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膜型1基质金属蛋白酶在胃癌组织中的表达及意义
已有研究表明,膜型1基质金属蛋白酶(membrane-type 1 matrix metalloproteinase, MT1-MMP)在多种肿瘤组织中表达,且与它们的侵袭和转移相关[1].我们采用免疫组织化学方法检测胃癌组织中MT1-MMP的表达,探讨其表达特点、组织定位及临床意义.
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数字断层融合排粪造影与数字X线排粪造影的对比研究
排粪造影技术始于20世纪50年代，磁共振及CT技术已经应用于排粪造影，显现了它们的优势，磁共振不仅能够评价肛管、直肠的形态和功能，而且能评价前、中盆腔病变［1］， CT在排粪造影诊断出口梗阻型便秘方面具有一定优势［2］，但是练延帮等［3］的对比研究表明磁共振只是在显示盆腔的病变方面有优势，而在显示直肠黏膜脱垂、直肠套叠及会阴下降方面还不如传统X线排粪造影。数字断层融合技术是近年X线领域研究较为热门的技术，其在肺部结节检出，转移性结节的诊断和随访、隐匿性骨折诊断、石膏外固定术后骨折情况分析、病灶软组织定位等方面显现出了其独特的优势。本研究将断层融合技术应用于排粪造影，旨在获取优质的图像，提高诊断效率。本研究收集2014年1月至2016年1月期间来我院就诊的患者39例，同时进行断层融合排粪造影和数字胃肠排粪造影，现报告如下。
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社会认知度视角下医药服务品定位与患者行为关系分析
据中国医师协会统计，从2013年10月21日到30日，短短的10 d时间，我国发生了6起患者伤医事件。医患之间的紧张关系日益加剧，矛盾不断尖锐化。究其主要原因还是在于医疗卫生体制的问题，包括医院管理体制、补偿机制、医疗保障制度、法律法规等各方面内容。本文将从医药服务品定位、医院组织定位和社会定位三方面逐一分析其中的原因。
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全膝关节成形术后连续被动运动的康复作用
在传统上，全膝关节成形术后早期通常进行几天的制动。制动好在组织损伤后的早期进行。在组织愈合过程中，早期进行控制性制动可以使新形成组织感受自然的张力，使胶原组织定位在正常的运动板上。在组织损伤后的术后第2天，胶原组织已出现在癍痕上，这提示制动应在术后早期进行。当膝关节处于伸展位时，关节面之间的压迫力量增加，滑膜之间的压力也增加。关节内的压力可能超过毛细血管床压，影响代谢物质的清除和正常的关节液的流动。关节制动后并发症很快就出现。因此组织要经过很长时间才能恢复到正常状态，在某些情况下，一些组织可能永远也不能恢复到正常状态。由于制动出现的这些不良后果，近年来对制动的研究也越来越多。
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人β-防御素的研究进展
β-防御素是一类富含精氨酸,而且具有特殊结构的小分子阳离子多肽,是过去几十年里寻找新型抗生素的重要发现之一.对人类基因组序列的分析表明,人染色编码体的基因含有多达一百多种的β-防御素,它们是连接固有免疫和适应性免疫的重要因子.β-防御素不但对多种细菌、真菌、病毒等具有直接的杀伤作用,而且还与肿瘤发生、组织修复以及生殖成熟等生理过程密切相关.
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小鼠富亮氨酸重复结构蛋白Lrig2基因、蛋白结构及组织定位分析
目的:分析小鼠富亮氨酸重复结构蛋白家族成员Lrig2的基因与蛋白的结构,明确其组织分布和定位,并对其功能进行初步预测.方法:利用生物信息学分析技术对小鼠Lrig2基因的染色体定位、蛋白结构进行分析预测;通过RT-PCR、mRNA原位杂交技术检测Lrig2基因在小鼠不同组织中的表达定位;通过系统进化树分析Lrig2与其他Lrrs蛋白家族成员的同源性.结果:生物信息学分析显示,Lrigs2是一种跨膜蛋白受体,是Lrrs蛋白超家族成员之一,胞外区含有15个Lrr模序、3个免疫球蛋白样结构域,存在单一的跨膜结构域;Lrig2在小鼠的多个组织中表达,其中在胸腺、脾脏等组织中表达较强;系统树分析显示,Lrigs蛋白是sLrPs超家族成员,是一种跨膜蛋白受体.结论:Lrig2在免疫组织中表达较强,推测其可能在肿瘤免疫应答进程中发挥重要的效能.
