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HCBP6对HCV核心蛋白反式激活作用的影响
目的:研究HCBP6蛋白在细胞内表达时,是否通过蛋白-蛋白之间的相互作用,对HCV核心蛋白的反式激活作用产生影响.方法:利用常规的分子生物学技术分别构建HCBP6蛋白和丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的真核表达载体.酶联负疫黏附法enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测CAT的表达水平,间接测定HCV核心蛋白对于SV40病毒即刻早期启动子的反式激活活性.结果:重组表达载体pcDNA3.1(-)-HCBP6、pcDNA3.1(-)-core经过限制性内切酶作图分析和核苷酸序列分析证实正确无误.转染HepG2细胞之后,HCV核心蛋白的表达,对于SV40病毒即刻早期启动子的转录表达活性具有显著的反式激活作用.但是,当与HCBP6蛋白的表达载体进行共转染时,SV40病毒的即刻早期启动子的转录活性受到抑制.重复试验得到了相似的结果.HCBP6蛋白的表达对于HCV反式激活SV40病毒即刻早期启动转录活性的抑制率40.4-62.3%.结论:HCBP6蛋白在细胞内的表达对HCV核心蛋白反式激活SV40病毒的即刻早期启动子的转录活性具有显著的抑制作用.
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常规肺功能的测定仪器和测定原理
测定肺功能的仪器统称为肺功能检查仪,简称肺功能仪,有肺量计(spirometer)、体容积描记仪和脉冲振荡仪等.根据测定方法可将肺功能参数分为直接测定参数和间接测定参数,前者可通过密闭式肺量计或流量计直接测定.受检者呼吸气量的多少为容积,包括潮气容积(VT)、补吸气容积(IRV)、深吸气量(IC)、补呼气容积(ERV)、肺活量(VC)等静态容积参数和FVC、FEV1等反映通气功能的各种动态容积参数;呼吸气量进出的快慢显示为流量.但部分参数不能通过呼气或吸气直接测定,如残气容积(RV)和包含RV的功能残气量(FRC)、肺总量(TLC),需通过气体分析法等间接测定.一氧化碳弥散量(DLCO)和每升肺泡容积的一氧化碳弥散量(DLCO/VA)也需要间接测定.
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矫味剂甜菊素对甘露聚糖肽口服溶液含量测定的影响
甘露聚糖肽口服溶液为免疫调节药，具有增强机体免疫功能等作用［1-2］。甘露聚糖肽口服溶液现行标准［3］的含量测定方法为苯酚-硫酸法，其原理是根据多糖在硫酸的作用下水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后再与苯酚缩合成有色化合物，进行比色测定［4-5］。我国甘露聚糖肽口服溶液生产企业有23家，其中部分企业使用甜菊素作为矫味剂，且处方中甜菊素使用量差异较大，分别为3.5％及15％。本文通过离子色谱法与现行标准方法进行比对，发现甘露聚糖肽口服溶液现行标准〔含量测定〕项，会因处方中添加甜菊素引起含量测定结果升高。为了提高甘露聚糖肽口服溶液含量测定结果的准确性，保障药品安全与确保合理用药，拟建议本品可使用其他矫味剂代替甜菊素或可探索新的含量测定方法，如可通过测定甘露聚糖肽口服溶液中的多肽间接测定甘露聚糖肽的含量［6］。
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肝脂肪酸结合蛋白:一个新型肾脏疾病标志物
肾脏病是一个世界范围内的公共健康问题.肾脏病的进展导致终末期肾衰竭,需要肾脏替代治疗,如血液透析、腹膜透析或肾移植维持生命.发现并监测肾脏疾病的进展因素对于降低终末期肾衰竭病人的数量是非常重要的.现有的肾脏病筛选和监测指标多数都不能用于肾脏病的早期诊断,而且都是间接测定肾小球滤过率,不能反应肾组织的状态.所以发现一个产生于肾组织,并可以对于疾病进展及其他的急慢性加重因素做出反应的的新的标志物是非常必要的.本文描述的是一个近来正在进行广泛的临床试验和确认的新型肾脏蛋白质标志物——肝型脂肪酸结合蛋白( liver fatty acid - binding protein,L - FABP).
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石墨炉全自动原子吸收法测定血铅
铅的测定方法有火焰原子吸收法、极谱法和双硫腙比色法,由于这些方法灵敏度不高,故取样量要求较大,这不适合用于直接测定血液中的铅.目前许多医院只能采用间接法测定血液中的铅,即"锌原卟啉"法[1],该方法原理是铅会影响血液中原卟啉含量,铅中毒病人游离原卟啉含量会升高,通过测定原卟啉含量间接测定铅含量,但实际上影响原卟林因素很多.本文所建立的方法能直接测定血液中铅含量,并且样品用量少(0.5?ml血液),准确度高,灵敏度高,操作简便快速.
