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2009-2010年浙江省金华市手足口病监测结果分析
目的 分析浙江省金华市2009-2010年手足口病的流行病学特征,及时掌握手足口病疫情趋势.方法 采用描述性流行病学方法对国家疾病监测信息报告系统中报告的2009-2010年金华市手足口病疫情资料进行分析.结果 金华市2009-2010年累计报告手足口病18450例,年均发病率为180.37/10万,2010年发病率(238.06/10万)比2009年(122.03/10万)上升95.08%.病原监测显示2009年流行株为Cox A16,2010年为EV71.2年发病数和发病率高的地区均为婺城区.全年各月均有发病,每年4月即进入发病高峰期,2009年有2个发病高峰,分别在4-7月和10-12月,2010年仅4-7月1个高峰.≤5岁散居儿童和幼托儿童是手足口病的主要发病人群,且无论是发病数还是发病率均是男性显著高于女性.结论 2009-2010年金华市手足口病发病存在明显的时间、地区、性别和年龄差异,2010年发病率比2009年大幅上升,流行株由Cox A16转变为EV71.
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上海地区副溶血性弧菌大流行菌株血清型及分子特征研究
目的 了解上海地区大流行副溶血性弧菌(VP)大流行菌株血清型分布及分子特征.方法 对2010-2012年分离自腹泻患者和食品中的VP菌株进行血清分型,以GS-PCR辨别大流行株,以PCR检测菌株的毒力基因tdh、trh和大流行株分子标识f237噬菌体orf8基因,以PFGE分型来分析菌株间的遗传关系.结果 1 136株VP可分为52个血清型(群),其中64.5％的菌株GS-PCR阳性,判定为大流行菌株,其血清型有11种,主要集中于O3∶ K6(76.8％)、O4∶ K68(9.4％)、O1∶K25(6.8％)、O1∶ K36(4.5％)4种血清型.相对于非流行菌株,O10∶K60、O3:K3、O1:K33三种血清型的菌株其PFGE图谱与已报道的大流行株更为接近,为新检测到的大流行血清型变种.大流行产毒株中仅能检测到tdh基因,未检测到trh基因,94.3％的大流行菌株携带噬菌体f237的oorf8基因,但有5.7％的大流行株orf8基因缺失.相同血清型的大流行菌株其PFGE图谱存在差异,且orf8基因的携带与否不能以PFGE进行区分.结论 上海地区VP大流行菌株血清型相对集中,且不断有新的血清型变种出现.从PFGE图谱的差异和orf8基因的携带与否上来看,大流行菌株仍在演变.
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宁波地区食品中致病菌监测与流行株分析
目的 了解宁波地区食品中致病菌检出情况和菌株的耐药性,发现其流行优势菌.方法 致病菌检测采用直接分离与增菌分离相结合的方法;细菌鉴定采用生化筛检和API等方法;细菌分型采用诊断血清和PFGE基因分型;药敏试验采用K-B法,耐药基因检测采用PCR法.结果 6 812份食品样品中检出目标菌7类12种,共2 331份,检出率为34.22％,致病性弧菌检出数高,其次为沙门菌和致病性气单胞菌.副溶血性弧菌与其他致病菌差异有统计学意义(P＜0.01),分离出10个血清群和29个PFGE型,其中O6、O5血清群和PFGE 1型是副溶血性弧菌的主要优势流行型.检出的致病菌对大多数抗生素敏感,其中3株气单胞菌为带aacc耐药基因的多重耐药菌.结论 宁波地区食品中致病菌种类较多,易引起食源性疾病;各类致病菌均有流行优势株,副溶血性弧菌是主要的流行优势株;血清分型和PFGE型能发现优势菌,但均有一定的局限性.
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北京地区丙型肝炎患者的丙型肝炎病毒基因分型
研究旨在了解近年来北京地区丙型肝炎病毒(HCV)流行株的基因型别,探讨基因型与肝病程度,HCV RNA病毒载量的关系.
