首页 > 文献资料
-
补骨脂酚对HepG2的细胞毒性及BSEP、NTCP、FXR、CYP7A1的影响
目的 观察补骨脂酚对体外HepG2细胞的毒性和对胆汁酸转运体的影响.方法 用MTT法检测不同浓度补骨脂酚作用于HepG2细胞2、6和24 h对细胞增殖的影响,计算相应IC50值,并检测细胞培养基中AST和ALP活性.用实时定量PCR检测BSEP、NTCP、FXR和CYP7A1的mRNA.结果 HepG2细胞的存活率与补骨脂酚终浓度和作用时间呈负相关,在62.5～187.5 μmol/L之间有良好的量效关系.补骨脂酚作用HepG2细胞6h的IC50=177.9 μmol/L,24 h的IC50=41.6μmol/L.补骨脂酚作用24 h的细胞毒性明显,细胞培养基中的AST和ALP活性显著升高,而60 μmol/L的环孢菌素A(CsA)几乎可以完全对抗补骨脂酚对HepG2细胞的抑制作用.实时定量PCR检测表明,补骨脂酚作用于HepG2细胞2h时BSEP被抑制,而24 h时BSEP、NTCP、FXR和CYP7A1的mRNA增加.结论 补骨脂酚对HepG2细胞的细胞毒性可能需要通过线粒体,并可能与其影响肝细胞胆汁酸转运有关.
-
复合全谷豆粗杂粮的活性成分及其对胆汁酸代谢的调控
目的 分析比较复合全谷豆粗杂粮中膳食纤维(dietary fiber,DF)、抗性淀粉(resistant starch,RS)、总黄酮和总皂甙等活性成分,了解其对大鼠粪胆汁酸(fecal bile acid,FBA)排出的影响及其调控机制.方法 按国家标准及文献方法测定复合全谷豆粗杂粮中DF、RS、总黄酮和总皂甙的含量.44只SPF级SD大鼠随机分为阴性对照组、高脂模型组、米面组和复合全谷豆粗杂粮组,分别给予相应饲料连续喂养8周.实验开始前和结束后,代谢笼收集大鼠粪便,磷钼酸法测定FBA.RT-PCR法测定大鼠肝脏组织中胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7Al) mRNA和肝X受体α(Liver X receptorα,LXRα) mRNA的表达.结果 复合全谷豆粗杂粮中每100g含DF 15.3g、RS 9.03g、总黄酮0.45g和总皂甙0.24g.复合全谷豆粗杂粮组大鼠FBA排出量显著升高(P＜0.05)；CYP7A1 mRNA和LXRα mRNA表达比其他3组显著增加(P＜0.05).结论 复合全谷豆粗杂粮比面粉大米富含UF、RS、黄酮和皂甙等活性物质.可以促使胆汁酸合成经典途径中限速酶CYP7Al和其上游受体LXRα mRNA表达的上调,有效地增加大鼠FBA的排出量,起到改善脂代谢紊乱的作用.
-
山楂叶总黄酮对FXR及其相关基因调控治疗NAFLD模型大鼠的机制研究
目的:探讨山楂叶总黄酮(TFHL)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠的治疗作用及其机制.方法:将SD大鼠随机分为正常组,模型组,TFHL高、中、低剂量组,共5组,高脂膳食建立NAFLD大鼠模型.HE染色、油红O染色观察肝脏病理变化;生化仪检测血清血脂等;RT-PCR法检测肝组织FXR、PPAR-α、PGC1 α、CYP7A1等的mRNA表达.Western Blot检测肝脏上述各项基因的蛋白表达.结果:与模型组比较,应用TFHL干预后,肝组织TG、CHOL含量显著降低,同时能增强肝脏FXR、PPAR-α、PGC1αmRNA和蛋白的表达,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:TFHL可调节NAFLD大鼠肝脏的脂质代谢,改善炎性反应状态,其机制可能与调控FXR相关基因有关.
-
黄连碱对胆固醇代谢关键基因的调节作用
该文主要研究胆固醇和25-羟胆固醇诱导对HepG2细胞胆固醇代谢的影响和黄连中黄连碱的降胆固醇活性及调节机制.用生化法检测了总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-c)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-c)水平;用qRT-PCR和Western bolt技术检测了胆固醇代谢关键基因LDLR,HMGCR,CYP7A1 mRNA和蛋白的表达水平.结果显示胆固醇和25-羟基胆固醇诱导能导致LDLR,CYP7A1的mRNA和蛋白的表达下降从而使TC和LDL-c含量上升.黄连碱能上调LDLR和CYP7A1的mRNA和蛋白表达水平而下调HMGCR的mRNA和蛋白表达水平,从而降低TC,LDL-c水平.这些结果表明黄连碱具有潜在的降胆固醇的药理活性,其分子机制可能是通过调节胆固醇代谢的关键基因LDLR,CYP7A1和HMGCR的mRNA和蛋白表达而达到降胆固醇的效果.该研究为开发新的具有降胆固醇活性的天然药物奠定了良好的理论基础.
