低剂量γ射线与香烟对胎鼠脑蛋白质及HSP70的影响

目的探讨低剂量γ射线、香烟及其联合作用对脑蛋白质及HSP70合成的影响.方法利用Westem dot blot和Lowrey方法对经低剂量γ射线(60Co,0～1.0Gy)和香烟烟雾(0～2支/只)处理的孕鼠的胎脑蛋白质和HSP70进行定量研究.结果 0.25Gy以上的照射和高浓度的香烟烟雾(2支/只)与对照组比较胎脑蛋白质明显减少,并且低剂量γ射线与香烟具有联合作用;低剂量γ射线、香烟烟雾及其联合作用下,胎脑HSP70明显升高(P＜0.01),其中高照射组和高浓度香烟组脑HSP70升高明显低于低照射组和低浓度香烟组(P＜0.01),照射与高浓度的香烟组联合明显较单独照射组低,有剂量依存关系.结论低剂量γ射线、香烟及其联合可引起脑蛋白质的含量减少,并诱导胎脑HSP70的合成,提示胎脑发育损伤与脑蛋白和HSP70的合成有一定关系.

苯乙烯职业暴露危害研究进展

苯乙烯(styrene)是一种重要的化学单体,主要用于合成塑料、树脂及橡胶,在化学工业中已得到广泛应用.同时,苯乙烯也广泛存在于环境中,在香烟烟雾、汽车尾气、饮用水和食品包装中均有发现[1].过去一致认为苯乙烯属于低毒类化合物[2],近10年来,国内外有关苯乙烯对人体危害的报道较多.本文就苯乙烯职业接触对人体造成及可能造成的危害作一综述.

香烟烟雾对小鼠仔代神经行为的影响

流行病学的研究显示,吸烟和生殖能力的下降有一定的关系,吸烟能够导致妇女生育能力降低,怀孕后的自发流产率提高和绝经期提前[1],引起人们对孕期吸烟对后代发育产生远期危害的关注.本文通过对仔鼠神经行为的测试,观察小鼠孕期被动吸烟对其仔代的影响.

短期香烟烟雾及脂多糖气道刺激对小鼠气道免疫细胞的影响

目的:探讨香烟烟雾及脂多糖(LPS)短期刺激对小鼠气道免疫细胞的影响.方法:LPS组小鼠气管内(一次性)滴注10μg LPS,熏烟组小鼠每天熏9支香烟持续熏4d,观测不同干预措施对小鼠体重的影响;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)总细胞数及细胞分类计数,观察细胞形态,并利用PDB(2-丁酸佛波醇酯)诱导BALF中的细胞检测ROS产出率;荧光定量PCR法检测肺组织中GM-CSF和CXCL15 mRNA表达.结果:与实验前相比,对照组及LPS组小鼠体重未见明显变化(P＞0.05),熏烟组小鼠体重减少了18.9％,其变化差异明显高于对照组和LPS组(P＜0.01).与对照组相比,熏烟组小鼠气道灌洗液细胞总数和各类细胞总数均无明显变化(P＞0.05);LPS组小鼠气道灌洗液细胞总数、巨噬细胞计数和中性粒细胞计数均高于对照组和熏烟组(P＜0.01),且LPS组灌洗液巨噬细胞体积较大,形态不规则,中性粒细胞胞核分叶较对照组多.LPS组小鼠气道灌洗液细胞在PDB的诱导下及没有PDB的诱导下均比对照组和熏烟组具有更高ROS产出率(P＜0.01).与对照组相比,LPS组小鼠肺组织中GM-CSF表达显著增高(P＜0.01),但CXCL-15和熏烟组小鼠肺组织中GM-CSF及CXCL-15的表达并未发生改变(P＞0.05).结论:短期香烟烟雾刺激明显引起小鼠体重下降,但未能诱发明显气道炎症反应;10 μg LPS气道滴注可通过增加肺组织GM-CSF的表达,增加中性粒细胞的成熟和募集,增加中性粒细胞内氧化应激反应及产生ROS的能力,诱发明显气道炎症反应.

