首页 > 文献资料
-
甲异靛诱导K562细胞凋亡及对传导信号STAT5表达影响的研究
目的 探讨甲异靛诱导K562原代细胞凋亡及对传导信号分子STAT5表达影响的作用.方法 K562细胞甲异靛处理12h、24 h、48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期等相关指标,Western blot检测STAT5的改变.结果 ①甲异靛作用K562细胞12h、24 h、48 h凋亡率分别为12.5±0.69,19.4±1.07和42.5±3.22,与对照组相同时间段比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).②甲异靛可使K562细胞阻滞于S期,S期细胞比例增加至(70.48±6.34),G0/G1期、G2/M期细胞减少.③在甲异靛作用12 h后至48 h,STAT5蛋白含量逐渐减少.结论 甲异靛促进K562细胞凋亡,可能与STAT5蛋白含量表达减少有关.
-
甲异靛对K562和HL-60细胞Wnt信号通路的影响
本研究探讨甲异靛对K562细胞和HL-60细胞Wnt信号通路的影响.采用RT-PCR和Western blot方法分别检测甲异靛处理的K562和HL-60细胞中GSK-3β及其下游相关基因及蛋白的表达水平.结果表明:甲异靛可使HL-60细胞中β-catenin和c-myc基因表达下降,但对K562细胞的这两种基因表达无明显影响;甲异靛略能增加HL-60细胞中GSK-3β蛋白表达,但明显降低K562细胞和HL-60细胞中p-GSK-3β和c-MYC蛋白表达水平;甲异靛对K562细胞中β-catenin表达没有明显影响,但能使HL-60细胞中β-catenin表达下降.结论甲异靛可抑制K562细胞和HL-60细胞中Wnt信号通路的传导,降低癌基因和相关蛋白的表达,从而发挥治疗白血病的作用.
-
甲异靛治疗β地中海贫血的初步研究
目的探索甲异靛对β地中海贫血患儿的临床疗效以及甲异靛对类β珠蛋白基因转录及表达的影响.方法 9例β地中海贫血患儿服甲异靛治疗,观察治疗过程中患儿临床症状及血液学改善情况,并采用荧光定量RT-PCR及血红蛋白肽链电泳分析技术检测患儿服用甲异靛后β、γ珠蛋白mRNA及珠蛋白肽链含量的变化.结果患儿服用甲异靛后,血红蛋白含量有不同程度上升,不良反应轻微;γ珠蛋白mRNA及γ珠蛋白肽链含量明显升高,经t检验,差别有显著性意义(P<0.0 1);β珠蛋白mRNA及β珠蛋白肽链含量无明显变化,与服药前相比无显著性差异(P>0.05) .结论口服甲异靛可以促进β地贫患儿γ珠蛋白基因转录及肽链合成 ,血红蛋白含上升,从而改善患儿临床症状,不良反应轻微.
-
甲异靛通过TLR4-TAK-NF-κB途径治疗银屑病的机制研究
在近年来的临床实践中发现,甲异靛对银屑病有很好的疗效,但作用机制不明.利用脂多糖刺激RAW264.7细胞后,发现甲异靛对其产生一氧化氮有明显的抑制作用.同时检测了甲异靛作用HaCaT细胞后对免疫相关细胞因子及上游通路细胞蛋白的影响.结果发现,甲异靛抑制了众多炎症相关因子的表达,如一氧化氮合成酶、环氧合酶2、肿瘤坏死因子等.对上游通路蛋白表达进行检测后发现,甲异靛可以相继抑制NF-kB、TAK和TLR4等蛋白的表达.本研究结果显示,甲异靛可以通过作用于TLR4-TAK-NF-κB通路,从而治疗或缓解银屑病.
-
甲异靛对K562细胞bcr-abl信号通路的影响以及诱导细胞凋亡机制研究
目的 探讨甲异靛对K562细胞bcr-abl信号通路的影响以及甲异靛诱导K562细胞凋亡的机制.方法 应用流式细胞术检测甲异靛诱导K562细胞凋亡的情况以及线粒体膜电位稳定性.应用Western blot技术检测bcr-abl信号通路相关蛋白、caspase以及Bcl-2家族成员在甲异靛作用前后的表达情况.RT-PCR技术检测甲异靛作用前后bcr-abl mRNA表达水平,用电泳移动迁移速度分析检测STAT3、STATS的DNA结合能力.结果 20 μmol/L甲异靛町降低ber-abl融合蛋白的表达及其磷酸化水平,但并不改变其mRNA表达水平,甲异靛可降低STATS以及CRKL的磷酸化水平,抑制STAT3、STATS的DNA结合能力.5-20μmoL/L甲异靛可诱导K562细胞凋亡并且具有浓度依赖性.甲异靛诱导K562细胞凋亡中伴随caspase 3、8、9活化以及细胞线粒体膜电位降低,caspase 3、8、9特异抑制剂z-DEVD-fmk、z-IETD-cho和z-LETD-fmk可阻断甲异靛诱导的K562细胞凋亡.甲异靛诱导K562细胞凋亡前后不伴有Bcl-2、Bax、Bid蛋白表达水平的改变.结论 甲异靛通过降低bcr-abl融合蛋白的表达并抑制bcr-abl信号通路中相关蛋白活性从而抑制K562细胞的增殖.甲异靛诱导K562细胞凋亡依赖于caspase活化以及线粒体途径,但Bcl-2家族成员不参与凋亡的调控.