-
胆汁酸螯合剂类降血脂药研究进展
随着对高血脂发病机制的深入了解以及他汀类药物的广泛应用，胆汁酸螯合剂类药物在高血脂治疗中的临床地位明显下降，但这类药物具有独特的作用机制。本文对胆汁酸螯合剂类药物的作用、不良反应与进展进行综述，希望对这类药物的临床应用有所帮助。
-
以调节胆固醇7α-羟化酶为靶标的生物活性成分研究进展
本文从反馈调节和核受体调节两个方面概述了胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)的调控机制,综述了近年文献报道的氨基酸、多肽、蛋白质等食品功能因子、中药单体和提取物等生物活性成分对CYPTA1的影响和调节,分析了CYP7A1靶点药物的开发前景和目前研究存在的问题,旨在为CYP7A1靶点药物的筛选和机制研究提供参考.
-
家族性胆固醇结石患者肝组织CYP7A1 mRNA的表达
目的:研究家族遗传性胆囊胆固醇结石患者、散发性胆固醇结石患者和非结石患者肝组织CYP7A1基因mRNA的表达改变及其与胆汁成石性变化的关系.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,研究了28例具有家族遗传性胆囊胆固醇结石患者、30例散发性结石患者和32例非结石患者肝组织CYP7A1 mRNA的表达变化;并采用生物化学技术行胆汁脂质分析,计算成石指数.结果:家族遗传性和散发性胆固醇结石组CYP7A1 mRNA表达水平较非胆固醇结石组降低,差异有显著性;在家族遗传性和散发性胆固醇结石组两组间无统计学差别;各组肝组织CYP7A1 mRNA表达与胆汁成石指数(LI)呈负相关.结论:胆囊胆固醇结石患者肝组织CYP7A1 mRNA水平降低,因而CYP7A1 mRNA表达下调可能是胆囊胆固醇结石形成的重要原因之一;CYP7A1是决定胆汁成石性和胆囊胆固醇结石发生的一个重要基因.
-
大鼠肝再生时血清胆汁酸及肝脏CYP7A1 mRNA表达的变化
一般认为胆汁酸在脂质的消化吸收以及胆固醇的代谢中发挥着重要作用,但近研究发现胆汁酸可作为信号分子在肝再生过程中起着关键作用[1].
-
法尼醇X受体拮抗剂的研究进展
法尼醇X受体(FXR)属于核受体超家族一员,在胆汁酸、三酰甘油、葡萄糖等的动态平衡中发挥重要作用.FXR拮抗剂可通过提高胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的活性而促进总胆固醇向胆汁酸转化,同时调节相关靶基因降低三酰甘油、低密度脂蛋白以及升高高密度脂蛋白水平.因此,FXR拮抗剂有望成为治疗高脂血症的新型药物.近年来,FXR拮抗剂的研究取得了较大进展,已获得多种结构类型的FXR拮抗剂.本文就近年来报道的FXR拮抗剂进行综述.
-
利福平对小鼠的肝毒性及胆酸代谢基因的影响
目的观察利福平长期给药引起小鼠的肝损伤及其对胆汁酸代谢通路相关基因的影响。方法1d1次灌胃给予♂昆明种小鼠180 mg·kg－1利福平连续30 d 与90 mg· kg－1利福平连续90 d；麻醉取血、肝脏，称肝重，检测血清谷丙转氨酶（ALT），观察肝脏组织的病理变化；提取肝脏总RNA并采用RT-PCR法检测胆汁酸代谢相关基因mRNA的表达情况，提取肝脏总蛋白并采用Western blot 法检测相关蛋白的表达。结果连续给予利福平180 mg·kg－130 d和90 mg·kg－190 d，小鼠肝重系数增加，肝脏发生明显病理改变，表现为肝细胞水肿、羽毛样变性与脂肪变性，且利福平180 mg·kg－130 d病理改变较严重；连续给药180 mg·kg－1利福平30 d 可使胆酸代谢基因胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）、法尼醇受体（FXR）、小分子异源二聚体伴侣（SHP）表达增加，胆盐输出泵（BSEP）的表达降低；连续给药90 mg·kg－1利福平90 d，仅可发现胆酸代谢基因胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）表达增加。结论利福平对小鼠具有明显肝毒性，引起胆汁淤积性肝损伤；其影响CYP7A1与BSEP的基因表达可能是其导致胆汁淤积性肝损伤的机制之一。
-
豚鼠高脂血症模型LDL-C代谢紊乱的机制研究
目的 建立豚鼠高胆固醇血症模型,并对形成机制进行探讨.方法 高脂饲料诱导法建立豚鼠高胆固醇血症模型,分别于造模1、2、4周检测血清脂质的动态变化;检测肝脏脂质;酶联免疫分析法测定血清ox-LDL浓度;实时荧光定量PCR法检测肝脏CYP7A1(cholesterol 7a-hydroxylase A1)、肝脏法尼酯X受体(hepatic farnesoid X receptor,FXR)、肝X受体α(liver X receptor,LXRα)、HMG-CoA还原酶mRNA的相对表达;Western blot法检测肝脏LDL-R的蛋白表达情况.结果 豚鼠经高脂饲料诱导1周后,模型组与对照组比较血清TC、LDL-C即发生升高,随造模时间延长,血脂一直维持在较高水平.造模4周后模型组血清ox-LDL、sd-LDL浓度,肝脏TC水平比正常组升高.肝脏HMG-CoA还原酶表达下调,LDL-R蛋白表达量明显高于正常组.值得注意的是豚鼠肝脏法尼酯X受体(FXR)表达明显上调,且肝X受体α(LXRα)表达也明显上调,但二者激活水平相当,终未改变肝脏CYP7A1mRNA的表达水平.结论 高脂诱导豚鼠形成高胆固醇血症主要与外源性胆固醇和低密度脂蛋白的清除发生障碍有关.
