首页 > 文献资料
-
肝脏X受体调控小鼠心肌细胞肥大性生长
目的 研究肝脏X受体(LXR)在肥厚心肌中表达的变化及其对心肌细胞肥大性生长的影响.方法 8周龄的野生型小鼠随机分为2组,即手术组和假手术组.两组小鼠分别接受主动脉缩窄术或假手术,术后2周进行各项指标检测,如心脏重/体重、心肌组织病理检测、分子生物学检测等;同时进行乳鼠心肌细胞体外培养,用血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导心肌细胞肥大性生长,并与LXR激动剂T0901317共孵育,通过检测心肌细胞蛋白质合成率、分析细胞形态及肥大基因表达等,探讨LXR对体外心肌细胞肥大性生长的调控作用.结果 病理及分子生物学检测证实主动脉缩窄术成功的构建了心肌肥厚的小鼠模型.手术组小鼠心肌组织中LXRα的蛋白及mRNA表达均显著高于假手术组(P均<0.05),而LXRB的表达差异无统计学意义.体外研究表明,LXR激动剂T0901317呈剂量依赖性地抑制由AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,表现在T0901317治疗组的心肌细胞面积、肥大基因的表达量、蛋白质合成率等均低于空白对照组(P均<0.05).结论 LXR是心肌肥厚的重要调控因子,LXR的激活能负性调控心肌细胞肥大性生长.
-
基于高密度脂蛋白的抗动脉粥样硬化小分子药物研究现状
大量流行病学结果显示,高密度脂蛋白胆固醇水平与动脉粥样硬化性心血管疾病发病率呈负相关,提示高密度脂蛋白可能具有抗动脉粥样硬化的作用.可能机制包括促进胆固醇逆转运、抗炎、抗氧化及对抗血栓和促纤溶作用等多个途径,其中,胆固醇逆转运可能在保持胆固醇平衡、缓解动脉粥样硬化病程中发挥了重要作用.载脂蛋白A-I、ATP结合盒转运子A1、肝脏X受体及胆固醇酯转运蛋白等多种蛋白因子在逆转运过程中扮演了重要角色,这些可能是基于高密度脂蛋白的药物发现的潜在靶点.因而,本文将以这几个关键蛋白为基础对抗动脉粥样硬化小分子药物研究现状进行综述.
-
肝脏X受体激动剂研究进展
肝脏X受体(LXR)属于核受体超家族成员,对脂肪代谢具有重要调控作用.研究表明LXR激动剂可能作为治疗和预防动脉粥样硬化的潜在药物,已有多个化合物处于临床前评价和生物活性筛选阶段.本文对近年来报道的LXR激动剂进行简要综述.
-
肝脏X受体研究在心血管疾病中的应用展望
肝脏X受体(Liver X Receptor,LXR)是新近研究比较深入的一个热点话题,LXR主要参与胆固醇代谢和转运、脂肪代谢、糖原异生和炎症等过程.本文在LXR的结构、功能、其激动剂及其可能的临床作用、未来的研究方向等多个方面进行了详细的阐述.
-
脂多糖对奶牛乳腺上皮细胞体外生长及细胞内固醇调节元件结合蛋白-1、肝脏X受体基因mRNA转录水平的时序性影响
目的 分析脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)体外生长及细胞内固醇调节元件结合蛋白-1 (sterol regulatory elementbinding protein 1,SREBP-1)和肝脏X受体(liver Xreceptor,LXR)基因mRNA转录水平的时序性影响.方法 原代培养BMECs,用LPS(终浓度为10μg/mL)分别刺激BMECs 0、1、3、6、12、24和48 h后,显微镜下观察细胞状态,采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测BMECs中SREBP-1及LXR基因mRNA的时序性表达水平.结果 LPS刺激BMECs 0、1、3h后的生长状态良好,细胞形态饱满,胞浆丰富,无任何肉眼可见变化;LPS刺激6h后,BMECs开始出现明显收缩、变圆,细胞间隙增大,细胞突起减少.与LPS刺激0h比较,LPS刺激BMECs 1 h后可显著下调LXR基因mRNA转录水平(P＜0.05),刺激3h后可显著下调SREBP-1基因mRNA转录水平(P＜0.05),且均随时间的延长呈逐渐降低趋势(P＜0.05),均于LPS刺激12h时达低,刺激24及48 h后LXR及SREBP-1基因mRNA转录水平均明显高于12 h,24和48 h间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 LPS可对BMECs产生严重损伤,能有效抑制BMECs中SREBP-1及LXR基因mRNA转录水平,且具有一定的时间依赖性.
