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内生多肽Elafin转染气道上皮细胞对不同细菌生物膜作用的差异
目的 探讨内生多肽(Elafin)转染气道上皮细胞经不同细菌产物诱导后对铜绿假单胞菌(P.aeruginosa,Pa)生物膜(biofilm,BF)的效应差异.方法 将pEGFP-N1-elafin转染到培养的肺腺癌细胞株A549细胞后,用表皮葡萄球菌(表葡组)、大肠埃希杆菌(E.coli组)和铜绿假单胞菌(Pa组)培养上清分别孵育细胞24h,另设转染空载体A549细胞作为正常组.用ELISA和Western blot检测每组细胞Elafin分泌水平和细胞内含量;体外平板法制备Pa-BF模型,用快速银染法和扫描电镜鉴定;将BF载体放入上述4组细胞中继续孵育8h,银染法观察BF中每个视野细菌的(灰度)面积积分,扫描电镜观察形态学改变.结果 Pa组细胞Elafin分泌水平和细胞内含量均较正常组的明显升高(P＜0.01),E. coli组也有升高(P＜0.05),表葡组无明显变化;各组BF面积积分也显示有明显差异,Pa组、E. coli组BF结构较正常组明显松散,尤以Pa组为甚,表葡组则没有明显变化.结论 不同细菌对Elafin的诱导表达能力有差异:Pa较强,E. coli次之,表葡不明显;Elafin能清除生物膜细菌.
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肠出血性大肠埃希杆菌O157:H7溶血毒素的检测方法
我们曾和美国马利兰大学发展了鉴定肠出血性大肠埃希杆菌的探针，其特异性和灵敏性极高。经序列分析发现该探针是溶血素基因的部分片段。我们又从溶血表型进一步完善了这一鉴定方法。由于其溶血条件特殊，人们一直认为该菌不溶血。我们将经验总结报告如下。 一、材料和方法 1．菌种来源：肠出血性大肠埃希杆菌882364，1986年江苏省徐州市卫生防疫站分离，经本实验室鉴定，并保存。851006为本实验室筛选到的溶血素基因的天然缺失株（对照菌株）。 2．菌株鉴定：生化鉴定为大肠埃希菌。O157单抗和H7血清为本实验室制备。用O157：H7 PCR诊断试剂盒检测882364、851006的溶血素基因，882364的扩增结果为阳性，851006为阴性。 3. 血平板的制备［1］：脱纤维羊血用磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次，加入至终浓度为3%。培养条件：于混合气（8%CO2，40%H2，52%N2）环境中37℃培养16 h，然后置21℃空气中6 h。 4．液体溶血活性检测［2］：(1)标准1%羊红细胞的制备；(2)活化菌体；(3)活性检测。 二、结果血平板检测的结果需对光观察，如发生溶血，可见菌落周围透明溶血环。液体溶血检测的结果如只需定性，则A值大于完全不溶血管即可；如需相对定量，可用溶血单位（HU）表示，一个溶血单位(HU)为裂解50%羊红细胞的检测样品的量。
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肠球菌耐药性的研究进展
肠球菌是近年来医院感染的常见条件致病菌,可引起泌尿道、手术伤口、血液、呼吸道、胆道、腹腔、盆腔感染,有严重疾病如肿瘤、糖尿病、神经系统疾病以及粒细胞减少、慢性泌尿系统疾病、外伤、长期住院患者易并发肠球菌感染,在膀胱炎、腹膜炎、胆囊炎中可与其他泌尿系统致病菌(如大肠埃希杆菌、类杆菌属)混合感染而协同致病.随着耐药肠球菌的逐渐增多且多重耐药,肠球菌感染给医院感染和治疗带来难题,肠球菌耐药性的研究也日趋引起重视.
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小儿社区获得性大肠埃希杆菌性肺炎临床分析
目的 探讨小儿社区获得性大肠埃希杆菌性肺炎的临床特点和耐药情况,指导临床治疗.方法 对我院2003年1月至2006年7月确诊的59例社区获得性大肠埃希杆菌性肺炎患儿进行回顾性分析.结果 小儿社区获得性大肠埃希杆菌性肺炎好发于有基础疾病的小婴儿,具有临床表现非特异性、并发症多、胸部X线表现多样等特点.肺水肿(非心源性)是重要并发症,且多见于体质好的患儿.社区获得性大肠埃希杆菌检出率在连续3年多的时间内呈逐年递增的趋势,2003年12%,2004年14%,2005年15%,2006年前7个月为26%.其中,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌33例,占56%.多数菌株对泰能、丁胺卡那霉素、环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦敏感,对β-内酰胺类抗生素普遍耐药.结论 小儿社区获得性大肠埃希杆菌性肺炎呈上升趋势,治疗关键是提高对本病的认识,尽早做痰培养及药敏试验,根据药敏试验选用抗生素.