CD8＋调节性T细胞在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展

慢性阻塞性肺病（ Chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一种可预防和可治疗的常见疾病，以持续存在的气流受限为特征，气流受限呈进行性发展，伴有气道和肺对有害气体或颗粒所致的慢性炎症反应增加［1］。目前有多种机制参与COPD的形成，如促炎-抗炎失衡、氧化-抗氧化失衡、蛋白酶-抗蛋白酶失衡和自主神经系统功能失衡等［2-5］，其中促炎-抗炎失衡是导致COPD迁延不愈的重要原因。这种慢性炎症累及局部和全身［6］，受累的抗原至少有三种可能来源：①微生物；②香烟烟雾成分及其衍生物；③自身抗原，包括来自细胞外基质降解产物的新生抗原［7，8］。近年越来越多的证据倾向于第三种可能：COPD患者和小鼠肺气肿模型的肺组织存在B细胞、CD4＋和CD8＋T细胞的寡克隆现象［9-11］，表明自身免疫反应可能参与了COPD的发展；另有研究显示α1-抗胰蛋白酶不仅抑制蛋白酶，而且通过阻止细胞凋亡和调节炎症反应来缓解COPD的病程进展［4］；研究人员还在稳定期COPD 患者外周血中发现异常水平的抗核抗体（ ANA ）和抗组织抗体（AT），并且AT与肺功能受损有关［12］。以上证据都支持COPD是一种自身免疫性疾病的假说。

红霉素对香烟烟雾刺激的人巨噬细胞组蛋白去乙酰化酶3表达影响的实验研究

目的：探讨红霉素对香烟烟雾刺激的人巨噬细胞组蛋白去乙酰化酶3（HDAC3）表达的影响。方法：体外培养人类单核细胞系U937细胞，用佛波脂（PMA）将其诱导分化为人巨噬细胞。按传统方法制备好香烟烟雾提取物（CSE）用于实验。将传代后的细胞分组：对照组、CSE组、红霉素＋CSE组、HDAC特异性抑制剂曲古霉素（ TSA）组。采用比色法检测细胞HDAC总活性；Western blot检测HDAC3和NF-κB蛋白表达；通过酶联免疫吸附实验（ ELISA ）检测细胞上清液中TNF-α的浓度。结果：1％CSE刺激人巨噬细胞引起细胞HDAC总活性减弱和HDAC3蛋白表达下降，诱导转录因子NF-κB活性增高，释放TNF-α；红霉素（1μg/ml）预孵育24 h可以增强CSE抑制的巨噬细胞HDAC3蛋白表达，下调NF-κB蛋白表达，抑制TNF-α的合成和释放。结论：红霉素通过上调HDAC3蛋白表达水平而抑制香烟烟雾诱导增强的转录因子NF-кB活性，进而影响炎症介质TNF-α的合成调控。

避免儿童接触香烟烟雾环境

人参皂甙Rb1对香烟烟雾诱导的大鼠神经细胞凋亡和细胞内Ca2+浓度的影响

目的:探讨人参皂甙Rb1 (GRb1)对香烟烟雾诱导的大鼠神经细胞凋亡和细胞内Ca2+浓度的影响.方法:雄性Wistar大鼠48只,随机分为对照组、吸烟组和GRb1组,每组16只吸烟组和GRb1组连续吸烟12周制作吸烟大鼠模型,期间每周给予GRb1组和吸烟组大鼠分别腹腔注射40mg/kg的GRb1和等量生理盐水,对照组不做任何处理提取大鼠大脑皮层组织,TUNEL法检测各组细胞凋亡情况,荧光分光光度法检测细胞内Ca2+浓度变化情况.结果:TUNEL法检测表明,未经香烟烟雾处理的对照组大鼠大脑皮层细胞自然凋亡率为2.54± 0.92个/视窗 连续吸烟12周,吸烟组大鼠大脑皮层细胞凋亡率较对照组显著升高,达20.62±2.13个/视窗(q=35.72,P＜0.01) GRb1组细胞凋亡率虽也有增加,为11.48±2.37个/视窗,明显低于吸烟组(q=15.39,P＜0.01).对照组、吸烟组和GRb1组大鼠大脑皮层细胞内Ca2+浓度分别为236.62± 12.52ng/L、636.37±18.63 ng/L和353.61±13.72 ng/L,G Rb1组Ca2+浓度显著低于吸烟组(q=54.73,P＜0.01).结论:GRb1对吸烟大鼠脑损伤的保护作用可能与抑制细胞内的Ca2+超载、降低香烟烟雾诱导的神经细胞凋亡有关.