-
丝裂素活化蛋白激酶通路在甲异靛诱导U937细胞凋亡中的作用
以往实验研究表明,细胞信号转导过程中丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)家族的活化除与细胞的生长增殖有关外,也参与细胞凋亡的调节.我们观察了甲异靛在诱导U937细胞凋亡过程中MAPK的三种信号分子ERK1/2、JNK及p38活性的变化,并分析其与细胞凋亡的关系,旨在进一步阐明甲异靛诱导白血病细胞凋亡的分子机制.
-
甲异靛诱导NB4细胞凋亡的分子机制研究
甲异靛对多种肿瘤细胞生长具有抑制作用~([1-2]),对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞系NB4细胞有显著的诱导细胞凋亡作用,但其具体机制尚不明确~([3]).我们通过研究半胱天冬酶(caspase)、蛋白激酶C(PKC)以及促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)在甲异靛诱导细胞凋亡过程中的变化,对甲异靛诱导NB4细胞凋亡的机制进行了初步探讨.
-
甲异靛对K562细胞的作用及其机制的初步研究
体内外研究表明,BCR-ABL融合蛋白是慢性粒细胞白血病(CML)发病的原发因素.BCR-ABL可通过持续活化多条信号传导通路传递其恶性信号,其中包括RAS/Erk2、JAK/STAT、PI3-K/Akt等.降低BCR-ABL的酪氨酸激酶活性或阻止其下游信号的传递就可以收到治疗白血病的效果.甲异靛治疗CML疗效较靛玉红强而不良反应较轻[1],但其抗白血病机制尚不清楚.我们以CML细胞株K562为研究对象,观察了甲异靛对BCR-ABL及其相关信号分子的影响.
-
甲异靛对慢性粒细胞白血病抗血管新生作用的体外研究
远期疗效分析结果证实,甲异靛与目前国际上治疗慢性粒细胞白血病(CML)的首选化疗药物羟基脲疗效相当,甲异靛联合羟基脲或干扰素较单用甲异靛、羟基脲、干扰素能明显延长总生存率,降低5年恶变率[1,2].
-
甲异靛诱导K562细胞凋亡及对JAK/STAT途径效应基因表达影响的研究
目的 探讨甲异靛诱导K562原代细胞凋亡及对效应基因表达影响的作用.方法 K562细胞甲异靛处理12 h、24 h、48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Westernblot检测Bcl-xL、CyclinD1和C-MYC的改变.结果 甲异靛作用K562细胞12h,24 h,48 h组的凋亡率与对照组比较有显著性差异(P均＜0.05);K562组24 h、48 h与12h比较有显著性差异(P均＜0.05).在甲异靛作用12 ～48 h,C-MYC蛋白含量逐渐减少,而Bcl-xL、Cy-clinD1无显著变化.结论 甲异靛促进K562细胞凋亡,可能与下调STAT5下游C-MYC的蛋白含量表达减少有关.
-
甲异靛治疗慢性粒细胞白血病临床及疗效机制的研究
目的观察甲异靛治疗慢性粒细胞白血病(CGL)疗效并探讨甲异靛治疗慢性粒细胞白血病的机制.方法回顾性地分析233例CGL患者的治疗情况,观察甲异靛单独或联合羟基脲或马利兰对CGL患者慢性期持续时间、生存期以及疾病进展情况的影响;采用台盼蓝拒染法、MTT比色法观察甲异靛对CGL原代细胞增殖抑制作用,采用形态学、TUNEL标记观察甲异靛对CGL原代细胞凋亡诱导作用.结果甲异靛治疗组中位慢性期、生存期略优于马利兰治疗组,进展为加速期或急变期的比率显著低于马利兰治疗组,与羟基脲治疗组相比无明显差异;甲异靛联合羟基脲可明显延长慢性期及生存期,60、100月进展为加速期或急变期的比率低于单独用药组,10～40μmol/L的甲异靛抑制CGL原代细胞的生长,40μmol/L的甲异靛作用6小时诱导CGL原代细胞的凋亡.结论甲异靛治疗CGL的中位慢性期、生存期优于马利兰,与羟基脲相似,甲异靛与羟基脲具有协同作用;甲异靛可能通过抑制白血病细胞增殖并诱导其凋亡而发挥治疗作用.