关键词： Lrr-免疫球蛋白结构域样蛋白2 基因与蛋白结构 组织定位 -
精神分裂症患者抗脑抗体的标记与定位研究
近年来,一些学者提出精神分裂症发病机理的自身免疫假说,陆续报道在患者体液中存在抗脑组织抗体,认为这种抗脑抗体可能与精神分裂症中枢神经系统免疫病理损害密切相关[1,2].为确认此抗脑抗体对脑组织的免疫结合特性及在脑组织中的定位,我们应用微波-免疫组化技术对精神分裂症患者脑脊液中IgG与同种异体的患者组织如脑、心、肝、脾、肾组织抗原的免疫结合特性及在脑的额上回,海马回,扣带回,乳头体,基底节,中脑,桥脑,小脑等的组织定位进行了组织、细胞学的免疫学标记研究,报告如下.
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华支睾吸虫富甘氨酸2a类抗原Cs4重组蛋白的免疫学特性与定位
目的 对华支睾吸虫富甘氨酸2a(glycine rich antigen 2a,GRA2a)类抗原Cs4重组蛋白(rCs4)进行免疫学特性分析,并对GKA2a类抗原进行组织定位.方法 使用蛋白质印迹(Western印迹)分析rCs4与华支睾吸虫病患者混合血清的免疫反应性,并分析GRA2a类抗原的分泌性.应用ELISA法检测rCs4免疫小鼠血清中抗rCs4特异性IgG水平,并动态检测华支睾吸虫感染兔0～44周的血清中抗rCs4特异性IgG水平.通过免疫荧光实验(immunofluorescence assay,IFA)对华支睾吸虫GRA2a类抗原进行组织定位.结果 纯化的rCsd可被华支睾吸虫病患者混合血清识别.rCs4单抗(mAb Cs4-31)与华支睾吸虫排泄分泌抗原和可溶性抗原在相对分子质量(Mr)26 000与55 000之间分别有13、15个反应条带,均呈阶梯状分布.ELISA检测rCs4免疫小鼠抗rCs4和ESA的IgG效价均达1:64 000,感染兔的抗rCs4特异性抗体平均水平自感染第4周开始上升,于第6周达到高峰,此后逐步递减,至第20周已呈较低水平.IFA检测发现GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫的表皮.结论 Cs4蛋白是华支睾吸虫在感染早期的分泌型蛋白,具较好的抗原性.GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫表皮.
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猪带绦虫CDC37基因的克隆、表达与组织定位研究
目的 原核表达猪带绦虫(Taenia solium)细胞分裂周期蛋白37(cell division cycle 37,TsCDC37),并对其进行组织定位和免疫原性研究.方法 通过Blastx分析从猪带绦虫成虫cDNA质粒文库中筛选出 TsCDC37基因,PCR扩增CDC37基因,以pET-28a(+)为载体构建目的基因原核表达体系,在大肠埃希菌(E.coli)BL-21/DE3 中诱导表达,纯化的重组蛋白免疫SD大鼠制备免疫血清,Western blotting分析重组蛋白的免疫原性,免疫组织化学方法观察TsCDC37在猪带绦虫成虫中的组织定位. 结果 PCR、双酶切和DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a-TsCDC37构建成功.目的基因在BL-21/DE3菌株中得到稳定表达,重组蛋白的相对分子质量(Mr)为52 000.纯化的重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清和猪带绦虫病、亚洲带绦虫病或牛带绦虫病患者血清识别.免疫组化结果显示,TsCDC37分布于猪带绦虫成虫表膜和子宫中的虫卵.结论 纯化后的猪带绦虫细胞周期分裂蛋白TsCDC37具有较强的免疫原性,主要定位于猪带绦虫成虫的表膜和子宫中的虫卵.
