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单剂量及多剂量米格列奈片的中国人体内药动学研究
目的:对米格列奈片的人体药动学进行研究,为该药临床合理使用提供参考.方法:将20名健康志愿者随机平均分成2组(男女各半),一组为5 mg与15 mg2个剂量单次口服给药,另一组为10 mg剂量单次口服给药与每天3次连续7d的多次口服给药.采用HPLC-MS/MS法测定血药浓度,WinNonlin 6.3软件计算药动学参数,IBM SPSS Statistics 19软件对结果进行分析.结果:单剂量口服米格列奈片5 mg、10 mg、15 mg和多剂量口服10 mg后,血浆中米格列奈的AUC0→t分别为(846.2±149.6)、(1337.9±183.2)、(2785.3±261.3)、(1327.2±240.8)ng·h·mL-1,Cmax分别为(375.7±99.8)、(499.8 ±99.0)、(1189.4±133.9)、(781.7 ±319.7) ng·mL-1;Tmax分别为(0.9±0.4)、(1.0±0.5)、(1.1±0.5)、(0.9±0.4)h;t1/2分别为(1.1±0.2)、(1.3±0.2)、(1.4±0.3)、(1.2±0.3)h.结论:单剂量口服给药试验表明,在考察的剂量范围内,口服米格列奈在健康中国人体内的药动学过程呈现线性动力学特征;多剂量实验表明米格列奈在健康中国人体内几乎无蓄积现象;米格列奈在不同性别中国人群体内的药动学过程无明显差异.
关键词： 苯丙氨酸衍生物 非磺脲类促胰岛素降糖药 米格列奈 血药浓度 高效液相色谱-串联质谱 药动学 -
重酒石酸卡巴拉汀国产片剂与进口胶囊的生物等效性研究
目的:研究重酒石酸卡巴拉汀在中国健康受试者体内的药代动力学,并评价其国产片剂(受试制剂)与进口胶囊(参比制剂)的生物等效性.方法:采用LC-MS/MS法测定20名健康受试者口服卡巴拉汀制剂后血浆中的卡巴拉汀浓度.采用DAS 2.1.1软件计算主要药动学参数,并评价其生物等效性.色谱条件:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×2.1mm,5μm),以甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵(含0.1％甲酸)(50:50)为流动相,流速0.3 mL· min-1,柱温35℃;质谱条件:采用离子喷雾离子化源,正离子方式检测,多重反应监测(MRM),用于定量分析的离子反应分别为m/z 251.2→206.3(卡巴拉汀)和m/z 275.2→230.2(氯苯那敏).结果:受试制剂与参比制剂的AUC0-t分别为(14.36±9.61)和(13.56±8.88) ng·h·mL-1;Cmax分别为(8.03±4.01)和(7.60±3.37) ng·mL-1;Tmax分别为(0.75±0.31)和(0.70 ±0.26) h;t1/2分别为(1.12±0.24)和(1.13±0.24)h.以卡巴拉汀计,受试制剂的相对生物利用度为(107.0±16.2)％.结论:试验结果表明受试制剂和参比制剂口服后吸收速度和程度相当,具有生物等效性.
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HPLC-荧光法测定氨磺必利血药浓度及其药动学研究
目的:建立测定人体血浆中氨磺必利高效液相色谱法,测定健康志愿者口服氨磺必利片48 h内血药浓度,进行药动学研究.方法:采用10％三氯醋酸直接沉淀提取血浆,固定相为C18,()烷磺酸钠醋酸溶液(pH 4.85)-乙腈(80∶ 20)为流动相,荧光检测波长为λex=280 nm,λem=370 nm.结果:氨磺必利线性范围为5～ 800 ng·mL-1(r=0.9997),低、中、高3个浓度平均方法回收率分别为105.1％、105.4％、101.3％,日内、日间精密度RSD均＜4％;AUC0～∞为(3545.74±1199.58)ng·h·mL-,AUC0～t为(3348.50±1161.27)ng·h·mL-1,Cmax为(457.69±232.62) ng·mL-,Tmax为(4.15±1.31)h,t1/2为(10.77±5.77)h.结论:本法简便、快速、经济、准确,可用于测定人血浆中氨磺必利的浓度及药动学研究.
