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利用恒溶氧-补料分批技术高密度培养大肠杆菌生产重组肿瘤导向多肽LTL-TNF
目的探讨重组肿瘤导向多肽LTL-TNF工程菌的大规模培养与表达方法以获取重组LTLTNF. 方法首先在试管和三角瓶中探讨工程菌的生长和表达规律,筛选其适宿主菌、佳培养及诱导表达条件,然后在5 L自控发酵罐中进行分批补料培养. 结果保持培养过程中30%~40%的溶解氧和限制性流加葡萄糖,工程菌DH5α/pBV-LTLTNF在5L发酵罐中培养至终密度A600 nm 40~50时,目的蛋白的表达高,可达菌体总蛋白的50%,LTL-TNF的含量达到5.12 g*L-1, 发酵总时间在12 h左右. 结论确定了周期短、产率高且稳定可靠的发酵工艺,为重组肿瘤导向多肽LTLTNF工程菌的工业化生产奠定了基础.
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血管钠肽抑制低氧诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成
目的观察血管钠肽(Vasonatrin peptide, VNP)对低氧状态下大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖及胶原合成的影响,探讨其防治低氧所致心肌间质结构重建的作用机制. 方法培养新生大鼠CFs, 应用流式细胞仪分析细胞周期,以3H-proline掺入率反映胶原合成速率. 结果单纯低氧不改变CFs的细胞周期,但增加低浓度血清(25 mL*L-1)作用基础上的细胞增殖指数PI (S+G2/M) / (S+G2/M+G0/G1) (P<0.01),10-6 mol*L-1的VNP抑制低氧诱导的PI增加(P<0.01). 低氧可以增加基础胶原合成(增加19.6%, P<0.05),也增加低浓度血清 (25 mL*L-1)诱导的胶原合成速率(增加37.2%, P<0.01). 10-8~10-6 mol*L-1的VNP浓度依赖性抑制低氧诱导的胶原合成速率 (P<0.01). 结论低氧增加胶原合成以及血清刺激的CFs的增殖反应,VNP抑制上述作用,从而抑制低氧引起的心肌纤维化.
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Fmoc固相合成法合成黑色素细胞刺激素(MSH)的工艺研究
目的: 研究9-芴甲氧羰基(Fmoc)固相合成法合成黑色素细胞刺激素(MSH)工艺的步骤及其影响因素. 方法: 采用Fmoc保护α-氨基,以TBTU/HOBT/DIEA为缩合剂合成MSH. 用色谱仪和质谱仪对合成的多肽进行纯化、鉴定. 结果: 多肽合成的得率可达63%,经反相高效液相色谱仪(RP-HPLC)对合成的多肽进行纯化后可得纯度为98.67%的目标肽. 通过基质辅助激光解吸附电离飞行质谱仪(MALDI-MS)检测所合成多肽的分子质量为1663.88 ku,与其理论分子质量1664.08 ku相符. 结论: 该合成法具有快捷、简便、高效地合成多肽MSH的特点,适合大批量生产.
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河山胸腺肽治疗慢性乙型肝炎临床观察
27例慢性乙型肝炎采用河山胸腺肽注射液160mg(20mg/Amp),投于5%葡萄糖溶液250ml中静脉缓滴,1次/d,治疗45d,与23例对照组相比,治疗后血清ALT复常率达74%有明显改善,CD4+细胞显著增高,CD8+细胞显著降低,CD4+/CD8+比值增高(P<0.01),说明胸腺肽中含有多种组份,具有多种生物调节效应,可促进T淋巴细胞的分化和成熟,调节和提高机体的细胞免疫功能,对治疗慢性乙型肝炎有较好的疗效.
关键词: 肝炎 乙型/药物疗法 胸腺提取物/治疗应用 肽类 -
1例海蜇蜇伤致过敏性休克患者的急救护理体会
海蜇是在海水中游泳、训练时经常可以碰到的一类海洋生物,它的外形像一把透明的伞,看似美丽其实十分凶猛,它的触手上布满了大量的刺丝囊及毒素,当触手碰到人体,会刺入人体皮肤,释放出毒液,毒液中含有类蛋白、肽类、5-羟色胺、组胺、强麻醉剂等[1],具有强烈的细胞毒性作用,可使人中毒。我科曾收治1例海蜇蜇伤引起过敏性休克的患者,现报道如下。
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血小板源性生长因子与肺间质纤维化
血小板源性生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)是一种重要的促间质细胞分裂增生的肽类调节因子,在组织修复、胚胎发育、免疫应答、肿瘤细胞增殖中起重要作用.近年来,PDGF参与器官纤维化过程并发挥关键作用备受人们关注.肺间质纤维化是间质性肺疾病的一大类型,其病因、发病机理较复杂,对PDGF等细胞因子的深入研究为阐明肺间质纤维化的发病机理提供了一条很重要的线索,并且为肺间质纤维化的治疗展示了一个美好前景.本文就PDGF与肺间质纤维化的关系作一综述.
