江苏大学学报（医学版）杂志
Journal of Jiangsu University(Medicine Edition) 강소대학학보（의학판）
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
脉络丛 Neuro-2A细胞株对胚胎脊髓运动神经元轴突的排斥作用
目的: 探讨脉络丛组织、Neuro-2A细胞株对胚胎脊髓运动神经元轴突生长的影响.方法: 采用ECM Gel作为组织培养的基质底物,将脉络丛组织或者Neuro-2A细胞株和胚胎12天的腹侧脊髓运动神经柱进行三维共培养,观察脉络丛组织或者Neuro-2A细胞株对胚胎脊髓运动神经元轴突生长的影响.结果: 脉络丛组织或者Neuro-2A细胞株与胚胎12天的腹侧脊髓组织共培养2天后,脊髓运动神经元轴突表现为偏离脉络丛组织或者Neuro-2A细胞株的偏向性生长. 结论: 脉络丛组织和Neuro-2A细胞株对胚胎脊髓运动神经元轴突有排斥作用.
-
Y-盒结合蛋白1对白血病K562细胞多药耐药基因-1表达的调控
目的: 观察多柔比星诱导K562细胞多药耐药基因-1(mdr1)基因表达过程中Y-盒结合蛋白1(YB-1)表达和核易位的变化情况,初步探讨YB-1蛋白对mdr1基因的转录调控.方法: 多柔比星间歇性长期作用于K562细胞,剂量逐渐增加.RT-PCR检测mdr1,YB-1基因表达,流式细胞仪检测mdr1基因编码的P糖蛋白(P-gp)表达,蛋白质印迹检测YB-1蛋白核易位.通过RNA干扰技术使K562细胞中YB-1基因表达沉默,多柔比星处理YB-1基因沉默细胞,RT-PCR、流式细胞仪分别检测mdr1 mRNA和P-gp的表达.结果: 经多柔比星作用后K562细胞mdr1基因转录上调,P-gp表达增加,同时YB-1基因转录也增强,且出现明显的核易位.YB-1基因沉默后,mdr1基因诱导性表达减少.结论: 多柔比星诱导K562细胞mdr1基因表达的过程中,YB-1对于mdr1基因的转录活化起一定的作用.
-
O-GlcNAc糖基转移酶表达下调对tau蛋白磷酸化的影响
目的: 以人O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因为靶点,研究小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对HEK293T细胞中OGT基因表达的抑制作用,以及这种抑制作用对tau蛋白磷酸化与糖基化修饰的影响.方法: 根据人OGT基因序列特点,设计高效且特异性强的siRNA.用脂质体转染siRNA进入HEK293T细胞,通过实时PCR检测siRNA对OGT基因表达的抑制.用蛋白免疫印迹法检测tau蛋白糖基化与磷酸化修饰的变化.结果: 设计的siRNA能够有效抑制OGT基因的表达,与空白组相比,抑制效率可达78.1%左右.OGT基因表达的下调使tau蛋白糖基化水平下降,而磷酸化水平增高.结论: tau蛋白的糖基化负调节其磷酸化,葡萄糖摄入减少或代谢降低可能在阿尔茨海默尔病的发生发展中起关键作用.
-
转染Smad3基因的大鼠肾系膜细胞uPA及PAI-1表达的改变
目的: 通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad3基因,观察转染阳性细胞克隆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)表达的改变,以进一步阐明转移生长因子-β(TGF-β)介导肾小球硬化发生的作用机制.方法: 经脂质体介导将含有Smad3重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及RT-PCR,Western blot法鉴定;又分别采用RT-PCR与Western blot法,检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达改变. 结果: 成功建立高表达Smad3的阳性MsC克隆(Th-8,Th-15),并证实其uPA mRNA及蛋白表达明显降低,而PAI-1 mRNA及其蛋白的表达显著增加.结论: TGF-β可能通过上调Smad3而减少组织内uPA的生成和增加PAI-1的合成,从而促进肾小球硬化的进展.
-
TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒载体的构建及其在人脐带间质干细胞中的表达
目的: 构建携带绿色荧光蛋白的TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒表达载体,转染人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs).方法: 设计含有GM-CSF信号肽序列和BglⅡ及HindⅢ酶切位点的引物,PCR扩增TNFα-Tumstatin,将扩增产物亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,重组穿梭质粒经PmeⅠ线性化后转化含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183中同源重组.筛选获得含有融合基因的重组腺病毒质粒,酶切鉴定并测序.重组病毒质粒用PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞,经过包装、扩增后感染hUCMSCs并检测细胞内融合基因的表达.结果: 重组腺病毒质粒经PCR和PacⅠ酶切鉴定,证实含有TNFα-Tumstatin融合基因,测序结果和设计片段的序列一致.重组腺病毒感染的hUCMSCs表达绿色荧光蛋白和融合基因.结论: 成功构建了TNFα-Tumstatin融合基因的腺病毒表达载体,能高效率感染hUCMSCs,为进一步研究融合基因修饰的hUCMSCs抗肿瘤效应奠定了基础.