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B族维生素片中维生素B12电感耦合等离子体质谱法间接测定
目的 建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法间接测定B族维生素片中维生素B12含量的方法.方法 样品经微波消解后,采用在线加入内标校正基体效应,用ICP-MS测定钴离子浓度间接测定样品中维生素B12的含量.结果 本方法在1.0～ 100.0 tg/L线性范围内具有良好的线性关系(r＞0.999),加标回收率为95.0％～ 104.0％,相对标准偏差(RSD)为1.17％～ 3.03％,方法检出限为0.014 mg/kg,定量下限为0.041 mg/kg.结论 本方法简单、灵敏、准确,适用于B族维生素片中维生素B12的测定.
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毛细管气相色谱法测定鼠药中毒者尿中氟乙酰胺或毒鼠强
氟乙酰胺(Fluoroacetamide,FAM)及霉鼠强(Tetramine,TEM)为国家明令禁止生产、销售和使用的剧毒鼠药.测定鼠药中是否含有氟乙酰胺和毒鼠强的佳方法是气质联用仪和核磁共振法,但仪器价格昂贵,难以推广.紫外分光法和氟离子电极法、气相色谱法可测定氟乙酰胺,但均要经复杂的前处理且为间接测定.我们研究建立了毛细管气相色谱法快速测定鼠药中毒者尿中氟乙酰胺、毒鼠强.该方法使用高效毛细柱分离,直接测定原形,故准确度和灵敏度高,特异性好,操作简便快速,已成功地应用于几起鼠药中毒事件,现介绍如下.
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水中痕量硫离子催化动力学光度法间接测定
目前,测定硫离子的常用方法是亚甲基蓝光度法[1],但该法灵敏度较低.动力学分析法由于灵敏度高,仪器设备简单,在金属离子的测定中应用较多,但用于硫离子的测定报道较少[2-5].因此,研究灵敏度高和选择性好的动力学分析法测定痕量硫离子具有一定意义.研究发现,在磷酸盐缓冲介质中,硫离子对痕量铬(Ⅵ)催化过氧化氢氧化中性红有明显的阻抑作用,且催化反应降低的速度在一定范围内与硫离子的浓度成正比.本文研究了硫离子阻抑催化反应的适宜条件,建立了阻抑催化光度法间接测定硫离子的方法,该方法操作简单,灵敏度高,选择性好,可用于实际样品中硫离子的测定.
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阴离子交换离子色谱法间接测定食品馅料中的二氧化硫脲
目的 建立食品馅料中二氧化硫脲的离子色谱快速检测方法.方法 基于二氧化硫脲在碱性无氧条件下可快速完全分解生成亚硫酸根的反应原理,在氩气饱和的KOH水溶液中反应并超声提取,使馅料中的二氧化硫脲完全转化为亚硫酸根,该提取溶液离心后经RP柱去除脂溶性杂质,经阴离子交换色谱柱IonPacAS11-HC (4 mmol/L×250 mmol/L,5μm)分离,抑制型电导检测器分析,通过检测亚硫酸钠含量间接测定二氧化硫脲含量.结果 在1.26 ～ 252 mg/L范围内目标物线性关系良好(r≥0.998 7),检出限(LOD)不高于6 mg/kg,定量下限(LOQ)不高于12 mg/kg,3个加标水平的方法回收率为92.3％ ～ 102.6％,相对标准偏差(RSD)为2.9％～4.9％.结论 本方法快速、准确、重现性好,适用于食品馅料中二氧化硫脲的快速分析.
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TH诊断甲亢患者的临床应用及意义
临床诊断甲亢患者实验室检查从间接测定甲状腺激素(Thyrorine or Thyroid Hormone, TH)到直接测定TH浓度,诊断水平不断提高.
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光度法间接测定面粉中过氧化苯甲酰
由于过氧化苯甲酰具有使面粉增白、增筋及杀菌等效果,故面粉加工工艺过程中用作改良剂,但有些加工厂,为增加面粉感观性状,以次充好,随意添加过量过氧化苯甲酰.目前测定方法有高效液相色谱法、气相色谱法,用分光光度法测定尚未见报道,本文利用过氧化苯甲酰具有氧化性特点,用碘化钾作还原剂,生成的碘与淀粉络合成有色络合物,根据颜色深浅,在波长540mn进行比色,得满意的结果.
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比色法测定食品中的蛋白质
食品中蛋白质的测定采用半微量凯氏定氮法[1],该法包括样品消解、蒸馏、滴定三大步骤,操作烦琐,耗时长,本试验探讨用双氧水一硫酸法消解样品,使蛋白质分解转化成硫酸铵,用传统的奈氏比色法[2],通过比色,间接测定食品中的蛋白质含量,方法简便、省时,结果准确、可靠.