关键词： 奶牛乳腺上皮细胞 脂多糖 固醇调节元件结合蛋白-1 肝脏X受体 -
脂联素对巨噬细胞ATP结合盒转运子A1表达及其功能的影响
目的 探讨脂联素对巨噬细胞ATP结合盒转运子A1 (ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)及其上游调控因子肝脏X受体α(Liver X receptor α,LXRα)表达的影响及其在胆固醇逆转运(Reverse cholesterol transport,RCT)和抗动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)中可能的作用机制.方法 以不同浓度的脂联素(0、1、5、10 μg/ml)体外培养巨噬细胞RAW264.7 24 h,RT-PCR法检测细胞中ABCA1和LXRα基因mRNA的转录水平,Western blot法检测细胞中ABCA1和LXRα蛋白的表达水平,闪烁计数法检测细胞内胆固醇的流出情况.结果 脂联素能显著上调RAW264.7细胞中ABCA1和LXRα基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平(P＜0.05),且呈浓度依赖性；脂联素能浓度依赖性地增加细胞内胆固醇的流出(P＜0.05).结论 脂联素可通过LXRα途径上调巨噬细胞ABCA1基因的转录和翻译水平,促进胆固醇逆转运,延缓AS的发生、发展.
-
阿昔莫司对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运子A1表达及其调控的影响
目的 研究阿昔莫司对巨噬细胞RAW264.7三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)及其上游调控因子肝脏X受体α(Liver X receptor,LXRα)的影响,探讨其促进胆固醇逆转运(Reverse cholesterol transport,RCT)、抗动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)的可能机制.方法 体外培养RAW264.7细胞,将细胞分为空白对照组(不含阿昔莫司)和不同浓度的阿昔莫司干预组(分别含5、10、25 μg/ml阿昔莫司),作用24 h后,采用RT-PCR法检测各组细胞中ABCA1和LXRα基因mRNA的转录水平;Western blot法检测各组细胞中ABCA1和LXRα蛋白的表达;闪烁计数法检测各组细胞内胆固醇的流出.结果 阿昔莫司呈浓度依赖性地增加RAW264.7细胞中ABCA1和LXRα基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平(P＜0.05或P＜0.01)及细胞内胆固醇的流出率(P＜0.01).结论 阿昔莫司可通过LXRα途径上调巨噬细胞ABCA1的表达,促使细胞内胆固醇流出,从而延缓AS的发生发展.
-
肝脏X受体激活对α-GalCer诱导的小鼠肝损伤保护机制探讨
背景:肝脏X受体(LXR)属于核受体超家族成员,对脂类代谢相关基因的转录调控起关键作用,同时具有调节免疫反应和抗炎效应.目的:研究LXR激活对a-GaICer诱导的小鼠肝损伤保护作用的可能机制.方法:15只C57BIL6J小鼠随机分为正常对照组、a-CaICer模型组和LXR治疗组,后两组以a-CaICer腹腔注射诱导肝损伤模型,LXR治疗组于造模前连续7 d腹腔注射LXR激动剂T0901317.造模6h后处死小鼠,行肝组织病理学检查和血清ALT、AST水平检测,免疫组化染色检测肝组织白细胞介素-6(IL-6)表达,蛋白质印迹法检测肝内P13K/AktNF-KB信号通路激活情况.实时RT-PCR检测肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA表达.结果:与正常对照组相比,α-GaICer模型组小鼠肝损伤明显,血清转氨酶水平升高,肝组织IL-6、TNF-α、iNOS表达上调.P13K/Akt/NF-KB信号通路激活.LXR治疗组肝损伤和血清转氨酶水平较α-GaICer模型组显著改善,肝组织炎症介质表达下调,P13K/Akt/NF-KB信号通路激活受抑.结论:LXR激活可调节免疫反应,抑制肝脏炎症,从而显著减轻α-GaICer诱导的小鼠肝损伤,其机制可能与抑制P13K/Akt/NF-KB信号通路激活有关.