-
PPARγ配体罗格列酮对大鼠扩张型心肌病的疗效及可能机制
目的: 观察PPARγ配体罗格列酮对多柔比星诱导的扩张型心肌病的治疗作用,并探讨可能机制.方法: 30只雄性SD大鼠随机分为(1)正常对照组(CON, n=10),等体积生理盐水灌胃;(2)扩张型心肌病组(DCM, n=10),多柔比星2.0 mg·kg-1腹腔注射,每周1次,共8周;(3)扩张型心肌病+罗格列酮组(DCM+RSG, n=10),罗格列酮3.0 mg·kg-1·d-1灌胃治疗,共12周.第15周检测心肌相关炎症因子浓度以及总抗氧化能力(TAOC)、丙二醛(MDA)浓度;检测心功能.结果: DCM组与CON组相比左室射血分数(LVEF),+dp/dtmax,-dp/dtmax,TAOC显著降低(P＜0.05).心肌中TNF-α,IL-1β,IL-6,MDA及胶原容积百分数(CVF)明显升高(P＜0.05),罗格列酮治疗后LVEF,TAOC有所改善(P＜0.05),TNF-α,IL-1β,IL-6,MDA,CVF有所降低(P＜0.05).结论: PPARγ配体罗格列酮可改善扩张型心肌病大鼠的心功能,其机制可能是提高心肌抗氧化能力、减少炎症因子的释放.
-
MDA-7基因的腺病毒载体构建及对肿瘤细胞凋亡的影响
目的: 构建一种端粒酶启动子调控目的基因MDA-7/hIL24表达的复制缺陷型腺病毒,并初步探索其抗肿瘤活性.方法: 通过基因操作技术将启动子(hTERTp)+目的基因(MDA-7)插入到5型腺病毒E1A区域,构建复制缺陷型腺病毒AdTP-mda7;同时构建对照病毒AdTP-EGFP.TCID50法测定病毒滴度.应用蛋白质印迹法检测MDA-7在肿瘤细胞株中的表达状态;通过结晶紫染色实验检测两种病毒对肿瘤细胞的杀伤差异.结果: 成功构建携带目的基因的腺病毒载体,PCR鉴定正确;蛋白质印迹结果表明MDA-7选择性地在多种肿瘤细胞株中表达,诱导肿瘤细胞凋亡,如A549,SGC-7901等,在以相同MOI值感染原代成纤维细胞时,原代细胞中没有检测到MDA-7表达;结晶紫染色试验结果表明AdTP-mda7对肿瘤细胞株的杀伤能力明显高于对照病毒AdTP-EGFP.结论: 成功构建复制缺陷型腺病毒AdTP-mda7,并证实MDA-7蛋白在肿瘤细胞中过表达诱导多种肿瘤细胞株发生凋亡.
-
缬沙坦对扩张型心肌病大鼠炎症因子表达的影响
目的: 探讨血管紧张素Ⅱ1型(AT1)受体阻滞剂缬沙坦对扩张型心肌病(DCM)大鼠炎症因子表达的影响及意义.方法: 腹腔注射多柔比星建立SD大鼠DCM模型.随机分为DCM模型组(M组, n=11)、缬沙坦组(V组, n=10)、正常对照组(C组, n=10),V组予以缬沙坦30 mg·kg-1·d-1,C组和M组予以生理盐水灌胃,8周后行心脏超声和血流动力学检测,放免法检测血清TNF-α,IL-6,IL-1β浓度,测定心室质量及指数,观察心肌病理改变,测定心肌胶原含量(CVF).结果: 与C组相比,M组左室内径、心室质量及指数显著增加(P<0.05),心功能显著降低(P<0.05),血清TNF-α,IL-6,IL-1β浓度和心肌胶原含量显著升高(P<0.05).缬沙坦可以显著降低DCM大鼠血清TNF-α,IL-6,IL-1β水平和心肌胶原含量(P<0.05),缩小左室内径、降低心室质量及指数(均P<0.05),改善心功能(P<0.05).结论: 缬沙坦可以通过降低DCM炎症因子表达,部分逆转心室重塑,改善心功能.
