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不同发育阶段人皮肤β1整和素及细胞角蛋白K19表达特征及其与创面修复结局关系的研究
严重烧创伤等所致皮肤损伤后的愈合能力随着人年龄的增大而逐渐降低,其原因涉及多方面,其中表皮细胞增殖分化潜能的改变可能是其重要原因之一.由于皮肤中β1整和素及细胞角蛋白K19仅在具有增殖与分化潜能的表皮干细胞和短暂扩充细胞上表达,本研究利用β1整和素和细胞角蛋白K19单抗,观察人胚胎期、幼儿期、成人期皮肤中表皮干细胞和短暂扩充细胞分布、数量的差异,并探讨这种差异特征与创面表皮再生能力随年龄降低的关系.分别取23~24周龄胎儿、4~10周岁幼儿、35~51岁三组全层皮肤.取材后即刻10%甲醛固定,常规石蜡包埋,切片5μm待用.采用免疫组织化学SP法,β1整和素和细胞角蛋白K19单抗分别购自Neo Markers和Maxim Biotech公司.β1整合素细胞膜染成棕黄色为阳性细胞,角蛋白细胞浆染成棕黄色为阳性细胞,同时设不加一抗的阴性对照.结果显示在胎儿期皮肤表皮基底层细胞β1整和素及角蛋白K19染色均为阳性,毛囊隆突部细胞β1整和素及角蛋白K19表达也均为阳性.幼儿期表皮基底层细胞中有部分细胞表达β1整和素及角蛋白K19,阳性细胞并非散在均匀分布,而是数个阳性细胞相对集中呈片状分布,β1整和素与角蛋白K19的表达规律相似.成年人表皮基底层中表达β1整和素及角蛋白K19的细胞也呈片状分布,阳性细胞率较幼儿组低,且染色强度较弱.本实验结果提示,胎儿期表皮基底层均为表皮干细胞和短暂扩充细胞,毛囊隆突部也含有大量的表皮干细胞和短暂扩充细胞,而幼儿期表皮基底层中仅有部分细胞为干细胞和短暂扩充细胞,成人期干细胞及短暂扩充细胞所占的比例则进一步降低.这可能与胎儿期皮肤的损伤在结构上能够完全修复,包括皮肤附件如毛囊、汗腺等也能完全再生,以及临床中幼儿皮肤损伤后再上皮化能力较成人强的现象有关.
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骨髓间充质干细胞在骨组织工程中的应用进展
人骨髓组织内存在两种截然不同的系统:造血系统和基质细胞系统.造血系统包括CD34阳性的前体干细胞和能分化为各种成熟血细胞的祖细胞.而非造血系统的结缔组织和各种基质细胞则在结构上和功能上对造血系统进行支持,并提供合适的生长因子,以及细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的相互作用[1].基质细胞系统包括血管内皮细胞和骨髓间充质干细胞(MSCs),后者具有多样分化潜能,可分化为骨、韧带、脂肪、软骨和肌肉.将MSCs植入宿主动物体内可形成含有成骨细胞、脂肪和软骨细胞的骨组织[2].
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肿瘤干细胞与滑膜肉瘤相关研究进展
20世纪50年代Makino等[1]通过肿瘤细胞自体移植实验发现肿瘤组织中极少数细胞具有干细胞特性能诱发新的肿瘤组织,首次提出肿瘤干细胞(cancerstem cells,CSCs)理论.该理论认为,肿瘤干细胞作为一类特殊的干细胞,具有自我更新能力和分化潜能,以及高致瘤性和耐药性的特点,可以通过分化为肿瘤细胞而产生肿瘤,即认为肿瘤干细胞是肿瘤启动、增殖生长、转移复发的根源.
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诱导多能干细胞移植在脊髓损伤修复中的应用及研究进展
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)至今仍是再生医学急需攻克的难题.尽管各种治疗手段较之前取得了一定进展,但疗效仍不能令人满意,终导致不同程度的神经功能丧失.近几十年来,随着再生医学的发展,尤其是干细胞技术的发展,为SCI的治疗提出了新的方向.传统的胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)移植缺乏足够的供体来源并涉及伦理问题和免疫排斥,而诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)有着近似ESCs的自我更新能力和分化潜能[1],避免了免疫排斥反应及伦理问题.iPSCs作为一种可直接从组织中获取并应用于自体移植的来源细胞,目前已成为国内外干细胞领域研究的热点[2].笔者就iPSCs移植在SCI修复中的应用及研究进展作一简要综述.
