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SP 94靶向肽在肝细胞肝癌显像中的应用
目的探讨99 Tcm?tricine?EDDA／HYNIC?SP94作为HCC特异性显像剂的可行性。方法利用固体合成技术合成HYNIC?SP94，以tricine?EDDA作为协同配体进行99 Tcm 标记，测定标记产物的放化纯及稳定性。将不同比活度（2．5、4．0和30．0 GBq／μmol）的99 Tcm?tricine?EDDA／HYNIC?SP94与Huh?7细胞温育进行细胞结合实验。 Huh?7和Hela荷瘤鼠分别作为实验组和对照组用于动物分布和microSPECT／CT显像实验。采用两样本t检验分析数据。结果99 Tcm?tricine?EDDA／HYNIC?SP94的标记率＞95％。标记产物在生理盐水及FBS中温育12 h仍稳定。随着99 Tcm?tricine?EDDA／HYNIC?SP94浓度的增加，Huh?7细胞结合增多并逐渐达饱和。生物分布实验中，注射显像剂后0．5 h肿瘤放射性摄取值为（1．02±0．26）％ID／g，明显高于HYNIC?SP94阻断组[（0．34±0．09）％ID／g；t＝3?537，P＜0．05]。与对照组Hela肿瘤相比，microSPECT／CT显像示Huh?7肿瘤摄取信号更强，且比活度较高的显像剂显像效果更佳。结论99 Tcm?tricine?EDDA／HYNIC?SP94的标记过程简单，稳定性好，能特异性识别肿瘤，有助于肝癌显像。
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18F-RGD环肽二聚体的自动化合成及小动物PET显像
目的 应用国产多功能18F标记模块制备4-[18F]氟-3-三氟甲基苯甲酰基-谷氨酸-(RGD -苯丙氨酸-赖氨酸)环肽二聚体(4-18 F-TFMB-E[c(RGDfk)2]),并用micro PET观察其在肿瘤模型鼠内的生物分布.方法 基于PET-MF-2V-IT-I多功能合成模块,采用“一锅法”完成4-18F-TFMB-E[ c(RGDfk)2]的制备和纯化.荷人胰腺癌BxPC-3裸鼠给药后行micro PET活体显像.结果 4-18 F-TFMB-E[ c(RGDfk)2]放化产率为(27.4±2.3)％(衰减校正后),总合成时间为30 min,无需HPLC法分离,放化纯＞98％.荷人胰腺癌BxPC-3裸鼠注射4-18 F-TFMB-E[c(RGDfk)2]后30、60和120 min后肿瘤摄取值(％ID/g)分别为4.03±0.32、3.31±0.20和2.72±0.17；注射后30 min肿瘤与对侧肌肉摄取值比值大于6(对侧肌肉摄取值为0.47 ±0.12).4-18F-TFMB-E[c (RGDfk)2]主要经肝、肠排泄.结论 4-18F-TFMB-E[ c(RGDfk)2]自动化合成速度快、效率高,胰腺癌肿瘤模型显影清晰.
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18F-FP-peptide用于化疗后肿瘤细胞凋亡显像
目的 研发含天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)核心的正电子核素标记的caspase-3多肽活性显像剂,以在体检测肿瘤细胞凋亡.方法 用国产合成模块通过点击化学合成( 18S,21S,24S,27S,30S)-27-(2-羧乙基)-21-(羧甲基)-30-( (2S,3R,4R,5R,6S)-6-((2-(4-(3-[18F]氟戊基)-1H-1,2,3三唑-1-yl)乙酰氨基)甲基)-3,4,5-三羟基四氢-2H-吡喃-2-羧酰氨)-24-异丙基-18-甲基-17,20,23,26,29-五羰基-4,7,10,13-四氧-16,19,22,25,28-五氨杂三十烷-1,32-二酸(18 F-FP-peptide).在体外18F-FP-peptide与经卡铂化疗的A549肺癌细胞混合60 min后,检测细胞放射性摄取率,摄取率=(放射性活度平均值×10×100％)/(细胞计数×细胞体积×放射性对照值).