-
兔局灶性脑缺血微导丝法预处理模型的建立
目的: 探讨稳定的兔局灶性脑缺血预处理微导丝法模型的建立及对其评价.方法: 健康新西兰白兔35只,随机分为3组:假手术组5只;缺血组10只,在DSA引导下,选择微导丝直接从颈总动脉(CCA)经颈内动脉(ICA)插至大脑中动脉(MCA)起始部4 h, 再灌注时,抽回导丝至颈总动脉内;预处理组20只,在DSA引导下,选择微导丝从颈总动脉经颈内动脉插至MCA起始部停留15 min,再灌注时,抽回导丝至颈总动脉内停留15 min,如此重复3次,之后将微导丝堵于大脑中动脉起始部4 h,完成微导丝法局灶性脑缺血预处理模型的制作,并利用神经功能缺损评分、TTC和HE染色对模型进行评价.并且对模型行MRI常规扫描及弥散成像,分析MRI是否也能显示脑缺血预处理的存在.结果: 血管造影可清晰显示颈内动脉的走行及其颅内分支情况,8只(80%,8/10)动物缺血模型成功,12只(60%,12/20)动物脑缺血预处理模型成功.缺血/再灌注后3 h就可在T2WI,DWI表现为右侧海马及外侧基底节区高信号,DWI范围大于T2WI,于24 h T2WI范围基本不变且T2WI与DWI范围相近.TTC染色将正常组织染成红色,梗死脑组织不染色而呈白色,不染色的范围与导丝栓塞后T2WI上的病变范围基本一致,预处理组终T2WI上高信号区及TTC无染区体积均小于缺血组.结论: 采用微导丝直接从颈总动脉经颈内动脉插至MCA起始部, 栓塞15 min后,抽回导丝至颈总动脉内再灌注15 min,如此反复3次,能建立较稳定的脑缺血预处理模型.
-
N-乙酰氨基半乳糖转移酶2对胃癌细胞SGC7901黏附迁移能力的影响
目的: 探讨N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(Polypeptide:N-acetylgalactosaminytransferases 2,ppGalNAc-T2)对胃癌细胞SGC7901黏附迁移的影响.方法: 将ppGalNAc-T2正义载体(pEGFP-C1-T2)、空载体(pEGFP-C1)及干扰载体(pSilenCircle)转染SGC7901细胞,采用反转录PCR方法检测其在mRNA水平表达,分别通过细胞黏附实验和穿膜实验检测其黏附力和迁移力变化.结果: 转染正义ppGalNAc-T2的SGC7901细胞比转染干扰载体的SGC7901细胞对纤连蛋白、基质胶和透明质酸的黏附能力低,但其侵袭迁移能力没有变化.结论: ppGalNAc-T2低表达可能与肿瘤浸润转移具有相关性.
-
氟伐他汀对扩张型心肌病大鼠心室重塑的影响
目的: 探讨氟伐他汀对扩张型心肌病(DCM)大鼠心室重塑的影响及其机制.方法: 多柔比星腹腔注射建立DCM大鼠模型,将大鼠随机分为氟伐他汀组(F组),扩张型心肌病组(M组)和正常对照组(C组).F组用氟伐他汀20 mg·kg-1 ·d-1灌胃,M组和C组用等量生理盐水灌胃.8周后进行心脏超声、血流动力学、组织病理学、心肌组织总抗氧化能力(TAOC)和丙二醛(MDA)浓度检测,并计算胶原容积分数(CVF).结果: F组死亡率低于M组 (P<0.05);与C组相比,M组大鼠的左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末压(LVEDP)、心室相对质量、CVF和MDA均增高(P<0.05),左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)、左室收缩压(LVSP)、左室内压大上升及下降速率(±dp/dtmax)和TAOC均降低(P<0.05);与M组相比,F组大鼠的LVEDD,LVESD,LVEDP,CVF,MDA和心室相对质量均降低(P<0.05),LVEF,LVFS,LVSP,±dp/dtmax和TAOC均升高(P<0.05).结论: 氟伐他汀能够改善心室重塑和心功能,抗氧化应激作用可能是其机制之一.
