江苏大学学报(医学版)杂志
Journal of Jiangsu University(Medicine Edition) 강소대학학보(의학판)
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mig-14对伤寒沙门菌在高渗应激早期基因表达的调节
目的:探查伤寒沙门菌mig-14在高渗应激下对若干基因表达的调节作用.方法:用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌mig-14基因缺陷变异株,用基因芯片分析高渗应激早期野生株和mig-14缺陷株基因表达差异,并对部分结果采用实时荧光定量PCR进行验证.结果:成功制备伤寒沙门菌mig-14缺陷株,高渗应激早期mig-14变异株与野生株相比有77个基因表达下调和72个基因表达上调. 结论:mig-14可能是一种调节基因,主要参与调节细菌的物质和能量代谢.
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骨髓间充质干细胞复合音猬因子/纳米晶胶原基骨修复骨缺损
目的:探讨骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells)复合音猬因子(sonic hedgehog,Shh)修饰的纳米晶胶原基骨(nano Hydroxyapatite/collagen, nHAC)修复大鼠股骨缺损的效果.方法:SD大鼠 MSCs经成骨诱导后,种植于支架材料形成细胞支架复合物.SD大鼠30只制成股骨干5 mm节段性缺损,分为空白对照组:骨缺损处不植植入物,MSCs/nHAC组:植入MSCs/nHAC复合物,MSCs/Shh-nHAC组:植入MSCs/Shh-nHAC复合物.通过大体观察、X线放射学、组织学对比各组骨缺损修复情况.结果:SD大鼠MSCs在体外与nHAC,Shh-nHAC复合培养第7天,电镜扫描证实Shh-nHAC更有利于MSCs黏附、增殖.术后第6、12周放射学检查评价新骨生成各组间差异有统计学意义(P<0.05).术后组织学检查各组新骨生成速度、生成量差异有统计学意义(P<0.05).结论:MSCs/Shh-nHAC复合物能够修复SD大鼠股骨缺损, 修复效果明显优于MSCs/nHAC复合物.
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shRNA干扰VEGF表达对白血病细胞多药耐药的影响
目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)与人白血病耐药细胞株K562/A02细胞多药耐药的关系及其机制.方法:针对VEGF基因设计合成3条干扰片段shRNA1,2,3,采用脂质体2000分别将其转染入K562/A02细胞,RT-PCR法检测VEGF和多药耐药相关基因MDR1,MRP1,topoⅡ,GST的mRNA水平;蛋白质印迹法检测VEGF蛋白水平;MTT法检测各组细胞对多柔比星的半数抑制浓度(IC50值).结果:K562/A02细胞VEGF mRNA表达水平显著高于敏感株K562细胞,差异有统计学意义(P<0.01),且VEGF蛋白水平也显著高于K562细胞;转染shRNA后,K562/A02细胞中VEGF mRNA水平出现不同程度下调,其中shRNA2组和shRNA3组与转染随机片段组比较差异有统计学意义(P<0.05),以shRNA3组下调显著,并且VEGF蛋白水平也出现相应的下调;转染48 h后K562/A02细胞中MDR1,MRP1及topoⅡ的mRNA水平均出现不同程度下调,以shRNA3组下调显著,分别下调(39.7±1.21)%,(29.1±0.97)%,(28.2±1.04)%,GST基因表达则无明显变化;阳性转染组细胞对多柔比星的敏感性明显增加,其中以shRNA3组显著.结论:VEGF shRNA可以抑制K562/A02细胞VEGF基因与蛋白的表达,不同干扰片段的沉默效果不同,并增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性,其机制可能与MDR1,MRP1及topo Ⅱ的表达下调有一定的关系.