将18F-FP-peptide注射到经卡铂化疗的荷A549肿瘤小鼠体内,60 min后测其生物学分布,并行micro PET/CT显像.应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,评价18 F-FP-peptide放射性摄取率与细胞凋亡率的相关性.数据处理使用SPSS 13.0统计软件,计量资料采用x-±s表示,组间比较采用单因素方差分析,相关性研究采用线性相关与回归分析.结果 18 F-FP-peptide的合成效率为(21.0±4.5)％(n=6,不校正),放化纯为99％,比活度为870 GBq/μmol.体外细胞实验研究表明,各组细胞凋亡率随卡铂化疗时间延长逐渐升高,经卡铂处理后0、1、2和24h后细胞凋亡率分别为(1.02±0.31)％、(4.85±1.26)％、(6.37±2.21)％和(10.23±2.43)％,对应的细胞摄取率分别为(0.06±0.01)％、(0.31±0.04)％、(0.44±0.02)％和(0.86±0.04)％,各组细胞凋亡率与放射性摄取率之间呈明显正相关(y=1.1244+11.0949x,r=0.9850,P＜0.01)；荷A549肿瘤卡铂化疗后24h,肿瘤组织放射性摄取率为(0.33±0.02) ％ID/g,明显高于未化疗肿瘤组织的(0.08±0.01) ％ID/g(F=31.25,P＜0.01)；而两者的细胞凋亡率分别为(15.50±1.47)％和(1.92±0.31)％,差异有统计学意义(F=33.54,P＜0.01)；荷A549肿瘤化疗后细胞凋亡率和肿瘤对18 F-FP-peptide的放射性摄取率呈明显正相关(y=-1.9055+54.4341x,r=0.9907,P＜0.01)；Micro PET显像示,未经化疗的肿瘤基本无放射性摄取,SUVmax与对侧比值为1.32±0.01,而经卡铂化疗的肿瘤明显摄取显像剂,SUVmax与对侧比值为3.46±0.02,两者比较差异有统计学意义(F=11.05,P＜0.01).结论 18F-FP-peptide是有临床潜在价值的caspase-3 活性显像剂.
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放射性碘间接标记血管活性肠肽
目的研究能有效降低体内脱碘的血管活性肠肽(VIP)的标记方法.方法①标记前体N-琥珀酰亚胺-3-(三正丁基锡)苯甲酸酯(ATE),得到中间体N-琥珀酰亚胺-3-I(125I)代苯甲酸酯(S125IB):采用Iodogen方法进行放射性碘标记,并考察一系列条件对标记率的影响.通过Sep-Pak硅胶柱分离得到产物S125IB,于4 ℃避光保存2 d.标记率和稳定性通过薄层层析(TLC)方法测定.②S125IB与VIP的联接:S125IB与VIP直接混合得到产物3-I(125I)代苯甲酰化血管活性肠肽(125IBA-VIP).以反相TLC测定其标记率.产物125IBA-VIP经高效液相层析(HPLC,RP C18柱)分离得到.三氯乙酸(TCA)沉淀法测定125IBA-VIP的体外稳定性.体外生物活性分析通过与细胞株SGC7901的细胞结合实验测定.结果①前体标记结果.室温条件下,氧化剂用量约10 μg,n(ATE)∶n(Na125I)为3～8∶1,反应5 min标记率>96%.S125IB在上述条件下较稳定,TLC结果显示无明显的放射性杂质产生.②S125IB与VIP的联接.TLC测定标记率>75%,HPLC示125IBA-VIP的保留时间(tR)为13.3 min,S125IB为19.6 min,VIP为8.32 min.125IBA-VIP的体外稳定性较好,4 ℃保存7 d后,无明显脱碘现象.细胞结合实验结果表明,125IBA-VIP活性与Iodogen法直接标记得到的125I-VIP一致,无明显生物活性损失.结论以ATE为前体对VIP进行放射性碘标记,解决了直接标记稳定性差、体内脱碘严重的问题,为蛋白质及多肽的放射性卤标提供了一个有效途径.