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小鼠骨髓源性肝干细胞筛选及其分化潜能的研究
目的 从骨髓细胞中筛选肝干细胞.方法 供体为纯系BALB/C雄性小鼠,从其骨髓细胞中分离CD34+Lin-、CD90+Lin-、CD117+Lin-、Sca-1+Lin-细胞.受体为35 Gy全肝照射预处理的同龄同系BALB/C雌性小鼠,A、B、C、D组分别为CD34+Lin-、CD90+Lin-、CD117+Lin-、Sca1+Lin-细胞移植.术后30 d活杀小鼠,取肝作小鼠Y染色体性别决定基因Sry的原位分子杂交和白蛋白的免疫组化染色,镜下观察并记录双阳性细胞数量.结果 A、B、C、D组小鼠肝组织中均检测到双阳性细胞,其中C组的双阳性细胞数量显著多于其它各组.结论 CD34+Lin-、CD90+Lin-、CD117+Lin-、Sca-1+Lin-细胞都含有骨髓源性肝干细胞、都有分化形成肝细胞的潜能,但CD117+Lin-细胞分化形成肝细胞潜能大.
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滑膜间充质干细胞在软骨修复组织工程中的研究进展
关节软骨一旦损伤将很难修复,运用自体软骨细胞移植治疗软骨损伤,愈后较好,但由于细胞来源不足以及供体部位病变等缺点,使其运用受到了限制,因此运用间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)来修复软骨损伤具有很好的应用前景.理想的MSCs应具有强大的成软骨能力,且不易向肥大细胞分化.本综述将归纳相关文献,通过比较滑膜和软骨的解剖位置和功能结构,对比滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cells, SMSCs)和其他MSCs的生长特性及成软骨能力,评估SMSCs在再生医学中的应用以及探讨其未来发展趋势,从而证明SMSCs是具有很强的软骨分化潜能的组织特异性干细胞,在软骨损伤修复中具有很好的运用前景.
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间充质干细胞在终末期肝病及原发性肝癌中的应用
原发性肝癌(肝癌)是全球第5位常见的恶性肿瘤和第3位癌症死因,其起病隐匿,生长快,大部分患者确诊时已属中晚期,无法行根治性切除术,且对放射治疗(放疗)、化学药物治疗(化疗)不敏感,预后极差,5年生存率仅7%左右[1]。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是一类来源于中胚层,具有自我更新和多种分化潜能的多能干细胞。MSC 具有很强的可塑性,体外培养易扩增,并在特定条件下可分化为多种细胞,包括脂肪细胞、成纤维细胞、肝细胞等[2]。MSC 可以迁徙至肿瘤组织中,参与构成肿瘤微环境,进而影响肿瘤细胞增殖、分化、转移等生物学特性[3-4]。MSC 与肿瘤细胞的相互作用可重塑肿瘤微环境,并使肿瘤细胞和 MSC 的生物学行为发生相应的变化[5]。本文就 MSC 在肝癌中的作用作一综述,旨在探讨MSC 在肝癌中的应用前景。
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肝脏微环境对肝脏干细胞调控机制的研究进展
随着对肝脏干细胞的深入研究,肝脏内存在具有向肝/胆系细胞双向分化潜能的成体肝脏干细胞的观点已经被广泛接受.在肝脏严重受损,成熟肝细胞增殖受抑制或增殖不能满足肝脏代偿时由肝脏成体干细胞增殖分化为成熟肝细胞.而由肝实质细胞,肝脏非实质细胞(肝星状细胞,Kupffer细胞,窦状内皮细胞),细胞外基质及神经系统等组成的肝脏微环境对肝脏干细胞增殖分化有重要作用.现对肝脏微环境对肝脏干细胞增殖分化调控作用的研究进展作一综述.
