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小分子RNA干扰雷帕霉素靶蛋白基因表达对百草枯致大鼠肺纤维化的影响
目的 探讨小分子RNA干扰雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达对百草枯致大鼠肺纤维化的影响.方法 体外培养人胚肾细胞HEK-293,构建mTOR小干扰RNA(mTOR-siRNA)表达质粒转染慢病毒,并以与mTOR基因无同源性的非特异性序列质粒作为对照.将72只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为生理盐水(NS)对照组、百草枯模型组、mTOR无关序列组、mTOR-siRNA组,每组18只.经腹腔注射20%百草枯溶液15 mg/kg制备百草枯中毒动物模型,NS对照组腹腔注射等量NS;mTOR无关序列组和mTOR-siRNA组大鼠分别经气道内注入滴度为1×109 TU/mL的慢病毒溶液50μL,NS对照组和百草枯模型组注入等量NS.各组分别于7、14、28 d处死6只大鼠取肺组织,光镜下观察病理学改变及纤维化情况;采用碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)水平;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)分别检测肺组织mTOR的mRNA和蛋白表达.结果 光镜下显示,NS对照组肺组织无明显病理学改变;百草枯模型组和mTOR无关序列组肺组织结构破坏,有大量炎性细胞浸润,并出现大量基质胶原及纤维组织增生,且随时间延长逐渐加重,符合百草枯致肺组织纤维化过程;而mTOR-siRNA组沉默mTOR基因后肺组织病理学及纤维化改变明显减轻.百草枯模型组和mTOR无关序列组肺组织HYP水平以及mTOR mRNA和mTOR蛋白表达量均呈时间依赖性持续升高,且明显高于NS对照组相应时间点;而mTOR无关序列组与百草枯模型组无明显差异.mTOR-siRNA组沉默mTOR基因后能抑制百草枯中毒导致肺组织中HYP的生成,以及mTOR mRNA和mTOR蛋白的表达量升高,其值接近NS对照组水平,在7 d或14 d时与百草枯模型组出现统计学差异,并持续至28 d〔7 d:HYP(μg/mg)为1.13±0.06比1.25±0.07;14 d:HYP(μg/mg)为1.19±0.09比1.29±0.12,mTOR mRNA(2-ΔΔCt)为0.99±0.11比1.94±0.12,mTOR蛋白(灰度值)为0.39±0.08比0.75±0.09;28 d:HYP(μg/mg)为1.28±0.06比1.40±0.05,mTOR mRNA(2-ΔΔCt)为1.15±0.13比2.85±0.15,mTOR蛋白(灰度值)为0.45±0.10比0.86±0.12,均P<0.05〕.结论 慢病毒介导的mTOR-siRNA可有效抑制百草枯中毒大鼠肺组织中mTOR表达,减轻百草枯致肺组织损伤和纤维化程度.
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T淋巴细胞内mTOR/S6途径在难治/复发再生障碍性贫血发病机制中的作用
目的 研究难治/复发再生障碍性贫血(AA)患者骨髓T淋巴细胞内雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/核糖体蛋白S6途径活化情况,以及mTOR抑制剂雷帕霉素(RAPA)和CD28抗原阻断剂CTLA-4免疫球蛋白(CTLA-41g)对此途径的影响.方法 采集13例难治/复发AA、8例初治重型AA(SAA)以及1O例缺铁性贫血(IDA)患者(对照组)的骨髓标本,加入RAPA和CTLA-41g进行孵育,用流式细胞术检测加药前后每组患者CD3+T淋巴细胞胞质内磷酸化mTOR(p-mTOR)、磷酸化S6(P-S6)和干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平,并分析其与疾病的关系.结果 ①难治/复发AA组患者骨髓CD3+T细胞胞内p-mTOR、P-S6及IFN-γ的表达水平较对照组显著升高(P值均＜0.01).②初治SAA患者p-mTOR和p-S6的表达水平低于难治/复发AA组(P值均＜0.01),而与对照组比较差异无统计学意义(P值均＞0.05);初治组IFN-γ的表达水平明显高于对照组(P值均＜0.01).③RAPA和CTLA-41g作用后,难治/复发AA患者p-mTOR、p-S6及IFN-γ的表达水平较用药前明显下降(P值均＜0.01).结论 CD3+T淋巴细胞内mTOR/S6途径在难治/复发AA患者中活化.RAPA和CTLA-41g均可抑制难洽/复发AA患者体内mTOR/S6途径,并下调IFN-γ.CD28/mTOR/S6和IFN-γ途径参与难治/复发AA的免疫发病机制,并且对RAPA和CTLA-41g敏感,以CD28、mTOR为治疗靶点,临床应用RAPA和CTLA-4Ig治疗此类AA患者值得探索.