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EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞株SGC7910生物学行为的影响
目的:了解EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:构建pSG5/BARF1真核表达载体,转染到EB病毒阴性的胃癌细胞系SGC7901,经RT-PCR鉴定,获得BARF1稳定表达的细胞克隆.以pSG5空载体转染细胞为对照,进行细胞凋亡诱导实验、细胞增殖实验、软琼脂集落形成实验和细胞迁移实验.结果:与对照组相比,BARF1表达细胞组经抗癌药顺铂诱导后的细胞凋亡率显著降低(P<0.01),增殖速度显著加快(P<0.01),软琼脂集落形成率显著提高(P<0.05),细胞迁移能力显著增强(P<0.05).结论:BARF1基因能够全面增强胃癌细胞的肿瘤原性,可能在EB病毒相关胃癌发生与演化的整个过程中起重要作用.
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缬沙坦对扩张型心肌病大鼠心肌预保护作用机制研究
目的:探讨血管紧张素Ⅱ1(AT1)型受体阻滞剂缬沙坦对多柔比星诱导的扩张型心肌病(DCM)大鼠心肌预保护作用机制.方法:SD大鼠随机分为正常对照组(n=10),DCM模型组(n=20)和预保护组(n=10).DCM模型组及预保护组予多柔比星(2 mg*kg-1,每周1次)腹腔内注射,正常对照组予同体积生理盐水腹腔注射.预保护组于造模同时给予预保护药物缬沙坦(30 mg*kg-1*d-1)灌胃,DCM对照组与正常对照组给予同体积生理盐水灌胃.8周后取各组大鼠心肌组织测定心肌肌浆网钙泵(SERCA2a)、钙释放通道(RyR2)、受磷蛋白(PLB)、钠钙交换蛋白(NCX1)的mRNA及蛋白表达水平.结果:①与正常对照相比,DCM模型组SERCA2a,RyR2的mRNA表达水平显著下降(P<0.05),PLB,NCX1的mRNA表达水平显著上升(P<0.05);预保护组SERCA2a,RyR2的mRNA水平均较DCM模型组升高(P均<0.05),PLB,NCX1的mRNA水平均低于DCM模型组(P均<0.05);②与正常对照组相比,DCM模型组SERCA2a,RyR2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PLB,NCX1蛋白表达水平显著升高(P<0.05);预保护组SERCA2a,RyR2蛋白水平均高于DCM模型组(P均<0.05),NCX1蛋白水平较DCM模型组显著降低(P<0.05);预保护组PLB蛋白水平较DCM模型组稍有下降,差异无统计学意义(P>0.05).结论:预防性给予缬沙坦对扩张型心肌病心肌有保护作用,机制可能与其部分纠正心肌钙调控蛋白的异常有关.
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骨髓间充质干细胞对体外损伤心肌细胞凋亡的影响
目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)在体外共培养条件下对多柔比星(doxorubicin, DOX)损伤心肌细胞凋亡的影响及可能机制.方法:贴壁法分离、培养骨髓间充质干细胞,第3代MSCs用于实验.原代培养3天的SD乳鼠心肌细胞,1.0 mg/L浓度的DOX处理4 h,建立心肌细胞损伤模型.将心肌细胞分为正常对照组、DOX损伤组、DOX损伤+MSCs共培养组.ELISA法检测细胞条件培养基内胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)的浓度.MTT检测MSCs条件培养基对DOX损伤心肌细胞活性的影响.并检测各组心肌细胞caspase-9,caspase-3活性及各组心肌细胞凋亡率.结果:第3代MSCs及原代心肌细胞均有IGF-1分泌,但MSCs条件培养基内IGF-1的浓度明显高于心肌细胞.MSCs共培养组心肌细胞活性高于DOX损伤组,但低于正常对照组(P<0.05).DOX损伤+MSCs共培养组caspase-9,caspase-3活性及心肌细胞凋亡率低于DOX损伤组,但高于正常对照组(P<0.05).结论:MSCs对多柔比星诱导的心肌细胞凋亡有保护作用,这种保护作用与旁分泌机制有关.