-
X线透视引导下经纤维支气管镜检查对肺孤立性病变的诊断价值
目的: 比较有和无X线透视引导下经纤维支气管镜(纤支镜)检查对肺孤立性病灶的诊断率.方法: 236例有孤立性肺结节和肿块(SPN/M)的患者分为两组:Ⅰ组(166例)在X线透视引导下行经纤支镜肺活检,Ⅱ组(70例)根据影像学解剖定位,无X线透视引导下行经纤支镜肺活检,比较两组的诊断阳性率,分析影响阳性率的相关因素.结果: Ⅰ组和Ⅱ组经纤支镜检查的阳性率分别为71.1%和52.9%(χ2=3.96,P<0.05).两组中病灶直径>4 cm亚组患者纤支镜诊断阳性率均明显高于直径<2 cm亚组(χ2=6.76,P<0.01和χ2=9.08,P<0.005).在直径≤2 cm和2.1~4 cm的肺恶性病灶患者中,Ⅰ组纤支镜检查的阳性率均明显高于Ⅱ组(χ2=4.06,P<0.05和χ2=4.72,P<0.05).位于距离肺门较远的肺外周区和中间区的恶性和良性病灶,Ⅰ组的阳性率要明显高于Ⅱ组(χ2=4.67,P<0.05和χ2=8.28,P<0.005).结论: 对于直径在2~4 cm范围,位于肺外周和中间区的SPN/M,选用X线透视引导下经纤支镜肺活检有助于提高诊断阳性率.
-
半固定式矫治装置治疗阻塞性睡眠呼吸暂停综合征疗效观察
目的: 观察上颌牙合垫加Ⅱ类牵引下颌前移口腔矫治器治疗阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)的疗效.方法: 使用上颌牙合垫加Ⅱ类牵引下颌前移口腔矫治器治疗阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者42例,3个月后复查主观症状、多导睡眠图(PSG).结果: 经矫治的42例患者的耐受率为90.5%,鼾声、睡眠憋醒、白日嗜睡症状明显好转.治疗前、后患者呼吸暂停指数、低通气指数、低血氧饱和度指标变化差异有统计学意义(P<0.05).结论: 上颌牙合垫加Ⅱ类牵引下颌前移口腔矫治器是治疗OSAS的较好新方法.
-
顺铂对肺癌细胞耐药基因表达水平的影响
目的: 研究顺铂(DDP)对肺癌细胞耐药基因MRP1,MGMT,XPA和XPB表达水平的影响,探讨不同耐药机制在肺癌耐药过程中的作用.方法: 以噻唑蓝还原法(MTT)检测DDP对肺癌细胞A549生存率的影响,实时荧光定量PCR技术检测DDP处理前后肺癌细胞MRP1,MGMT,XPA和XPB mRNA的表达水平.结果: 不同浓度DDP(1.25~40 μg/ml)处理肺癌细胞48 h,细胞的生存率从74.7%降至17.4%.4 μg/ml DDP处理肺癌细胞12, 24和48 h后,细胞生存率分别为96.1%,73%和48.5%.DDP处理引起细胞的MRP1 mRNA表达水平先下降后上升;MGMT mRNA表达水平下降;XPB和XPA mRNA表达水平均增高.结论: DDP可以导致肺癌细胞耐药基因MRP1,MGMT,XPA和XPB mRNA表达水平的改变,提示多种耐药机制参与了DDP引起的肺癌细胞耐药.
-
Rac1在肝癌细胞株生长和侵袭中的意义
目的: 证实Rac1在肝癌细胞的生长与侵袭中的意义,寻找可能的肿瘤基因治疗新靶点.方法: 特异性抑制Rac1蛋白表达的siRNA干扰肝癌高转移细胞株97-H,观察肝癌高转移细胞株97-H内Rac1表达、细胞生长、肿瘤细胞的活力和体外侵袭力的变化.结果: 肝癌高转移细胞株97-H内Rac1表达、细胞生长受抑制,肿瘤细胞的活力和体外侵袭力显著降低.结论: Rac1表达的减少能够显著抑制肝癌细胞的生长和侵袭,可能成为肿瘤基因治疗新的靶点.
-
慢性粒细胞白血病染色体核型与血清碱性磷酸酶水平的相关性
慢性粒细胞白血病(chronic myelocytic leukemia,CML)为一种起源于造血干细胞的恶性疾病,临床分为慢性期、加速期和急变期三个过程,在加速期和急变期过程中疾病本质发生变化,患者临床表现和治疗效果均有差异.
-
硝酸甘油复合艾司洛尔控制性降压在前列腺电切术中的应用
经尿道前列腺电汽化切除术(TURP)目前已广泛应用于前列腺手术,具有手术时间短、创伤小、术后恢复快等优点.但患者常为合并有高血压、冠心病的老年男性,心脏储备功能降低,心肌供氧受限,围术期心血管副反应明显增多.