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雷帕霉素对U937细胞抗肿瘤效应的研究
雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是细胞生长中心的调控者,它介导的信号传导通路异常是某些白血病的重要发病机制[1].雷帕霉素进入细胞后与FKBP(他克莫司结合蛋白)形成"功能获得性"复合物RAP-FKBP,强烈抑制mTOR的催化活性.阻断了信号的下传,终引起细胞周期蛋白合成的改变[2],为雷帕霉素靶向杀伤肿瘤细胞提供了理论依据.
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自噬相关蛋白在肺鳞癌和腺癌组织中的表达及相关性研究
目的：探讨肺鳞癌和腺癌中自噬相关蛋白Beclin1、自噬相关蛋白1（Atg1）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达情况及其相关性分析。方法采用免疫组织化学Envision二步法，检测82例肺癌（鳞癌和腺癌）组织及17例癌旁正常肺组织中Beclin1、Atg1、mTOR的表达情况，并分析其表达的相关性。结果肺癌组织中Beclin1的阳性表达率低于正常组（52.44%vs 94.12%，P＜0.01），在淋巴结转移、TNM分期、不同分化程度情况的肺癌组织中阳性表达率差异有统计学意义，且随肿瘤恶变和侵袭程度的增强呈递减趋势。肺癌组与正常组Atg1阳性表达率比较差异无统计学意义（64.71%vs 46.34%），但在肿块较大肺癌组织中的阳性表达率低于肿块较小者（P<0.01）。肺癌组mTOR阳性表达率高于正常组（53.66%vs 5.88%，P＜0.01），有淋巴结转移的肺癌组织中mTOR阳性表达率高于无淋巴结转移者（P<0.01）。相关性分析显示，鳞癌中Beclin1与Atg1表达呈正相关（r=0.609），Beclin1、Atg1分别与mTOR呈负相关（r分别为-0.617、-0.444）；肺腺癌中，Beclin1与Atg1表达呈正相关（r=0.458），Beclin1、Atg1分别与mTOR呈负相关（r分别为-0.497，-0.541），均P<0.01。结论 Beclin1、Atg1、mTOR在肺鳞癌和腺癌组织中的表达呈现较好的相关性，提示肺鳞癌和腺癌的临床病理学变化与自噬有关。
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人结直肠癌组织中 mTOR、HIF-1α、PKM2的表达及临床意义
目的：观察人体结直肠癌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和酪氨酸激酶M2（ PKM2）的表达，并探讨其临床意义。方法外科手术及纤维结肠镜切除并经病理确诊的结直肠癌标本87例为结直肠癌组，正常结直肠组织30例为正常结直肠组，运用免疫组化方法检测其mTOR、HIF-1α、PKM2的表达。结果结直肠癌组mTOR、HIF-1α及PKM2的平均光密度值均显著高于正常结直肠组（分别为5165．6±391．8 vs．1215．8±153．4，4474．4±255．9 vs．1633．0±115．6，9736．0±128．7 vs．4031．8±477．1， P ＜0．05）。