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一株来源于东海的盐单胞菌的鉴定及活性筛选
目的 对一株分离自东海海水样品中的茵株(编号P12008)进行鉴定和生物学活性研究.方法 对P12008进行革兰染色、形态观察及耐盐实验,结合16S rDNA序列测定确立其进化地位.采用体外细胞毒模型MTT法测定菌株发酵液对HepG2细胞及HL60细胞的抑制作用;采用DPPH和ABTS模型对茵株发酵液的乙酸乙酯提取液进行抗氧化作用研究.结果 P12008为G~-菌,光镜下呈椭圆或圆形.该菌株在不含NaCl的培养基中不能生长.适生长盐度为12.5%.16S rDNA序列分析的结果表明P12008菌株与Halomonas sp.MZ0306Al(EUl24745.1)相似度高,为99%.生物学活性研究发现,该菌株的发酵液对HepG2细胞的抑制率为17.1%,对ABTS清除率达到40.71%(100μg·mL~(-1)),而对DPPH的抑制率达到59.06%(375μg·mL~(-1)),抗氧化活性较强.结论 研究表明,P12008是一株中等嗜盐的盐单胞菌,其发酵液具有一定的体外细胞毒活性和较强的抗氧化作用,值得进一步研究其活性代谢产物.
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中药复方海藻制剂体外免疫调节、细胞毒和抗氧化作用
目的 对中药复方海藻制剂水煎液各相的体外免疫调节、细胞毒和抗氧化作用进行初步研究.方法 采用中性红法测定对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响;采用MTT法测定对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用;采用MTT法测定对肿瘤细胞株的细胞毒活性;采用比色法测定对DPPH自由基、羟基自由基清除能力以及对抗脂质过氧化能力、还原能力和总体抗氧化能力的影响.结果 复方海藻制剂的乙酸乙酯相与正丁醇相显示中等强度的免疫调节活性,乙酸乙酯相显示强抗氧化活性.结论 免疫调节与抗氧化作用可能是中药复方海藻制剂抗肿瘤作用的药理基础.
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丑海参的化学成分研究(Ⅰ)
目的 研究中国南海丑海参中的化学成分.方法 应用多种色谱技术反复分离纯化,采用波谱解析和化学方法测定化合物的结构.结果 从丑海参中分离测定了3个海参皂苷:Holothurin Al(Ⅰ),Holothudn A (Ⅱ)和Pervicoside C(Ⅲ).以及1个核苷类化合物腺苷(Ⅳ).结论 所有化合物均为首次从该海参中获得,化合物Ⅰ~Ⅲ均有显著的细胞毒活性.
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紫花茄皂苷Ⅰ-2对人肝癌细胞的细胞毒影响
目的 探讨紫花茄皂苷Ⅰ-2对人肝癌BEL-7402细胞的细胞毒作用.方法 用酸性磷酸酶(APA)法测定不同浓度紫花茄皂苷Ⅰ-2处理人肝癌BEL-7402细胞后的增殖抑制率和IC50.结果 紫花茄皂苷Ⅰ-2对BEL-7402细胞有明显的增殖抑制作用,在皂苷作用72 h后,实验组与对照组的A405比较差异有显著性(P<0.05),半数抑制浓度IC50为6.2 μg/ml.结论 紫花茄皂苷Ⅰ-2对人肝癌细胞的细胞毒作用呈明显的浓度依赖性.
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吉西他宾在泌尿道移行细胞癌治疗中的应用
吉西他宾是一种新型的细胞毒类化疗药物,能够嵌入S期细胞的DNA序列中,干扰DNA的合成过程,导致细胞死亡,从而发挥抗肿瘤作用.现将吉西他宾在泌尿道移行细胞癌(TCC)中的应用总结如下.
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热刺激对体外培养的血管内皮细胞损伤及IL-6、TNF-α释放的影响
目的 探讨中暑发生及发展的机制.方法 取对数生长期人脐静脉血管内皮细胞HUEVC,对照组将细胞置于标准37℃、5% CO2浓度培养箱中,39℃组、41℃组、43℃组分别将细胞置于39℃、41℃、43℃细胞培养箱中,均分别培养0、1、3、5、7h.采用CCK-8法计算细胞存活率;撤除热刺激,各组更换100μL/孔完全培养基,继续培养24 h,计算细胞增殖率.采用ELISA法测定热刺激后1h各组血浆IL-6和TNF-α水平.结果 与对照组比较,39℃、41℃、43℃组各个时点细胞存活率均下降(P均<0.001),并呈时间及温度依赖关系.撤除热刺激、培养24h时,与对照组比较,39℃组7h及41 ℃组和43℃组各时点细胞增殖率均显著下降(P均<0.001),并呈时间及温度依赖关系.39℃、41℃、43℃组IL-6和TNF-α水平均明显高于对照组(P均<0.001),41℃组和43℃组较39℃组显著上升(P<0.01),43℃组和41℃组无显著性差异.结论 热刺激对血管内皮细胞具有细胞毒效应,可抑制血管内皮细胞增殖,并促进细胞因子IL-6和TNF-α的释放,且呈温度及时间依赖性.本研究结果为中暑的发生及发展机制研究奠定了实验基础.