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骨髓干细胞在血管外科的基础研究与临床应用
一、关于干细胞的研究干细胞是一类具有自我复制和多项分化潜能的原始细胞,包括胚胎干细胞和成体干细胞,生命体正是通过干细胞的分裂来实现细胞的更新及保证持续生长.而干细胞的发育也受到多种内在机制和微环境因素的影响.
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骨髓间充质干细胞在皮肤缺损修复中的应用
目前,大面积皮肤缺损创面的覆盖与修复一直是临床医师倍感棘手的问题.随着组织工程学研究的不断拓展,应用干细胞技术为解决这一难题提供了新的手段,组织工程化人工皮肤的构建和应用为临床大面积皮肤缺损的修复治疗提供了新的途径和方法 .骨髓间充质干细胞(born mesenchymal stem cells,BMSCs)是一种具有多项分化潜能的细胞,因其取材方便、对机体的损伤小、具有较强的传代增殖能力和免疫耐受性等特点而受剑越来越多的关注.对于骨髓来源的干细胞在皮肤创面愈合中的作用,国内外的学者进行过一系列的探讨.本文就骨髓间充质十细胞的特性及其在皮肤缺损修复中的应州作一综述.
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骨髓间充质干细胞与组织修复
干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞群体,根据发生的来源,干细胞可被分为两类:胚胎干细胞和成体干细胞.胚胎干细胞和成体干细胞除了来源不同,其大的区别在于增殖能力和分化潜能的不同.
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成人肝脏干细胞研究现状及展望
Malcolm等[1]认为所谓干细胞(stem cell)为不分化而长期生存,且保持多种分化潜能的一种细胞群,而祖细胞(progenitor cell)则为一类具有分化能力、自我更新、自我维持能力受限制,仅有单向或双向分化潜能且生存时间相对较短的细胞群.近年来,成人肝脏干细胞(hepatic stem cell, HSC)的研究成了国内外研究的热点.胚胎4~6个月时,肝脏是造血的主要场所,即是红细胞、骨髓细胞、B细胞、T细胞和巨核细胞生成的场所.出生后不久,这些造血功能就停止.近年来,许多学者发现当肝组织受到严重破坏时,肝组织内幼稚细胞有分化的证据,如肝组织内一种卵圆细胞(oval cell )可分化为肝细胞、胆管上皮细胞[2,3].这种卵圆细胞被认为来自赫氏小管区(the canal of hering)和胆管树终末处[4].同时也发现了这种幼稚细胞表达大量干细胞表面的标志物,如CD34、CD45、CD38、CD69、C-kit等抗原[5-12].有学者成功分离和提纯C-kit阳性细胞,并进行了体外培养[7].于是许多学者确信成人肝组织内所存在的这种幼稚细胞来自于肝脏干细胞[5-7].但也有许多学者研究了骨髓干细胞在肝细胞再生中的作用,发现成人肝组织内的幼稚细胞直接来源于骨髓干细胞[1,8、13-15].也有学者推测这种幼稚细胞可能一部分来自于骨髓干细胞,一部分来自于肝脏自身干细胞[13].不管成人肝组织内是否真正存在自身干细胞,但祖细胞肯定存在.现已证实成人肝组织内确实存在着一种能使干细胞向淋巴细胞和肝细胞分化的微环境,且干细胞在肝损伤修复、免疫排斥和肿瘤免疫反应中发挥一定作用.我们就这些问题作一综述.
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Lentivirus介导分泌神经营养因子-3的基因工程神经干细胞移植治疗脊髓损伤的实验研究
神经干细胞(NSC)是中枢神经系统中具有自我更新能力和多种分化潜能的细胞,是脊髓损伤(SCI)后再生修复的理想材料和基因载体.我们探讨了Lentivirus介导分泌神经营养因子-3(NT-3)的基因工程NSC移植治疗SCI的可行性,以期为SCI后功能恢复的实验研究以及进一步临床研究提供基础资料.
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基于骨髓基质干细胞的组织工程化软骨在非软骨形成部位的构建稳定性
骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)因其来源广泛、增殖能力强大、大规模扩增后不易丧失分化潜能等突出优势,成为软骨组织工程种子细胞的佳选择.