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工作场所空气中二氧化硫的测定方法研究
目的:建立一种用火焰原子吸收光谱法间接测定工作场所空气中二氧化硫的新方法.方法:用(1+1000)高氯酸溶液吸收空气中二氧化硫,使其氧化成硫酸根,加铬酸钡悬浊液生成硫酸钡沉淀,释放出铬酸根,用火焰原子吸收光谱法测定铬,可间接求得二氧化硫的含量.结果:方法曲线的相关系数r=0.9993,线性范围0～5μg/ml,检出限0.12μg/ml,相对标准偏差为3.52%～4.25%,加标回收率为95.0%～106%.结论:用本方法测定工作场所空气中二氧化硫,操作手续简单、快速、检出限低、灵敏度高,结果满意.
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顶空冷原子吸收法间接测定空气中硫化氢
空气中硫化氢浓度的监测,是作为评价空气污染的重要指标之一,目前文献介绍较多的有亚甲兰分光光度法[1]、荧光法[2]、气相色谱法[3]等,前者灵敏度低,采集样品量大,结果重现性差,后者仪器昂贵,使用复杂.
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毛细管气相色谱法测定鼠药中毒者尿中氟乙酰胺和毒鼠强
氟乙酰胺(FLuoroacetamide,FAM)及毒鼠强(Tetramine,TEM)为国家明令禁止生产、销售和使用的剧毒鼠药.由于当前鼠药市场混乱,管理不善,误食中毒的事故屡有发生.病人急性中毒症状共同表现为突然发作惊厥、抽搐,严重者意识丧失,可因剧烈抽搐导致呼吸衰竭而死亡[1].分析氟乙酰胺和毒鼠强的佳方法是气质联用仪和核磁共振法,但仪器价格昂贵,难以推广.紫外分光法和氟离子电极法、气相色谱法可测定氟乙酰胺[2],但均要经复杂的前处理且为间接测定.我们研究建立了毛细管气相色谱法快速测定鼠药中毒者尿中氟乙酰胺及毒鼠强.该方法使用高效毛细柱分离,直接测定原形,故准确度和灵敏度高,特异性好,操作简便快速,已成功地应用于几起鼠药中毒事件,结果令人满意.
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火焰原子吸收法间接测定水中硬度
水中硬度系指沉淀肥皂的程度,使肥皂沉淀的原因主要是水中钙镁离子,此外还有铁锰铅锌等其他金属离子,但由于钙镁离子浓度远远大于其他离子的浓度.因此,通常以钙镁含量来计算水中硬度.测定水中硬度有经典的乙二胺四乙酸二钠容量法.现讨论测定水中钙镁离子浓度计算水中硬度[1].
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心力衰竭时血浆内皮素、一氧化氮及血管紧张素Ⅱ的变化及意义
本研究应用高效液相法间接测定充血性心力衰竭(CHF)患者治疗前后血浆中一氧化氮(NO)浓度,并与血浆内皮素(ET)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)进行相关分析,以揭示其在CHF发展过程中的意义.
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063 徒手颈椎牵引降低正常人α-运动神经元的兴奋性
[英]/Bradnam L…//Electromyogr Clin Neurophysiol.-2000,40.-259～266徒手颈椎牵引是减轻颈椎和上肢肌肉骨骼疾患疼痛,增加其活动度的一干预方法,但有关其疗效和临床作用机制方面的研究甚少.ROM、徒手肌力测试、组织顺应性改变和经颅磁刺激激活肌肉收缩的记录等评价方法,均因缺乏对肌肉活动微小变化监测的敏感性而不能提供肯定性结果.EMG方法研究结果不一致使其方法学受疑,且仅能测定总的运动单位释放,而不能测定影响运动单位募集的α-运动神经元的变化.H反射间接测定α-运动神经元兴奋性,提供了用于评定经验性干预疗效的量化测试方法.本实验旨在确定徒手颈椎牵引是否影响桡侧屈腕肌α-运动神经元库的活动,以获得这一方法具有神经生理学反应的依据.
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氢化物发生-原子荧光光谱法及其间接测定技术在食品医药领域的应用进展
氢化物发生-原子荧光光谱法(HG-AFS)具有灵敏度高、检出限低、分析成本低的优势,同时克服了可分析元素种类少的缺陷[1].HG-AFS法间接分析技术逐渐成为食品医药行业分析工作者的研究热点,现将近年来氢化物发生-原子荧光光谱法间接测定技术在食品医药领域的应用进展综述如下.
关键词： 氢化物发生-原子荧光光谱法 间接测定 中药 重金属元素