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肺真菌感染诊治进展
近年来,糖皮质激素、细胞毒药物应用日益增多,肿瘤、器官移植及介入性操作患者增加,肺部真菌感染的发病率逐年上升.现将不同免疫功能状态时肺部真菌感染的诊断治疗要点简述如下.
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艾邦致全身皮肤过敏反应1例
艾邦即盐酸格拉司琼葡萄糖注射液,本品主要成分为盐酸格拉司琼,用于放疗、细胞毒类药物化疗引起的恶心和呕吐.常见的毒副作用为头痛、倦怠、发热、便秘等,偶有短暂性无症状肝转氨酶增加,致全身皮肤过敏反应在我科尚属首例.
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胶质瘤RNA致敏的人脐血树突状细胞诱导细胞毒T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用
目的:制备人脐血来源的树突状细胞(DCs),用胶质瘤RNA诱导其成熟,并观察DCs诱导细胞毒T淋巴细胞(CTL)体外杀伤肿瘤细胞的活性.方法:以rhGM-CSF、IL-4诱导人脐血单个核细胞向DCs分化并鉴定.提取胶质瘤RNA与DCs混合,使DCs致敏,未致敏的DCs为对照组.观察细胞形态并检测致敏前后DCs的表型.将DCs与外周血T细胞共培养,以胶质瘤细胞为靶细胞,采用MTT比色法检测T细胞抗肿瘤活性差异.结果:人脐血单个核细胞于诱导第5 d呈现典型的DCs形态;经rhGM-CSF、IL-4诱导培养后,CD86、CD11c、CD54、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子表达与培养前比较均明显增高(P<0.01).负载抗原后,MHC-Ⅰ和CD54表达与负载抗原前相比进一步增高(P<0.05).以DCs诱导活化的T细胞与胶质瘤细胞共培养可使胶质瘤细胞的生长受到抑制,并终导致其死亡;杀伤率与未负载抗原的对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).结论:人脐血单个核细胞在细胞因子的诱导下扩增并分化为DCs.经抗原致敏后,能增强淋巴细胞对相应肿瘤细胞的体外杀伤效应.
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氯喹治疗系统性红斑狼疮的应用时机临床探讨
系统性红斑狼疮(SLE)的治疗目前公认有效的方法是糖皮质激素和细胞毒药物治疗.氯喹做为一种辅助治疗药物在临床上应用较为广泛,文献记载该药对于轻型SLE、皮疹、光敏感以及关节症状有一定疗效[1].
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红算盘子中三萜类化学成分及其细胞毒活性研究
目的 研究红算盘子的化学成分及其细胞毒活性.方法 采用多种色谱方法分离纯化,根据理化性质和各种波谱技术进行结构鉴定;用MTT法评价其细胞毒活性.结果 从醋酸乙酯部位分离得到6个三萜类化合物,鉴定为算盘子二醇①,羽扇豆-20(29)-烯-3α,23-二醇②,算盘子酮③,表-羽扇豆醇④,3β,19α,23α-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸⑤,2β,3β,23α-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸⑥.结论 以上化合物均为首次从红算盘子中分离得到;其中化合物1~4对人肝癌BEL-7402细胞,化合物5,6对非小细胞肺癌A-549细胞具有一定程度的细胞毒作用.
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紫草素对人角质形成细胞HaCaT增殖抑制以及细胞毒性的初步研究
目的 研究紫草素对人角质形成细胞HaCaT细胞增殖的抑制作用,以及对细胞凋亡的影响,并对其细胞毒作用进行初步研究.方法 以不同浓度的紫草素处理HaCaT细胞,MTT法检测紫草素对HaCaT细胞增殖抑制作用,并计算其IC50;流式细胞仪检测紫草素对HaCaT细胞凋亡的作用,Western blotting检测其对Caspase-3以及Bcl-2蛋白的影响;Griess法检测细胞上清中一氧化氮(NO)释放量、同时检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)释放量.结果 紫草素可明显抑制HaCaT细胞增殖,24h和48h其半数致死量分别为1.43 μg/ml和0.80 μg/ml;紫草素可明显促进HaCaT细胞凋亡,且剂量越大,凋亡率越明显,紫草素促进角质形成细胞凋亡作用与诱导Caspase-3以及抑制Bcl-2蛋白表达有关.紫草素直接作用于HaCaT细胞后,细胞培养上清中NO和LDH释放量明显增加.结论 紫草素直接抑制人角质形成细胞增殖,诱导凋亡,但也具有一定的细胞毒作用.
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漏芦黄酮对成骨细胞的体外毒性实验研究
目的:考察中药漏芦黄酮对体外培养成骨细胞的细胞毒性.方法:用MTT比色法,通过测定各药物组活细胞OD值(optical density,OD)间接计算出不同浓度药物对细胞生长的抑制率,进而考察细胞毒性大小.结果:在0.09%到1.92%的浓度范围内,药物浓度与细胞抑制率呈负相关.结论:漏芦黄酮对体外培养成骨细胞有一定细胞毒性.
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微小病变型肾病:CD80相关的是细胞病?
微小病变型肾病(minimal change nephropa-thy,MCN)是儿童肾病综合征中常见的病理类型,主要是由T细胞的功能异常导致了足细胞骨架的重排引起肾小球的通透性增高和(或)肾小球基底膜上硫酸乙酰肝素的改变而产生蛋白尿。近,足细胞上CD80的表达被认为是蛋白尿产生的一种机制。MCN患者的尿液中通常有 CD80水平的升高且肾活检的标本中亦有 CD80的表达。T细胞分泌白介素13(interleukin-13,IL-13)以及 TLR 配体可能作为诱导足细胞上 CD80表达,而细胞毒 T 淋巴细胞相关抗原4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4)被认为是终止足细胞上 CD80表达的因素。本文主要介绍 CD80在 MCN 发病机制中的作用。
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B淋巴细胞交叉配型在致敏肾移植受者中的作用
致敏肾移植受者术前需做淋巴细胞毒交叉配型.T淋巴细胞交叉配型(TXM)的意义已得到公认,但B淋巴细胞交叉配型(BXM)的临床意义尚有争论.我们发现BXM阳性的肾移植受者术后急性排斥反应发生率显著升高,1年移植肾存活率显著降低,报告如下.
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亲属活体供肾肾移植术中供肾二次缺血/再灌注一例
患者,男性,38岁,因"慢性肾炎,尿毒症"入院.行规律性血液透析2周.于2002年9月11日行亲属活体供肾肾移植术.供者为受者的同胞姐姐,40岁.供、受者血型均为O型,HLA-A、B、DR抗原无错配,受者群体反应性抗体(PRA)阴性,淋巴细胞毒交叉配合试验(CDC)为2%.供肾热缺血时间为5 min,二次热缺血时间为5 min,冷缺血时间为7 h.将供者左肾移植于受者右髂窝,供肾静脉与受者的右髂外静脉行端侧吻合.
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肾移植后急性播散性脑脊髓炎一例
患者,女性,41岁.因慢性肾功能不全于2000年8月11日在本院行同种肾移植术.术前检查供、受者血型相同;群体反应性抗体(PRA)Ⅱ类为25%.供肾冷缺血时间为6h,淋巴细胞毒交叉配合试验(CDC)为3%.
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Rh阴性受者接受Rh阳性供肾移植一例
患者为男性,39岁,原发病为慢性肾小球肾炎、尿毒症,接受血液透析1年余,群体反应性抗体阴性.患者的ABO血型为B型,RhD阴性,其表型为Ccdee,该表现型在我国汉族人的Rh表型频率为0.0008.术前Rh抗体检测:抗E阴性,抗D阴性,抗C阴性,抗e阴性.供者的ABO血型为B型,RhD阳性,供、受者HLA-A、B、DR位点有4个抗原相合,淋巴细胞毒交叉配合试验阴性.供肾热缺血时间为6min,冷缺血时间为8 h.术前未对患者实施免疫治疗.术后采用环孢素A、硫唑嘌呤及泼尼松预防排斥反应,尿量正常.术后第2 d血肌酐降至186μmol/L,第4 d降至142 μmol/L,第9 d降至95μmol/L.彩色超声多普勒检查提示移植肾形态及血流未见明显异常.第7 d、第30 d分别检测患者体内Rh抗体,结果均为阴性.
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肝肾一期联合移植一例
患者为男性,33岁.因肝硬化肝功能衰竭、肝肾综合征接受肝肾一期联合移植.供、受者HLA配型良好,淋巴细胞毒交叉配合试验为0.03,群体反应性抗体(PRA)阴性.供肝以HTK液快速重力灌洗,联合切取肝脏、双肾.采取经典非转流原位肝移植.供肾植入右髂窝.供肝、供肾冷缺血时间分别为6 h、9 h,无肝期80 min.
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Rh血型阴性患者接受Rh阳性供肾二例
例1,患者为男性,23岁,维吾尔族.因尿毒症于2001年11月15日行肾移植术.供者ABO血型为B型、Rh阳性,受者ABO血型为B型、Rh阴性;淋巴细胞毒交叉配合试验为0.04.供肾热缺血时间4min,冷缺血5h.开放血流后肾脏充盈良好,立即有尿液分泌.