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脂肪组织中血管基质部分的促血管化作用及应用进展
20世纪90年代中期以来,脂肪组织已被认为是一个完整的内部器官,在能量调控、炎性反应和免疫应答方面具有特殊的作用.脂肪组织中主要存在两大细胞群,成熟脂肪细胞及血管基质部分( stromal vascular fraction,SVF)[1].SVF被认为是一组混杂的细胞群,其中含有一定数量的脂肪来源间充质干细胞(adipose derived stem cells,ASCs),ASCs具有促血管化、多种分化潜能及免疫调节功能.脂肪组织因其易于获得、储量丰富的特性正逐步成为间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的重要选择和来源.
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子宫内膜干细胞研究进展
子宫内膜由功能层和基底层组成,其功能层随卵巢激素而发生周期性变化,在女性生育期可发生超过400次的增生、分化及脱落,显现出活跃、强大的再生能力.早在上世纪七十年代,Prianishnik-ov[1]就提出了子宫内膜干细胞的假说,认为参与子宫内膜功能层增生修复的是一类具有高度增殖、自我更新和分化潜能的内膜干细胞.目前随着于细胞研究的发展,通过细胞克隆、干细胞分离鉴定、诱导分化等研究证实在于宫内膜、蜕膜及月经血中均存在于细胞,研究表明内膜干细胞在子宫内膜异位症、子宫腺肌症、子宫内膜癌等内膜相关疾病发生发展中发挥作用,此外,子宫内膜干细胞也为再生医学提供了重要的细胞来源.现对子宫内膜干细胞的研究状况以及应用前景进行综述.
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胚胎干细胞的生物学特性及其应用
1981年Evans和Kaufman首次建立了小鼠胚胎干细胞系[1].关于人的胚胎干细胞早文献记载是在1994年,ES细胞是从人胚泡的ICM中分化而成的,但只传了二代未能建系成功[2].1998年JamesThomson等[3]从人胚泡的ICM分离出ES细胞并建系成功;同年JohnGearhart等[4]从5~9W流产的胎儿生殖嵴中分离出人胚胎生殖细胞(embryonic germcell,EGC),这些都为ES细胞的研究奠定了基础.由于ES细胞具有全能分化潜能和无限扩增能力,在体外可分化成各种细胞和组织用于进行替代治疗,因此ES细胞成为21世纪生命科学研究领域的热点之一.现将胚胎干细胞的生物学特性以及应用进展进行综述.
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卵巢癌问答(四)
(接上期)12.卵巢肿瘤可分为哪几类由于卵巢本身遗传和解剖的特点,全身各个部位的肿瘤都可以在卵巢上发生,具有高度分化潜能的卵巢可以发生胚胎发育过程中3个胚层来源的肿瘤.
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神经干细胞特性及其在神经疾病治疗中的应用
神经干细胞是具有增殖、分化潜能且能增殖自身的细胞.神经干细胞分离、培养、鉴定及应用是神经科学研究的前沿领域,为探讨神经细胞发生、迁移、分化和治疗多种神经系统疾病提供了全新的思路.长期以来,人们一直认为,成年哺乳动物脑内不存在神经干细胞,神经细胞不具备更新能力,一旦受损乃至死亡,再生是不可能的,因为成熟神经细胞是不能分裂的,这种观念使人们对神经系统发生和神经疾病治疗的认识受到了很大局限.近10年来,神经生物学的重要进展之一是发现神经干细胞的存在及特征,特别是成体脑内神经干细胞的分离和鉴定具有划时代意义.
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内皮祖细胞与缺血性卒中的研究进展
干细胞是一群具有自我更新能力的细胞,并通过细胞不对称分裂分化成其他细胞[1].与干细胞相比,祖细胞是已经程序化的、确定向特定细胞系分化的细胞.内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是血管内皮细胞的祖细胞,它可以持续自我更新,在特定的条件下分化为成熟的内皮细胞.EPCs通常处于静止状态,当机体受到生理或病理刺激后,即发挥其较强的增殖、分化潜能,分化为成熟的血管内皮细胞,促进受损血管的修复.目前EPCs已成为血管发生和血管新生领域研究的热点,EPCs移植越来越多地应用于血管相关性疾病的治疗.本文对EPCs与缺血性脑血管疾病研究进展综述如下.