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快检设备精品推荐
拜发分析系统销售北京有限公司产品1:RIDASCREEN(R)葡萄球菌肠毒素检测试剂盒检测技术:酶联免疫技术检测对象:葡萄球菌肠毒素适用条件:孵育时间为2小时45分钟,符合国家标准.产品性能:适宜大批样品集中检测,具有快速、操作简便、无需贵重仪器设备,且对样品纯度要求不高等特性.
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MicroFast?金葡肠毒素快速检测卡让5种肠毒素无处匿身--访北京良润生物科技有限公司总经理刘磊
本着“良心事业，润泽民生”的宗旨和“以技术为引领，以人才为依托，专注食品安全，打造健康生活”的理念，北京良润生物科技有限公司（以下简称“良润生物”）一直致力于提升微生物快速检测技术，研发多种优质产品。近日，良润生物推出了检测金黄色葡萄球菌肠毒素（简称“金葡肠毒素”）的新品--MicroFast?金葡肠毒素快速检测卡，—款能够检测出5种肠毒素SEA/SEB/SEC/SED/SEE的国际领先产品，新产品的检测原理是怎样的？与传统方法相比有哪些优势？带着众多疑问，本刊记者采访了北京良润生物科技有限公司总经理刘磊先生。
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重组金黄色葡萄球菌肠毒素A的表达及鉴定
目的 通过基因重组方式获得高纯度、高含量重组金黄色葡萄球菌肠毒素A(rSEA).方法 将金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因片段插入pET28a载体中,测序并正确鉴定后,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达目的蛋白.重组蛋白用Ni-NTA His蛋白亲和柱纯化.结果 SDS-PAGE结果表明成功表达了分子量约为30 kD的重组蛋白,经Western blot和小鼠生物学鉴定,表达产物为重组金黄色葡萄球菌肠毒素A,并且具有较好的免疫原性,为制备抗金黄色葡萄球菌肠毒素A单克隆抗体及建立相应的免疫学检测方法奠定了基础.结论 构建的rSEA表达载体稳定,可高效表达目的rSEA蛋白.
关键词： 重组金黄色葡萄球菌肠毒素A 葡萄球菌肠毒素 原核表达 -
食品中金黄色葡萄球菌检验方法浅析
金黄色葡萄球菌在自然界中有着十分广泛的分布,能造成食品污染以及细菌性食物中毒,因此在食品检测中必须重点关注金黄色葡萄球菌的检测.目前,金黄色葡萄球菌的检测方法主要包括反向胶乳凝结法、PCR法、酶联免疫吸附法等,检测人员必须深入了解金黄色葡萄球菌的生物学特性、流行病学特点、致病性等才能保证检测的顺利进行.
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葡萄球菌C型肠毒素免疫胶体金试纸的研制
葡萄球菌肠毒素(staphyloccucal enterotoxin,SE)是由金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)产生的蛋白质外毒素,是引起细菌性食物中毒的主要原因之一,人体在食入1～6 h后会出现呕吐、腹泻等典型症状[1].SE可分为A～I多个血清型,而葡萄球菌C型肠毒素(staphyloccucal enterotoxin C,SEC)是引起食物中毒的常见肠毒素血清型,目前针对SEC的检测主要依靠传统方法,费时费力[2],在实际检测应用中存在局限性.
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金黄色葡萄球菌食物中毒株遗传特征分析
目的 对石家庄市2007-2013年金黄色葡萄球菌食物中毒株进行分子分型、肠毒素检测和耐药性分析,了解金黄色葡萄球菌食物中毒株的遗传学特征. 方法 利用多位点序列分型(MLST)技术对食物中毒事件中检出的金黄色葡萄球菌进行分子分型,采用金黄色葡萄球菌肠毒素ABCDE分型检测试剂盒对分离的金黄色葡萄球菌进行葡萄球菌肠毒素分型,采用BD Phoenix生化药敏鉴定仪对分离株进行药敏检测. 结果 47株食物中毒株金黄色葡萄球菌分14个MLST型,分别为:ST15、ST59、ST5、ST398、ST6、ST1003、ST88、ST30、ST338、ST464、ST7、ST72、ST804和ST9.葡萄球菌肠毒素类型分别为SEE,SEA-SEB-SEC,SEA-SED-SEE,SEB-SEC,SEC-SED-SEE,SEA-SEE和SEA-SEB-SEDSEE.93.6％(44/47)的食物中毒株产β内酰胺酶,97.9％(46/47)的分离菌株对青霉素耐药,对其他11种受试药物表现出不同程度的敏感,少数菌株表现为耐药. 结论 多个MLST型的金黄色葡萄球菌均可引起食物中毒,食物中毒株可产多种葡萄球菌肠毒素,对多种抗菌药物敏感.