结直肠癌患者不同性别、年龄、分化程度下mTOR、HIF-1α及PKM2表达率无统计学差异（ P ＞0．05）；不同Dukes分期和淋巴转移下mTOR、HIF-1α及PKM2的表达率有统计学差异（ P ＜0．05）；不同浸润深度下mTOR和PKM2的表达率有统计学差异（ P ＜0．05），而HIF-1α表达率差异无统计学意义（ P ＞0．05）。结直肠癌组织中mTOR与HIF-1α、PKM2蛋白间呈正相关（ r ＝0．247、0．512， P ＜0．05），且HIF-1α与PKM2亦呈正相关（ r ＝0．568， P ＜0．05）。结论人体结直肠癌组织中mTOR、HIF-1α及PKM2的相对表达量均显著高于非肿瘤人群，且其表达与结直肠癌的增殖转移相关，可作为结直肠癌靶向治疗作用位点。
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细胞自噬的分子调控机制研究进展
细胞自噬是目前生物医学广泛研究的热点之一,它是一种由溶酶体介导的细胞内成分自我降解的过程,是真核生物中一种普遍的生命现象.在真核细胞中,自噬处在一个较低的水平上,起到持家的作用,例如降解胞内受损的细胞器及无功能蛋白,以此作为细胞内能量的来源,维持细胞内环境的稳态.自噬的上调出现在外部坏境的改变,如饥饿、激素失衡和氧化应激等,或者是内部需求的增加,如去除蛋白质聚集体等情况[1-2].越来越多的证据表明,自噬与心脏病、癌症和许多神经退行性疾病有关.据Hundeshagen等[3]报道,地高辛在治疗心衰的过程中可明显激活自噬;但在永久性大脑中动脉栓塞模型中,自噬过度激活可诱导细胞发生死亡,加重脑损伤[4].自噬在疾病中的作用比较复杂,因此,明确自噬的发生机制,有助于诱导自噬在疾病的发生发展过程中发挥保护作用.为此,本文对细胞自噬的过程及其分子调控机制进行阐述.
关键词： 细胞自噬 雷帕霉素靶蛋白 磷脂酰肌醇-3-激酶 Beclin1 -
1,25-二羟维生素D3调控mTOR通路对UUO大鼠肾间质纤维化作用的研究
目的:观察1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠p-mTOR表达的影响及其机制.方法:54只健康雄性wistar大鼠随机分为假手术组(n=18)、UUO模型组(n=18)、1,25(OH)2D3治疗组(n=18).每组于术后1、3、7天分批处死大鼠各6只,留取造模侧肾脏进行相关检测.用苏木精-伊红染色(HE)观察肾间质纤维化的程度.采用免疫印迹(western-blot)法检测p-mTOR在各组大鼠造模侧肾脏的表达情况.结果:UUO模型组大鼠的肾脏组织中p-mTOR的表达高于假手术组(P＜0.05),而1,25(OH)2D3治疗组p-mTOR的表达低于UUO模型组(P＜0.05).结论:mTOR通路可能参与了肾间质纤维化的发生及发展.1,25(OH)2D3可通过调控mTOR通路减缓肾脏纤维化的进展.
关键词： 1 25-二羟维生素D3 肾间质纤维化 雷帕霉素靶蛋白 -
颗粒蛋白前体与胰岛素抵抗及自噬的相关研究进展
颗粒蛋白前体(PGRN)高表达于人体内多个器官和组织,参与多种疾病的发生发展.近几年国内外研究表明PGRN在调节葡萄糖代谢和胰岛素敏感性中发挥着重要作用,并提出PGRN是通过氧化应激及内质网应激等相关途径抑制自噬活性引起胰岛素抵抗,对于相关机制的研究可能为2型糖尿病的防治提供新的靶点.
