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透骨消痛颗粒含药血清诱导骨髓间充质干细胞分化的实验研究
目的 探讨透骨消痛颗粒含药血清诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)向软骨细胞分化的潜能.方法 以临床等效剂量0.145 g/(kg·d)、0.29g/(kg·d)、0.58g/(kg·d)制备各浓度透骨消痛颗粒含药血清,36只SD大鼠随机均分为空白对照组,低剂量组、中剂量组和高剂量组,分别给予0.9%生理盐水20 mL,不同浓度透骨消痛颗粒含药血清各20 mL,连续灌胃3d,采用全骨髓培养法分离培养BMSCs,显微镜下观察软骨细胞分化的形态变化并计数;RT-PCR检测骨髓基质干细胞中Sox9、CollagenⅡ、Runx2 mRNA表达.结果 空白对照组细胞呈梭形,漩涡状,单一生长;透骨消痛颗粒含药血清各组BMSCs形态发生转变,至接种7d后,其细胞生长达到高峰;透骨消痛颗粒含药血清可促进软骨细胞数量,且具有明显的剂量效应;透骨消痛颗粒含药血清可增加Sox9、CollagenⅡ和Runx2 mRNA表达水平.结论 透骨消痛颗粒含药血清可有效诱导BMSCs向软骨细胞分化.
关键词: 透骨消痛颗粒含药血清 骨髓间充质干细胞 软骨 分化潜能 -
BM SCs在骨关节外科领域中的研究进展
骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells ,BMSCs)是骨髓中除了造血干细胞之外的另一种干细胞,在特定的诱导因素诱导下BMSCs能够向成骨细胞、脂肪细胞、肌细胞、神经细胞等细胞分化,同时其可在体外培养条件下进行增殖、诱导和分化。目前,BMSCs在组织工程、细胞治疗等相关领域有着广泛的应用前景。
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急性肝衰竭模型猪微环境对脂肪间充质干细胞生物学特性的影响
目的 探究急性肝衰竭(ALF)猪脂肪来源的间充质干细胞(ADMSCs)的生物学活性,为ALF-ADMSCs是否具有潜在的自体移植潜能提供实验依据.方法 分别获取急性肝衰竭猪来源的ADMSCs和正常猪来源的ADMSCs(Nor-ADMSCs),进行原代分离和培养.观察第1代与第5代ALF-ADMSCs的细胞形态,CCK8法检测ALF-ADMSCs增殖能力,检测和分析其诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞、成软骨细胞、成肝细胞的能力,以及分析ALF-ADMSCs和Nor-ADMSCs中肝脏特异性基因的表达.结果 成功分离培养ALF-ADMSCs和Nor-ADMSCs,第1代与第5代ALF-ADMSCs细胞形态均与Nor-ADMSCs相似.ALF-ADMSCs和Nor-ADMSCs均高表达间充质干细胞表面标记CD105和CD90,不表达或低表达造血干细胞表面标记CD14.ALF-ADMSCs与Nor-ADMSCs增殖能力差异无统计学意义(P>0.05).与Nor-ADMSCs相比较,ALF-ADMSCs诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、肝样细胞的能力差异无统计学意义(P>0.05).肝细胞生长因子(HGF)在ALF-ADMSCs中表达量比Nor-ADMSCs高(12.48±0.59)倍.结论 ALF-ADMSCs具有正常的干细胞特征与生物学特性,没有因ALF微环境而改变,且其高表达肝细胞生长因子,或可作为干细胞移植治疗终末期肝病的理想细胞源.
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骨髓间充质干细胞在骨科中的应用研究进展
在骨髓基质中存在一种非造血系的干细胞称为间充质干细胞(bone marrowderived mesenchymal stem cells简称BMSCs).在不同的理化环境和细胞因子的诱导下,BMSCs具有可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌腱细胞、肌管细胞、肌肉细胞甚至神经元样细胞,即多系分化潜能,且分化后各种组织细胞有很强的增殖能力.
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肾脏原始神经外胚叶肿瘤伴全身多发转移一例报告
原始神经外胚叶肿瘤(PNET)是一种起源于神经嵴胚胎与残留组织、有多种分化潜能的小圆细胞恶性肿瘤,有EWS基因和ETS相关癌基因家族的易位,一般发病年龄在35岁以内,好发于儿童和青少年.该肿瘤在肾脏罕见[1].中国人民解放军第113医院收治1例肾脏PNET患者,现对其临床特点以及治疗预后结合文献进行分析.报道如下.