-
甲异靛联合imatinib对CML K562细胞的促凋亡作用
目的研究甲异靛联合imatinib促进K562细胞凋亡的作用.方法K562细胞经imatinib或/和甲异靛处理48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡相关指标(线粒体跨膜电位和Annexin V/PI)的改变,ELISA方法检测caspase 3活性改变,Western blot检测凋亡相关蛋白(cyt C, c IAP1, procaspase 3和PARP)的改变.结果与单用组相比,20 μmol/L甲异靛与0.3 μmol/L imatinib联合应用后,线粒体跨膜电位下降细胞比例明显升高,cyt C释放入胞浆,caspase 3酶原形式procaspase 3减少,caspase 3活性升高,其底物PARP被降解,Annexin V水平升高.结论甲异靛与imatinib合用可协同促进K562细胞凋亡.
-
甲异靛对1型糖尿病大鼠心肌损伤的修复作用
目的 观察甲异靛对糖尿病大鼠Wnt/β-catenin信号通路中相关蛋白在1型糖尿病大鼠心肌中表达的影响,明确其在糖尿病心肌病发生、发展中的作用.方法 SD♂大鼠腹腔一次性注射链脲佐菌素建立1型糖尿病大鼠模型,取模型成功大鼠分为糖尿病4、8周模型组以及甲异靛4、8周给药组.尾静脉采血检测空腹血糖值;HE染色法观察心肌病理结构变化;Western blot和免疫组织化学法检测心肌GSK-3β、p-GSK-3β、Wnt2、β-catenin、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65蛋白表达变化.结果 与正常对照组比较,1型糖尿病大鼠血糖值明显升高,体质量明显下降(P<0.01),8周甲异靛给药组大鼠血糖与糖尿病组比较明显下降(P<0.01);显微镜下能观察到糖尿病模型组大鼠心肌不同程度局灶性心肌细胞肥大、溶解性坏死、纤维组织增生等,甲异靛给药组大鼠心肌病变较糖尿病模型组有不同程度的缓解.糖尿病模型大鼠相对于正常对照组,心肌p-GSK-3β、Wnt2、β-catenin、p-NF-κB-p65表达升高,尤其是8周时,差异有显著性(P<0.01),给药组的蛋白表达与DM模型组比较明显降低(P<0.01).结论 甲异靛可能是通过降低Wnt2、β-catenin、GSK-3β等蛋白的表达,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路在糖尿病大鼠体内的激活,参与修复糖尿病大鼠的心肌损伤及炎症过程,进一步研究该药在糖尿病大鼠心肌损伤修复中的作用机制,将为糖尿病心肌病找到新的治疗靶点提供理论依据.
-
小剂量阿糖胞苷致高热、呕吐1例
患者男,50岁,1996年初出现面色苍白、头晕、乏力,1996年3月8日入我院血液科,查体见中度贫血貌,脾肋下2 cm.血常规示:白细胞173.1×109/L,Hb 75 g/L,Plt461×109/L;骨髓涂片检查示有核细胞增生极度活跃,分类以中、晚幼粒细胞为主,诊断为慢性粒细胞性白血病,经HA化疗1疗程及口服羟基脲、甲异靛、皮下注射干扰能等治疗,1996年7月30日复查骨髓象达完全缓解,此后长期皮下注射干扰能,定期复查血象均正常.
-
甲异靛治疗慢性粒细胞白血病临床随访观察
甲异靛治疗慢性粒细胞白血病(CML)已有了近20年的历史,该药对CML近期有效率为90.1%[1].我所自1994年4月～1995年4月对18例CML患者应用甲异靛(部分联合干扰素)治疗,随访观察至1999年6月,总结如下.