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苏州市婴幼儿轮状病毒血清G型分布
由A组轮状病毒(RV)引起的巨大疾病负担已成为全球关注的公共卫生问题,WHO已将RV感染纳入全球腹泻病控制和免疫规划.然而,疫苗的研制和实施必须建立在病毒流行株的监测基础上,通过已有的监测结果,发现各个地区以及同一地区不同时期的流行株可能发生变化.因此有必要建立广泛的RV监测网,动态观察流行株的变化,为将来疫苗的使用和控制RV腹泻提供依据.
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大肠埃希菌O157:H7国内流行株新K抗原的发现
大肠埃希菌抗原主要有O抗原和H抗原,相当部分菌株还存在K抗原.K抗原与大肠埃希菌的致病力存在一定关系.我们研究发现,国内一些O157:H7临床标本分离株存在"O"不凝集现象,有K抗原存在的可能性.经实验证实,在分离自腹泻患者粪便标本的3株O157:H7菌株中发现一种新的K抗原(L型).
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1988-2005年甲3亚型流感流行株与疫苗株的HA1区差异探讨
目的 从基因层面探讨18年来我国及欧美国家甲3亚型流感流行株与当时WHO疫苗推荐株之间的差异.方法 收集1988-2005年间我国以及欧美国家的甲3亚型流感流行株与疫苗株的血凝素重链(HA1)区域的氨基酸序列,用BioEdit生物软件进行比较,分析其与当时疫苗推荐株在HA1以及HA1抗原决定簇区域的氨基酸差异.结果 在HA1区以及HA1区抗原决定簇位点,我国甲3亚型流感流行株与当年疫苗株之间的差异,均大于它与下一轮疫苗株之间的差异,且已达到十分显著的程度(P＜0.01).而欧美国家甲3亚型流感流行株与当年疫苗株之间的差异,虽然稍大于它与下一轮疫苗株之间的差异,但尚不显著(P＞0.05).此外,使用多年的疫苗株,无论在我国还是欧美,随着疫苗使用年数的增加,流行株与疫苗株之间的差异不断增大.结论 WHO推荐的甲3亚型疫苗株与我国甲3亚型流行株之间,从基因层面进行分析,存在明显的滞后现象.
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禽流感危机及其应对策略
1997～2003年,以往仅感染禽类的禽流感(avian influenza)H5N1、H9N2、H7N7病毒却在我国香港、广东地区及荷兰分别引起人类疫情爆发或个案感染[1-5].2003年底至2004年初,亚洲有8个国家出现了禽流感H5N1爆发疫情,且在越南、泰国再次出现人感染禽流感H5N1病毒,其中死亡18例(截止2004年2月10日的数据),引起全球高度关注[6].在短短的几年时间里,先后发生禽流感H5N1、H9N2、H7N7病毒跨越种属屏障直接感染人类的事件,预示着禽流感病毒的变异在加速.至今尚没有发现禽流感具有人传人的能力[1,5,7],但该病毒均属甲型流感病毒,而甲型流感病毒变异性非常快,就有可能通过抗原变异或通过与人流感病毒发生基因重配,形成重配株[8],从而具备人传人的能力.也就是说,它们有可能变为全球大流行株[1],有可能造成人的流感流行或世界大流行.因此,禽流感爆发和其越过种属屏障感染人类,已经对全人类健康构成严重的潜在威胁.
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2006-2009年济南市麻疹病毒流行株的基因测定分析
自1954年麻疹病毒(MV)分离成功以来,一直被认为是单一血清型.1998年5月,WHO规定对MV基因定型至少对血凝蛋白(HA)全长编码序列或核蛋白(N)基因碳末端450个核苷酸序列进行分析.至目前已发现MV存在8个基因组(A-H)23个基因型[1].
