放疗后mdx小鼠尾静脉移植,用补肾方水提液灌胃实验鼠,观察实验小鼠存活率和移植物抗宿主病(GVHD)症状;移植后4个月/8个月取小鼠骨骼肌以HE染色观察病理状况,以免疫荧光方法检测细胞骨架蛋白(DYS蛋白)表达.结果:补肾方能不同程度降低mdx鼠核中心移位比例和提高DYS蛋白表达量;同时能明显减轻GVHD症状.结论:补肾方能提高骨髓干细胞移植治疗mdx小鼠的效果.
关键词: 补肾方 骨髓干细胞移植 Duchenne型肌营养不良症 mdx小鼠 -
不同放疗剂量对肌营养不良鼠骨髓干细胞移植的影响
目的使用不同剂量γ射线对Duchenne型肌营养不良鼠(mdx鼠)照射,研究骨髓干细胞移植后mdx鼠缺失蛋白表达的情况.方法将18只7~8周mdx鼠随机平均分为A、B、C 3组,依次给予7 Gy、7.5 Gy、8Gyγ射线预处理;3天后行骨髓干细胞移植.移植骨髓干细胞取自4~5周的C57BL/6鼠,体外培养3 d,按1.2×107个细胞/每只剂量移植给3组预处理后的mdx鼠.连续观察受体鼠的移植物抗宿主病(GVHD)程度;移植12周后,检测受体鼠体内抗肌萎缩蛋白表达情况.结果C组GVHD反应较明显;A、B、C 3组的股骨肌肌纤维dystrophin蛋白表达率分别为8%、9%和13%.各组间缺失蛋白表达率有显著差异.结论对7~8周mdx鼠,给予不同剂量的γ射线预处理,骨髓干细胞移植后,8Gyγ射线表达多,7Gy射线照射表达量少;但8 Gy γ射线照射GVHD反应较明显.
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全球干细胞治疗市场发展趋势
1968年,Gatti应用骨髓移植(BMT)成功治疗了一例重症联合免疫缺陷患者,从而开启了干细胞(SCs)在医学上的应用之门.直到今天,骨髓移植仍然用于治疗癌症和遗传性血液疾病,只是采集造血干细胞的来源越来越多地集中在外周血造血干细胞和脐带血干细胞,使用骨髓干细胞移植的比例在不断下降.目前,全球每年大约有6万例骨髓移植手术(其中大约3.5万例使用自体造血干细胞,剩下的大约2.5万例使用异基因造血干细胞进行移植).除骨髓移植外,近期期望高的干细胞疗法来自多能间充质干细胞(MSCs),长远期望来自于多能胚胎干细胞(ESCs)和诱导性多能干细胞(iPSCs).目前市面上使用的和在研的大多数干细胞产品的细胞来源为多能MSCs.
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骨髓干细胞移植后mdx鼠腓肠肌病理及Dystrophin的表达变化
[目的] 研究骨髓干细胞移植后mdx鼠腓肠肌组织病理变化及dystrophin的动态表达变化.[方法] 7~9周mdx鼠20只平均分为4组,放疗后移植1.2×107个/只同种异基因全骨髓干细胞,于移植后4周、8周、12周及16周应用HE染色观察细胞形态及核中心移位(CNF),免疫组化及Western blot方法检测dystrophin表达变化,C57鼠和未治疗mdx鼠各5只作阳性和阴性对照.[结果] C57鼠腓肠肌横切面可见肌细胞大小形态基本一致,无核中移现象.各细胞移植治疗组和对照组mdx鼠均有大量的炎细胞浸润.核中心移位明显.未治疗mdx鼠CNF高,可达70%左右,移植后4周、12周和16周,CNF比例分别为55%、50%和44%.免疫荧光结果C57鼠肌膜呈完整的网状绿色荧光,mdx鼠肌膜基本未见绿色荧光;移植后4周肌膜dystrophin阳性纤维数大约占细胞总数的1%,随时间延长表达渐渐增多,8周、12周和16周时阳性细胞数分别占细胞总数的5%、10%和15%.Western blot结果mdx鼠无dystrophin的表达,野生型C57鼠表达量多,移植后4周mdx鼠仅见微弱表达,随时间延长表达量渐增,移植后16周表达量较移植8周明显增加.[结论] 骨髓干细胞移植后mdx鼠腓肠肌CNF随移植时间延长逐渐减少,dystrophin的表达随时间延长增多,提示骨髓干细胞移植后长久持续参与受损骨骼肌的修复与再生.