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99Tcm-亚锡葡庚糖酸钠结合GGC序列监测基因治疗的实验研究
目的 构建以金属结合肽(双甘氨酰半胱氨酸,即GGC序列)为核素报告基因、人VEGF165为治疗基因的重组腺病毒载体,以99Tcm-GH为报告探针,探讨该报告系统监测治疗基因表达的可行性.方法 pcDNA3-VEGF165质粒线性化后,将金属结合肽GGC序列连于VEGF165基因C端,通过内部核糖体切入位点(IRES)连接增强型绿色荧光蛋白(EGFP),构建重组腺病毒载体Ad5-VEGF165GGCmotif-IRES-EGFP(Ad5-VIE),同时构建腺病毒包装EGFP(Ad5-EGFP)为对照.以不同感染复数(MOI=0,10,25,50,100)Ad5-VIE感染大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)后,用99Tcm-GH为报告探针,研究感染细胞摄取动力学(30,60,90和120 min)情况,以检测GGC序列在MSC中的表达,并与实时定量PCR、Western-blot蛋白印迹、免疫组织化学等方法鉴定的VEGF165表达进行对比分析.通过荧光显微镜及实时定量PCR检测EGFP在细胞中的表达.采用SPSS 13.0软件进行统计学处理,组间比较运用独立样本成组t检验、q检验和直线(Pearson)相关分析.结果 以Ad5-VIE感染MSC后,不同MOI摄取实验结果示细胞对99Tcm-GH的摄取率随病毒MOI的增加而逐渐增加(r2=0.86,P＜0.05),并且在MOI=100时达到(7.94±0.75)%;不同时间摄取实验示随99Tcm-GH孵育时间延长,细胞摄取率逐步增高,至120 min时达到(7.72±0.22)%.Ad5-VIE感染组与Ad5-EGFP感染组摄取率在各个不同时间点差异均有统计学意义(t=15.10～54.92,P均＜0.05).在mRNA水平上,VEGF165及EGFP表达均随病毒MOI增加而增加(r2=0.99,P＜0.05).不同MOI下细胞对99Tcm-GH的摄取与VEGF165蛋白表达呈较好的相关性(r2=0.90,P＜0.05).免疫组织化学检查结果表明人VEGF165目的 基因在MSC中成功表达.荧光显微镜下可以观测到被感染细胞中的EGFP蛋白.结论 成功构建的重组腺病毒系统Ad5-VIE感染MSC对99Tcm-GH的摄取与VEGF165表达呈正相关.以GGC多肽为报告基因可以监测治疗基因VEGF165的表达,为核素报告基因显像提供了理论依据.
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三个抗糖尿病药进入临床试验
Amylin制药公司的一种用于2型糖尿病人的合成肽类抗糖尿病药exendin-4(AC 2993)将于2001年开始进行Ⅲ期临床实验.
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细胞因子与甲状腺
细胞因子是一组具有多种生物学活性的蛋白质或肽类,它们主要由免疫细胞产生,并通过与各自的靶细胞表面特异性受体结合发挥作用.甲状腺细胞表面不仅存在这样的受体,其本身也可合成并释放部分细胞因子如白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8、IL-11及肿瘤坏死因子(TNF-α)等[1].现就近年来甲状腺与细胞因子的研究进展作一回顾.
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老人如何选用护肤品
皮肤有营养,老人才健美.老年人的皮肤特点是松弛而有皱纹,皮下脂肪减少甚至消失,汗腺及皮脂腺萎缩,皮肤干燥、变硬变薄、防御功能下降.因此老年人只能选择适当的营养性化妆品和保湿类的,方可延缓皮肤老化、保持肌肤活力.1.珍珠类:珍珠中含有24种微量元素及角蛋白肽类等多种成分,能参与人体酶的代谢,促进组织再生,起到护肤、美颜、抗衰老的作用.
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ZS-1多肽修饰载紫杉醇靶向脂质体抑制NCI-H1299肺癌细胞的研究
目的 以人源性肺癌细胞NCI-H 1299为模型,研究ZS-1多肽修饰的载紫杉醇脂质体(ZS-1 modified paclitaxel liposome,ZSLP-PTX)的体外抗肿瘤作用.方法 采用薄膜分散法制备ZSLP-PTX,并对其理化性质进行表征.MTT实验研究ZSLP-PTX对NCI-H1299肿瘤细胞的增殖抑制能力,用定性和定量的细胞摄取实验研究ZS-1修饰脂质体与肺癌细胞的亲和力.构建NCI-H1299细胞肿瘤球模型,研究不同脂质体对肿瘤球的穿透能力.结果 ZSLP-PTX的粒径为(125.7±18.5)nm,24小时内,在50％的血清中能保持稳定.NCI-H1299细胞和NCI-H1299体外肿瘤球对ZSLP的摄取能力大于LP-PTX(P ＜0.05);ZSLP-PTX对NCI-H1299细胞的增殖抑制作用显著强于LP-PTX(P ＜0.05).结论 与LP-PTX比较,ZSLP-PTX能够更有效地被NCI-H1299肿瘤细胞所摄取,抑制肿瘤细胞的增殖,具有更强的抗肿瘤作用.