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肺留置导管注药治疗肺脓肿12例
1997年以来,我们经纤维支气管镜(纤支镜)在肺留置导管注药治疗肺脓肿12例,效果满意.1 临床资料1.1 一般情况 12例均为经临床及胸部 X 线或 CT 检查确诊,并用2种抗生素治疗1周以上疗效不显著者.男9例,女3例;年龄27～58岁,平均45.5岁;病史10 d～2个月.均有发热、咳嗽、咯脓痰,伴胸痛4例.肺脓肿部位:右上叶前段2例,右上叶后段1例,右中叶1例,右下叶后段2例,右下叶背段4例,左下叶后段2例.体征:均有局部呼吸音减弱,患侧湿7例.痰培养12例,其中阳性8例,1例为大肠埃希杆菌,3例为咽峡炎链球菌,2例为肺炎链球菌,2例为肺炎克雷伯杆菌亚种.
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新生儿感染性腹泻的诊治
新生儿腹泻是新生儿期常见的胃肠道疾病,其中因感染因素引起的称为新生儿感染性腹泻.新生儿肠道的免疫能力低,从胎儿的无菌环境到生后立即暴露在各种病原体存在的环境中,容易发生感染性腹泻.1 发病原因引起新生儿腹泻的病原种类有细菌、病毒、真菌及寄生虫.细菌以大肠埃希杆菌多见,共分5个类型,分别为致病性大肠埃希杆菌(EPEC)、产毒性大肠埃希杆菌(ETEC)、侵袭性大肠埃希杆菌(EIEC)、肠出血性大肠埃希杆菌和肠凝聚黏附性大肠埃希杆菌.
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老年患者大肠埃希杆菌败血症死亡7例报告
我院急诊科1988～1995年共收治了7例大肠埃希杆菌性败血症,其中5例死于感染性休克和急性肾功能衰竭,2例死于多脏器功能衰竭.全部病例血培养证实有大肠埃希杆菌生长.大肠埃希杆菌感染的发病率近年来在发达国家呈上升趋势,国内也有病例报道[1].而有关大肠埃希杆菌所致的败血症报道较少,一旦发病,病死率极高,应引起足够的重视.
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血培养中产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希杆菌与肺炎克雷伯杆菌临床分布及耐药性分析
目的 分析血培养中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希杆菌及肺炎克雷伯杆菌临床分布及耐药性.方法 2012年10月-2015年9月武汉大学人民医院送检血培养阳性的标本中分离大肠埃希杆菌和肺炎克雷伯杆菌,均采用BACTEC-FX BD全自动血培养仪进行血培养,阳性标本用BD全自动微生物鉴定/药敏仪Phoenix-100进行鉴定,应用WHONET5.5软件进行抗生素耐药性分析.结果 临床血培养标本共检出肠杆菌科921株,包括大肠埃希杆菌487株(52.88％)及肺炎克雷伯杆菌184株(19.98％),其中产ESBLs大肠埃希杆菌314株(64.48％)和肺炎克雷伯杆菌184株(32.61％).产ESBLs大肠杆菌及肺炎克雷伯杆菌对青霉素类、头孢类、喹诺酮类、红霉素类等抗菌药表现出高的耐药性(62.1％～100％),阿米卡星(5.2％)及派拉西林/他唑巴坦(10.3％)表现出有良好的抗菌作用,美洛培南(0.9％)、亚胺培南(0)碳青酶希类等抗菌药效果好.血培养中产ESBLs菌株对各种抗菌药(除美罗培南与亚胺培南)的耐药率明显高于不产ESBLs菌株,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 血培养中产ESBLs大肠埃希杆菌与肺炎克雷伯杆菌对各类抗菌药物呈现不同程度耐药,并具多重耐药特点,碳青霉烯类亚胺培南和美罗培南仍是敏感抗产ESBLs菌的药物,阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦亦保持了良好的抗菌活性.应加强产ESBLs菌株的监测及耐药性分析,以指导临床合理用药,并对控制产ESBLs菌株的播散以及耐药基因的传播具有重要意义.