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LC-MS/MS法测定人血浆中万古霉素的血药浓度
目的:建立测定人血浆中万古霉素浓度的LC-MS/MS分析方法,用于临床万古霉素血药浓度监测.方法:以甲哌卡因为内标,将50μL血浆加入到30μL的25％(w/v)三氯乙酸溶液中,沉淀蛋白质,经离心处理后,取上清液5μL进样分析.色谱条件:采用Shimadzu VP-ODS(2.0 mm × 150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.3mL· min-1;质谱条件:电喷雾离子源,多反应监测,离子极性为正离子,用于定量的离子对分别为万古霉素m/z 725.0/144.3,内标甲哌卡因m/z 247.3/98.3.结果:线性范围为0.5～100μg·mL-1,低定量限为0.5μg·mL-1;日内、日间RSD＜ 15％,相对误差为-0.8％～1.9％;提取回收率为74.3％ ～ 85.0％.结论:本方法样品处理方法简单,方法准确,灵敏度高,适用于人血浆中万古霉素浓度的测定.
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超高效液相色谱串联质谱测定人血浆中雷沙吉兰及其代谢物
目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中雷沙吉兰(PAI)及其代谢物l-氨基茚满(1-AI)的浓度.方法:血浆样品用乙酸乙酯萃取,离心后取上清液氮气吹干,流动相复溶后进行UPLC-MS/MS测定.色谱柱:ACQUITY UPLC BEH HIL-IC色谱柱(2.1 mm ×50 mm,1.7μm);流动相:乙腈-5 mmol·L-1甲酸铵含2％甲酸(90∶10,v/v);流速:0.4 mL· min-1;柱温:35℃;进样量:5μL.电喷雾离子化(ESI),正离子模式多重反应选择离子检测(MRM),PAI及内标13C3-PAI、1-AI及相应内标13C3-1-AI的检测离子对分别为m/z 172.0 →117.0和175.0 →120.0、m/z 134.0 →117.0和137.0 →120.0.结果:血浆中PAI和1-AI线性范围分别为0.02 ～ 10 ng·mL-1(r=0.9983)和0.1 ～50 ng·mL-1(r=0.9993).日内、日间精密度(RSD)均小于15％,准确度(RE)均小于±15％,血浆基质对PAI和1-AI测定无干扰.结论:本研究建立的同时定量测定人血浆中PAI及1-AI的UPLC-MS/MS方法能够快速测定血浆样品,提供准确可靠的分析结果,可用于大批临床样品的分析.
关键词： 雷沙吉兰(PAI) 1-氨基茚满 血药浓度 超高效液相色谱串联质谱 方法学 -
LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中紫杉醇及其药代动力学研究
目的:建立LC-MS/MS分析方法用于检测Beagle犬血浆中紫杉醇浓度,并研究注射用紫杉醇脂质体的药代动力学.方法:12只Beagle犬随机分成2组后分别i.v.给予1 mg·kg-受试制剂与参比制剂,在不同时间采集血浆样品,采用C18反相色谱柱(250 mm× 4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1％醋酸水溶液(85∶15,v∶v),以多烯紫杉醇为内标,电喷雾离子化(ESI),正离子扫描模式,多反应离子检测(SRM),紫杉醇[M+Na+]m/z 876.4→591.3,内标多烯紫杉醇[M +Na+] m/z830.4→303.9,应用DAS 2.0药代动力学计算程序计算药代动力学参数.结果:紫杉醇的检测浓度范围在3～2000 ng·mL-1呈线性相关(r =0.9980);定量下限为3 ng·mL-1;批内和批间变异均小于15.0％.紫杉醇给药后血药浓度-时间曲线符合二室模型,受试药物和参比制剂的主要药代动力学参数t1/2、Cmax、MRT0-24、AUC0-24和AUC0-∞分别为(7.3±2.0)h和(7.2±2.5)h、(796.1±321.8)ng·mL-1和(1248.0 ±178.6)ng· mL-1、(6.2±1.1)h和(5.3±0.8)h、(948.4±100.2)ng·h·mL-1和(969.7±322.1)ng· h· mL-1、(1022.1±232.7)ng·h·mL-1和(1084.0±304.1)ng·h·mL-.结论:本分析方法对血浆中紫杉醇的检测具有专属性,且灵敏、可靠,对上述药代动力学参数以SAS统计软件进行双侧t检验,结果表明给予受试制剂及参比制剂后犬的主要药代动力学参数差异无统计学意义(P＞0.05).