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麦粒灸对自发性高血压大鼠血压及mTOR蛋白表达的影响
目的：观察麦粒灸对自发性高血压大鼠血压及雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的影响，以对其降压机制作初步探讨。方法将12周龄的自发性高血压大鼠随机分为模型组、麦粒灸组，另取12周龄 SD大鼠设为正常组。干预前测量每只大鼠血压，并记录。各组相同环境饲养。模型组、正常组不施灸，麦粒灸组每天同一时间段取“足三里”“曲池”进行麦粒灸治疗，每穴灸5壮，每日1次，共28 d。末次施灸结束，再测各组大鼠血压变化并记录。取各组大鼠心脏，用Westernblot检测心肌组织mTOR表达水平。结果12周时，模型组和麦粒灸组血压明显高于正常组(P<0.01)，模型组和麦粒灸组血压差异无统计学意义(P>0.05)。16周时，麦粒灸组血压明显降低，与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。麦粒灸组 mTOR蛋白表达明显升高，与模型组和正常组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论麦粒灸可能通过调控 mTOR蛋白的表达，降低自发性高血压大鼠血压。
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不同镀膜磁体对牙龈成纤维细胞活性及mTOR表达的影响
目的评价各种镀膜钕铁硼磁体的生物相容性.方法将托槽、不同镀膜及未镀膜磁体加入DMEM中制备成浸提液,分别以5%和10%浓度加入培养的大鼠牙龈成纤维细胞,以AlamarBlueTM法测细胞活性.对加入10%浸提液的培养细胞做雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的免疫印记分析.结果结果显示5%托槽、镀氮化钛磁体组的AlamarBlue还原率分别为63.0±3.4%、66.5±3.0%,与对照组64.2±3.4%无差异(P＞0.05);10%托槽、镀氮化钛磁体组的还原率分别为62.0±2.17%、64.9±0.5%,与对照组比较65.7±1.0%无差异(P＞0.05);而其余各组培养细胞的AlamarBlue还原率与对照组有显著性差异(P＜0.05).免疫印记结果显示,mTOR表达的平均灰度值托槽组77.0±2.85与镀氮化钛组81.2±2.60无显著性差异(P＞0.05);镀镍组40.5±1.94,镀铜组15.0±2.01和未镀膜磁体组24.7±2.10与托槽组差异显著(P＜0.01).结论镀氮化钛钕铁硼磁体具有良好的生物相容性.
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大鼠骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达与4周耐力运动的影响
背景:已有研究提示,雷帕霉素靶蛋白信号调控骨骼肌蛋白翻译过程,在运动引起的蛋白质合成变化中起作用.目的:观察耐力运动对骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达的影响,以及雷帕霉素靶蛋白在运动诱导骨骼肌生长中的作用途径.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-10/12北京体育大学运动人体科学学院实验室完成.材料:健康雄性、SPF级2月龄的SD大鼠12只,体质量180～200 g,随机为运动组和对照组,每组6只.方法:运动组先进行适应性训练:上坡跑,坡度为5°,速度分别为10,15,20 m/min强度递增的跑台运动,30 min/次, 1次/d,共6 d;然后进行正式运动:上坡跑,跑台坡度5°,速度20 m/min,60 min/次,1次/d,6 d/周,共4周的跑台运动.②对照组均不运动,其他生活条件与运动组相同.主要观察指标:采用反转录-聚合酶链反应方法测定腓肠肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达,采用BCA方法测定腓肠肌总蛋白含量.结果:实验纳入的12只大鼠全部完成训练,均进入结果分析,中途无脱落.①运动组腓肠肌总蛋白含量显著高于对照组 (67.0±11.7, 46.8±7.9;P < 0.05).②运动组雷帕霉素靶蛋白表达量显著高于对照组表达量(0.43±0.04, 0.25±0.03;P < 0.05).结论:耐力运动后大鼠腓肠肌总蛋白含量上升,骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达上升,提示雷帕霉素靶蛋白可能参与肌肉生长对运动适应的调控.
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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白及其与肝脏肿瘤关系的研究进展
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶.在细胞的生长、分化、增殖、迁移和存活上扮演了重要的角色.由于mTOR信号通路在细胞周期进程中发挥了重要作用,而细胞周期进程调节异常与许多疾病尤其是癌症的发生、发展有关,因此mTOR信号通路的失调可引起多种癌症.