-
高胆固醇摄入对新西兰兔胆汁酸代谢的影响
目的 观察2周高胆固醇食物摄入对新西兰兔胆汁酸经典合成途径基因调节的影响.方法 20只新西兰兔随机分为对照组和高胆固醇组,分别喂饲普通兔粮及高胆固醇兔粮2周,测定实验前后血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、胆汁酸(bile acid,BA)及肝脏胆固醇7α羟化酶(cholesteral 7α-hydroxylase, CYP7A1)活性及mRNA、小分子异源二聚体伴侣(short heterodimer partner,SHP) mRNA、胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP) mRNA和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1) mRNA、胆固醇酯转移蛋白(cholesteryl-ester transfer protein,CETP) mRNA.结果 高胆固醇组TC、LDL、BA均较对照组升高(P<0.05);高胆固醇组CYP7A1活性及mRNA均较对照组降低(P<0.05);高胆固醇组SHP mRNA、BSEP mRNA均较对照组升高(P<0.05);胆固醇组ABCA1 mRNA、CETP mRNA均较对照组升高.结论 高胆固醇摄入后肝脏FXR、LXR受体均被激活,CYP7A1活性下降,胆汁酸经典合成减少.
-
LXR-IDOL-LDLR轴在脂质平衡中作用研究进展
[目的]综述新近发现的IDOL蛋白(Inducibledegrader of the low-density lipoprotein receptor)对低密度脂蛋白受体(low-densitylipoprotein re-ceptor,LDLR)调节作用及肝X受体(LXR)-IDOL-LDLR轴在脂代谢平衡稳态中作用的研究进展.[方法]查阅近年来国内外研究IDOL及LXR-IDOL通路的相关文献,并归纳总结其在脂代谢中的作用.[结果]IDOL能在转录后水平介导LDLR及其家族其他成员(VLDLR、ApoER2)的泛素化降解,该作用独立于固醇调节元件结合蛋白(SREBP)途径且受LXR的调节.[结论]LXR-IDOL通路能通过IDOL依赖途径泛素化降解LDLR,调节LDLR水平及LDL摄取,从而在脂代谢平衡中发挥重要作用.LXR-IDOL-LDLR轴可能为脂质代谢紊乱及心血管疾病提供新的潜在治疗靶点.
关键词： LDLR诱导降解蛋白 肝脏X受体 LDLR 脂质代谢 -
以核受体为靶标的胆汁淤积治疗药物研究进展
胆汁淤积的治疗药物匮乏，熊去氧胆酸是目前唯一被FDA 通过的治疗原发性胆汁性肝硬化的药物，但其药效却限于疾病早期，因此迫切需要开发新的胆汁淤积治疗药物。核受体能调控胆汁酸稳态，它作为胆汁淤积治疗的靶标是目前研究的热点。该综述对目前报道多的核受体进行总结，分析其作为胆汁淤积药物治疗靶标的利弊及应用前景。
-
肝脏X受体α对高糖所致心肌细胞凋亡的影响及其机制
目的：观察肝脏X受体α（ LXRα）对高糖所致心肌细胞凋亡的影响，并探讨其机制。方法将对数生长期的H9c2大鼠心肌细胞随机分为5组，空白组、低T0组、中T0组、高T0组分别用二甲基亚砜及5、10、20μmol／L的LXRα激动剂T0901317预处理12 h，高糖对照组不处理；之后低T0组、中T0组、高T0组、高糖对照组用33 mmol／L的高糖浸润24 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western blotting法检测细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白相对表达量。结果空白组、低T0组、中T0组、高T0组、高糖对照组细胞凋亡率分别为10．67％±0．82％、29．53％±4．21％、19．76％±2．80％、15．15％±1．90％、34．09％±5．32％；多组间比较，P＜0．05；低T0组、高糖对照组与空白组比较，P均＜0．01；中T0组、高T0组与高糖对照组比较，P均＜0．05。与空白组比较，低T0组、中T0组、高T0组、高糖对照组Bcl-2表达均降低，Bax和Caspase-3表达均增加，P均＜0．05；与中T0组、高T0组比较，高糖对照组上述指标变化更明显，P均＜0．05；低T0组与高糖对照组上述指标比较，P均＞0．05。结论中、高浓度LXRα可抑制高糖所致的心肌细胞凋亡，其机制可能与降低Bax、Caspase-3表达和增加Bcl-2表达有关。
-
Idol:一个新的通过转录后途径调节低密度脂蛋白受体的蛋白
肝脏的低密度脂蛋白受体(LDLR)是清除血浆低密度脂蛋白(LDL)的主要途径,并且是一个非常重要的心血管系统疾病的治疗靶点.LDLR的表达量受到转录和转录后两方面的调控.这里介绍一种新近发现的、通过泛素化作用经转录后途径调控LDLR的蛋白Idol (inducible degrader of the LDLR).Idol是一个肝脏X受体(LXR)的靶分子,具有E3泛素连接酶活性,可以介导LDLR的泛素化,并在溶酶体降解.Idol还有另外两个LDLR家族的靶蛋白VLDLR和ApoER2.尽管Idol和前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)存在着很多相似之处,但它们在调控LDLR的途径上是不同的.近的工作显示Idol与人类的LDL水平有关,Idol可能在人类的血脂代谢有重要作用.