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HPLC-MS/MS测定比格犬血浆中维他昔布浓度及其药代动力学研究
目的:建立快速灵敏的HPLC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中维他昔布的浓度,并研究维他昔布在健康Beagle犬体内的药代动力学特征.方法:血浆样品的处理采用叔丁基甲醚液液萃取方法,内标为塞来昔布.色谱柱:Thermo Syncronic-C18 (2.1 mm×100 mm,5μm);流动相:甲醇(含0.1％的甲酸)-水(含0.1％的甲酸),梯度洗脱;流速:200 μL· min-1;进样量:5μL;柱温:20℃.质谱采用ESI+源,多重反应监测(MRM)模式,毛细管温度350℃,喷雾电压4.5 kV,鞘气压力199.96 kPa,辅气压力165.48 kPa,源内碰撞诱导解离电压:-10 V,碰撞气(氩气)压力0.1995 Pa,选择检测离子反应对为m/z 347.9→269.0(维他昔布),m/z382.0→362.0(塞来昔布).单剂量给药30 mg后,测定Beagle犬血浆中维他昔布的浓度,并计算药代动力学参数.结果:维他昔布在0.5 ～1000 ng·mL-1浓度范围内线性良好(r =0.9980),定量下限为0.5 ng·mL-1.提取回收率均高于89％,日间、日内RSD均小于13％,专属性良好,在本实验涉及的条件下样品稳定.Beagle犬血浆中维他昔布的Cmax为(94.27 ±57.18)ng·mL-1,Tmax为(2.08±2.01)h,t1/2为(5.87±3.37)h,AUC0 ～36 h为(625.88±375.70)h·ng· mL-1.结论:该方法简便、准确,专属性强,适用于维他昔布在Beagle犬体内的药代动力学研究.
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HPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中槐角苷及染料木素
目的:建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱方法测定大鼠血浆中槐角苷及其苷元染料木素.方法:血浆经过乙酸乙酯提取,以大豆苷元为内标,采用Zorbax SB-C18(2.1 mm×30 mm,3.5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.001％甲酸铵溶液(加氨水调节pH至7.5)(45:55),流速0.2 mL·min-1;质谱条件为电喷雾离子源(ESI源),负离子模式检测,扫描方式为多反应监测(MRM),定量离子对为m/z 252.9→223.7(大豆苷元)、m/z 431.1→267.6(槐角苷)、m/z 268.8→132.8(染料木素).结果:槐角苷浓度在1.072～536 ng·mL-1,染料木素浓度在1.068～534 ng· mL-1的范围内线性关系良好(r＞0.995);日间和日内精密度RSD均小于10％,低、中、高3个浓度的提取回收率在85％～ 97％之间.结论:本法可用于大鼠血浆中槐角苷和染料木素的测定及其药代动力学研究.
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尼美舒利分散片在健康人体内的药代动力学及生物等效性的LC-MS/MS研究
目的:建立人血浆中尼美舒利浓度的LC-MS/MS测定法,并用于尼美舒利分散片的药代动力学和生物等效性研究.方法:采用自身双交叉试验设计,20名男性受试者随机分成2组,分别单剂量口服100 mg受试制剂或参比制剂,0～24 h间隔采集血样.以LC-MS/MS内标法测定尼美舒利血药浓度,使用Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1％甲酸溶液(82:18,v/v);多反应监测[M+H]+离子通道分别为m/z 309.1→m/z 153.9(尼美舒利)和m/z 237.1→m/z194.0(内标卡马西平),DAS 2.1计算药动学参数.结果:建立的LC-MS/MS法在0.075～12 μg·mL-1范围内色谱响应与浓度相关性良好,低定量限为0.075 μg· mL-1,批内及批间精密度RSD均小于15％.受试制剂与参比制剂的Tmax分别为(3.0±0.7)h和(3.5±1.0)h,Cmax分别为(4.863±1.194)μg·mL-1和(4.657±1.038)μg·mL-1,t1/2分别为(3.2±1.0)h和(3.3±1.1)h,AUCo-24h分别为(32.35±12.50)h·μg·mL-1和(32.32±11.69)h·μg·mL-1,相对生物利用度F为(105.2％±35.0)％.结论:建立的LC-MS/MS法准确、灵敏,结果可靠,测得尼美舒利受试制剂和参比制剂生物等效.