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二甲双胍抗肿瘤机制的研究进展
二甲双胍是临床中治疗2型糖尿病常用的一线治疗药物，近年研究发现，二甲双胍不仅有降血糖的作用，还有抑制肿瘤细胞增殖的作用，其抗肿瘤机制的焦点主要集中在激活单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶途径、降低循环中胰岛素及胰岛素样生长因子水平、诱导细胞周期停滞、抑制血管生成及炎症反应、抑制氧自由基生成、抑制肿瘤干细胞增殖、联合相关药物增强对放疗及化疗的敏感性等，以此抑制肿瘤细胞增殖，减少糖尿病患者肿瘤的发病风险。目前，二甲双胍的抗肿瘤作用及其分子机制的研究已成为热点，本文就近年来二甲双胍抗肿瘤机制进行简要综述。
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反义mTOR基因局部转染对移植静脉内膜增生的影响
目的:观察反义雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因转染对移植静脉内膜增生的影响.方法:聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)和聚乙烯醇(PVA)包载制备纳米级粒子混合物.建立自体静脉移植模型,随机分成转基因组、空载体组、对照组.转基因组转染纳米粒子包载的反义mTOR基因,空载体组转染纳米粒子包载的空载体,对照组不予特殊处理.分别于术后3、7、14、28 d取材,常规HE、弹力纤维VG染色,RT-PCR、免疫组织化学染色、Western blot检测mTOR基因的mRNA及蛋白的变化,TUNEL法观察血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的动态变化.结果:转基因组内膜中mTOR蛋白产物表达较其他组明显减少(P＜0.05);转基因组内膜增生程度在术后7、14、28 d较其他组明显减少(P＜0.01);转基因组凋亡细胞较其他组明显增高(P＜0.05).结论:反义mTOR基因的表达能够有效抑制自体移植静脉内膜的增生,促进VSMC的凋亡.
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mTOR/P70 S6激酶信号通路在腮腺腺癌发生中和作用
目的:研究mTOR/P70 S6激酶信号通路激活在腮腺腺癌发生中的作用.方法:用免疫组织化学方法及Western印迹分析测定腮腺腺癌中mTOR和P70 S6激酶的表达.结果:免疫组化与Western印迹分析的结果一致,与正常组织相比,腮腺腺癌中mTOR和P70 S6激酶的表达明显增加.结论:口腔腮腺腺癌mTOR和P70 S6激酶的表达增加可能是介导腮腺腺癌发生的主要机制之一.
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mTOR反义RNA真核表达载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达
目的:构建哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的反义RNA真核表达载体,观察其对血管平滑肌细胞(VSMC)功能的影响.方法:提取人VSMC总RNA,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增mTOR基因cDNA序列,经pGEM-T载体克隆后双酶切,将cDNA序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGP-C1,构建mTOR基因反义RNA真核表达载体.转染VSMC,采用Westem blot法检验反义表达载体对mTOR蛋白表达的影响,流式细胞仪检测细胞周期的变化.结果:经RT-PCR获得664 bp产物,T载体克隆后,经DNA测序,确定该片段为mTOR基因cDNA,进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-mTOR,测序证明序列正确后转染VSMC,证实其能够显著抑制mTOR蛋白产物表达,VSMC的分裂、增殖过程受阻.结论:已经成功构建mTOR基因的反义RNA真核表达载体.
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雷帕霉素靶蛋白参与缺血后处理减轻大鼠骨骼肌缺血/再灌注损伤
目的 探讨哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路在缺血后处理(I-postC)减轻大鼠骨骼肌缺血再灌注(I/R)损伤中的表达和意义.方法 48只雄性健康Wistar大鼠,无创动脉夹夹闭右侧股动脉4 h,松夹再灌注12 h或24 h建立大鼠右后肢I/R损伤模型,随机分为I/R组(n=16)、缺血预处理(IPC)组(5 min缺血/5 min再灌,3个循环,n=16)及缺血后处理(IpostC)组(1 min再灌/1 min缺血,3个循环,n=16).分别于再灌注后12 h、24 h取标本.观察骨骼肌组织形态学、湿,干重比、丙二醛(MDA)及髓过氧化物酶(MPO)的变化,Western blot和免疫组织化学方法检测mTOR的表达.结果 I-postC和IPC组的骨骼肌水肿明显减轻,MDA和MPO指标亦明显降低,与I/R组比较差异显著(P＜0.05).I-postC组和IPC组之间无显著差异(P＞0.05).I-postC和IPC组mTOR蛋白产物表达显著增加,与I/R组比较差异显著(P＜0.05).结论 I-postC减轻大鼠后肢骨骼肌I/R损伤,与缺血预处理可能存在共同的作用机制,及通过激活mTOR信号转导通路发挥作用.