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强力霉素抑制丝裂霉素诱导的MTEC1细胞凋亡及其蛋白质组初步分析
目的:探讨强力霉素(doxycycline,Dox)保护胸腺上皮细胞的作用及其机制,为进一步研究Dox的免疫调节作用奠定基础.方法:利用光学显微镜观察Dox对丝裂霉素(mitomycin, MMC)诱导MTEC1凋亡的影响,同时采用Hochest33342、PI单染、Annexin V和PI双染确认其作用,后利用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术分析了SAX2芯片捕获的Dox作用前后的差异蛋白质.结果:通过形态学观察、Hochest33342、PI单染及Annexin V和PI双染发现Dox确实能保护MTEC1抵抗丝裂霉素诱导的细胞凋亡.随后采用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术分析SAX2芯片捕获蛋白,发现Dox能调控15种蛋白,其中上调8种,下调7种.结论:Dox具有保护MTEC1,抑制MMC诱导的细胞凋亡作用,并对MTEC1的蛋白表达有调控作用.
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血管内皮生长因子与细胞支架复合物修复大鼠股骨缺损
目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)与骨髓间充质干细胞(MSCs)、纳米晶胶原基骨(nHAC)复合物对大鼠股骨缺损的修复作用.方法:将20只SD大鼠制成股骨缺损模型后分2组:对照组植入MSCs/nHAC复合物,实验组植入VEGF/MSCs/nHAC复合物.术后第2,4,8周行影像学和组织学观察;术后第8周行新生骨痂环境扫描电镜(ESEM)检查.结果:术后第2,4,8周实验组与对照组放射学检查评价骨生成差异有统计学意义(P<0.05).组织学观察发现实验组较对照组能更快更有效地促进大鼠股骨缺损处的骨痂生长.结论:VEGF/MSCs/nHAC支架较MSCs/nHAC支架对骨缺损的修复有更好的效果.
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PCNA,Ki-67,p53蛋白及β-HCG在宫颈鳞癌中的表达及临床病理意义
目的:探讨增殖细胞核抗原(PCNA),Ki-67,p53蛋白及β-HCG在宫颈鳞癌中的表达及其临床病理意义.方法:采用免疫组化方法检测不同临床分期、不同病理分级的55例宫颈鳞癌标本中PCNA,Ki-67,p53及β-HCG的表达情况.结果:PCNA,Ki-67,p53蛋白在宫颈鳞癌中的表达率高于慢性宫颈炎,表达差异有统计学意义(P<0.05),在Ⅲ级鳞癌及有淋巴结转移者中的表达率高于Ⅰ级、Ⅱ级鳞癌及无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05);β-HCG在宫颈鳞癌中的表达率高于慢性宫颈炎,在中晚期宫颈癌及有淋巴结转移者中的表达高于早期宫颈癌及无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05).结论:PCNA,Ki-67,p53蛋白的表达率与宫颈癌的病理分级及淋巴结转移有关;β-HCG表达率与宫颈癌的临床分期及淋巴结转移有关;PCNA ,Ki-67, p53,β-HCG与宫颈癌的预后有关.
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胃癌组织中核因子-κB的表达及临床意义
目的:研究核因子-κB(NF-κB)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤细胞分化、浸润、淋巴结转移及远处转移等生物学行为的关系.方法:应用Envision二步法检测78例胃癌及40例癌旁组织石蜡标本中NF-κBp65蛋白的表达水平.结果:NF-κB在癌组织的表达明显高于癌旁组织,低分化癌组织较高分化、中分化组织中NF-κB的表达高;有淋巴结转移的组织较无转移的表达高;浸润程度越深,表达越高;有远处转移的组织较无转移的表达高.结论:NF-κBp65蛋白在胃癌中有高表达,并且其在胃癌的发生、转移过程中发挥重要作用,可能成为胃癌治疗的一个新靶点.