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左氧氟沙星治疗社区获得性肺炎60例临床观察
1 对象和方法选择我院2003年5月～2004年9月呼吸科门诊及病房诊断为社区获得性肺炎(CAP)的病人60例,诊断标准符合中华医学会呼吸分会2002年制定的<社区获得性肺炎诊断和治疗指南>(草案).其中男34例、女26例,年龄16～80岁,平均55岁,30例伴有基础疾病慢性阻塞性肺病COPD,诊断标准符合中华医学会呼吸分会慢阻肺学组2002年制定的
,除外其它感染性疾病.入选前27例曾应用过其它抗生素经验治疗3～5天,临床均未能有效控制.细菌培养由镜检筛选合格标本或者连续2～3次培养到相同细菌或少量细菌生长与涂片检查结果一致为有意义,非典型致病原(肺炎支原体、肺炎衣原体、军团菌)以血清抗体低度呈4倍或以上增高.确定45例临床有意义:肺炎链球菌21例,流感嗜血杆菌12例,大肠埃希杆菌6例,肺炎支原体10例,肺炎衣原体4例、军团菌3例,其中混合感染者11例. -
细胞溶解性阴道病研究进展
乳酸杆菌是阴道正常菌群中的重要成员,是阴道微生态系的优势菌,它通过产生乳酸降低阴道pH值,从而抑制阴道炎症发生[1,2],并能竞争黏附,产生H2O2和其它抑制物质如嗜酸乳菌素,刺激免疫系统等抑制大肠埃希杆菌、白色念珠菌、阴道加德纳菌和动弯杆菌的过度生长[3-5],维持阴道微生态平衡[6,7].一些育龄期妇女却会因为乳酸杆菌的过生长而造成阴道上皮细胞的溶解破裂[8,9],从而可以导致类似念珠菌阴道炎的临床症状,例如外阴瘙痒、烧灼感、大量白色阴道分泌物[8].
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龙胆碱的抑菌活性研究
目的 研究龙胆碱对细菌和真菌有无抑制作用,为开发中草药单体活性成分治疗由细菌或真菌引起的妇科常见疾病提供理论依据.方法 采用药物二倍稀释法和菌落计数法相结合的方法.结果 龙胆碱对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌和以大肠杆菌、铜绿假单胞菌为代表的革兰氏阴性菌,以及以白色念珠菌为代表的真菌均有不同程度的抑制作用.低抑菌浓度:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及铜绿假单胞菌为0.875 0～1.750 mg/mL,白色念珠菌为0.903 7～1.807 mg/mL.结论 龙胆碱对革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌均有一定的抑制作用.
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对临床分离的大肠埃希杆菌和肺炎克雷伯菌耐药状况分析
目的:调查和分析上海市扬浦区市东医院临床分离的大肠埃希杆菌和肺炎克雷伯菌分布特征与药敏结果,方法:收集本院2010年临床送检标本所分离的大肠埃希杆菌和肺炎克雷伯菌药敏资料,用WHONET 5.5软件进行数据分析.结果:共获得大肠埃希杆菌696株和肺炎克雷伯菌409株,在菌株总数中排名第一和第三.大肠埃希杆菌检出率较高的科室为普外科(20.3％)、急诊科(14.1％)、风湿肾病科(12.6％),主要分离自尿(46.3％)、脓液(11.6％)和痰(10.8％)等标本.肺炎克雷伯菌检出率较高的科室为急诊科(17.6％)、呼吸科(14.2％)、肿瘤内科(11.7％),主要分离自痰(40.8％)、咽拭子(26.4％)和尿(9.5％)等标本.大肠埃希杆菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株检出率分别为56.0％和17.1％,两者的检出率之间具有显著性差异(P＜0.01),产ESBLs菌株的耐药率明显高于非产ESBLs菌株.结论:本院大肠埃希杆菌和肺炎克雷伯菌在泌尿系统、呼吸系统疾病高发的科室分离率高,其耐药率水平主要受产ESBLs菌株的影响.