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金黄色葡萄球菌中毒性休克毒素-1的临床研究进展
中毒性休克综合征（toxic shock syndrome，TSS）是一类起病急骤、进展迅速的严重感染性疾病，以发热、皮疹、病后脱皮和脱屑、低血压及三个以上器官功能受损为特征，并伴有较高的死亡率。近年TSS流行病学的一个重要的改变是非月经相关性TSS日益增多，尤其是外科、产科及整形美容手术后的病例已明显
增加［1］。
中毒性休克毒素-1（toxic shock syndrome toxin-1，TSST-1）是由噬菌体Ⅰ群金黄色葡萄球菌（ Staphylococcus aureus，SA）产生的外毒素，属于致热原性超抗原家族，能够引起TSS。 Li等［2］的研究表明，TSST-1和葡萄球菌肠毒素A（ Staphylococcal enterotoxin A，SEA）的超抗原活性及致病力，不会被加热和消化酶破坏。TSST-1通过激活T淋巴细胞使其活化、增殖，并释放大量的炎性细胞因子引起强烈的免疫应答，终导致炎症失控和多器官的损害。 TSST-1还能直接损害枯否细胞，抑制内毒素脱颗粒反应，使内毒素在体内蓄积；扩大内毒素的致死效应，引起内毒素休克［3］。 Peterson等［4］的研究表明，阴道上皮细胞对SA的炎性应答可以引发大范围的固有免疫活化，从而介导TSST-1侵入阴道黏膜的过程。 Batisson等［5］发现TSST-1能够通过提高脑内前列腺素E2（PGE2）浓度及激活caspase依赖的神经元凋亡，来对脑组织产生长期的毒性作用，产生不可逆的脑损伤。 Li等［6］发现在MSSA68111（一种对甲氧西林敏感、能同时合成PVL／TSST-1的SA）中的 TSST-1基因（ tst）含有一种特殊的金葡菌致病岛SaPl68111，SaPl68111可能来自于多种已知SA致病岛（ SA patho-genicity island，SAPL）的基因重组，极具活动性，故可使其他菌株受染。 -
一起由葡萄球菌肠毒素引起食物中毒的调查报告
1999年3月12日,天津经济技术开发区怡园小区工程建筑工地的12名工人,因误食变质猪肉炒的菜而导致一起食物中毒.根据流行病学调查、临床表现及实验室诊断,确定为金黄色葡萄球菌肠毒素所致,现将调查结果报告如下:1 流行病学调查3月12日下午6时左右,开发区医院收治了一些均因恶心、呕吐等胃肠道症状就诊的患者,经询问患者为怡园小区工程建筑工地工人,共计12人,他们均在食用该工地临时食堂做的午餐后1～3小时内相继出现上述症状.经现场调查发现:该工地食堂为临时搭建小屋,顶部用石棉瓦搭成,四面通风,无门,无下水及照明设施,更无冷藏、防蝇、防尘等设施.经询问得知该组采购员于3月11日中午以每斤1.50元的便宜价格购得"血脖肉"3斤,当日中午炒菜仅用去一半,在没有冷冻的情况下,次日(3月12日)中午又将剩余生肉烹制食用,12人在食用后全部发病.该12名工人为工地的水暖工组,一日三餐均在这个小食堂就餐,在发病前72小时内无在外就餐史,临近的另一组工人不在此吃饭的无一人出现中毒症状.12人在医院经抗菌、对症等治疗后,于次日凌晨治愈全部出院,无死亡病例,病程1～2天.
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金黄色葡萄球菌肠毒素与多器官功能障碍综合征
临床资料表明,革兰阳性(G+)菌脓毒症的发病率逐年上升,至20世纪90年代已达脓毒症发病率的40%以上,并仍有升高趋势.其中金黄色葡萄球菌(金葡菌)发病率位居首位,是烧伤创面感染、急性肝衰竭的重要病原菌.由于其致病因素复杂、耐药性不断增强,特别是中间型抗万古霉素金葡菌的出现,金葡菌感染所致脓毒症及多器官功能障碍综合征(MODS)的防治已成为现代创伤外科和危重病医学面临的棘手难题之一.我们回顾性调查了近5年间从创面分离的病原菌1 661株,其中金葡菌分离率从1995年的17.7%(居第3位)上升为1999年的29.3%(居第1位);此外,278例次静脉内置管的严重烧伤患者,7例次发生导管脓毒症(5例死亡),其分离病原菌中金葡菌占50%以上.由此可见,金葡菌是烧伤感染中常见的菌种之一,其中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的耐药性强,易引起脓毒症和MODS等致死性并发症.细菌学研究表明,可溶性外毒素的产生是G+菌感染的重要标志之一,在G+菌感染性疾病的发生、发展中具有重要意义.其中金葡菌肠毒素因其“超抗原”(superantigen)特性以及在中毒性休克综合征、MODS发病中的特殊意义而倍受关注.