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PI3K/mTOR/自噬通路在间歇性低氧加重全脑缺血大鼠神经损伤中的作用
目的 比较常态大鼠和间歇性低氧大鼠全脑缺血再灌注后磷脂酰肌醇3激酶(PI3?K)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及Beclin?1表达变化,探讨PI3K/mTOR/自噬通路在间歇性低氧加重全脑缺血大鼠神经损伤中的作用.方法 80只雄性Wistar大鼠采用数字随机法随机分成假手术组(SO组)、单纯脑缺血再灌注组(I/R组)、间歇性低氧7 d脑缺血再灌注组(IH7+I/R组)以及间歇性低氧21 d脑缺血再灌注组(IH21+I/R组),每组20只.造模前,IH7+I/R组、IH21+I/R组分别给予间歇性低氧7和21 d.采用改良的Pulsinelli四血管阻断法制备脑缺血再灌注模型,HE染色、电镜观察海马CA1区神经细胞形态变化;免疫组织化学法、实时定量PCR检测大鼠脑组织海马CA1区PI3?K、mTOR和Beclin?1表达情况;Morris水迷宫测试检测大鼠学习记忆功能.结果 与SO组比较,I/R组大鼠在各时间点出现神经元结构损伤,存活神经细胞数量减少,大鼠的学习记忆功能下降;免疫组化示PI3?K、mTOR和Beclin?1免疫阳性细胞数增加(P<0.05);实时定量PCR示PI3?K、mTOR和Beclin?1表达增强(P<0.05).与I/R组比较,IH7+I/R组和IH21+I/R组大鼠在各时间点神经元结构损伤加重,存活神经细胞数量减少,大鼠的学习记忆能力下降;免疫组化示PI3?K、mTOR和Beclin?1免疫阳性细胞数增加(P<0.05);实时定量PCR示PI3?K、mTOR和Beclin?1表达增强(P<0.05);上述变化在IH21+I/R组更为显著(P<0.05).结论 间歇性模式低氧可加重全脑缺血再灌注损伤后神经损伤,其机制与PI3K/mTOR/自噬通路活化有关.
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矫治力对兔牙周组织中雷帕霉素靶蛋白和核糖体S6蛋白激酶活性的影响
目的 探讨雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/S6蛋白激酶(p70 S6K)信号通路在兔正畸牙移动过程中对牙周组织改建的作用.方法 选用12只日本大耳白兔(体质量2.0 kg左右),雌雄不限,建立正畸牙移动的动物模型,按照3,5,7,14d随机分组,每组3只,上颌右侧戴矫治器组为实验组,左侧未戴矫治器组为对照组,采用Western免疫印迹的方法,观察牙周组织中mTOR及p70 S6K蛋白表达的变化.结果 戴矫治器3d后牙周组织中mTOR和p70 S6K表达增强,7d达高峰,14d后有所下降,与对照组比较有显著差异(P<0.01).结论 在矫治力作用下,兔牙周组织中mTOR及p70 S6K表达均明显增强,导致牙周组织发生一系列变化.
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自噬介导人舌鳞癌细胞对顺铂耐药的作用及其机制研究
观测自噬在人舌鳞癌细胞对顺铂（DDP）耐药产生中的作用及分子机制，并进一步研究抑制自噬是否能够逆转肿瘤细胞对DDP的耐药，MTT法检测舌鳞癌Tca8113细胞的存活率，western‐blot和RT‐PCR法分别检测各实验组细胞外信号调节激酶（ERK）及雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达情况。结果显示DDP联合氯喹组较DDP组细胞存活率低，差异有统计学意义（P＜0．05），蛋白ERK的表达显著降低，mTOR的表达显著升高。因此，自噬抑制剂氯喹能够提高顺铂对舌鳞癌细胞的敏感性，增强了DDP的抗肿瘤作用。