-
甲异靛对Jurkat细胞AKT信号通路的影响及其在细胞凋亡中作用的研究
目的:探讨甲异靛对Jurkat细胞AKT信号通路的影响及其在甲异靛诱导Jurkat细胞凋亡中的作用.方法:采用XTT法检测甲异靛对Jurkat细胞的生长抑制作用,应用流式细胞术以及DNA片段分析检测甲异靛诱导Jurkat细胞凋亡的情况.应用Western Blot检测CASPASE家族成员及AKT信号通路相关蛋白在甲异靛作用前后的表达或磷酸化情况.通过电转染方法使Jurkat细胞高表达外源性活化AKT,并进一步分析其对甲异靛诱导细胞凋亡作用的影响.结果:甲异靛抑制Jurkat细胞增殖,随着药物浓度增加抑制作用增强,IC50为10.2 μmol/L;5～20 μmol/L甲异靛诱导Jurkat细胞凋亡且凋亡效应具有浓度依赖性;甲异靛诱导细胞凋亡过程中伴随CASPASE 2,3,8,9的活化,50 μmol/L CASPASE抑制剂z-VAD-fmk 可阻断甲异靛诱导的Jurkat细胞凋亡 .甲异靛降低Jurkat细胞AKT信号通路中AKT,RAF,PDK1,以及ERK1/2 的磷酸化水平;15 μmol/L LY294002)(PI3K-AKT抑制剂)可显著提高甲异靛诱导Jurkat细胞凋亡的作用.甲异靛同样诱导高表达外源性活化AKT的 Jurkat细胞凋亡,但LY294002不能增强甲异靛对高表达外源性活化AKT的 Jurkat细胞的凋亡诱导效应. 结论:甲异靛显著抑制Jurkat细胞增殖,通过活化CASPASE途径诱导Jurkat细胞的凋亡. 甲异靛诱导细胞凋亡过程中伴AKT磷酸化水平的降低,AKT活性的降低并非甲异靛诱导凋亡的惟一因素,但参与甲异靛与PI3K-AKT抑制剂协同诱导Jurkat细胞的凋亡的过程.
-
甲异靛对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对CD68+细胞极化的影响
目的 研究甲异靛在脑缺血再灌注损伤中的抗炎症反应及调节巨噬细胞/小胶质细胞极化的作用.方法 采用经颈内动脉线栓法造成大脑中动脉闭塞,闭塞60min后将栓线拔出以实现大脑中动脉血流再灌注,形成小鼠短暂性大脑中动脉阻塞(transient middle cerebral artery occlusion,tMCAO)模型,观察甲异靛对小鼠脑梗死范围、脑含水量、神经行为学的影响;采用免疫荧光染色观察甲异靛对小鼠脑组织缺血区小胶质细胞/巨噬细胞极化的影响,Western blot法检测缺血区大脑皮层炎症信号通路相关分子TLR-4、p65/NF-κB以及炎症因子TNF-α和IL-1β的表达水平.结果 甲异靛可以减少脑缺血再灌注48 h后的脑梗死体积(P＜0.01),改善神经功能评分(P＜0.05),减轻脑水肿(P＜0.01),降低TLR-4/NF-κB信号通路分子及炎症因子表达水平,减少脑梗死区小胶质细胞/巨噬细胞M0向M1极化(P＜0.05),促进M0向M2极化(P＜0.001).结论 甲异靛可能通过改善脑水肿、调控小胶质细胞/巨噬细胞极化和抑制炎症反应,从而在脑缺血再灌注损伤中起保护作用.
关键词： 甲异靛 脑缺血再灌注损伤 小胶质细胞/巨噬细胞极化 -
甲异靛对K562原代细胞凋亡作用研究
目的 探讨甲异靛诱导慢性髓系细胞白血病K562细胞株凋亡的作用.方法 K562细胞经20 μm/L甲异靛处理12 h、24 h、48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期.结果 K562未经甲异靛作用时凋亡率[(1.0±0.36)％]与人体正常细胞系NIH3T3凋亡率[(2.6±0.39)％]相比,差异有统计学意义(P＜0.05);K562细胞空白组凋亡率为(1.0±0.36)％,12h组为(12.5±0.69)％,24 h组为(19.4±1.07)％,48 h组为(42.5±3.22)％,与NIH3T3细胞组同时间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);k562组12 h、24 h、48 h与空白组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).甲异靛能使K562细胞阻滞于G2/M期,G2/M期细胞比例增加,G0/G1期和S期细胞减少.结论 甲异靛对体外K562细胞有诱导凋亡作用,其作用与时间成正相关关系.甲异靛可使K562细胞阻滞于G2/M期.
-
慢性粒细胞白血病的治疗进展
慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)在经历了20世纪初的放疗、核素治疗,20世纪50年代白消安的应用,20世纪60年代羟基脲取代自消安成为首选药物,到80年代开始的甲异靛、干扰素使用及联合化疗、造血干细胞移植,再到20世纪末使用酪氨酸激酶抑制剂等一系列措施后,疗效逐步提高.
-
甲异靛对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡影响的实验研究
目的:研究甲异靛对人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制和诱导凋亡作用.方法:采用MTT法检测甲异靛对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制;流式细胞仪测定细胞凋亡率;光学显微镜观察细胞形态的变化;western blot法测定caspase-3、PARP及bcl-2表达.结果:甲异靛能明显抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖.甲异靛诱导MCF-7细胞凋亡,呈现典型细胞凋亡的形态变化,并呈时间和剂量依赖性,凋亡率高可达(68.40±4.87)%,在细胞凋亡过程中出现PARP分子断裂和bcl-2下调,未检测到caspase-3.结论:甲异靛能诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡抑制细胞增殖,其发生机制可能与下调bcl-2有关.
关键词： 甲异靛 MCF-7乳腺癌细胞 凋亡