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葡萄球菌肠毒素联合热灌注化疗治疗1OO例恶性腹水的临床研究
目的:探讨腹腔热灌注化疗联用葡萄球菌肠毒素(staphyloentero-toxin,SE)行热灌注生物化疗对腹盆腔晚期恶性肿瘤并发腹水的增效减毒的,临床治疗效果.方法:100例腹盆腔晚期恶性肿瘤并发恶性腹水的患者利用随机、前瞻的方法分为对照组50例行热灌注化疗,治疗组50例行热灌注化疗联用SE.观察对腹水的治疗效果、生存期、细胞免疫的影响及毒副作用等.结果:治疗组、对照组的腹水有效率分别86.0%(43/50)及68.0%(34/50)(x2=4.574,P=0.032),其中治疗两次后治疗组腹水的全消率占该组的82.5%(33/40),对照组为58.1%(18/31)(x2=9.004,P=0.003).两组总生存期无统计学显著性差异(P=0.548).治疗组的KPS改善率为84.0%(42/50).对照组为66.0%(33/50),两组改善率相比有显著差异(x2=4.320,P=0.038);治疗组患者细胞免疫的改善作用优于对照组.治疗组与对照组的Ⅱ度以上的白细胞下降的发生率分别为8.0%、24.0%,有显著性差异(x2=4.762,P=0.029);同时,两组Ⅱ度以上血小板下降的发生率分别为8.0%、26.0%,有显著性差异(x2=5.741,P=0.017),治疗组的血小板下降发生率低于对照组.治疗组的血液毒性明显低于对照组.结论:腹腔热灌注化疗是治疗腹盆腔晚期肿瘤并发腹水的一个简单、安全、经济、有效的方法,联用SE可起到增效减毒的效果,且可减少治疗次数,可提高患者的生存质量.
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PCR技术在食物中毒病原菌检测中的应用
金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素已被视为食物中毒的主要因素之一,引起世界各国的普遍关注,因此建立快速检验方法势在必行.一般传统方法的整个操作过程繁杂,时间长.我们将PCR技术应用于食物中毒中金葡菌肠毒素的检测与分型,不仅缩短了检测时间,提高了检出率,而且能够对肠毒素进行分型,可为流行病学调查提供准确依据.
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金黄色葡萄球菌肠毒素的研究进展
葡萄球菌是革兰阳性球菌中的一种,广泛分布于自然界,如:空气、水、土壤等,同时存在于人体、动物体的皮肤及其与外界相通的腔道中.绝大部分不致病,少数可引起人类感染,其中的金黄色葡萄球菌致病力强,主要是因为其产生大量的侵袭性物质,如:各种酶类,多种毒素和菌体的一些成分等等.金黄色葡萄球菌产生的主要酶类有:凝固酶、耐热核酸酶、葡激酶等;产生的主要毒素有:肠毒素、葡萄球菌溶素、杀白细胞素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1等.目前国内外对金黄色葡萄球菌肠毒素的研究主要集中在检测方法和作为超抗原的致病性两个方面.
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金黄色葡萄球菌肠毒素检测方法的应用及进展
金黄色葡萄球菌引起的食物中毒是一个重大的世界性公共卫生问题[1].传统的检测方法以检测致病菌为主,需要培养,检测时间长,且存在着致病菌在加工过程中致死,因而无法检出,但是在加工以前已经产生毒素,且金黄色葡萄球菌肠毒素可耐受100℃煮沸30 min而不被破坏,并能抵抗胃肠道中蛋白酶的水解作用,结果造成食物中毒.所以为确保食品卫生安全迫切需要建立快速、灵敏的毒素检测方法.目前常见的毒素检测方法主要有以下几种.