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河南省2007-2011年HIV-1流行株及耐药性调查
为观察河南省近年HIV-1流行株的变化及耐药的传播情况,笔者于2007-2011年对当年新确证未治疗的HIV-1感染者或AIDS患者进行连续3次监测,现将结果报告如下.一、对象与方法1.对象:调查对象为2007、2009、2011年3次调查中经河南省有资质的HIV-1确证实验室检测首次确证者,调查数分别为50、104、50例.所有调查对象均签署书面知情同意书(18岁以下的未成年人由其父母或法定监护人签署).有以下情况之一者予以排除:(1)以前有HIV-1阳性检测记录;(2)以前接受过抗病毒治疗;(3)有WHOⅢ期或Ⅳ期临床症状.
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北京市发现输入性脊髓灰质炎野病毒健康携带者
2011年8月26日,我国新疆维吾尔自治区和田地区发现4例Ⅰ型脊髓灰质炎(简称脊灰)野病毒患者,经WHO协查,与巴基斯坦2010年流行株同源性达99％[1].北京市为应对可能出现的脊灰野病毒输入,于2011年9月对来自该地区的学生及教职工开展了脊灰疫苗应急接种工作和大规模脊灰野病毒筛查工作,现报告如下.
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麻疹病毒疫苗株沪191和宁波麻疹病毒流行株血清交叉中和试验结果分析
目的 分析麻疹病毒疫苗株[上海(沪)191,Shanghai191;S191]的免疫保护性,为探讨有效预防控制麻疹的措施提供参考.方法 用微量中和试验测定不同人群血清对麻疹病毒疫苗株(S191)和浙江省宁波市麻疹病毒流行株(Ningbo2008-06)的中和抗体(Neutralizing Antibody,NA)水平.结果 S191株麻疹减毒活疫苗(Measles Attenuated Live Vaccine,MV)初次免疫(初免)血清,有MV免疫史麻疹患者急性期血清,麻疹患者恢复期血清,应急接种MV前、后血清,对疫苗株的NA几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)分别为1∶35.23、1∶4.16、1∶231.74、1∶37.81、1∶61.03;对麻疹病毒流行株的NA GMT分别1∶19.04、1∶2.21、1∶596.62、1∶32.25和1∶67.54.初免血清及有免疫史麻疹患者急性期血清,对疫苗株的NA GMT分别是流行株的1.85倍(t=2.537,P＜0.05)和1.88倍(t=-2.696,P＜0.05);麻疹患者恢复期血清对流行株的NA GMT是疫苗株的2.57倍(t=-3.054,P＜0.05);而应急接种后血清中和疫苗株和流行株的NA GMT差异无统计学意义.小月龄婴儿血清随着月龄增长对疫苗株和流行株的NA GMT均下降,6月龄和8月龄婴儿对流行株的NA GMT分别为1∶2.60和1∶1.24.结论 S191株MV能中和宁波麻疹病毒流行株,只是中和能力略有下降;应急接种能显著增加麻疹NA水平;母传麻疹抗体6月龄后几乎无保护作用;有必要对现行MV免疫策略进行调整.
关键词： 麻疹病毒疫苗株(沪191) 流行株 中和抗体 -
麻疹病毒流行株的基因变化与现行疫苗的预防效果
麻疹病毒仅1个血清型,但通过对流行株的血凝(H)蛋白和核(N)蛋白基因的序列分析,至2001年10月世界卫生组织根据有关资料确认麻疹病毒有8个基因组(A、B、C、D、E、F、G、H),共20个基因型.其间H蛋白基因和N蛋白基因的核苷酸差异达7%,而N基因COOH端的450个核苷酸的差异在不同型之间>12%.中国流行的麻疹病毒主要为H基因组的H1型,是一种新的基因型.目前国内外使用的麻疹疫苗皆为A基因型,通过交叉中和试验证实,现行的麻疹疫苗免疫后的抗体能中和不同基因型的麻疹病毒流行株,但中和抗体滴度略低,仍可预防麻疹发生.