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UPLC - MS/MS法测定比格犬血浆中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度
目的:建立灵敏的超高效液相色谱-质谱联用法测定比格犬血浆中的阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度.方法:选用Waters BEH C18(100 mm ×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,分别以0.5％甲酸/5 mmol· L-1醋酸铵-乙腈和2 mmol·L-1醋酸铵-乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样品采用乙酸乙酯提取后进样,通过电喷雾电离源,以多重反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 178.9→136.9(阿司匹林)、m/z 136.9→64.9(水杨酸)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定阿司匹林和水杨酸;m/z 249.6→58.9(单硝酸异山梨酯)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定单硝酸异山梨酯.结果:阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的线性范围分别为2.0 ～ 2000.0,20.0 ～ 16000.0,9.6 ～9557.0 ng·mL-1;定量下限分别可达2.0,20.0,9.6 ng·mL-1;日内、日间精密度(RSD)均小于15％.结论:本方法灵敏度较高,血浆用量少,适用于比格犬血浆样品中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的测定和药物动力学研究.
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LC - MS/MS测定人血浆中辛伐他汀及其活性代谢物的含量
目的:建立人血浆中辛伐他汀及其活性代谢物辛伐他汀酸的LC - MS/MS测定方法.方法:血浆样本在酸性条件下经甲基叔丁基醚液液萃取后,以2.5 mmol·L-1醋酸铵(含0.1％甲酸)-乙腈(25:75)为流动相,采用Inertsil ODS -3(2.1 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离.使用电喷雾离子源以多反应监测(MRM)方式分别进行正负离子监测.辛伐他汀选用洛伐他汀作为内标,在正离子模式下检测;代谢物辛伐他汀酸选用洛伐他汀酸作为内标,在负离子模式下监测.结果:测定血浆中辛伐他汀及其代谢物辛伐他汀酸的线性范围均为0.1 ～20.0 μg·L-1;方法回收率分别为86.1％ ～ 100.5％,91.5％ ～ 104.4％;日内精密度分别为3.2％ ～4.7％和4.5％ ～6.9％,日间精密度分别为3.6％ ～9.8％和2.3％ ～10.5％.结论:该方法简便快速、灵敏度高、重复性好,可准确的定量人血浆辛伐他汀及代谢物辛伐他汀酸的浓度,适用于辛伐他汀药代动力学研究.
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UPLC - MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度
目的:建立UPLC - MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度.方法:血浆样品用甲基叔丁基醚提取,离心后取上清液氮气吹干,流动相复溶后进行UPLC - MS/MS测定.色谱柱:BEHC18(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相:乙腈-0.01 mol· L-1醋酸铵(72:28);流速:0.15 mL·min-1;柱温:40℃,进样量:8μL.电喷雾离子化(ESI),正离子模式多重反应选择离子检测(MRM),辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸及内标洛伐他汀的检测离子对分别为:m/z 419→199,437→303,405→199.结果:血浆样品中辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸线性范围分别为0.241 ～61.76 ng·mL-1(r=0.999,n=5)和0.344 ～88.16 ng·mL-1(r=0.997,n=5),日内、日间精密度(RSD)均小于15％,方法的平均回收率分别为100.6％和106.0％,血浆基质对血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸测定无干扰.结论:建立的UPLC - MS/MS法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,为辛伐他汀制剂的临床药代动力学研究提供了简便、准确的分析测定方法.
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LC - UV法测定大鼠血浆中依达拉奉及其药动学研究
目的:建立测定大鼠血浆中依达拉奉的HPLC - UV法,并研究经灌胃给药后的依达拉奉在大鼠体内的药动学特征.方法:经乙酸酸化的血浆样品以高氯酸直接沉淀后,进行LC - UV法分析,色谱柱为Symmetry Shield C18(250 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-50 mmol·L-1醋酸铵水溶液(40:60),流速为1.0 mL· min-1,检测波长为240 nm,柱温为30℃.测定灌胃给药后大鼠血浆中依达拉奉的浓度,并计算主要药动学参数.结果:依达拉奉浓度在0.2～100.0 μg· mL-1范围内线性关系良好,低、中、高3种浓度的日内日间精密度均小于10％.药动学参数:Cmax为(40.7 ±3.5) μg·mL-1;tmax为(0.22 ±0.11) h;AUC0-10为(41.6 ±6.1)μg·h·mL-1;AUC0～∞为(42.4 ±6.3)μg·h·mL-1;t1/2为(2.5±0.6)h.结论:该方法简单、灵敏,可用于依达拉奉在大鼠体内的药动学研究.