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广州地区奶类抗生素残留和金黄色葡萄球菌污染调查
目的 为了解广州地区奶类抗生素残留和金黄色葡萄球菌污染状况.方法 2006-2009年期间,采用随机抽样方法分别对我市十个区以及两个地级市共计302份奶类样品进行了抗生素残留、金黄色葡萄球菌以及葡萄球菌肠毒素的检测.金黄色葡萄球菌的检测按照国标GB4789.10进行;抗生素残留和葡萄球菌肠毒素的检测则依照试剂盒的要求进行.结果 302份样品,其中有62份检测到有抗生素残留,阳性率为20.53%;奶粉类为高,29.51%;纯奶类次之,为22.67%.通过对各年份的相互比较,抗生素残留的检出呈逐年上升的趋势.随机抽取的42份奶制品均未检出金黄色葡萄球菌,肠毒素检测阴性;10份生奶有7份检出金黄色葡萄球菌,其中5份肠毒素检测呈阳性.结论 广州地区的奶制品存在较高的抗生素残留的不安全因素,生奶类检出抗生素残留、金黄色葡萄球菌及其肠毒素等的情况说明奶源存在污染.因此,监督部门必需更进一步规范生牛奶供应市场,加强对奶制品的抗生素残留的监控,以维护广大人民的身体健康.
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一起食物中毒中金黄色葡萄球菌的分子特征分析
目的 利用多位点序列分型(muhilocus sequence typing,MLST)技术对一起食物中毒中检出的金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)进行分子分型,了解毒株的肠毒素类型,为金葡菌的分子溯源研究提供实验室数据.方法 miniVIDAS全自动荧光酶标免疫测试仪检测样品中葡萄球菌肠毒素.按照GB 4789.10-2010对样品进行菌株分离和生化鉴定,应用MLST方法对分离出的金葡菌进行基因分型,酶联免疫吸附法对分离株进行葡萄球菌肠毒素分型.结果 分别从病人的呕吐物、食堂师傅手涂抹物、厨房刀涂抹物中检出金葡菌,呕吐物中检出葡萄球菌肠毒素;可疑食物中未检出金葡菌,葡萄球菌肠毒素为阴性.中毒毒株MIST分析得到4个ST序列型,ST5、ST15、ST59和ST338,其中ST5型金葡菌产肠毒索C、肠毒素D和肠毒素E;ST15型菌产肠毒素E;ST59型和ST338型菌产肠毒素B和肠毒素C.结论 此食物中毒由不同MIST型别的金葡菌引起,毒株产葡萄球菌肠毒素的类别也不同.
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一起葡萄球菌肠毒素性食物中毒调查报告
1986年3月31日上午8:30至下午3:00太钢第一幼儿园先后249人恶心、呕吐、腹痛,其中幼儿240人,炊事员6人,锅炉2人,木工1人,其中67人住院治疗.
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PCR-ELISA检测葡萄球菌肠毒素A
葡萄球菌肠毒素(SE)是引起食物中毒和医院感染的重要病原.金葡菌肠毒素分为7个血清型.近年来,国外学者又发现了新的血清型即SEH[1]、SEG、SEI[2].近来发现[3],造成医院感染的耐青霉素金黄色葡萄球菌(MRSA),80%以上产生肠毒素,个别医院分离株几乎100%产生肠毒素.肠毒素的检测有生物学方法、免疫学方法、分子生物学方法等,近年来又发展基因探针的检测方法,由于放射性同位素标记探针的半衰期及放射污染特点,限制了该技术的推广应用,聚合酶链反应(PCR)在临床应用时,遇到了一些问题,比如灵敏度的特异性问题、污染问题,因为存在TapDNA聚合酶抑制物质而致假阳性结果[4].虽然可以通过斑点技术,Southern杂交法提高PCR的灵敏度和特异性,但是,这些方法多存在费时、繁琐、易污染等问题,不适合大量标本的检测,在参考国内外文献的基础上,本文建立了PCR-ELISA法检测金葡菌肠毒素基因的方法.结果报告如下.
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一起金黄色葡萄球菌引起食物中毒调查
2004年12月11日,澳门某机构举办圣诞节联欢会发生一起金黄色葡萄球菌肠毒素所致集体食物中毒事件.现报告如下.
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葡萄球菌肠毒素超抗原广谱抑制性多肽的设计及空间结构研究
目的：以SEs氨基酸高度保守序列作靶序列设计抑制性多肽，研究筛选出的多肽P72的空间结构。方法：用生物信息学软件“Vector NTI 10.3，InsightII 2000，Discovery Studio 1.7”等分析及预测多肽P72的空间结构。结果：P72在SEA、SEB和SEC的同源序列在空间结构具有高度的相似性，P72远离SEB的TCR和MHCⅡ结合位。结论：P72可能不是与MHCⅡ类分子及TCR结合而产生的抑制作用，其具体的抑制机制有待深入研究。
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一起金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒调查分析
2003年10月29日下午3时,我院急诊科收治了46例因食用盒饭所致的食物中毒患者.经流行病学调查、临床诊断和病原学鉴定,证实为一起金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素食物中毒.现报告如下.