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β肽及其多聚物对人肝癌细胞株与基质黏附的抑制作用
目的研究β肽及其多聚物对肝癌细胞株与基质黏附的抑制作用.方法观察化学合成的β肽(β肽)、化学合成的二聚β肽(β2肽)、化学合成的三聚β肽(β3肽)、用大肠杆菌表达系统表达的表达β3肽及GRGDS对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞及人肝癌高转移细胞株HCCLM6细胞与纤连蛋白(fibronectin,FN)的黏附作用的影响.结果各种多肽对细胞与FN的黏附均具有特异的抑制作用,呈现剂量效应相关关系和时间效应相关关系(P<0.05).且随着多肽重复次数的增多,对细胞与FN黏附的抑制作用越强,表达β3肽和β3肽的抑制肿瘤细胞黏附的作用强,β2肽和GRGDS的作用次之,β肽的抑制作用弱.各种多肽对HCCLM6细胞与FN黏附的抑制作用强于对SMMC-7721细胞的黏附抑制作用.结论表达β3肽对肝癌细胞株与基质的黏附具有强大的抑制作用,可能成为抗肿瘤转移的新的药物手段.
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幽门螺杆菌感染与胃癌、慢性胃炎、溃疡病、异型增生的关系及PCNA表达
目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染的不同胃黏膜增殖性病变的演进中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及其意义.方法对130例病理证实的不同胃黏膜病变应用免疫组化方法检测PCNA标记指数(LI),Warthin-starry法检测Hp感染.结果 PCNA-LI在浅表性胃炎为22.00±16.95,萎缩肠化性胃炎为46.45±19.10,溃疡病为45.75±18.15,异型增生为61.06±20.67.在萎缩肠化性胃炎、溃疡病、异型增长及胃癌组织中均高于浅表性胃炎(P<0.05).萎缩肠化型胃炎、溃疡病、异型增生及胃癌中Hp感染阳性组PCNA阳性表达均高于Hp阴性组(P<0.05).结论 PCNA表达和Hp感染与胃黏膜增殖和恶化有关.
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抗菌肽在抗肿瘤方面的研究进展
抗菌肽是一种天然免疫系统中的小分子多肽,具有抗肿瘤活性,毒副反应小,不易产生耐药性等特点.研究抗菌肽对研发新型抗肿瘤化疗药物具有重要意义.
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YIGSR抑制骨肉瘤细胞分泌MMP-2和MMP-9的实验研究
[目的] 研究酪氨酸-异亮氨酸-甘氨酸-丝氨酸-精氨酸五肽(YIGSR)对人骨肉瘤细胞MG-63分泌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的抑制作用.[方法] 在MG-63细胞中加入0、50、100μg/ml的YIGSR,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫组化和明胶酶谱分析检测MMP-2和MMP-9的变化.[结果] 免疫组化结果显示随YIGSR剂量增加,MMP-2、MMP-9平均光度递减,胞浆着色变浅;RT-PCR结果显示,随YIGSR剂量增加,MMP-2、MMP-9对应电泳条带亮度逐渐减弱:明胶酶谱分析也表明,随YIGSR剂量的增加,负染条带平均光度越来越低.结果均有显著性差异(P<0.05).[结论] YIGSR能有效抑制人骨肉瘤细胞MG-63分泌MMP-2和MMP-9,在抑制骨肉瘤的侵袭与转移中可能会发挥一定作用.
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核素标记血管多肽显像诊断恶性肿瘤实验研究
[目的]以肿瘤血管系统为目的靶,以核素标记多肽ATWLPPR为显像剂,探讨核素标记肿瘤血管特异性多肽显像用于肿瘤诊断的可行性.[方法]应用99mTc标记ATWLPPR并鉴定.制作荷人乳腺癌裸鼠模型,实验组于注射99mTc-ATWLPPR后不同时间显像,对照组应用未标记ATWLPPR预处理后显像,勾画感兴趣区,计算两组肿瘤与对侧相应部位放射性比值:荷瘤裸鼠于注射显像剂后180min,取感兴趣器官及肿瘤组织称重并测量放射性计数:[结果]以HYNIC作为双功能螯合剂,99mTc-HYNIC-ATWLPPR标记率可达91.53%±2.339%,放化纯为94.14%±1.75%,标志物体外稳定.实验组荷瘤裸鼠注射显像剂后180min肿瘤部位显影为清晰,对照组肿瘤部位未见明显显像剂分布.两组肿瘤/对侧上肢的放射性比值分别为2.33±0.40和1.18±0.12(P＜0.05).显像剂在荷乳腺癌裸鼠体内肝脏和肾脏的摄取高.脑部摄取低;[结论:制备的99mTc-HYNIC-ATWLPPR方法简单,标记率和放化纯高、稳定性好.主要以肝脏和肾脏排泄;肿瘤组织可以对该显像剂特异性摄取.提示该显像剂可以用于肿瘤诊断.