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新疆维吾尔族及哈萨克族冠心病患者肿瘤坏死因子受体2基因多态性研究
目的:研究维吾尔族及哈萨克族人肿瘤坏死因子受体2(tumor necrosis factor receptor 2, TNFR2)第6外显子196位点基因多态性与冠心病的相关性. 方法:采用病例对照研究的方法,用ShineRoar探针技术检测117名冠心病患者(其中维吾尔族人89名,哈萨克族人28名)以及106名健康体检者(其中维吾尔族人51名,哈萨克族人55名)的TNFR2第6外显子196位点的基因型. 结果:维吾尔族冠心病患者与一般人群TNFR2第6外显子196位点等位基因及基因型频率的差异没有统计学意义;哈萨克族TNFR2第6外显子196位点G等位基因携带者发生冠心病的风险明显高于T等位基因携带者(OR=3.560, 95%CI:1.157~8.139, χ2=9.73, P=0.002);TG或GG基因型携带者发生冠心病的风险明显高于TT基因型携带者.两分类Logistic回归分析结果显示,在控制性别和年龄不变的情况下,哈萨克族TNFR2第6外显子G等位基因与冠心病的发生明显相关(OR=4.100, 95%CI:1.315~12.780, χ2=5.916, P=0.015).结论:哈萨克族TNFR2第6外显子G等位基因是发生冠心病的主要危险因素之一.
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氯胺酮雾化吸入抑制芬太尼诱发咳嗽反射的临床观察
目的:观察氯胺酮雾化吸入对芬太尼诱发咳嗽反射的影响.方法:80例ASA Ⅰ~Ⅱ级择期手术患者,随机分为氯胺酮雾化吸入组(K组)和对照组(C组),每组40例.K组和C组分别于麻醉诱导前采用压缩雾化吸入氯胺酮0.25 mg/kg(稀释至4 ml)或生理盐水4 ml,雾化吸入5 min后于5 s内静脉注射芬太尼3 μg/kg,观察2 min,记录芬太尼诱发咳嗽反射的例数和强度;监测并记录麻醉前(T0)、雾化吸入5 min后(T1)、气管插管前即刻(T2)、气管插管后即刻(T3)、气管插管后1 min(T4)的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和心率(HR)变化.结果:K组芬太尼诱发咳嗽反射的发生率明显低于C组(P<0.01),两组间同一时间点的SBP,DBP,HR相比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:0.25 mg/kg氯胺酮雾化吸入可以有效降低芬太尼诱发咳嗽反射的发生率,并且对循环影响轻微.
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不同发作类型癫痫患者抑郁状况及生活质量的多因素分析
目的:探讨不同发作类型等因素对癫痫患者发生抑郁和生活质量的影响.方法:采用汉密尔顿抑郁量表和抑郁自评量表评价患者的抑郁状况,采用QOLIE-31量表评定患者生活质量.采用PSSS量表评估患者的社会支持情况.结果:癫痫患者抑郁发生率比普通人群高,其中GTCS发作组和复杂部分性发作组抑郁发生率高,首次发病年龄小的患者抑郁发生率高,差异有统计学意义(P<0.01);癫痫患者的生活质量较正常人为低,GTCS发作组和复杂部分性发作组低,差异明显(P<0.01);起病年龄对生活质量有影响.结论:起病早,GTCS发作和复杂部分性发作者,情感状态受损明显,生活质量水平相对较差.对患者生活质量影响明显的因素依次为抑郁、发作类型、起病年龄和社会支持.
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肺叶切除术后两种镇痛方法效果比较
目的:研究开胸肺叶切除术患者胸部硬膜外镇痛与静脉镇痛的效果及对术后肺部并发症的影响.方法:选择80例ASA I~Ⅱ级、开胸肺叶切除患者随机分为两组,A组麻醉方法为静吸复合麻醉,术后静脉芬太尼患者自控镇痛(PCIA);B组全麻诱导前T5-6间隙硬膜外置管,2%利多卡因3 ml试验剂量,术后罗哌卡因及芬太尼硬膜外镇痛(PEA).所有患者均记录气管导管及胸腔引流管拔除时间;术后第4,24,48 h静息及运动疼痛评分,镇静评分.观察两组术后肺部并发症(感染、肺不张)发生率.结果:B组患者气管导管拔除时间(0.7±0.2)h早于A组(2.1±0.4) h,P<0.01;胸腔引流管拔除时间(2.7±0.6)d明显早于A组(4.3±0.7)d,P<0.05.B组术后各时间点静息及运动疼痛评分均小于A组(P<0.05),而镇静评分两组无差异.术后B组肺部并发症发生率7.5%低于A组17.5%,P<0.05,特别是术后肺部感染发生率两组有明显差异(2.5%与12.5%,P<0.01).结论:开胸肺叶切除手术硬膜外镇痛效果优于静脉自控镇痛,并可减少术后肺部并发症的发生.