-
β-葡聚糖对巨噬细胞的增殖及ERK5通路的影响
目的: 探讨β-葡聚糖对于小鼠巨噬细胞RAW264.7的生长增殖和诱导细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,以及细胞外信号调节激酶5(ERK5)信号通路在这一过程中的表达.方法: 以不同浓度(12.5,25,50,100,200和400 μg/ml)的β-葡聚糖刺激体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞后,用四唑盐比色实验(MTT)检测细胞的生长增殖; 瑞氏染色法检测RAW264.7 细胞的吞噬活性;用ELISA方法测定培养上清液中TNF-α的表达量;蛋白质印迹法检测ERK5及磷酸化ERK5 (p-ERK5)表达情况.结果: MTT实验结果显示不同浓度的β-葡聚糖对细胞的增殖有不同程度的促进作用,其中以100 μg/ml浓度时促进作用大,大剂量时则对细胞增殖产生抑制作用.在浓度为100 μg/ml时,TNF-α的表达量达到峰值,ERK5和p-ERK5被活化.结论: 一定浓度的葡聚糖对小鼠巨噬细胞的增殖和吞噬有明显的促进作用,细胞外信号调节激酶5信号通路参与了这一过程.
-
皮肌炎患者外周血CD4+T细胞中TGF-β1mRNA表达及意义
目的: 检测活动期皮肌炎(dermatomyositis,DM)患者外周血CD4+T细胞中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)以及血清磷酸肌酸激酶(CK)含量.初步探讨CD4+T细胞TGF-β1在皮肌炎发病机制中的作用.方法: 收集12例活动期皮肌炎患者和12例健康对照者外周血,采用免疫磁珠分离法获得CD4+T细胞,通过RT-PCR方法检测出各组TGF-β1表达水平.观察CD4+T细胞中TGF-β1表达与CK含量的相关性.结果: 活动期皮肌炎患者外周血CD4+T细胞中TGF-β1相对表达量为0.751±0.107,显著高于健康对照0.438±0.170﹙P<0.05﹚.CD4+T细胞TGF-β1表达量与CK含量呈中度正相关﹙r=0.67, P<0.05﹚.结论: 活动性皮肌炎患者外周血CD4+T细胞中TGF-β1 mRNA表达显著升高,可能与皮肌炎疾病发生有关.
-
大肠埃希菌表达的含PTD穿膜序列的融合蛋白3种复性方法比较
目的: 探索融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP纯化以及复性的条件,以提高其复性效率,为后续融合蛋白生物学功能的研究做准备.方法: 表达、提取并纯化包涵体形式的融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP,分别用稀释复性、透析复性、柱上复性的方法,对融合蛋白进行复性,分析不同方法的特点及包涵体复性率,采用流式细胞术检测融合蛋白的穿膜活性.结果: 3种复性方法得到的融合蛋白复性率依次为:柱上复性得率高,其次是透析复性,稀释复性得率低.柱上复性后蛋白的穿膜效率高,相对较低的是稀释复性,而未复性的融合蛋白穿膜效率极低.结论: 3种复性方法均能对PTD穿膜蛋白复性,但以柱上复性佳.
-
β-葡聚糖对巨噬细胞增殖胞内游离钙及cAMP浓度的影响
目的: 探讨β-葡聚糖对RAW264.7细胞增生、胞内游离钙及cAMP浓度的影响.方法: 中性红比色法检测细胞生长, 酚试剂法检测细胞蛋白质合成, 动态检测β-葡聚糖对胞内游离钙和cAMP浓度的影响.结果: 微量β-葡聚糖可促进细胞生长及蛋白质合成;β-葡聚糖作用后3～5 min使胞内游离钙浓度升高,作用1 min 后使cAMP浓度升高, 并保持较高水平.结论: 胞内游离钙及cAMP是β-葡聚糖对RAW264.7细胞作用过程中重要的信使分子.
-
HIV TAT蛋白研究进展
人类免疫缺陷病毒-1型 (HIV-1)基因能够编码一种被称为反式转录激活因子 (transactivator of transcription,TAT)的蛋白.它通过与反式激活应答(transactivating response,TAR)RNA序列结合以起始基因转录.TAT蛋白和REV蛋白一起作为HIV-1的调控因子,在HIV的基因表达中起着举足轻重的作用.
-
RNA干扰技术在消化系肿瘤基因治疗中的应用
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由内源性或外源性双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)所诱发,高度特异性降解细胞内同源mRNA,使基因沉默的现象.这种现象发生在转录后水平,故又称为转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS)[1].
-
ABC转运子G亚族与人类疾病
众所周知,胆固醇代谢与很多疾病有关,如:心血管疾病(包括动脉粥样硬化型心血管病),家族性高胆固醇血症,高脂血症,肾病综合征,糖尿病,黄色瘤病,牛皮癣,冠心病,高血压,阿尔茨海默氏症等等.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