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肽类和蛋白质类药物肺部给药的体内外评价方法
目的介绍肽类和蛋白质类药物肺部给药的体内外评价方法.方法对肽类和蛋白质药物肺部给药研究中的给药方法、药动学评价、药效学评价、肺部沉积、体外评价及安全性评价方法进行综述.结果根据研究的不同阶段选择合适的动物给药模型,采用特异性强、灵敏度高的分析方法是肽类和蛋白质药物肺部给药系统体内评价的关键.肺内沉积是对剂型和给药装置递送效果的综合考察.具有良好体内外相关性的体外评价方法的建立与安全性评价在肺部给药制剂开发中具有十分重要的意义.结论肽类和蛋白质类药物肺部给药的体内外评价方法与其他给药途径有较大区别,在研究和开发中应根据需要选取适当的方法.
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抗菌肽Alloferon-1串联式重组表达及其表达产物体外抗肿瘤活性的研究
目的:构建串联式表达Alloferon-1的原核重组表达系统,检测合成及重组表达的Alloferon-1体外抗肿瘤细胞活性.方法:采用连接引物PCR法,构建含6×His-EK-8×Alloferon-1-EK-6×His序列的人工融合基因;采用常规分子生物学方法克隆并构建该人工融合基因及其原核表达系统;采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统了解目的重组产物8×rAlloferon-1-EK表达情况和产量;采用Ni-NTA亲和层析及EK酶切和Sephadex G-50层析法提纯8×rAlloferon-1-EK及rAlloferon-1-EK;采用MTT法检测rAlloferon-1-EK体外抑制KB、SGC和HL-60肿瘤细胞增殖的作用,并与直接合成的Alloferon-1(sAlloferon-1)和Alloferon-1-EK(sAlloferon-1-EK)的抗肿瘤作用比较.结果:获得了序列正确的目的人工融合基因克隆及其原核表达系统pET42a-8×rAlloferon-1-EK-E.coliBLDE3.在IPTG诱导下,该原核重组表达系统可表达串联式目的重组蛋白8×rAlloferon-1-EK,其产量约为细菌总蛋白的30%.Ni-NTA和Sephadex G-50层析后,可分别获得8×rAlloferon-1-EK和rAlloferon-1-EK.在25～100 μg/ml剂量范围内,sAlloferon-1、sAlloferon-1-EK和rAlloferon-1、rAlloferon-1-EK均有明显抑制KB、SGC和HL-60肿瘤细胞生长及增殖的效果(P<0.01),且四者抑制作用无明显差异(P>0.05).结论:本研究成功构建了串联表达rAlloferon-1的原核表达系统,其表达产物具有与合成的Alloferon-1和Alloferon-1-EK相似的体外抗肿瘤细胞活性.
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以聚乙烯亚胺-β-环糊精为骨架偶联短肽CY11的转基因载体
目的:以聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用靶向于肿瘤表面成纤维细胞生长因子受体(FGFR)的短肽CY11(CGMQLPLATWY)偶联于载体材料上,研究该载体材料的基因转染效率.方法:用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio) propionate,SPDP]将CY11偶联到PEI-β-CyD上,合成CY11-PEI-β-CyD.核磁共振氢谱(1H-NMR)、热重分析(TGA)对载体材料进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,MTT法测定载体材料的细胞毒性,在COS-7、Hela和B16细胞株上进行体外转染实验.结果:成功合成材料CY11-PEI-β-CyD,在N/P为4时能够有效地浓缩质粒DNA.在B16细胞上,材料CY11-PEI-β-CyD达到160 μg/ml时,细胞存活率仍高于80%.在CY11-PEI-β-CyD/DNA复合物在N/P为20∶1时,转染效率是对照组PEI-β-CyD的17倍.结论:CY11-PEI-β-CyD是具有低毒性、高转染且有FGFR靶向性的新型非病毒转基因载体.