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子宫内膜间质肉瘤伴性索样分化1例并文献复习
子宫内膜间质肉瘤是一种少见的子宫肿瘤,由或多或少的与正常子宫内膜间质细胞相似的细胞组成,血管供应丰富,其来源于成熟的子宫内膜间质或子宫肌层内有分化潜能的原始子宫间叶细胞[1],临床及病理易误诊或漏诊.
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糖尿病患者脂肪间充质干细胞的分离培养与鉴定
目的:探讨体外分离培养糖尿病患者脂肪间充质干细胞(ADSCs)的方法并分析其生物学特性。方法采用胶原酶消化法从糖尿病患者的脂肪组织中分离出ADSCs。对ADSCs进行体外培养,倒置相差显微镜下观察细胞形态;绘制第3、6、8代传代细胞的生长曲线;流式细胞仪检测第3代细胞表面标记物( CD34、CD45、CD29、CD44、CD105、CD90);通过成脂诱导实验鉴定细胞的分化潜能(油红染色阳性判定为脂肪细胞,证实细胞可向脂肪细胞分化)。结果分离出的ADSCs,能稳定传代;其细胞表面标记物CD34、CD45呈阴性表达,CD29、CD90、CD44、CD105呈阳性表达。成脂诱导后油红染色阳性。结论在糖尿病患者脂肪组织中成功分离到ADSCs,在体外适宜条件下ADSCs可向脂肪细胞分化,具有分化潜能。
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大鼠胚胎期及出生早期乳腺干细胞的免疫组织化学研究
取妊娠20日龄胎鼠及出生后3、8 d的SD大鼠乳腺组织标本进行HE染色显微镜下观察,借助抗体SCA-1、CK18和α-SMA,用免疫酶标法和免疫荧光法对细胞进行免疫组化鉴定.结果 表明,妊娠第20 d鼠胚、出生后3 d和8 d乳鼠的次级导管上皮中可鉴别出4种细胞表型:SCA-1阳性细胞、CK18阳性细胞、SCA-1和CK18双阳性细胞、SCA-1和∕或CK18阴性细胞.根据细胞的形态大小和分布位置,确定SCA-1阳性的小亮细胞为乳腺干细胞.提示大鼠胚胎期及出生早期的乳腺干细胞存在分化潜能;此可为其分离及作为种子细胞转染外源性基因提供实验依据;CK18阳性细胞为已分化的腺上皮细胞,SCA-1和CK18双阳性细胞为已定向的腺上皮祖细胞.
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神经干细胞诱导分化相关因素的研究现状
1992年,Reynolds和Richards先从成年鼠的纹状体和海马中分离出能够不断增殖并具有分化潜能的细胞群落,提出了神经干细胞(neural stem cell,NSC)的概念,改变了长期以来人们认为人脑神经元缺乏再生能力的错误观念.Watt[1]等将NSC定义为未分化,缺乏分化标志,能自我更新,具有能分化为至少一种细胞表型的细胞.
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自体骨髓干细胞移植治疗路易体痴呆的护理
路易体痴呆目前一般只能采取缓解或改善症状的治疗,既不能使病情停止发展,也不能根治.神经干细胞是具有自我分裂增殖能力和多方向分化潜能的细胞,其作为神经系统自我修复的细胞学基础,已成为中枢神经系统疾病和损伤修复的研究焦点.近年来我科开展自体骨髓干细胞移植治疗3例路易体痴呆患者,并运用系统化整体护理的方法实施了围手术期护理,取得了较好的效果.现报告如下.
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NG2胶质细胞增殖和分化的研究进展
NG2胶质细胞是哺乳动物中枢神经系统中增生多的胶质细胞之一,其在发育过程中和成年都具有自我更新或产生新的少突胶质细胞的能力.中枢神经系统损伤后,NG2胶质细胞的增殖能力迅速增加且其分化潜能也变宽,可分化为星形胶质细胞甚至神经元.但影响其增殖和分化的机制还不明确,故本文对影响NG2胶质细胞的各种信号分子、生长因子及其分化潜能进行综述,进而更好地调控NG2胶质细胞的增殖和分化,更好地发挥其在中枢神经系统病变中的作用.
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细胞移植在中枢神经系统疾病中的应用
近些年的研究证实中枢神经组织有再生能力,但损伤后修复功能较差,很多实验结果不能令人满意.既往的脑移植或脑组织移植大的生物学障碍是移植物难以在宿主体内生存或发育,移植效果的稳定性及其功能的恢复不肯定.干细胞是具有多种分化潜能和自我更新能力的细胞,广泛存在于造血系统.其低免疫源性、多潜能分化及不断自我更新能力,使研究者的策略转向了细胞移植.本文对近年来细胞移植在中枢神经系统疾病中的应用研究作一综述.