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盐酸曲美他嗪片在健康人体内的药代动力学研究及生物等效性评价
目的:建立人血浆中盐酸曲美他嗪浓度的LC - MS/MS法,并用于盐酸曲美他嗪片的药代动力学和生物等效性研究.方法:采用自身双交叉试验设计,20名男性受试者随机分成2组,分别单剂量口服20mg受试制剂或参比制剂,0～24h间隔采集血样.以LC - MS/MS内标法(盐酸丁咯地尔)测定盐酸曲美他嗪血药浓度,采用Inertsil ODS -2色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-含0.1％甲酸、0.2％醋酸铵的水溶液(55:45,v/v);多反应监测[M+H]+离子通道分别为m/z 267→181(曲美他嗪)和m/z 308→237(丁咯地尔).DAS2.1计算药代动力学参数.结果:建立的LC - MS/MS法在0.5～200 μg·L-1范围内线性关系良好,低检测限为0.05 μg·L-1,批内及批间精密度RSD均小于15％.受试制剂与参比制剂的Tmax分别为(1.8±0.7)h和(1.8±0.8)h,Cmax分别为(60.1 ±10.7)μg·L-1和(59.6 ±10.5)μg · L-1,t1/2分别为(6.1±1.1)h和(6.1±1.0)h,AUC0-24 h分别为(518±126)h·μg·L-1和(518±120)h·μg·L-1.结论:建立的LC - MS/MS法准确可靠,可用于盐酸曲美他嗪片的药代动力学和生物等效性评价.
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RP-HPLC法研究鹿角缩酮B在新西兰兔体内的药代动力学
目的:建立测定新西兰兔血浆中鹿角缩酮B的反相高效液相色谱方法,并测定静脉给药后新西兰兔血浆中鹿角缩酮B浓度及药动学参数.方法:血浆样品经酸化后用乙酸乙酯进行液液萃取,化合物1为内标,色谱柱为Phenomenex C18流动相为甲醇-乙腈-水(30:30:40),流速0.8 mL·min-1,检测波长220 nm.结果:本方法中内源性物质不干扰测定,鹿角缩酮B在0.4～50 μg·mL-1范围内线性良好(r =0.9995),检测限为0.2 μg·mL-1;高中低浓度平均回收率为85.2％～105.5％,日内和日间精密度RSD均小于10％.结论:首次建立了鹿角缩酮B在新西兰兔体内的分析方法,为鹿角缩酮B的体内分析奠定了方法学基础.本方法专属、准确、灵敏,适用于测定新西兰兔的血药浓度；静脉给药后鹿角缩酮B在体内药代动力学符合二室模型.
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HPLC-MS/MS法测定人体血浆中扎托布洛芬的浓度
目的:建立灵敏、快速和选择性高的高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中扎托布洛芬浓度.方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18(150 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1％甲酸水溶液(90:10,v/v),地西泮为内标,以多反应监测(MRM)扫描方式进行监测,监测离子质荷比:扎托布洛芬m/z 299.2→ m/z 225.2,地西泮m/z 285.1→m/z193.1,血浆样品经乙腈沉淀蛋白后取上清液进样.结果:血浆中扎托布洛芬线性范围为0.02～20.0 μg·mL-1,低、中、高3个浓度日内、日间精密度均小于10％.结论:本方法灵敏度高,选择性强,分析时间短,适用于人血浆中扎托布洛芬的浓度测定.
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超高效液相色谱-飞行时间质谱联用法测定人血浆中单硝酸异山梨酯
目的:建立测定人血浆中单硝酸异山梨酯的超高效液相色谱-飞行时间质谱联用法.方法:应用ACQUITY UPLC Hss T3(1.8 μm,2.1mm ×50 mm)色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸水为流动相,梯度洗脱进行分离,流速0.50 mL· min-1.采用飞行时间质谱检测器,大气压电喷雾离子源(ESI),负离子全扫描检测.结果:血浆中内源性物质不干扰测定,每个样品分析时间为3.0 min,本法线性范围为0.02～1.00 μg·mL-1,提取回收率为98.6％～109.0％,日内和日间的RSD分别小于8.7％和10.6％.结论:该方法灵敏、快速,重现性好,可用于单硝酸异山梨酯临床血药浓度监测和药动学研究.