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新生儿产超广谱β-内酰胺酶菌感染临床及耐药性分析
收集送检新生儿的标本，通过细菌扩增，用Vitek32全自动细菌鉴定系统进行鉴定，确定菌株，通过PCR扩增方法扩增超广谱β-内酰胺酶基因，确定阳性超广谱β-内酰胺酶菌菌株，并对菌株进行耐药性分析及药敏统计分析，筛选敏感抗生素及监测耐药性。从临床送检的2936份标本中分离到1533株细菌，其中大肠埃希杆菌729株，分离率47.6%，产 ESBLs 菌457株，阳性率62.7%；克雷伯氏菌498株，分离率32.4%，产 ESBLs 菌株272株，阳性率54.6%；变形杆菌113株，分离率7.4%，产ESBLs菌49株，阳性率43.4%。此外，分离到阴沟肠杆菌102株，分离率6.7%，沙雷氏菌87株，分离率5.7%，柠檬酸盐菌90株，分离率5.9%，其他革兰氏阴性菌及真菌等91株，分离率5.9%。药敏实验发现分离到的产ESBLs菌除对碳青霉烯类药物（亚胺培南）及加酶抑制剂药物（哌拉西林）敏感外，对常见的其余8种抗生素菌有不同程度严重的耐药性。从分离的年份来看，分离到的菌株有呈逐年升高的趋势。新生儿产ESBLs菌感染情况比较严重，近年来呈逐步增多的趋势，主要病原体为大肠埃希杆菌、克雷伯氏菌以及变形杆菌，这些细菌对常见的抗生素耐药性高，治疗时刻采用敏感性高的碳青霉烯类以及加酶抑制剂类抗生素进行治疗。
关键词： 产超广谱β-内酰胺酶 大肠埃希杆菌 克雷伯氏菌 ESBLs菌 耐药性 -
乙二胺四醋酸使耐药菌恢复对抗菌药物敏感性的研究
目的:探索恢复多重耐药细菌敏感性的方法.方法:通过琼脂平皿二倍稀释法加入乙二胺四醋酸(EDTA)测定各药物对产ESBLS多重耐药的肺炎克雷伯杆菌及大肠埃希杆菌的MIC的.在此基础上,采用阿米卡星注射液80mg,qd+左旋氧氟沙星注射液400 mg,qd+EDTA注射液1 g,qd(其中0.5 g加入阿米卡星注射液,另外0.5 g加入左旋氧氟沙星注射液中,EDTA连续使用3 d后停用2 d为一疗程)治疗产ESBLs多重耐药的肺炎克雷伯杆菌及大肠埃希杆菌感染25例患者,进行10 d治疗后观察疗效.结果:大多数受试药物加入EDTA后对产ESBLs的肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希杆菌的MIC都有所降低并恢复敏感性,但氨曲南、头孢噻肟仍然耐药.而进行临床治疗探索也表明,阿米卡星注射液联合左旋氧氟沙星注射液并加入EDTA注射液治疗产ESBLs的肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希杆菌的感染具有较高的有效率.结论:在各抗菌药物中加入乙二胺四醋酸为治疗多重耐药细菌的新途径.
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大肠埃希杆菌耐药性的综合分析
目的:分析大肠埃希杆菌耐药性的现状.方法:对6省、市21所医院采集的标本分离的各致病菌株数,确定大肠埃希杆菌的排位,并按药敏试验,确定其对常用抗菌药的耐药率.结果:大肠埃希杆菌株数在总致病菌株数(不包括真菌)和G-菌株数中均居第1位,对常用抗菌药物耐药明显.结论:大肠埃希杆菌对抗菌药物的耐药性已成为临床的突出问题.
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右肾周脓肿破溃致臀部脓肿——关于"臀部脓肿切开引流伤口经久不愈"的讨论
1 本例临床特点①中年女性,肥胖,平素体健;②以臀部脓肿为首发症状,病史无高热畏寒及尿急、尿频、血尿等泌尿系感染症状,也无盗汗消瘦等结核中毒症状,病程虽长但全身状况良好;③体格检查臀部瘘口有少量脓液,右肾区叩击痛;④胸部、腰椎、骨盆X线拍片检查无阳性发现;⑤超声检查右肾异常强回声;⑥静脉造影右肾不显影;⑦化验血白细胞升高,血糖、肝肾功能正常,窦道脓液检出大肠埃希杆菌,抗酸染色(-),PPD弱阳性.⑧瘘口逆行造影显示瘘管向上延伸至第二腰椎水平.⑨CT检查显示右肾轮廓增大变形,肾结构消失,壁增厚,CT值10Hu,肾周筋膜增厚,病灶内可见点片状液面,上段输尿管扩张,壁增厚.左肾大小位置正常,无肿块及结石影.