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成体干细胞与肺
干细胞是一类具有自我更新和高度增殖、分化潜能的细胞,能够产生高度分化的功能细胞.按分化潜能可分成三类细胞,即全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞.按生存阶段的不同可分为胚胎干细胞和成体干细胞两大类.成体干细胞包括骨髓来源的干细胞、间充质干细胞、造血干细胞和存在于组织或器官内的干细胞.目前研究多的是成体干细胞.成体干细胞是从机体组织内分离出来的多能干细胞.目前在几乎所有的组织及或器官中都有分离出干细胞的报导.如心脏、神经组织、骨骼肌、脂肪、血管、骨髓等.另外,在皮肤、肝脏、消化道、胰脏、视网膜、乳房、卵巢、睾丸及前列腺等器官的上皮组织内也有发现[1,2].
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脐血间充质干细胞体外诱导分化潜能的研究
近年来的研究认为,间充质干细胞(MSCs)是中胚层发育的早期细胞,具有很强的自我更新能力,可体外大量扩增,并至少能分化成3种中胚层结缔组织,已被用作组织工程的种子细胞.本研究试图在体外从脐血单个核细胞(MNCs)中分离培养MSCs,研究其生物学特性及分化潜能,现报告如下.
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精原干细胞移植的研究进展
睾丸生殖细胞中精原干细胞(SSC)是雄性动物睾丸内惟一向子代传递遗传信息的干细胞,具有高度自我更新和分化潜能,也是雄性动物精子发生的基础.目前SSC移植法是研究精子发生过程的主要手段,也是制作转基因动物,研究基因功能,治疗雄(男)性不孕和保护濒危动物等的关键环节.常用的移植法有睾丸生殖细胞移植法和睾丸组织块移植法,现将用这2种移植法的研究进展作如下综述.
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碱性成纤维细胞生长因子对骨髓间充质干细胞扩增及分化潜能的影响
目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖及其分化潜能的影响.方法 体外培养大鼠BMSCs,分别设对照组和bFGF处理组,bFGF作用浓度分别为1、10、100 μg/L.作用72 h后,噻唑蓝(MTT)测吸光度(A)值反映细胞增殖.细胞免疫组织化学测细胞CD44的累积A值;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞CD44的mRNA相对表达量.结果 在1 μg/L bFGF作用下其MTT A值为0.334±0.036较对照组A值0.251 ±0.033明显增高(P<0.05).在1 μg/L bFGF作用下其细胞免疫组织化学测得CD44的累积A值较对照组明显增高(P<0.01);其RT-PCR测得CD44的mRNA相对表达量较对照组明显增高(P<0.01).结论 作用浓度为1 μg/L的bFGF可促进BMSCs的体外扩增并有助于保持BMSCs的分化潜能.
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不同物理密度介质诱导干细胞表达多种组织细胞标记蛋白
干细胞凭借其多组织分化潜能,成为当前医学界包括血液科、神经科、心脏科、骨科、皮肤科等在内的多学科研究热点[1-3].我们在近期工作中偶然发现将干细胞移植到特定物理密度的材料表面时,干细胞有顺材质硬度分化的特性.我们借助低熔点琼脂糖设计出一种物理密度梯度介质,比较干细胞在该梯度介质中的生长状态和组织分化特点,观察物理因素对干细胞横向组织分化的干预效果.
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JAK2/STAT3信号通路调节骨髓间充质干细胞神经定向分化
骨髓间充质干细胞(MSCs)是来源于中胚层的骨髓非造血干细胞,具有较强的自我更新和跨胚层分化潜能.探索MSCs神经诱导分化的内在调节机制,提高MSCa向神经元分化的比例,降低向神经胶质细胞分化比例,对于干细胞移植治疗中枢神经系统损伤有重要的临床意义.
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转染肝细胞生长因子基因对移植颗粒脂肪新生血管形成的影响
脂肪移植要取得进展,就要深入研究移植后的再血管化[1].我们以腺病毒为载体,把肝细胞生长因子(HGF)基因导入大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),然后与颗粒脂肪混合移植,充分发挥MSCs多项分化潜能和HGF强大的血管效应,旨在为颗粒脂肪移植建立新生血管诱导生物组织工程模式.
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表达胶质细胞源性神经生长因子的骨髓基质干细胞的神经分化潜能
有研究表明,骨髓基质干细胞(BM-SC)可以向神经细胞分化,且易于获取[1],因此被认为是治疗中枢神经系统疾病理想的细胞载体.我们以胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)为目的基因,采用阳离子脂质体转染方法,对BMSC的基因工程化和神经分化潜能进行了初步研究.