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功能核磁共振成像在脑中央区肿瘤手术中的应用
目的:探讨功能核磁共振成像(fMRI)在脑中央区肿瘤手术中的应用价值.方法:11例脑中央区肿瘤患者,手术前行 fMRI,明确脑皮质运动区与肿瘤的关系.结果:11例脑中央区肿瘤患者的脑皮质运动区均在 fMRI上获得确定,11例手术切除的肿瘤患者均达显微镜下全切除.术后神经功能受损症状未加重.结论:fMRI图像对脑中央区肿瘤术前制定手术计划、评估手术风险,术中选择手术切除肿瘤的进路等非常有益.
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5-Aza-CdR对人肾癌OS-RC-2细胞生长及γ-连环蛋白表达的影响
目的:研究甲基化抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肾癌OS-RC-2细胞增殖、凋亡及γ-连环蛋白(γ-catenin)表达的影响.方法:使用不同浓度(10-7,10-6,10-5,10-4 mol/L)的特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理OS-RC-2肾癌细胞株.MTT检测5-Aza-CdR对肾癌细胞株OS-RC-2的生长抑制作用.流式细胞仪检测5-Aza-CdR对OS-RC-2肾癌细胞株凋亡的影响.细胞免疫化学检测5-Aza-CdR处理OS-RC-2肾癌细胞株后γ-catenin表达的变化.结果:5-Aza-CdR明显抑制肾癌细胞的增殖,促进其凋亡,且与药物浓度及作用时间有关.药物处理后γ-连环蛋白表达增加.结论:γ-catenin蛋白表达受甲基化的抑制,提示5-Aza-CdR可使γ-catenin基因去甲基化而抑制肾癌OS-RC-2细胞株增殖,并促进其凋亡.
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冠心病伴脑梗死患者血清同型半胱氨酸水平及颈动脉粥样硬化程度的相关性
目的:探讨冠心病伴脑梗死患者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平和颈动脉粥样硬化程度的相关性.方法:检测136例冠心病患者(冠心病伴脑梗死58例,单纯冠心病78例)及54例健康人(正常对照)的血清Hcy水平,彩色超声观测颈动脉粥样硬化情况.结果:与正常对照组及冠心病组相比,冠心病伴脑梗死组血清Hcy水平及颈内动脉粥样硬化发生率及硬化程度均升高(P<0.05);冠心病患者血清Hcy水平与颈动脉粥样硬化程度呈正相关(r=0.687,P<0.05). 结论:血清Hcy水平、颈动脉粥样硬化是冠心病、脑梗死发生的独立危险因素.
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糖蛋白A34在胃癌演变过程中表达的变化
目的:探讨糖蛋白A34在胃癌演变过程中的表达情况及临床意义.方法:采用RT-PCR方法分别检测18例正常胃黏膜(A组)、30例慢性萎缩性胃炎胃黏膜(B组)、24例早期胃癌黏膜组织(C组)及48例进展期胃癌黏膜组织(D组)中糖蛋白A34 mRNA的表达情况.免疫组化法检测各组糖蛋白A34的表达情况.结果:糖蛋白A34 mRNA在正常组织、萎缩性胃炎组织、早期胃癌组织和进展期胃癌组织中相对表达水平分别为0.093±0.010, 0.211±0.023, 0.258±0.017, 0.259±0.021,糖蛋白A34在各组表达阳性率分别为5.56%, 33.33%, 70.83%, 75.00%.糖蛋白A34及其mRNA的表达在A,B,C 三组之间差异均具有统计学意义(P<0.05),早期胃癌和进展期胃癌两组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:糖蛋白A34在胃癌的演变过程中的表达逐渐加强.