关键词: dystrophin mdx鼠 骨髓干细胞移植 -
亚致死量放疗对Duchenne型肌营养不良鼠骨髓干细胞移植的影响
[目的]研究7 Gy γ射线放疗对Duchenne型肌营养不良鼠(mdx鼠)骨髓干细胞移植的效果.[方法]获取4~5周昆明鼠的骨髓干细胞,体外培养3 d,移植给7 Gy剂量放疗的7~8周的mdx鼠.22只7 Gy剂量放疗的肌营养不良鼠鼠,随机分为A、B、C、D 4组;A、B、C每组6只,静脉移植骨髓干细胞数为A组:1.2×106/只、B组4.8×106/只、C组1.2×107/只.D组4只作空白移植对照.观察受体鼠存活率,临床监测移植物抗宿主病(GVHD)情况;移植12周后,检测受体鼠肌组织抗肌萎缩蛋白表达情况.[结果]移植3个月后,22只实验鼠全部存活,18只移植鼠有近9%肌纤维表达dystrophin蛋白.[结论]移植前给予7 Gy γ射线放疗照射mdx鼠,部分破坏受体骨髓造血系统后,静脉注射移植同种、非同系鼠的骨髓干细胞,3个月之后,受照射鼠实现了100%存活;且移植鼠均有抗肌萎缩蛋白表达.
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自体骨髓干细胞移植联合高压氧治疗2型糖尿病的效果
目的:观察自体骨髓干细胞移植联合高压氧治疗2型糖尿病的临床效果。方法44例2型糖尿病患者纳入研究,其中22例自愿接受自体骨髓干细胞移植治疗的患者组成移植组,其余22例患者经与移植组患者配对分配到药物组。入组前两组均采用胰岛素常规治疗1个月。移植组在药物治疗的基础上应用自体骨髓干细胞移植术,术前5 d 及术后5 d 每天行高压氧治疗1次,药物组继续胰岛素常规治疗。治疗后1、3、6、12个月分别进行疗效评价,观察血清 C 肽(FC -P、2hC -P)及糖化血红蛋白(HbA1C )水平变化,观察胰岛素用量变化。结果移植组治疗后血清 C 肽水平均较移植前升高,升幅显著高于药物组;移植组 HbA1C明显降低,且降幅大于药物组;移植组63.6%(14/22)患者胰岛素用量减少或停药。结论自体骨髓干细胞移植联合高压氧治疗2型糖尿病是一种有效的手段。
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网织血小板比率测定在异基因骨髓干细胞移植中的应用
网织血小板比率(immature platelet fraction,IPF)的测定,以往均采用流式细胞仪法,但其所用仪器和试剂均较昂贵,且耗时较长,也需要专业人员,因此未能作为常规项目开展.目前,软件升级后的XE-2100血液分析仪可进行IPF的检测,我们采用这种方法对我院异基因骨髓干细胞移植(allogenic bone marrow stem cells,Allo-BMS)后患者IPF的情况进行了监测,现报告如下.
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干细胞移植治疗2型糖尿病并下肢周围动脉病前后内皮微粒的变化及意义
糖尿病周围动脉病(PAD)是糖尿病严重并发症之一,对于干细胞治疗性血管新生的研究为PAD 的治疗提供了干细胞移植的新疗法。2型糖尿病并下肢 PAD 患者有血管内皮功能障碍,内皮细胞在激活或凋亡过程中能释放内皮微粒(EMP),增多的 EMP 能独立预测内皮依赖性血管舒张功能的受损情况[1]。既往研究多观察自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病PAD 疗效,但移植治疗带来的下肢缺血改善是否可以降低EMP 水平, EMP 计数与 PAD 程度相关性如何,是否具有评价PAD 程度的临床价值,国内外尚未见相关研究。本研究旨在尝试探讨这些问题。
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外周血干细胞移植的临床应用
根据造血干细胞来源不同分为骨髓干细胞移植、外周血干细胞移植及脐血干细胞移植.近年来的研究和临床试验表明,化疗加细胞因子(G-CSF,GM-CSF等)可使更多的干细胞进入外周血,从而不用通过采集骨髓就可以采集到足够的造血干/祖细胞用于移植,并使其移植后粒细胞和血小板恢复速度明显快于骨髓移植,因此外周血干细胞移植已成为造血干细胞移植的主要干细胞来源.
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骨髓干细胞移植在神经疾病中的应用前景
干细胞是指有多种分化潜能和自我更新能力的细胞,这种多潜能细胞存在于成年个体的许多组织和胚胎中.目前研究较为深入的干细胞主要有:骨髓干细胞(MSC)、神经干细胞、胚胎干细胞.
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心肌坏死又"复活"
坏死的心肌还能"复活"?!也许很多人都对此难以置信.但是2003年11月19日一个医学奇迹在辽宁省人民医院心内科诞生了.李占全副院长和众专家成功实施了外周血分离骨髓干细胞移植术治疗心肌梗死,此举尚为国内首例.
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自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病足1例
患者,男性,56岁,因糖尿病足反复溃疡13年、伴视物不清、肢体麻木、行走不稳3 d于2004年6月21日入院.入院后查患者右足背表皮约5 cm×5 cm无痛感大泡,双足及小腿麻木、发凉,保护性感觉明显减退,踝部及小腿皮肤多处溃疡愈合后疤痕形成,色素沉着明显;血糖高,头颅CT示左侧侧脑室体旁、内囊前肢脑梗塞,踝肱压测定(ABI)显示右侧为0.99,左侧为0.97,眼底荧光造影示双侧眼底微血管呈斑块状渗出,有微动脉瘤形成,核磁共振血管显影示双下肢大中动脉未见明确异常.诊断为:①2型糖尿病;②糖尿病性血管并发症;③糖尿病足(1级).