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2014年上海市嘉定区副溶血性弧菌分子流行病学分析
目的 了解上海市嘉定区副溶血性弧菌腹泻患者和食品分离株的血清型、毒力基因和分子分型特征及其流行状况.方法 对2014年分离自腹泻患者和食品的菌株进行血清分型,以PCR检测菌株的毒力基因tdh和trh及大流行株分子标识GS-PCR和orf8基因,通过PFGE分型分析菌株间的遗传关系.结果 嘉定区副溶血性弧菌导致的腹泻病例主要集中在5～10月份,高峰出现在8月份,患者年龄分布呈双峰现象,女性感染者中检出弱产毒或不产毒菌株的比例高于男性.腹泻患者分离株中居前7位的血清型分别为O3:K6、O4:K9、O4:K8、O4:K68、O4:K12、O1:KUT、O3:KUT,产毒株占92.3％,流行株占61.9％,主要以O3:K6为主,orf8基因阴性流行株约占流行株的20.1％.323株副溶血性弧菌分为121个PFGE型,大流行株之间遗传距离更为接近,均处于同一聚类单元;非流行株构成复杂,形成以O4:K8、O4:K9、O4:K12、O3:K29(O3:KUT)为中心的4个聚类单元,且与大流行株距离较远,非流行株之间在PFGE条带上差异也较大.食品分离株均为非产毒株,未发现患者分离株和食品分离株具有相同的PFGE型,且未见形成明显的PFGE聚类单元.结论 副溶血性弧菌是嘉定区重要的腹泻病原,其感染控制应以大流行株和产毒株为主,食品监测应充分考虑副溶血性弧菌在病例中的分布情况.
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一株肾综合征出血热病毒的鉴定
肾综合征出血热(HFRS)病毒引起的疾病以肾脏组织损害为主,发病过程分为5期,即发热期、肾损害期、少尿期、多尿期、恢复期.我国目前发现的病毒流行株仅有2个型,即Ⅰ型(姬鼠型)和Ⅱ型(家鼠型);Ⅰ型病毒致病力强,病人症状严重,病死率高;Ⅱ型病毒则相对较轻.
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2015-2016年度中国甲型H1N1亚型流感病毒疫苗候选株的制备及鉴定
目的 为获得2015-2016年度中国流行的甲型H1N1亚型流感病毒疫苗候选株,制备流感病毒重配株并对其进行鉴定.方法 采用经典重配的方法,将H1N1亚型流感病毒流行株与H3N2亚型的鸡胚高产重配母本株(X-157株)在鸡胚上进行混合培养.用H3亚型的HA蛋白抗血清和X-157株全病毒抗血清对混合培养病毒进行阴性筛选.阴性筛选后HA滴度较高的病毒用Real-Time PCR法对表面蛋白基因型进行鉴定.对表面蛋白基因型正确的毒株用限制性内切酶酶切鉴定法鉴定其内部基因组成.进一步对HA和NA基因进行Sanger法测序,并用表面基因无氨基酸位点突变的毒株免疫雪貂,进行双向血凝抑制(Two-way hemagglutination inhibition test,HI)试验.结果 Real-Time PCR筛选出5株表面蛋白基因型正确的毒株.经内部基因鉴定其中4株为6+2组成,1株为5+3组成.5株重配株的HA和NA基因均未发生氨基酸位点突变.5株重配株HA滴度均维持在1 024以上.终选取的12号重配株免疫原性良好,HI滴度达5 120,双向HI试验均通过.重配后疫苗株在鸡胚上的产量是重配前野毒株的64倍.结论 成功制备了2015-2016年度中国流行的甲型H1N1亚型流感病毒疫苗株,为疫苗贮备和疾病防控奠定了基础.