香烟烟雾暴露大鼠肺组织中RAGE蛋白表达的改变

[目的]观察香烟烟雾暴露大鼠肺组织中晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycationendproducta,RAGE)蛋白的表达. [方法]健康雄性Wistar大鼠20只,随机分为3个香烟烟雾染毒组和1个对照组,每组5只.采用动式气体染毒装置对大鼠进行香烟烟雾的染毒,装置内烟雾及氧气浓度分别控制在20%和21%,每天染毒2次,每次30min,3个染毒组分别暴露1、2、4个月作为短、中、长时间暴露组.染毒结束后取动物肺脏,左肺甲醛固定作病理切片,右肺提取蛋白,分别采用免疫组织化学方法和免疫印迹方法(Western blot)定性和定量检测RAGE蛋白在各组大鼠肺组织中的表达.同时检测肺组织氧化损伤指标--线粒体细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidase,COX)的活性,并分析RAGE的表达与COX活性的相关性. [结果]免疫组织化学结果显示RAGE蛋白棕黄色阳性颗粒在香烟烟雾暴露组大鼠的肺泡上皮细、支气管上皮细胞以及淋巴细胞中均呈现阳性表达.Western blot结果显示,与对照组比较,中、长时间暴露组大鼠肺组织中RAGE蛋白的表达明显增高(P<0.01).COX活性检测显示,各染毒组COX的活性均明显降低(P<0.05).相关分析显示,RAGE的表达量与COX的活性呈负相关. [结论]香烟烟雾暴露可诱导大鼠肺组织RAGE蛋白的表达,有望作为吸烟的潜在效应标志物.

孕鼠香烟烟雾染毒对胎鼠视杯和视泡上皮细胞凋亡的影响

[目的]观察孕鼠香烟烟雾染毒致胎鼠眼畸形的作用及对视杯、视泡上皮细胞和问充质细胞凋亡的影响.[方法]将怀孕的金黄地鼠随机分为吸烟组和对照组,吸烟组共3组(每组10只动物)分别于孕第6、7、8天开始用香烟烟雾染毒(即A、B、C组);对照组(共15只动物)除无烟熏外,其他条件同吸烟组.分别于染毒第3天时,在体视显微镜和光镜下观察各组鼠胚的发育情况及眼畸形的形态学变化;采用原位末端标记法定量分析金黄地鼠胎鼠视杯、视泡上皮细胞及间充质细胞凋亡的变化.[结果]孕鼠香烟烟雾染毒对胚胎有显著致畸作用,吸烟组总畸形率为40.08%,眼畸形率为10.32%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01),其中以孕7天开始染毒组畸形率高(51.69%).吸烟组视杯、视泡上皮细胞及间充质细胞的凋亡细胞数明显高于对照组(P<0.05),且以孕7天开始染毒组凋亡细胞计数高,为(29.1±2.1)个.组织学观察发现,吸烟组胎鼠视杯的发生明显迟干对照组.[结论]香烟烟雾染毒对胚胎有明显眼致畸作用;香烟烟雾可以诱导视杯、视泡上皮细胞及间充质细胞过度凋亡,导致视杯的发生明显延迟,这可能是香烟烟雾染毒致胚胎眼畸形发生的机制之一.

环境因素对皮肤衰老的影响

衰老是指随着年龄的增长,机体各器官、系统发生功能性和器质性衰退的渐进过程.衰老这一复杂的生物学过程,除受基因的调控、疾病、不良生活习惯及社会心理负荷的影响外,环境因素也发挥重要作用.由于皮肤直接与外环境相接触,皮肤的衰老受环境因素的影响为显著,尤其在身体暴露部位(面颈部、上臂等)的皮肤.据目前所知,对皮肤有不良作用的主要环境因素包括日光中紫外线(UVA、UVB)、红外线(IR)及香烟烟雾、空气污染等.这些都可加速皮肤生理衰老过程,并具其自身的特点.