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臭氧气浴治疗糖尿病感染性足溃疡临床观察
糖尿病患者由于合并神经病变及各种不同程度末梢血管病变而导致的下肢感染、溃疡形成和(或)深部组织的破坏[1],称为糖尿病足(diabetic foot ,DF).该病是与周围神经、血管病变相关的糖尿病重要慢性并发症之一.
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三七超细粉体对兔缺血再灌注心肌ICAM-1蛋白表达的影响
目前,缺血心肌再灌注治疗的技术如溶栓治疗,经皮冠状动脉内成形术和冠状动脉旁路移植术等仍是治疗缺血性心脏病普遍采用的措施.
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幽门螺杆菌γ-谷氨酰转肽酶基因的克隆及序列分析
目的:克隆不同疾病来源的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)γ-谷氨酰转肽酶(Gamma-glutamyltranspeptidase,GGT)基因,并进行序列分析.方法:从人胃黏膜组织中分离培养获得Hp,提取其基因组DNA,对GGT基因进行 PCR扩增,克隆进 pMD18-T 载体,进行测序和生物信息学分析,并与基因库中公布的标准株26695和J99的GGT氨基酸序列进行比对分析.结果:成功克隆了分别来源于慢性胃炎,胃溃疡,十二指肠溃疡和胃癌的4种Hp菌株GGT片段,并进行了序列分析.4种病源的Hp GGT序列大小均为1 704 bp,编码 567 个氨基酸,理论分子质量是61 kDa,等电点是9.3,在N端具有信号肽,含有ATP蛋白激酶结合结构域和γ-谷氨酰转肽酶保守结构域.序列比对分析显示,不同来源的Hp菌株GGT具有很高的保守性.结论:GGT在Hp中高度保守,具有分泌作用,可能对宿主细胞产生影响.该基因的成功克隆为进一步研究其功能打下了基础.
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小鼠高迁移率族蛋白1cDNA克隆、原核表达与鉴定
目的:克隆并原核表达小鼠高迁移率族蛋白1(high mobility group box1,HMGB1).方法:从小鼠脾脏细胞中提取总RNA,应用RT-PCR获得小鼠HMGB1cDNA,经PCR扩增小鼠HMGB1基因;通过T-A克隆将该基因构建到PMD-18T载体中,测序鉴定;将该基因插入pET-28a(+)表达载体,IPTG诱导后,可表达相对分子质量约30 kDa的蛋白.蛋白质印迹鉴定表达的目的蛋白.结果:经RT-PCR扩增得到648 bp的DNA片段,序列分析显示与基因库中报道的已知序列完全一致;构建了含有HMGB1编码序列的原核表达载体,经诱导表达、蛋白质印迹鉴定,获得相对分子质量约30 kDa的融合蛋白.结论:成功克隆和表达了小鼠HMGB1基因,为HMGB1蛋白的功能试验奠定了基础.
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筛顶筛板及中鼻甲的影像解剖学研究进展
筛板与筛顶的连接方式,不同个体及同一个体的两侧都有变异.筛窦前房变异很大,周围与颅前窝、视神经管、眼眶等重要结构毗邻.如果不熟悉该区域的解剖关系,手术过程中会导致失明、大出血、脑脊液鼻漏等严重并发症[1].
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人参研究的新进展
人参(Panax ginseng C.A.Meyer)是五加科植物的根茎,Panax意为长寿、包治百病,其应用历史可追溯到2000多年以前.我国现存早的药物学专著<神农百草经>中对人参的药用价值有详细的论述,要点是:强身体益智,明目,安精神,止惊悸,久服后延年益寿,因其具有神奇而广泛的作用,享有"百草之王"的美誉.
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甲状旁腺囊肿2例临床病理分析
甲状旁腺囊肿较少见,临床诊断误诊率常为100%.1905年Goris首次报道1例颈部甲状旁腺囊肿,目前国外文献报道约300余例,我国文献报道约60余例.我院自2000年以来收冶2例甲状旁腺囊肿,报告如下.结合文献资料复习,着重讨论甲状旁腺囊肿组织起源和术前诊断.
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2019 | 01 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |