一种检测弓形虫抗体的快速ELIB技术

酶联免疫印迹技术(ELIB)作为一项新的免疫学技术,因其高分辨率、高灵敏度及高特异性等优点,广泛应用于寄生虫抗原的分析、纯化和鉴定等.但由于ELIB技术是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白转印以及固相免疫标记等3项技术结合而成,操作时间较长,因而未能成为常规的免疫诊断方法.我们在检测弓形虫抗体时,引进PhastSystem全自动水平电泳系统,该系统电泳凝胶厚度薄(＜0.5mm),易冷却,且电场强度高,具有快速和高分辨率等特点,再加上半干式电转移配置,使得SDS-PAGE及电转印的时间均大为减少,仅需30min,全过程也不到5h;只需微量样品,可检出弓形虫IgG和IgM两种抗体.在诊断弓形病中具有应用价值.现介绍如下.

血吸虫病免疫诊断

近年来诊断血吸虫病为经典、可靠的病原学诊断(粪检)方法,由于费工、费时、费力,疫区群众的依从性逐年下降,收集粪便愈加困难,同时随着防治规划的实施,疫区病人的感染度和感染率的下降,其敏感性愈来愈低.故迫切需要应用免疫诊断方法来补充或替代粪检方法.我国研究者从50年代开始致力于免疫诊断方法的研究,本文着重介绍一些比较成熟并已在我国现场广泛应用的免疫诊断方法.

幽门螺杆菌免疫学检测方法研究进展

幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)是1982年由澳大亚学者Warren和Marshall从胃炎和消化性溃疡病人胃黏膜活体组织中培养出来的一种革兰氏阴性螺旋形细长微弯杆菌.Hp感染不仅能引起慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等多种胃肠道疾病,并且HP被证实为I类致胃癌致病因子[1,2].此菌在世界不同地区、不同种族感染率有所差异,尤其在发展中国家其感染率较高,而我国自然人群感染率约54.76%,而现症感染率平均高达55%[3].因此建立快速、准确、安全的检测方法对Hp感染的诊断和治疗极为重要.而近些年随着HP单克隆抗体制备技术和蛋白组学的研究深入,Hp酶联免疫吸附技术,胶体金免疫技术,免疫印迹技术以及蛋白芯片等免疫诊断方法效能逐步提高,其用于现症感染和临床疗效观察中取得了可喜的进展,本文就此综述如下.

123 改善外科手术前结节性甲状腺损害的免疫诊断方法的应用

日本血吸虫病免疫诊断方法的研究进展

日本血吸虫病是一种人兽共患的寄生虫病,主要分布于亚洲的中国、菲律宾等国家.有关日本血吸虫病的免疫学诊断方法种类繁多,目前发展方向主要集中在对特异性标记物的研究和诊断方法的标准化上,以便能更好地应用于现场.该文对日本血吸虫病主要的免疫学诊断方法以及存在的一些主要问题作一简要综述.

斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原dipstick诊断方法的建立

Dipstick是一种简便、快速的免疫诊断方法.本研究以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性蛋白Mr 22 000分子纯化抗原和自制的胶体金标记羊抗人IgG建立胶体金标记dipstick快速诊断法,探讨该抗原在dipstick快速诊断斯氏狸殖吸虫病中的应用价值.

应用薄膜载体大豆脲酶结合物的酶联免疫吸附试验诊断血吸虫病

酶联免疫吸附试验(ELISA)已作为一种敏感性和特异性较高的免疫诊断方法.作者等曾用聚氯乙烯(Polyvinyl Chloride,简称PVC)塑料薄膜作为固相载体代替聚苯乙烯微量反应板,建立了PF-ELISA(Plastic,Film-ELISA),Chandler[1]、裘丽姝[2]介绍了用脲酶结合物,尿素底物新系统取代通常使用的辣根过氧化物酶(HRP)及硷性磷酸酶,提高了试验的敏感性.

末梢血胶体染料试纸条法诊断血吸虫病效果观察

由于抗血吸虫药物吡喹酮在血吸虫病流行区的广泛应用,血吸虫的感染率和感染度均有大幅度下降,在感染率＜5%的血吸虫病低度流行区,已不宜继续采用全民化疗方法.然而,重复感染和新感染依然存在,为巩固血防成果,仍需尽可能及时查治病人,而粪检已不再适用于该地区,需要寻找一种简便、快速和敏感性高、特异性好的查病方法,以适应现场防治工作需要.胶体染料试纸条法(DDIA)是新近研制开发的血吸虫病免疫诊断方法[1].为探讨其诊断血吸虫病的现场应用价值,对末梢血DDIA的应用效果进行了观察.

间接血凝全血法与静脉血清法检测血吸虫病效果比较

间接血凝试验(IHA)是目前常用的血吸虫病免疫诊断方法之一.但常规法一般都使用肘静脉血液,分离血清后检测,群众不易接受,现场使用不便.因此,近年来杨道祥报道IHA一步法[1],汤俊明指端采血塑料管法[2],张小丽采用微量末梢全血纸片法与5种血清免疫方法检查结果比较[3],阳性符合率均较高.现有部分地区采用微量末梢全血直接滴入V型反应板内,直接稀释检查(简称全血法).为了证实IHA全血法敏感性和特异性,我们对IHA全血法与静脉血清法进行了比较,报道如下.

旋毛虫病免疫诊断液、固相抗原效果多重比较

旋毛虫病是一种重要的人兽共患寄生虫病.已知约有120多种哺乳动物有自然感染.人群高发区主要是云南、河南、湖北、吉林等省.治疗不及时,病人死亡率可高达3-30%,猪旋毛虫的检出率以河南、湖北高,并呈逐年上升趋势.大多旋毛虫病与多种寄生虫病混合流行于同一地区,误诊率较高.传统的病原学检查方法由于取材部位、时间、感染程度等因素影响,检出率仅50%|2|,而且有创伤性,不易被病人接受,现场应用时受到限制.随着免疫技术的发展,新的免疫学方法的敏感性特异性已不断提高,有在临床检验中已逐渐取代病原学诊断方法,而更为广泛的应用于流行区的筛选病人和普查工作.为此,本实验研究ELISA和IEST应用于检测流行区现场采集样本的效果试图通过选择实用性抗原、改进实验条件和完善实验方法等方面的探索,筛选出一种适于流行区推广使用、特异性高、敏感性强的诊断抗原,为现场工作提供重现性好、操作简便、成本低、有疗效考核价值的免疫诊断方法.研究结果显示,旋毛虫尿溶性与水溶性纯化抗原同样有较好的敏感性及更高的特异性.水溶性抗原与固相抗原敏感性和特异性无显著性差异.

两种免疫诊断方法检测血吸虫病的操作时间与假阳性结果关系

自Yoshimoto(1910)首先应用免疫诊断方法检测日本血吸虫感染以来,国内外一直沿用至今[1].免疫诊断是血吸虫病诊断的重要辅助工具,也是当今血吸虫病防治研究的热门课题.特别是间接血凝(IHA)法和乳胶凝集(LA)法,由于其敏感性较好,特异性较高,操作简便,重复性较好,出结果快速而被广泛使用.但是,两法也存在一定的假阳性和交叉反应等问题.所以,国内外学者在其敏感性和特异性方面作了大量研究.已证实,日本血吸虫与其它寄生虫以及某些疾病确实存在交叉反应[2～4].本文观察到,采集血液标本后放置时间的长短,也会影响检测结果,即出现一定的假阳性反应.现将结果报告如下.

血吸虫尿循环抗原免疫诊断研究进展

血吸虫病的免疫诊断研究,多年来国内外学者主要致力于血清循环抗原(CAg)、循环抗体(CAb)及循环免疫复合物(CIC)的水平检测.对尿液中CAg水平检测的研究报道甚少.尿液检测标本易得,且对人体无损伤性,因此,近年来,不少学者把目标转向研究检测血吸虫病人尿CAg,试图建立新的免疫诊断方法.现就检测尿CAg的研究进展综述如下.

ELISA试验假阳性结果原因分析

酶联免疫吸附试验(ELISA)以其敏感性高、特异性强、操作简便等特点被临床及全国采供血机构广泛应用.但作为一种免疫诊断方法,在实际血液检测工作中常常会受到一些因素的干扰,导致检测结果出现非特异性反应,即假阳性,本文就产生假阳性结果的原因进行分析.

包虫病几种免疫诊断方法的比较

包虫病是棘球属和泡球属绦虫的幼虫引起的具有地方流行性和自然疫源性的动物源性人畜共患寄生虫病。在我省包虫病流行比较广泛，它不但严重危害着人类的健康，而且还影响着畜牧业的发展。现将我院近年来所用几种简易免疫诊断方法、结果情况作一分析。……