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多肽MC10介导的聚乙烯亚胺-β-环糊精聚合体作为靶向Her-2受体基因载体的研究
目的:多肽MC10 (MARAKEGGGC)介导的聚乙烯亚胺-β-环糊精聚合物载体作为新型靶向性非病毒基因载体的研究.方法:低分子量的聚乙烯亚胺(PEI)通过羰二咪唑(1,1'-carbonyl-diimidazole,CDI)偶联β-环糊精(β-CyD)合成聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将MC10偶联到PEI-β-CyD上,制成新型转基因载体材料MC10-PEI-β-CyD.用核磁共振氢谱(1H-NMR)对载体的结构进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,透射电镜观察其浓缩质粒DNA后形成的微粒粒径.MTT法检测聚合物的毒性,用SKOV-3、A549和MCF-7细胞株进行体外转基因实验,确定MC10-PEI-β-CyD具有基因携带能力及靶向选择性.结果:成功地合成了MC10-PEI-β-CyD,且MC10-PEI-β-CyD在N/P为5时,能够有效浓缩质粒DNA,形成粒径约为(170±35)nm的微粒.结论:MC10-PEI-β-CyD具有低毒和高转基因效率,对Her-2受体的肿瘤细胞具有很好的靶向性.
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宫内生长迟缓大鼠胰腺ghrelin和胰岛素表达变化
目的:探讨宫内生长迟缓大鼠胰岛ghrelin表达规律,阐明ghrelin是否参与宫内生长迟缓所致的胰岛素抵抗的进程.方法:建立宫内生长迟缓(I组)和正常出生体重(N组)大鼠模型;测定血糖、血ghrelin、血胰岛素水平、胰腺ghrelin含量和高糖刺激后胰腺胰岛素分泌量;RT-PCR检测胰腺ghrelin和胰岛素mRNA水平;免疫荧光和共聚焦技术检测胰岛ghrelin和胰岛素的阳性细胞数.结果:I组1 d、3 d和7 d的血浆胰岛素水平均低于N组(P<0.05),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)也低于N组相应时间点(P<0.05).两组血糖、血浆胰岛素、HOMA-IR和血浆ghrelin水平有随时间变化的趋势(F=4.12～125.97,P均<0.001＝.I组血浆ghrelin水平与HOMA-IR呈正相关(r=0.553,P=0.000).两组胰腺ghrelin含量、ghrelin mRNA、insulin+细胞和ghrelin+细胞比例均随日龄增长呈下降趋势(F=－49.29～427.28,P均<0.001＝,两组间ghrelin含量和mRNA变化差异显著(F=－69.98～169.22,P均<0.05＝;I组和N组胰岛素分泌水平分别与其胰腺ghrelin含量呈负相关(r=-0.895,P=0.000;r=-0.458,P=0.002),胰岛ghrelin+细胞比例分别与其胰腺insulin+细胞比例呈负相关(r=-0.810,P=0.000;r=-0.714,P=0.000).两组大鼠胰岛ghrelin+细胞分布不同.结论:宫内生长迟缓对血浆ghrelin水平、胰岛素分泌的影响在生后持续存在,ghrelin参与了宫内生长迟缓者发生胰岛素抵抗的进程.
关键词： 胎儿生长迟缓/病理生理学 胰岛素抗药性 血糖/代谢 胰岛素/代谢 肽类 -
不同出生体重新生大鼠胰腺ghrelin和钙通道表达的研究
目的:探讨宫内营养环境对大鼠胰腺ghrelin和胰岛细胞团上L型钙通道(Cav1.2、Cav1.3)相对丰度的影响.方法:建立不同出生体重新生大鼠模型,分别取新生第1天大鼠胰腺或分离的胰岛细胞团组织,用实时荧光定量RT-PCR观察不同出生体重组胰腺ghrelin mRNA表达的变化和胰岛细胞团上Cav1.2、Cav1.3 mRNA的差异;同时,对胰岛细胞团上ghrelin、Cav1.2、Cav1.3蛋白进行免疫组织化学染色.结果:实时荧光定量RT-PCR显示:新生大鼠小于胎龄儿(SGA)组胰腺ghrelin mRNA水平高于适于胎龄儿(AGA)组的表达 (P<0.05).免疫组化积分光密度数据显示与实时荧光定量RT-PCR结果呈相同趋势.结论:早期宫内营养状况过剩或缺乏可能导致胰腺分化和成熟障碍,并引起胰岛细胞团上ghrelin和钙通道表达差异.