关键词： 猪带绦虫 细胞分裂周期蛋白37 抗原性 组织定位 -
亚洲带绦虫烯醇化酶基因的原核表达、鉴定与组织定位
目的 表达亚洲带绦虫(Taenia asiatica,Ta)成虫烯醇化酶(enolase,ENO)基因,并对其进行组织定位和免疫反应性分析.方法 通过大规模测序从亚洲带绦虫cDNA文库中确定ENO基因,PCR扩增目的 片段,将其克隆至表达质粒pET-30a(+),在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙基母-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察重组蛋白的表达情况,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱纯化重组蛋白,蛋白质印迹(Western blotting)分析该重组蛋白的免疫反应性.将重组蛋白免疫SD大鼠制备免疫血清,ELISA检测抗体水平,间接免疫荧光检测确定ENO在亚洲带绦虫成虫组织中的定位.结果 PCR、双酶切和DNA测序结果均表明,重组质粒pET-30a(+)-TaENO构建成功.SDS-PAGE结果显示,重组蛋白TaENO的相对分子质量(Mr)为47000.经亲和层析获高纯度的蛋白,蛋白浓度为0.37mg/ml.重组蛋白TaENO能被SD大鼠抗血清、感染亚洲带绦虫的猪血清和患者血清识别.间接免疫荧光检测结果显示,TaENO主要定位于成虫的表膜.结论 纯化后的亚洲带绦虫成虫烯醇化酶重组蛋白具有较强的免疫反应性,烯醇化酶主要定位于成虫表膜.
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子宫内膜异位症中表皮生长因子受体的表达及临床意义
本文通过研究表皮生长因子受体(EGFR)在子宫内膜异位症中的组织定位和表达,探讨EGFR表达与子宫内膜异位症发生的关系,从而为寻求新的治疗方法开辟途径.
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华支睾吸虫溶血磷脂酶在虫体组织定位及其特异性抗体类型分析
目的 观察华支睾吸虫溶血磷脂酶(CsLysoPLA)在成虫的组织定位,分析其诱导人体产生的特异性抗体类型.方法 应用免疫荧光方法,观察CsLysoPLA在成虫的组织定位;应用ELISA方法,CsLysoPLA重组蛋白检测25份华支睾吸虫病人血清的IgG1、IgG2、IgG4、IgE.结果 CsLysoPLA定位于虫体的口吸盘、排泄囊、肠支、生殖孔,与虫体分泌/排泄抗原物质密切相关的部位;以CsLysoPLA重组蛋白检测华支睾吸虫感染者血清,IgG1抗体水平较高,IgG2抗体水平稍高,而感染者的IgG4、IgE水平则与健康人无明显差异.结论 CsLysoPLA主要经虫体消化道、生殖道、排泄系统分泌/排泄到体外,刺激人体免疫系统产生Th2为主的免疫应答.
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亚洲带绦虫膜联蛋白B3基因免疫学特性分析及组织定位
目的 对重组表达的亚洲带绦虫膜联蛋白B3(Annexins B3)基因得到的蛋白进行免疫学初步研究及组织定位.方法 将构建在原核表达质粒pET-28a(+)中的Annexins B3基因在大肠埃希菌BL21/DE3中进行诱导表达,将纯化后的重组蛋白用蛋白印迹(Western blotting)进行免疫学分析,间接荧光免疫组织化学定位,荧光显微镜下曝光观察结果.结果 诱导表达并纯化后的重组蛋白可被亚洲带绦虫、猪带绦虫和牛带绦虫感染的病人血清识别.免疫组化显示,该基因的组织定位在亚洲带绦虫成虫的表膜.结论 该重组蛋白具有较好的免疫反应性,组织定位于表膜,说明该基因是维持成虫在宿主消化道厌氧环境中能量代谢平衡的关键分子和介导寄生虫与宿主相互作用的潜在的疫苗候选抗原分子.
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华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶的表达定位及其酶活性的研究
目的 克隆和表达有酶活性的华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶(CsTPx),并进行组织定位研究,为进一步研究其功能奠定基础.方法 利用生物信息学方法从华支睾吸虫基因组文库中识别硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)基因,并对蛋白的结构特征和相关生物学和免疫学功能进行预测.从华支睾吸虫成虫cDNA中扩增目的基因,克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,进行蛋白纯化,免疫印迹鉴定、组织定位及其酶活性的检测.结果 华支睾吸虫TPx基因全长2 175 bp,有一大一小的两个内含子,其编码区序列长度为636 bp,编码212个氨基酸;该蛋白第1～17位氨基酸为其信号肽序列,第51～74位氨基酸为跨膜区,属于经典的2-Cys过氧化物还原酶.重组蛋白可被感染了华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该蛋白定位于成虫的皮层、肠支、卵黄腺、虫卵和囊蚴的体壁中.酶活性检测结果表明,在一定范围内,CsTPx还原H2O2呈剂量和时间依赖性.抗体对酶活性有影响,在合适的抗体水平可以促进酶活性.结论 CsTPx可在大肠杆菌中进行功能性表达,其产物具有良好的免疫学和生物学活性.