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流感口服疫苗研究进展
流感疫苗接种始于20世纪40年代,在人群中长期和广泛的接种数据表明流感疫苗接种是防控流感有效的手段.传统疫苗的存在形式包含全病毒灭活疫苗、裂解疫苗和亚单位疫苗.它们存在的局限性主要包括:(1)依赖于鸡胚生产,耗时较长;(2)不良反应较大;(3)匹配性依赖:若疫苗株与流行株不相匹配,会造成免疫逃脱,严重影响人群免疫效果;(4)监测干扰:机体会产生针对于病毒内部蛋白(如NP)的特异性抗体,所以全病毒疫苗的使用会干扰临床监测和检疫及流行病学调查.
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4株金黄色葡萄球菌临床分离株的多位点测序分型
多位点序列分析(Multilocus Sequencing Typing, MLST)是近年报道的一个具有很高分辨能力的分子生物学方法,它的主要优势是已经建立了有大型数据库的国际网站http://www.mlst.net,可以直接将实验结果提交数据库与已知的流行株进行比较,分析不同时间不同地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)临床分离株的遗传相关性.本研究对从天津分离的4株金葡菌临床株进行MLST分型,并与国际流行克隆株比较,了解它们的遗传背景和可能的来源.
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霍乱弧菌在离体人胆汁中长期存活及L型变异的研究
霍乱弧菌流行株对温度较为敏感,在每年寒冷季节中不能从外环境中发现其存在,构成了所谓病原体的隐蔽性特点.以往认为人是霍乱弧菌的唯一宿主,其慢性带菌者至今长报道为10年.我们以离体人胆汁方式进一步探讨了其带菌期限与有关机制.
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不同CA16流行株的相关生物学和VP1基因的分子生物学研究
目的 对柯萨奇病毒A组16型(CA16)病毒株进行生物学特征与基因背景研究,为CA16病原和疫苗的进一步研究奠定基础.方法 从咽拭子标本中分离出CA16病毒；通过中和鉴别试验和RT-PCR对病毒进行分子生物学鉴定；病毒的VP1基因序列测定后,与其他CA16序列进行比较,绘制种系发育树,确定病毒基因型；测定病毒滴度,观察病毒在Vero细胞上的噬斑形态；攻击乳鼠分析病毒的致病性.结果 从手足口病患者咽拭子标本中分离到6株病毒,采用肠道病毒通用引物可以从病毒感染细胞中扩增出约150 bp大小的目的产物带；采用CA16特异性引物可以从病毒感染细胞中扩增出210 bp大小的目的产物带.而采用EV71特异性引物未见特异性扩增条带.噬斑分析发现,6株病毒在Vero细胞上接种96 h后均能出现清晰的噬斑,其中BJ-3噬斑直径为4～5 mm,B J-5噬斑直径约为3 mm,B J-1、B J-2、BJ-4、BJ-6噬斑直径为1.5 ～2 mm；除BJ-3噬斑边缘模糊外,其余5株噬斑边缘整齐.该6株病毒均可被人CA16抗体阳性血清中和.在Vero细胞上连续传5代,滴度均在7.0LgCCID50/nl左右.基于VPI基因序列的种系发育分析结果显示,BJ-2、B J-4、B J-5属于C1亚型,BJ-1、BJ-3、BJ-6属于C3亚型,该6株病毒核苷酸同源性达90％以上,氨基酸同源性达99％以上.乳鼠攻击试验结果显示,BJ-3和BJ-5攻击后第4～5天乳鼠开始发病,后肢出现明显的麻痹、瘫痪症状,至第6～7天全部死亡,正常对照组和其他病毒组直至攻击后第14天均无异常.结论 不同CA16病毒株的生物学特性有所不同,基因背景相近,致病性明显不同,需进一步了解中国流行的 CA16病毒株的致病特点,为疫苗的研发提供直接依据.
关键词： 柯萨奇病毒A组16型(CA16) 流行株 手足口病