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脑钠素与心力衰竭
一、脑钠素的一般概况:早在20世纪80年代左右,有人推测心脏组织中存在具有利尿、利钠和扩血管作用的肽类生理活性物质,所谓"心脏激素".1985年此生理活性物质经de Bold等鉴定,并将其命名为心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP),其后在1988年由Sudoh等[1]首先从猪脑中分离纯化了一种新的利钠肽,称为脑钠素又称脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP),而后又发现了C-型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP),肾钠素(Urodilatin)和蛇钠素(Dendroaspis natriuretic peptide,DNP),共同组成了循环利钠肽家族(NPs).
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有毒植物中毒的诊断与处理原则
1 有毒植物中毒的临床特点1.1 主要毒性化学成分有非蛋白氨基酸、有毒蛋白质及肽类、萜、生物碱、苷、酚、亚硝酸盐等,及污染的重金属、杀虫剂、除草剂、植物生长调节剂等.
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成骨生长肽对体外培养成骨细胞样细胞的促成骨作用
目的研究成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)对成骨细胞样细胞的促成骨作用.方法体外培养SD大鼠颅盖骨的成骨细胞样细胞,用组织学、组织化学、生物化学等方法,观察OGP用药组(50瓶)与对照组(50瓶)细胞在增殖发育过程中的形态与功能变化.结果两组细胞均有骨结节形成,但OGP组比对照组能更早更多地产生骨基质,并有高出2倍的碱性磷酸酶产生.细胞培养14 d时,OGP组还出现小梁状结构.结论 OGP在明显促进成骨细胞样细胞增殖成熟的同时,能激发其更高的成骨活性,形成更多的新骨组织.
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多黏菌素B及其模拟肽与脂多糖类脂A结合的比较研究
目的观察多黏菌素B(PMB)及其模拟肽与脂多糖(LPS)、类脂A的结合能力.方法将100 μg/L的LPS、类脂A分别包被于生物传感器,再将0.01μg/L的PMB、PMB模拟肽1、PMB模拟肽2各5μl分别加入疏水样品池,比较PMB及其模拟肽与LPS、类脂A的结合能力.结果(1)PMB模拟肽1几乎没有与LPS、类脂A结合的活性,PMB及模拟肽2均与LPS、类脂A高亲和力结合.(2)PMB模拟肽2与LPS结合的峰值(98.41±7.31)rad/s高于PMB与LPS结合的峰值(83.58±5.42)rad/s(P<0.05);PMB及其模拟肽2与类脂A结合的峰值基本一致.(3)PMB与LPS结合的峰值明显低于其与类脂A结合的峰值(P<0.05),但PMB模拟肽2与LPS、类脂A结合的峰值比较,差异无显著性意义(P>0.05).(4)PMB模拟肽2能在较短时间内与LPS、类脂A结合并达到高峰.结论与PMB比较,PMB模拟肽2与LPS、类脂A能更好更快地结合,且亲和力相近;模拟肽2与LPS中的类脂A结合没有空间位阻,可能会发挥较好的抗LPS作用.
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生长因子促进创面愈合研究进展
1 生长因子(GF)的临床应用进展GF是一类对靶细胞增殖和分化有调节作用的肽类,是体内重要信号分子,在调节生长发育、组织修复、肿瘤发生等多方面发挥重要作用.GF种类繁多,通常按照GF的受体(靶细胞)及特性将其分为EGF、Fb生长因子(FGF)、神经生长因子(NGF)、血小板源性生长因子(PDGF)和TGF等.GF自20世纪80年代开始应用于临床,其对创伤修复的促进作用逐渐明确.