-
去乙酰化酶SIRT1对胰岛B细胞株MIN6分泌功能的影响及其机制研究
目的 观察沉默信息调节因子1(SIRT1)对小鼠胰岛B细胞株MIN6胰岛素分泌功能的影响,并初步探讨其机制.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测SIRT1及其下游肝脏X受体(LXRs)的mRNA在MIN6细胞中的表达,应用酶链免疫吸附测定法(ELISA)分别检测SIRT1激动剂白藜芦醇(resveratrol)和SIRT1抑制剂sirtinol对MIN6细胞胰岛素分泌影响的量效与时效关系及SIRT1下游调控基因LXRs抑制剂22(S)-羟化胆固醇(22-S-HC)对MIN6细胞胰岛素分泌功能的影响.结果 SIRT1激动剂resveratrol能够明显的促进MIN6细胞的胰岛素分泌,SIRT1抑制荆sirtinol则对MIN6细胞的胰岛素分泌具有一定的抑制作用,且均呈一定程度的时间-剂量依赖关系.SIRT1的活性变化不会引起LXRs的mRNA表达变化.SIRT1下游调控因子LXRs的抑制剂22-S-HC能够部分拮抗白藜芦醇时MIN6细胞的胰岛素分泌的促进作用.结论 SIRT1的活性对于MIN6细胞的胰岛素分泌具有明显的正相关调节作用,其机制可能与SIRT1下游的棱转录因子LXRs的活性有关.
-
LXR在湿性AMD患者中的表达及与血脂代谢的相关性分析
目的:探索肝脏X受体(liver X receptor,LXR)在湿性年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)的表达及与血脂代谢的相关性分析.方法:随机选取本院眼科门诊湿性AMD患者20例,同时选取健康志愿者20例作为对照组.收集年龄、性别等病史资料,通过抽血测定血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL)水平.采用荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法检测LXRα和LXRβ的mRNA的表达水平.使用LXR激动剂TO901317处理,观察PBMC中LXRα和LXRβ的变化.采用t检验、非参数检验、Pearson相关性分析及ROC分析进行数据统计分析.结果:湿性AMD患者中LXRα,LXRβ的mRNA的表达水平都低于对照组的表达水平(t=3.881,P=0.001;t=5.839,P=0.000).使用LXR激动剂TO901317处理后,在PBMC中LXRα的mRNA表达水平升高,LXRβ表达无差异.Pearson相关性分析提示LXRα与TG具有负性相关性,而LXRα与TC、HDL、LDL及LXRβ与TC、TG、HDL、LDL均无相关性.ROC分析得LXRα检测结果的曲线下面积(AUC)为0.824 (95％CI=0.676～0.973,P=0.001),LXRβ检测结果的AUC为0.945 (95％CI=0.873～1.000,P=0.000).结论:LXRα和LXRβ的表达水平下降提示与湿性AMD疾病的发生发展密切相关,可能成为诊断和治疗湿性AMD的一个新靶点.