被动吸烟对大鼠胰腺损伤的研究

吸烟是一种呈全世界流行的生活习惯.有研究发现,吸烟与胰腺癌(PC)和慢性胰腺炎(CP)发展有关[1,2].本研究采用香烟烟雾染毒法模拟被动吸烟状态,观察吸烟所致大鼠胰腺损伤并探讨香烟中氧自由基(oxygen free radical,OFR)在胰腺损伤中的作用.

香烟烟雾对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能及血清细胞因子水平影响

目的 探讨被动吸烟联合气道内注入脂多糖(LPS)法制备大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型过程中,大鼠肺功能及血清中细胞因子水平的变化.方法 72只雄性SD大鼠随机均分为4周、6周、8周模型组,自然愈合3周、6周组和对照组.采用气管内两次注入LPS联合持续熏烟的方法建立COPD大鼠模型,动态监测被动吸烟过程中及停止熏烟后,动物肺功能指标0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)及其与用力肺活量(FVC)比值(FEV0.3/FVC)的变化;同时用酶联免疫吸附方法检测血清中白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,并进行相关分析.结果 与对照组比较,各模型组FEV0.3、FEV0.3/FVC、IL-10水平降低,IL-8、TNF-α水平升高(P均＜0.05);且随着熏烟时间延长细胞因子及肺功能指标变化更为显著.模型组IL-8、TNF-α水平与FEV0.3/FVC呈负相关(P＜0.001,r=-0.579;P=0.034,r=-0.354).与对照组比较,自然愈合6周组IL-8、TNF-α水平下降(P均＜0.05),IL-10升高(P＜0.05),各自然愈合组FEV0.3、FEV0.3/FVC均低于对照组(P均＜0.05).结论 香烟烟雾刺激能显著影响COPD大鼠体内细胞因子水平.

香烟烟雾提取物抑制肺泡上皮细胞的增殖并诱导其凋亡

香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)中含有丰富的氧化剂和自由基,由它所引起的氧化应激可导致肺泡壁的损伤进而发展为肺气肿.近年来,围绕CSE损伤肺泡壁作用机制的研究较为活跃,但其结果却一直存在着分歧.本实验的目的是观察CSE对肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤作用并探讨与其相关的分子机制.MTT比色法的结果显示,CSE以时间和剂量依赖性的方式降低细胞的增殖活力,流式细胞术的分析结果表明细胞增殖周期被阻滞在G1/S期.Hoechst 33258染色以及透射电镜观察从形态上确认CSE诱导细胞凋亡的发生,DNA梯的出现和Annexin V-FITC/碘化丙啶双染色的结果从分子水平得到进一步的证实.同时,运用流式细胞术检测到CSE诱导的凋亡伴随着Fas受体的高表达和caspase-3的显著活化.另外,使用H2DCFDA染色,经激光共聚焦显微镜术测得细胞内氧自由基在细胞受到CSE刺激以后大量快速积累.结果表明CSE能够抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的A549细胞的生长和增殖,并诱导细胞凋亡,由Fas受体所介导的死亡受体途径参与此凋亡过程,而CSE所引起的氧化应激则可能是阻止肺泡上皮细胞生长增殖并诱导其凋亡的始动因素.

香烟烟雾对小鼠支气管肺组织内皮素、一氧化氮水平影响的研究

目的:探讨香烟烟雾对气道及肺组织损伤的机理.方法:采用试剂盒检测被动吸烟小鼠血浆和肺泡灌洗液中内皮素、一氧化氮的浓度变化.结果:香烟烟雾刺激小鼠血浆及肺泡灌洗液中内皮素和一氧化氮显著高于对照组(P＜0.001).结论:香烟烟雾可刺激气道上皮细胞和血管内皮细胞释放内皮素,诱导一氧化氮大量产生是造成气道炎症损害的重要因素.