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聚乙二醇化重组人肿瘤坏死因子-α:制备和抗肿瘤活性
目的:评价聚乙二醇化重组人肿瘤坏死因子-α(PEG-rHuTNF-α)的价值。方法:用三种不同分子量的聚乙二醇(PEG)修饰重组人肿瘤坏死因子-α(rHuTNF-α);用凝胶过滤色谱法分离PEG-rHuTNF-α;按L929靶细胞法测定rHuTNF-α和PEG-rHuTNF-α的体外活性;通过S-180实体瘤的坏死研究其体内活性。结果:rHuTNF-α能在温和的条件下用PEG修饰,用分子量为5000的PEG修饰重组人肿瘤坏死因子的主要产物含有四个PEG分子,分子量为12 000和20000的PEG修饰的主要产物均含二个PEG分子。用同一种分子量的PEG修饰所得PEG-rHuTNF-α的活性与所含PEG分子的个数有关,所含PEG分子数愈少,则活性愈高;当PEG-rHuTNF-α的分子量相同时,所含单个PEG分子的分子量愈大,活性愈高。当与胰蛋白水解酶混合存放时,rHuTNF-α的活性随时间的延长而降低,但所有PEG-rHuTNF-α对蛋白水解酶有明显的阻抑作用。体内活性测定结果表明:PEG5000-rHuTNF-α(1500 IU/鼠)与rHuTNF-α(3000 IU/鼠)有相近的抗肿瘤活性;PEG12000-rHuTNF-α(1500 IU/鼠)与rHuTNF-α(3000 IU/鼠)比较有较高的诱导肿瘤坏死的效果;PEG20000-rHuTNF-α(1500 IU/鼠)与rHuT-NF-α(6000 IU/鼠)比较有更高的抗肿瘤活性。结论:聚乙二醇化重组人肿瘤坏死因子可能更适合于治疗使用。
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转阿片肽基因治疗慢性疼痛的研究现状和展望
慢性疼痛发生过程中通常伴随有神经系统的复杂改变.因此,慢性疼痛应被视为神经系统的一种病理状态.在探索治疗慢性疼痛的新途径时,基因方案显示出了巨大的潜力.基因治疗是将镇痛性的蛋白质导入与疼痛相关联的结构中,并使其在靶细胞附近进行持久表达.近来,这些技术在许多慢性疼痛的动物模型上进行了成功实验,显示出某些基因特别是前阿片肽如阿片促黑皮质素原或脑啡肽原A在脊髓水平上的转运,以及由此所引起的编码产物的大量产生,能够有效减弱炎症性和神经源性的疼痛.
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细胞因子和神经肽调控外周组织的疼痛
过去认为外周感觉神经末梢和免疫系统是两个不相关的系统,现已证明免疫系统和外周感觉神经末梢是有相互作用的,外周的传入神经末梢能产生内在的疼痛调节.免疫细胞释放的阿片肽和位于外周炎症组织的阿片受体的相互作用可导致内源性镇痛.从免疫细胞产生和释放的阿片样物质的作用可能是产生外周疼痛的一种未经发现的途径.
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加强田间管理有效进行人参病虫害防治
人参(Panax ginseng C.A.Mey)为五加科人参属植物,主产我国吉林、辽宁、黑龙江等省,以根、茎、叶、果实入药.人参含有人参皂苷、挥发油、酚类、肽类、多糖、单糖、氨基酸、微量元素等多种成分,人参质量的优劣取决于总皂苷和个单体皂苷的多寡及比例.人参具有大补元气、强心救脱、益心复脉、生津安神等功能.是我国应用时间早、范围广的中药材品种之一,被誉为百草之王,东北三宝之首.
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大蒜与癌症
研究表明,大蒜含有丰富的氨基酸、蛋白质、糖类、脂肪、无机盐等营养成分.而作为一种天然药用植物,大蒜更含有丰富的维生素、含硫有机化合物、活性酶、多种微量元素以及肽类等400多种有效成分,其中一些对人体极为有益的保健和治疗成分,是其它任何植物都不含有的.
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饮食调理婴幼儿睡眠
利用睡眠的各种食物营养医生列出了许多适合宝宝睡眠的营养物,并做了细致说明.1.牛奶牛奶中含有两种催眠物质,一种是色氨酸,这是一种人体必需的氨基酸,能促进大脑神经细胞分泌出命名人有调节作用的肽类,其中的"类鸦片肽"可以和中枢神经结合,发挥类似鸦片的麻醉、镇痛作用,让人感到全身舒适,有利于解除疲劳并入睡.
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水牛角四种不同提取方法的实施研究
水牛角为牛科动物水牛(Bubalus bubalis Linnaeus)的角,具有清热解毒,凉血定惊的作用.水牛角主要含有蛋白质、肽类、氨基酸、胆甾醇、强心成分等.其中蛋白质、肽类经水解后能得多种氨基酸[1].由于水牛角中的蛋白质属角蛋白,较难溶于水,煎出率极低.因此,笔者采用四种不同的提取方法,以氨基酸的种类及含量作为考察指标,比较其提取效果的优劣.