-
激活内源性肝X受体对酒精暴露致新生鼠神经前体细胞增殖障碍的保护作用
目的 探索激活肝脏X受体(liver X receptors,LXRs)对新生期小鼠酒精暴露后海马齿状回内神经前体细胞的保护作用.方法 选用同窝的子鼠按随机数字表法分成3组(n=3):对照组、酒精组(分别注射等量溶剂或酒精)和LXRs激动剂(TO901317,TO)+酒精组[腹腔注射TO激动剂10 mg/kg(DMSO∶ PBS=1∶3为溶剂)].采用免疫组化方法检测与增殖细胞相关的Ki67、5-溴-2'-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)以及性别决定区域Y同源盒基因2(Sox2)、巢蛋白Nestin的表达水平,观察激活内源性LXRs对新生期小鼠酒精暴露后海马齿状回神经前体细胞增殖与神经前体细胞维持的影响.结果 新生期小鼠酒精暴露后抑制海马齿状回神经前体细胞的增殖,包括Ki67阳性细胞数量显著减少[酒精组(24.7±5.5)vs对照组(45.9±7.1),P＜0.01],BrdU阳性细胞数量显著减少[酒精组(44.9±2.9)vs对照组(54.8±6.0),P＜0.01],Sox2标记的神经前体细胞数量减少[酒精组(31.1±6.4)vs对照组(46.6±6.3),P＜0.01],Nestin标记的长纤维出现断裂,数量减少[酒精组(25.3 ±3.8)vs对照组(35.0±2.0),P＜0.01].TO901317预处理有效减轻酒精对海马齿状回前体细胞的毒性作用,TO+酒精组较酒精组Ki67阳性细胞数量增加[TO+酒精组(54.2±10.8)vs酒精组(24.7±5.5),P＜0.01],BrdU阳性细胞数量显著增加[TO+酒精组(53.4±2.8)vs酒精组(44.9±2.9),P＜0.01],Sox2阳性细胞增加[TO+酒精组(54.0 ±6.7)vs酒精组(31.1±6.4),P＜0.01],Nestin标记的纤维断裂减少,数量增加[TO+酒精组(33.0 ±2.6)vs酒精组(25.3±3.8),P＜0.05].结论 激活LXRs可减轻酒精暴露对新生期小鼠海马齿状回神经前体细胞增殖的抑制作用,从而保护海马齿状回的发育.
-
TO901317修复酒精致新生小鼠视网膜节细胞损伤的实验研究
目的 观察酒精暴露对新生小鼠视网膜结构的影响,以及肝脏X受体(LXRs)激动剂TO901317对酒精损伤小鼠视网膜的保护作用.方法 将新生C57BL/6J小鼠分为对照组、酒精暴露组和激动剂TO预处理组,每组3只.采用HE染色检测各组小鼠视网膜大体结构改变,采用免疫组化染色检测各组小鼠视网膜NeuN阳性细胞数、GFAP表达变化.结果 免疫组化染色发现LXRβ主要分布于新生小鼠视网膜节细胞层,HE染色发现酒精组新生小鼠视网膜节细胞数量较对照组显著减少(P＜0.01),TO处理能显著翻转酒精暴露导致的视网膜节细胞层细胞数量减少(P＜0.05)；免疫组化染色发现酒精组小鼠眼球视网膜节细胞层NeuN阳性细胞数明显少于对照组(P＜0.01),而TO预处理组较酒精组NeuN阳性细胞显著增多(P＜0.01).对各组进行GFAP免疫组化染色并采用光密度分析进行半定量分析,结果显示酒精组小鼠视网膜GFAP表达较对照组和TO预处理组显著增高(P＜0.01).结论 LXRs受体激活可有效抑制酒精所致视网膜中星形胶质细胞的活化,挽救节细胞丢失.
-
LXR激动剂TO901317对成年小鼠海马齿回星形胶质细胞的作用
目的 观察肝脏X受体(liverX receptor,LXR)激动剂TO901317对成年小鼠海马齿回(dentate gyrus,DG)星形胶质细胞数量以及海马齿回颗粒下区(dentate gyrus subgranular zone,DG-SGZ)星形胶质细胞放射状突起的作用.方法 3个月龄健康雄性C57B/L6小鼠采用TO901317激动剂灌胃1周,采用免疫组化检测小鼠海马星形胶质细胞的数量和形态学变化,采用RT-PCR检测海马LXRα、LxRβ、Klf-9、ABCA1、ABCG1和apoE的表达.测量肝脏大小和质量.结果 TO901317激动剂灌胃1周后,海马齿回胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性的星形胶质细胞数量显著减少(P＜0.05),而海马DG-SGZ区GFAP阳性的放射状纤维显著增多(P＜0.01)；小鼠海马LXRα表达无显著变化(P＞0.05),而LXRB表达显著下降(P＜0.05),Klf-9、ABCA1、ABCG1和apoE表达显著升高(P＜0.05).灌注TO901317后小鼠肝脏显著肿大,质量较DMSO对照组显著增加(P＜0.01).结论 TO901317通过LXRβ受体调节Klf-9、ABCA1、ABCG1、apoE的表达,从而显著增加海马神经发生区GFAP长纤维的延伸.
-
肝脏X受体参与阿尔茨海默病胆固醇代谢异常机制的研究进展
阿尔茨海默病(AD)是一种以记忆减退、认知、语言障碍及人格改变为主要症状的神经系统退行性疾病,多发于65岁以上老年人,病理改变以细胞外β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)、老年斑或神经炎斑、神经元细胞质内出现神经纤维缠结为特征.