关键词： 华支睾吸虫 硫氧还蛋白过氧化物酶 组织定位 酶活性 -
院前救护专业角色与自我和组织定位冲突的调查
目的：了解院前救护人员的专业角色与自我和组织定位相冲突的情况。方法对328名院前急救医生和护士采取自制问卷调查，包括院前救护人员年龄、性别、学历、职称、所在单位等一般资料，专业角色和自我定位的冲突的情况，急救网络常规、规定与个人的职业自我定位及职业目标相冲突的情况。结果39.9%的医护人员认为对患者的大利益有不同看法时会与同事发生争论；护士在履行职责时传染病危险发生率（21.4%）高于医生（15.9%），而医生受到他人威胁的发生率（24.4%）高于护士（17.6%），差异均具有统计学意义；59.4%的医护人员认为在履行职责时应该牺牲个人的大利益；23.5%的医护人员曾在私人场合或时间被认出并要求施救；11.3%曾未完成交接而将患者放下单方面撤离；27.7%医护人员认为急救网络常规、规定与本人的职业自我定位及职业目标相冲突。结论院前急救人员的专业角色与自我和组织定位存在一定程度上的伦理学冲突，管理者在给予更多的理解与关注的同时，需加强培训和调整管理制度。
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机器人优于2D和3D腹腔镜
自1990年以腹腔镜为代表的微创外科技术应用于胃肠外科以来，微创胃肠外科相继经历了2D腹腔镜、3D腹腔镜和机器人外科时代。特别是在2000年达芬奇机器人手术系统问世以后，胃肠外科进入一个更精准、更微创和更智能的新时代。2002年，Weber施行了第1例达芬奇机器人右半结肠及乙状结肠切除术［1］。同年 Hashizume 等［2］又施行了第1例达芬奇机器人辅助胃癌根治术。到2014年12月31日前，根据Intuitive Surgery的新数据，全球装机总数达3266台，其中美国2223台，欧洲549台，在亚洲及其他地区494台，中国大陆29台、香港9台。第三军医大学西南医院于2010年3月在国内较早引进达芬奇机器人外科手术系统，我中心率先在国内开展达芬奇机器人胃癌根治术和结直肠癌根治术。到目前为止，已累计完成达芬奇机器人胃肠手术800余例，其中胃癌根治手术361例，结直肠癌根治手术442例，积累了较丰富的经验［3-5］。通过临床实践，我们充分体会到，达芬
奇机器人手术系统具有许多2D甚至3D腹腔镜技术无法比拟的优势：（1）术者通过操作台直接看到放大10～15倍的三维立体术野，可以清晰准确地进行组织定位和器械操作，尤其对于胃肠道恶性肿瘤保功能手术，可以清晰辨认自主神经并予以保护；（2）机器人仿真手腕手术器械具有7个自由度，同时消除不必要的颤动，所以手术器械完全达到人手的灵活度和准确度，可以进行人手不能触及的狭小空间的精细手术操作；（3）术者可以自行调整镜头和辅助机械臂，不仅能够大限度达到眼手协调，而且减少了腹腔镜手术对团队的依赖；（4）术者采取坐姿进行手术操作，有利于完成长时间而复杂的手术，并且延长了主刀医生的手术生命。其他优点还包括：远离手术台、减少术者感染相关传染性疾病的风险以及异地远程手术等。 -
载脂蛋白M的组织定位及其生物学意义的研究进展
载脂蛋白M(ApoM)是1999年由瑞典隆德大学的Xu和Dahlback[1]发现并从乳糜微粒中分离、克隆出来的一种新型的载脂蛋白.正如此前命名载脂蛋白L(apolipoprotein L,ApoL)一样,将其命名为ApoM.其相对分子量为26×103.根据序列检索结果分析,ApoM属于Lipocalin蛋白超家族成员[2].ApoM主要存在于高密度脂蛋白,同时也是富三酰甘油和低密度脂蛋白的组成部分.