-
阿托伐他汀诱导肝脏Cyp7 a1和时钟基因的表达
他汀类药物是羟甲戊二酰辅酶A(HMGCR)选择性抑制剂，是临床防治冠心病的重要药物[1-2]。研究表明，阿托伐他汀能升高肝脏中胆固醇7羟化酶(Cyp7a1)的表达，改变体内胆汁酸代谢[3]，并可能与其长期使用所致肝脏不良反应有关[4]。Cyp7a1表达受时钟基因的调控，具有昼夜节律性[5]。本研究采用长期给予临床剂量阿托伐他汀，观察其对小鼠肝 Cyp7a1基因和时钟基因表达的影响。
-
金黄地鼠高脂血症模型胆固醇代谢紊乱的生物标志物的研究
目的：建立金黄地鼠高脂血症模型，并对胆固醇代谢紊乱的分子机制进行探讨。方法金黄地鼠随机分为正常和模型组，正常组饲常规饲料，模型组饲高脂饲料，连续诱导4周。酶法检测血脂水平和 CYP7A1活性，荧光实时定量PCR技术探讨金黄地鼠高脂血症模型胆固醇代谢紊乱的分子机制。结果金黄地鼠经高脂饲料诱导后与对照组比较，血清TC、LDL-C和TG明显升高，肝脏TC、TG明显增加。机制研究表明，模型组 CYP7A1活性明显降低，肝脏 LDL-R、SREBP-2、CYP7A1和LXRα表达下调，肝脏FXR表达上调。结论金黄地鼠经高脂饲料诱导后可形成以TC、LDL-C、TG升高为特征的高脂血症模型， LDL-R、SREBP-2、CYP7A1、FXR和LXRα既是金黄地鼠高脂血症模型胆固醇代谢紊乱的生物标志物，也是抗高胆固醇血症药物的作用靶标。
-
化石利胆汤对胆总管结石ERCP术后患者CYP7A1和B-UGT的影响
目的:探讨化石利胆汤对逆行胰胆管造影取石(ERCP)术后胆总管结石患者血液以及血脂中的胆固醇7α羟化酶以及二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶的影响.方法:选取90例行ERCP检查且证实胆总管结石并行碎石取石术患者,将其随机分为治疗组及对照组,每组45例,治疗组给予常规治疗结合化石利胆汤,对照组予常规治疗,分别比较治疗前以及治疗后第7天、1个月患者血CYP7A1、B-UGT mRNA以及蛋白的表达情况.结果:治疗组服药后第7天、1个月的CYP7A1、B-UGT mRNA表达水平均明显高于治疗前,且与对照组同时期比较明显升高,治疗组服药治疗后第7天的CYP7A1、B-UGT蛋白表达水平明显较治疗前升高,且与对照组同时期比较明显升高,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:化石利胆汤可上调胆总管结石ERCP术后患者CYP7A1、B-UGT mRNA及其蛋白的表达.
-
依折麦布对饮食性高胆固醇血症大鼠胆固醇吸收及代谢相关靶点的调节作用
目的 探讨依折麦布对饮食性高胆固醇血症大鼠胆固醇吸收及代谢相关靶点的调节作用.方法 雄性SD大鼠,正常组喂食普通饲料,其余组喂食高脂饲料,复制饮食性高胆固醇血症大鼠模型.依折麦布组除喂食高脂饲料外,每天灌胃给药,连续给药4周,测定大鼠血清、粪便、肝脏的总胆固醇,并测定大鼠肝脏CYP7A1、LXRα、小肠NPClL1 mRNA和蛋白的表达水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠血清、粪便总胆固醇含量均显著上升(P＜0.01),肝脏总胆固醇含量上升(P＜0.05).与模型组比较,依折麦布组大鼠血清、肝脏总胆固醇含量均显著下降(P＜0.01),粪便总胆固醇含量显著上升(P＜0.01).依折麦布组大鼠肝脏CYP7A1、LXRα、小肠NPC1L1 mRNA和蛋白的表达与模型组、正常组比较均显著下降(P＜0.01).结论 依折麦布能降低饮食性高胆固醇血症大鼠血清和肝脏总胆固醇含量,增加粪便总胆固醇排出,并能抑制肝脏CYP7A1及小肠NPC1L1的表达,其抑制CYP7A1表达可能与下调LXRα有关.