长期香烟烟雾吸入对大鼠的慢性毒作用

目的 探讨长期香烟烟雾吸入对大鼠的慢性毒性作用.方法 健康雄性Wistar大鼠18只,随机分为正常对照组、低浓度(20%)染毒组和高浓度(60%)染毒组.染毒组大鼠整体暴露于动式气体染毒装置,烟雾吸入.染毒期间对大鼠定期进行体质量测量,在第5周、13周、21周、45周末染毒后分别收集各组大鼠24 h尿液进行8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)测定,第45周末处死大鼠,观察肺脏病理改变与骨髓细胞微核率.结果 肺脏病理切片显示染毒组大鼠肺气肿改变明显,支气管炎症反应逐渐加重.染毒组大鼠体质量增长均显著低于对照组;同时在各个时间点8-O-HdG水平明显升高,高浓度组升高更为显著;各染毒组微核率明显升高.上述变化均有统计学意义(P<0.05).结论 长期香烟烟雾吸人对大鼠有慢性毒性作用.

地毯乃藏污纳垢之所

人们早就知道,地毯是室内环境中灰尘、虫螨等的主要聚集地.在室内,来自樟脑球、空气清新剂、杀虫剂和香烟烟雾等化学物质的许多污染,尽管也被墙纸、天花板和其他室内物品的表面所吸附,但大部分都滞留在地毯中.

ICR小鼠吸烟诱导肺部炎症模型的建立及其特征

目的:观察ICR小鼠对急性吸烟暴露的敏感性,建立ICR小鼠急性吸烟引起肺损伤的模型.方珐:小鼠每天被动吸烟3次,一次暴露两支,持续20 min,分别急性吸烟0 d、1 d、3 d、7 d,观察小鼠肺组织的支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及分类计数、肺组织干湿重比,肺组织病理切片炎症情况、肺组织TNF-α含量、MMP-12含量,MPO活性,评价该品系小鼠对吸烟的耐受性与敏感性和适宜的暴露时间.结果:随着吸烟天数的增加,肺干湿重比、白细胞计数、MPO、MMP-12均呈时间依赖性上升(P<0.01),以3 d为高.TNF-α吸烟1 d即明显升高,吸烟7 d时仍持续高水平.结论:ICR小鼠急性吸烟3d为急性炎症的高峰,之后迁延进入慢性炎症,本品系对于吸烟暴露的耐受性与敏感性均较佳,为急性吸烟建模的良好模型.

香烟烟雾吸入致大鼠肺与气管上皮细胞RAGE和S100A6表达增加

目的 观察香烟烟雾长期染毒大鼠肺组织、气管上皮细胞中晚期糖基化终产物受体(RAGE)和钙结合蛋白(S100A6)的表达.方法 健康雄性Wistar大鼠18只,随机分为对照组、低(烟雾浓度20%)和高(烟雾浓度60%)浓度组,每组6只.动式气体染毒装置每天染毒2次,每次30 min,一周5 d,共染毒43周.分离大鼠气管和肺组织,分离原代上皮细胞,收集并提取总蛋白;Western blot方法检测RAGE和S100A6蛋白的表达.同时测定正常的人支气管上皮细胞株BEAS-2B和肺癌细胞株A549中2种蛋白的表达情况.结果 气管组织贴块培养法分离出的上皮细胞纯度为(93.56±1.48)%;烟雾染毒组大鼠肺组织及气管上皮细胞中RAGE和S100A6蛋白的表达均显著增高.同时,肺癌细胞A549中RAGE及S100A6蛋白的表达量明显高于正常人支气管上皮细胞BEAS-2B.结论 RAGE和S100A6有望作为香烟烟雾暴露致肺损伤的生物学标志.

Treg在慢性阻塞性肺疾病中的研究新进展

调节性 T 细胞( regulatory T cells,Treg)是一类具有抑制功能的CD4+ T淋巴细胞的亚群,在适应性免疫应答的外周免疫耐受中发挥重要作用。现研究显示在多种慢性炎症性疾病和自身免疫性疾病中存在Treg数量改变,提示Treg在慢性炎症性疾病和自身免疫性疾病的发病机制中有着重要的调节作用。慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)是以持续、进行性、不可逆的气流受限为特征的疾病,与气道和肺组织对香烟烟雾等有害气体或颗粒的异常慢性炎症反应有关。目前该病的发病机制未完全明确,近年研究[1,2]表明慢阻肺存在着免疫反应介导的气道炎症,慢阻肺可能为自身免疫性疾病。故深入揭示Treg在慢阻肺的发病机制中作用,已成为慢阻肺研究领域的热点之一。本文就Treg在慢阻肺中的研究进展作一综述。