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LC-MS/MS法测定人体利多卡因浓度及药代动力学的应用
目的:建立LC-MS/MS法测定人体血浆利多卡因的浓度,并研究NAL1282利多卡因贴剂(5％)的药代动力学.方法:色谱柱为YMC C18(150 mm ×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-20 mmol·L-1甲酸铵(87:13,v/v)；流速:0.25 mL·min-1；进样量:5 μL;柱温:40℃,样品室温度为15℃.采用随机、单剂量给药、开放性、两周期交叉设计的单中心试验,分别给予9名健康受试者NALI282利多卡因贴剂3贴,700 mg·贴-1.采用LC-MS/MS法测定给药后不同时间的血药浓度.结果:利多卡因线性范围为0.8～ 206 ng·mL-1,低检测限为0.2 ng·mL-1,方法灵敏、稳定、特异性高.利多卡因贴剂主要药代动力学参数Cmax、Tmax、AUC0→24和AUC0→∞分别为(61.6±18.5)ng·mL-1；9 h(6 h,12 h)；(848.4 ±231.7)ng·h·mL-1；(1129.3±324.0)ng·h·mL-1.结论:该方法简便、准确,重复性好,并可应用列人体利多卡因贴剂药代动力学的研究.
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LC-MS/MS方法同时检测人血浆中异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺的浓度
目的:建立同时检测人血浆中3种抗结核药物异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺浓度的LC-MS/MS方法,用于肺结核患者及临床试验中三药血药浓度的测定.方法:以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白等处理后检测.采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)为分析柱,ZORBAX SB-Aq柱(2.1mm×12.5 mm,5 μm)为保护柱,以乙腈-5 mmol·L-1甲酸铵水溶液(含0.1％甲酸)(8:92,v/v)为流动相,使用电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行检测,异烟肼m/z138.2→ 121.0,乙胺丁醇m/z205.2 →116.1,吡嗪酰胺m/z124.1→ 81.1,对乙酰氨基酚m/z152.0→110.0.分析时间为5 min.结果:血浆中内源性物质对测定无干扰,异烟肼线性范围为0.1 ～6.0μg·mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg·mL-1,乙胺丁醇线性范围为0.1 ～5.0μ g·mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1 μ g·mL-1,吡嗪酰胺线性范围为1.0～50.0 μg·mL-1,定量下限(LLOQ)为1.0μ g·mL-1.日内、日间精密度(RSD)均小于10％,准确率为90.4％～108.7％.结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于临床血浆样品的高通量分析.
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液质联用方法对海狗油大鼠药物动力学的初步研究
目的:应用LC/APCI - MS法检测大鼠血浆中海狗油的二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十二碳五烯酸(DPA)3个主要成分,为其药动学研究提供灵敏、准确和实用的方法.方法:取血浆样品0.1 mL经甲醇-正已烷(1:1)沉淀蛋白并萃取后,氮气吹干后进行柱前转酯化衍生,采用Waters C18色谱柱(150 mm×4.6mm,5μm)分离,以乙腈-水(9:1)为流动相,流速0.3 mL· min-1,检测波长210 nm,柱温40℃.通过大气压化学电离四极杆质谱,以选择离子监测(SIM)方式进行检测.用于定量分析的EPA甲酯(EPAM)、DHA甲酯(DHAM)、DPA甲酯(DPAM)、十九碳二烯酸甲酯(内标物)的m/z分别为317.30[M+H]+、343.30[M+H]+、345.30[M+H]+、309.20[M+H]+.结果:EPAM、DHAM和DPAM的线性范围均为50～10000 ng·mL-1,定量限为50 ng·mL-,日内、日间RSD均小于6.6％.对海狗油的大鼠药物动力学初步研究结果表明,EPA、DHA和DPA在连续给药第10 d达到稳态浓度,且时间与给药剂量之间没有关联性；大鼠血浆中EPA、DHA和DPA稳态浓度的高低与给药剂量正相关.结论:该法快速灵敏,准确度高,适用于大鼠体内EPA、DHA、DPA的药动学研究.
